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    猴頭菇液體生產(chǎn)種制備關(guān)鍵技術(shù)

    2016-05-30 11:12:55劉連強(qiáng)羅瑩劉建華王文治翟宏偉錢磊
    南方農(nóng)業(yè)·中旬 2016年10期
    關(guān)鍵詞:猴頭菇制備

    劉連強(qiáng) 羅瑩 劉建華 王文治 翟宏偉 錢磊

    摘 要 猴頭菇是中國傳統(tǒng)四大名菜之一,一種食藥兼?zhèn)涞氖秤镁R酝镱^菇的人工栽培大多使用固體菌種,其制種周期長、污染率較高、接種效率低。隨著食用菌產(chǎn)業(yè)的發(fā)展,目前猴頭菇規(guī)模化生產(chǎn)開始應(yīng)用液體菌種技術(shù),具有制種時(shí)間短、菌種生活力強(qiáng)、接種方便快捷等特點(diǎn)。

    關(guān)鍵詞 猴頭菇;液體菌種;生產(chǎn)種;制備

    中圖分類號(hào):S646 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:B DOI:10.19415/j.cnki.1673-890x.2016.29.057

    猴頭菇(Hericium erinaceus(Rull ex F.)Pers.)屬層菌綱、非褶菌目、猴頭菇科、猴頭菇屬,因外形酷似猴頭而得名,又叫猴頭菌,猴菇。猴頭菇肉嫩、味香、鮮美可口,是中國傳統(tǒng)四大名菜(猴頭、熊掌、燕窩、魚翅)之一,有“山珍猴頭、海味魚翅”之稱。我國中醫(yī)認(rèn)為,猴頭菇性平味甘,有利五臟、助消化、滋補(bǔ)身體等功效。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)證明,猴頭菇可治療消化不良、胃潰瘍、胃竇炎、胃痛、胃脹及神經(jīng)衰弱等疾病。另外,很多對(duì)猴頭菇多糖藥用功效的臨床應(yīng)用研究表明,猴頭菇多糖具有提高免疫力、抗腫瘤、抗衰老、降血脂等多種生理功能。

    目前猴頭菇人工栽培多采用固體菌種,制種周期長、污染率較高、接種效率低。而液體菌種技術(shù)則具有制種時(shí)間短、菌種生活力強(qiáng)、接種方便快捷等特點(diǎn),非常適合猴頭菇的規(guī)?;?、機(jī)械化生產(chǎn)。本文將介紹猴頭菇液體菌種的制備技術(shù)。

    1 工藝流程

    制備母種→原種(液體搖瓶)→生產(chǎn)種(罐體發(fā)酵)→料棒接種。

    2 母種的制備

    2.1 母種培養(yǎng)基配方

    配方1:馬鈴薯(去皮)20 g,葡萄糖2 g,瓊脂2g ,水1 000 mL,pH值5.5~6。

    配方2:葡萄糖20 g,麥麩100 g(加水煮沸30 min,過濾取汁),蛋白胨4 g,酵母膏3 g,瓊脂20 g,磷酸二氫鉀1 g,硫酸鎂0.5 g,維生素B 110 mg,水1 000 mL,pH值5.5~6。

    配方3:麥麩40 g、玉米粉10 g、黃豆粉10 g(加水煮沸30 min,過濾取汁),瓊脂20 g,磷酸二氫鉀1 g,硫酸鎂

    0.5 g,維生素B 110 mg,加水至1 000 mL,pH值5.5~6。

    2.2 母種制備及注意事項(xiàng)

    根據(jù)配方準(zhǔn)確稱取原料,加水煮沸制作成培養(yǎng)基質(zhì)。定容后,開始分裝試管,裝入基質(zhì)的量約為試管長度的1/4~1/5,然后塞上棉塞。使用高壓滅菌鍋滅菌,上壓前注意要放凈高壓滅菌鍋內(nèi)的冷空氣。滅菌時(shí),一般在溫度121 ℃、壓力0.11 Mpa下滅菌30 min即可。滅菌后,待培養(yǎng)基溫度下降至60 ℃左右時(shí),即可把試管擺成斜面。擺放斜面時(shí),注意避免培養(yǎng)基粘濕棉塞。

    接種母種時(shí),要嚴(yán)格按照無菌操作規(guī)程。接種后,置于恒溫箱中在25 ℃左右恒溫培養(yǎng)10~15 d,菌絲即可長滿培養(yǎng)基斜面。

    3 原種的制備

    3.1 原種培養(yǎng)基配方

    馬鈴薯(去皮)20%、麥麩3%、葡萄糖2%、蛋白胨3‰、磷酸二氫鉀2‰和硫酸鎂1‰。

    3.2 原種的制備及注意事項(xiàng)

    馬鈴薯去皮切片后與麥麩一起煮沸20 min,過濾后定容,加入其他原料,全部溶解后裝入三角瓶。三角瓶在使用前除清洗外,還要空滅,滅菌方法與常規(guī)滅菌試管培養(yǎng)基相同。每個(gè)瓶中放入5~10粒玻璃球(直徑0.5 cm),用棉塞塞緊瓶口,再用牛皮紙包裹后扎緊。使用高壓滅菌鍋滅菌,在溫度121 ℃、壓力0.11 Mpa下滅菌45 min。

    冷卻后進(jìn)行無菌接種,然后置于25 ℃恒溫培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)72 h。搖床培養(yǎng)時(shí),溫度25 ℃,轉(zhuǎn)速140 r/min,培養(yǎng)時(shí)間72~96 h。

    4 生產(chǎn)種的制備

    4.1 生產(chǎn)種培養(yǎng)基配方

    葡萄糖2%、玉米粉1%、蛋白胨1%、磷酸二氫鉀1‰、硫酸鎂1‰、酵母膏0.5‰、瓊脂2‰~3‰和消泡劑1‰。

    4.2 生產(chǎn)種的制備

    4.2.1 清洗罐體

    發(fā)酵罐在每次使用后都必須徹底清洗,去除罐內(nèi)殘存的菌球、菌塊料液等雜物,保證罐內(nèi)潔凈。

    4.2.2 配制原料

    按照生產(chǎn)種培養(yǎng)基配方準(zhǔn)確稱取各種原料。馬鈴薯去皮切片后與麥麩一起煮沸2 min,過濾定容,再加入其他原料及消泡劑。

    4.2.3 滅菌

    將盛有培養(yǎng)基質(zhì)的發(fā)酵罐推進(jìn)滅菌倉,通入蒸汽滅菌,控制溫度在121 ℃左右、壓力為0.11 Mpa,滅菌1 h。

    4.2.4 冷卻

    培養(yǎng)基滅菌完畢后,開啟滅菌倉,將發(fā)酵罐推進(jìn)冷卻室進(jìn)行降溫,當(dāng)溫度降至25 ℃時(shí)即可接種操作。

    4.2.5 接種

    將發(fā)酵罐推到層流罩下,先用酒精噴燈發(fā)酵罐接種口消毒,再迅速打開原種瓶并用噴燈將瓶口消毒,打開接種口閥門,將菌種注入發(fā)酵罐,然后迅速關(guān)閉接種閥門。

    4.2.6 恒溫培養(yǎng)與觀察

    接種結(jié)束后將發(fā)酵罐推到培養(yǎng)區(qū),連接通氣閥等。通過進(jìn)氣閥和排氣閥將通風(fēng)量調(diào)節(jié)至料液體積和空氣體積的比為1∶(0.5~1.2)。調(diào)節(jié)罐壓保持在0.02~

    0.04 Mpa。培養(yǎng)溫度控制在25 ℃左右,空氣相對(duì)濕度保持在65%~75%,通風(fēng),避光。

    接種24 h后,每隔12 h可從接種口取樣1次,觀察菌種萌發(fā)和生長情況。采用顯微鏡,低倍、高倍、油鏡,觀察菌絲生長狀況和有無雜菌污染,發(fā)現(xiàn)異常及時(shí)處理。

    菌種恒溫培養(yǎng)7 d左右即可使用接種栽培袋。如果液體生產(chǎn)種不能立即使用,可以在12~15 ℃條件下暫時(shí)保存2~3 d。

    4.2.7 菌種放罐指標(biāo)

    菌種放罐指標(biāo)包括感官指標(biāo)和理化指標(biāo),見表1和表2。

    (責(zé)任編輯:趙中正)

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