馬鈴薯脫毒繁種技術(shù)初探

摘 要：馬鈴薯為茄科茄屬一年生草本植物，原產(chǎn)于高寒地區(qū)。無性繁殖作種的第二代起的容易造成病毒對(duì)新生植株的侵入，破壞馬鈴薯植株的正常生長(zhǎng)功能，致使感染病毒植株的長(zhǎng)勢(shì)衰弱，營(yíng)養(yǎng)器官和生殖器官表現(xiàn)不正常，產(chǎn)量逐年下降，故不能留種使用，若繼續(xù)留種就會(huì)導(dǎo)致馬鈴薯的各種病蟲害逐年加重，不能充分發(fā)揮品種特性（簡(jiǎn)稱種性）， 造成嚴(yán)重減產(chǎn)，退化了的種薯不通過脫毒就不能恢復(fù)種性。以上稱為馬鈴薯的品種退化。為解決洋竽種性退化和適應(yīng)新形式下現(xiàn)代馬鈴薯產(chǎn)業(yè)發(fā)展的需要，除了科研部門利用有性繁殖進(jìn)行品種改良及提純復(fù)狀保持種性外，根本辦法只能是通過薯塊莖（芽）尖脫毒苗繁育合格的無毒種薯，保證馬鈴薯生產(chǎn)的正常供種，保持馬鈴薯種性不發(fā)生退化。

關(guān)鍵詞：馬鈴薯；退化；脫毒；繁種

薯莖（芽）尖脫毒苗無土栽培技術(shù)就是利用薯莖（芽）尖生長(zhǎng)點(diǎn)處不帶毒，在離體無菌條件下，通過蛭石、草炭或者松針土作基質(zhì)，進(jìn)行組織培養(yǎng)，產(chǎn)生新個(gè)體，誘導(dǎo)馬鈴薯無病毒植株再產(chǎn)生氣生小塊莖（種薯），不僅可以不受外界環(huán)境中病原物（真菌、細(xì)菌、病毒）的侵染，而且能較常規(guī)的大田繁殖方法大大縮短種薯生產(chǎn)周期，提高繁殖速度和繁殖系數(shù)。用此方法培植出的試管薯，是目前國(guó)際上所有種薯中質(zhì)量最高最可靠的種薯。試管薯有體積小，重量輕，無病毒，較之大田生產(chǎn)的常規(guī)薯更便于保存、運(yùn)輸和推廣，利于實(shí)現(xiàn)種薯生產(chǎn)工廠化。

采用試管薯作種是當(dāng)前國(guó)內(nèi)外馬鈴薯生產(chǎn)上的一項(xiàng)先進(jìn)技術(shù)，實(shí)際上莖（芽）尖脫毒苗繁育種薯是種薯無性繁殖技術(shù)的具體應(yīng)用，其中快速生產(chǎn)小健種薯，育種上稱為“原原種”，是應(yīng)用推廣脫毒種薯技術(shù)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，繁殖材料部位的選定和脫毒方法的選用是種薯繁育成功與否的重要內(nèi)容。我國(guó)引進(jìn)此技術(shù)時(shí)間不長(zhǎng)，但發(fā)展快；現(xiàn)己基本摸清了影響試管薯形成的主要因子、解決辦法和生產(chǎn)微型種薯的方法。本文就馬鈴薯脫毒繁種技術(shù)作學(xué)術(shù)性研討僅供廣大同行參考。

一、無性繁殖及有關(guān)品種的概述

1.無性繁殖：無性繁殖是不經(jīng)生殖細(xì)胞結(jié)合的受精過程，由母體的一部分直接產(chǎn)生子代的繁殖方法。在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上常用作物營(yíng)養(yǎng)器官的一部分和花芽、花藥、雌配子體等材料進(jìn)行無性繁殖。無性繁殖可來自一株所謂”母株”植物的全部，也可以來自植物或枝條的一部份。

2.有關(guān)品種的概念。原種用馬鈴薯莖 （芽 ）尖分生組織培養(yǎng)方法獲得的無病試管苗及其結(jié)下的微型薯并在防蟲網(wǎng) （溫 ）室內(nèi)栽培結(jié)下的無病塊莖以及在網(wǎng) （溫 ）室中生產(chǎn)的符合脫毒原原種質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的脫毒小薯（小健薯或試管薯）。原種是在具備一定隔離條件的場(chǎng)所由原原種生產(chǎn)的符合脫毒原種質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的塊莖。 一級(jí)良種由原種生產(chǎn)的符合一級(jí)良種質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的塊莖。二級(jí)良種由一級(jí)良種生產(chǎn)的符合二級(jí)脫毒良種質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的塊莖。

二、馬鈴薯莖（芽）尖脫毒無性繁殖育種技術(shù)

1.馬鈴薯種薯莖（芽）尖脫毒方法

取材消毒：對(duì)欲脫毒的品種塊莖催芽，當(dāng)芽長(zhǎng)4～5cm時(shí)，剪芽并剝?nèi)ネ馊~，然后用自來水下沖洗40min，在無菌室內(nèi)用漂白粉溶液消毒后，用無菌水沖洗2～3次。

剝離接種：在無菌室內(nèi)，在40倍的解剖鏡下，剝?nèi)?個(gè)葉原基的莖尖，接種于MS莖尖培養(yǎng)基的試管中，經(jīng)高壓滅菌后使用。

組織培養(yǎng)：關(guān)鍵是將脫毒后的莖尖透導(dǎo)生成帶有完整根、莖、葉的植株，培養(yǎng)基的選擇很重要。MS莖尖培養(yǎng)基一般應(yīng)包括大量元素、微量元素、有機(jī)成分和生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素、蔗糖和瓊脂，pH值為5.7。接種莖尖的培養(yǎng)室溫度25℃、光照1500～3000LX，經(jīng)過3個(gè)月就可以長(zhǎng)成3～4片葉的小植株。再在無菌室，進(jìn)行切段擴(kuò)繁，然后取其中的部分脫毒苗進(jìn)行病毒檢測(cè)。

病毒檢測(cè)：通常用鑒別寄主即指示植物或血清學(xué)方法進(jìn)行檢測(cè)，及時(shí)淘汰有病毒癥狀的鑒別寄主或血清學(xué)陽性反應(yīng)的莖尖苗，用無任何反應(yīng)的莖尖苗即脫毒苗作為繁殖的種苗。用以上方法可以保證種薯的脫毒率可達(dá)100%。

2.莖（芽）尖脫毒苗繁育方法

主要有容器生產(chǎn)法、溫室生產(chǎn)法和網(wǎng)室生產(chǎn)法三種，目前以網(wǎng)室生產(chǎn)法為主。網(wǎng)室生產(chǎn)法主要是利用早春溫差大、光照強(qiáng)等自然氣候特點(diǎn)，誘導(dǎo)試管苗形成微型塊莖。由于網(wǎng)室生產(chǎn)法方法簡(jiǎn)單易行，且成本低，見效快，質(zhì)量高，效益好。巳成為目前馬鈴薯薯塊莖（芽）尖脫毒苗繁育良種原原種生產(chǎn)的主要方法。

三、網(wǎng)室生產(chǎn)法的主要步驟

1.脫毒試管苗的培養(yǎng)。莖尖組織培養(yǎng)與檢測(cè)已經(jīng)明確引起種薯退化、減產(chǎn)的主要病毒有PVX、PVY、PVS、PLRV 和類病毒PSTV以及細(xì)菌病害。脫毒試管苗由莖尖組織培養(yǎng)獲得，經(jīng)過嚴(yán)格的病毒、類病毒、細(xì)菌病害的檢測(cè)。一般選用健壯植株的頂芽或塊莖萌發(fā)的頂芽為外植體，借助解剖鏡剝?nèi)?.2mm大小的生長(zhǎng)點(diǎn)，接種在MS培養(yǎng)基上培養(yǎng)，成苗后對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)篩選。

移栽前練苗移栽前2-3天，把培養(yǎng)瓶放在自然光照和通風(fēng)條件下，將瓶蓋打開練苗，以增強(qiáng)試管苗對(duì)外界條件的適應(yīng)能力。注意不要放在強(qiáng)光下，以免水分蒸發(fā)過快，造成液體培養(yǎng)基干涸和葉片失水干枯。

2.育苗。苗床準(zhǔn)備：育苗選擇在溫度和光照適宜、保溫保濕、有隔離條件的溫室或塑料小拱棚內(nèi)進(jìn)行。苗床土用大田土、草炭和有機(jī)肥按3：2：1混配?？蛇x用直徑4cm，高5cm的蔬菜育苗紙筒，將紙筒在平地上拉開，裝滿苗床土，用噴壺澆透水。也可以不用紙筒，用苗床土直接作成1-1.5m寬的苗床，苗床表面一定要平整。

試管苗移栽：將經(jīng)過鍛煉的試管苗從培養(yǎng)瓶中取出，用清水洗去根部的培養(yǎng)基，再用鑷子小心將其插入紙筒中。每栽完一聯(lián)紙筒苗，及時(shí)用細(xì)眼噴壺澆透水，使苗根能隨水伸展，與土壤緊密結(jié)合，提高成活率。也可在苗床上劃出小溝，在溝內(nèi)澆透水。將洗凈的試管苗按5cm等距均勻擺在溝內(nèi)，從側(cè)面培土。栽完后都要用細(xì)嘴噴壺澆一次透水。

移栽后管理：要保持適當(dāng)?shù)臏囟群蜐穸取Ｒ归g最低溫度不能低于15℃，為防止低溫引起提前結(jié)薯現(xiàn)象，可給苗床蓋上塑料薄膜保溫。白天為防止強(qiáng)光直射，必須用遮陽網(wǎng)遮陰。大約1周后，新的葉片和根系就會(huì)產(chǎn)生。再過三周就會(huì)完成育苗。在育苗期間，要適量澆水，保持土壤半濕半干的最佳濕度，定期給溫室通風(fēng)防止高溫?zé)?。如果出現(xiàn)葉片缺肥發(fā)黃，還應(yīng)噴施適當(dāng)葉面肥或營(yíng)養(yǎng)液。

由此可知，經(jīng)過近幾年的研究和生產(chǎn)試驗(yàn)總結(jié)出的莖（芽）尖脫毒苗無土栽培技術(shù)的網(wǎng)室生產(chǎn)法，不僅能使無菌條件的組培苗轉(zhuǎn)向自然環(huán)境中生長(zhǎng)，結(jié)出小薯，而且還可通過剪尖扦插，提高繁殖系數(shù)，加快繁種進(jìn)程，降低生產(chǎn)成本。其生產(chǎn)出的原種適于在我縣的絕大部分地中低山地區(qū)大力推廣，推廣脫毒優(yōu)良品種的潛力和發(fā)展空間巨大。

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作者簡(jiǎn)介：余展翅（1964-），男，重慶忠縣，大專，專業(yè)教師，研究方向：農(nóng)技推廣，農(nóng)業(yè)教育。