栽培尼泊爾菊三七中的木脂素類(lèi)化合物

張志輝 陸瑤 鄧安珺 馬林 吳豐 李志宏 秦海林

[摘要]采用溶劑提取、萃取粗分離、硅膠和Sephadex LH20凝膠柱色譜以及制備HPLC等純化技術(shù)，從采自北京郊區(qū)的尼泊爾菊三七栽培品中分離得到4個(gè)化合物，通過(guò)波譜分析并參考文獻(xiàn)數(shù)據(jù)鑒定其結(jié)構(gòu)分別為7S，8R9′O乙基去氫雙松柏醇9乙酸酯（1）、9′O乙基去氫雙松柏醇（2）、去氫雙松柏醇9，9′二乙酸酯（3）和（+）梣皮樹(shù)脂醇（4）。1為新的2，3二氫苯并呋喃8，3′新木脂素型化合物，2～4均為首次從尼泊爾菊三七中分離得到的木脂素類(lèi)化合物。對(duì)4個(gè)化合物在DMSOd6溶劑中的1H和13CNMR數(shù)據(jù)進(jìn)行了全歸屬。

[關(guān)鍵詞]尼泊爾菊三七；菊科；木脂素；7S，8R9′O乙基去氫雙松柏醇9乙酸酯；結(jié)構(gòu)鑒定

[Abstract]Taking application of some isolation and purification technologies， including solvent extraction， rude solvent isolation， column chromatographies on silica gel and Sephadex LH20 ， and preparative HPLC ， 4 compounds were obtained from Gynuranepalensiscultivated in a suburban area of Beijing. Their structures were identified by spectroscopic methods in conjunction with comparison of the NMR data with literature values as 7S，8R9′Oethyldehydrodiconiferyl9acetate （1）， 9′Oethyldehydrodiconiferyl alcohol （2）， dehydrodiconiferyl9，9′diacetate（3）， and （+）medioresinol（4）， respectively. 1 is a new 2，3dihydrobenzofuran8，3′neolignane type compound， and 24 were isolated from G.nepalensis for the first time. The complete assignment of the 1H and 13CNMR spectroscopic data of the four compounds recorded in DMSOd6 was achieved.

[Key words]Gynuranepalensis； Compositae； lignans； 7S，8R9′Oethyldehydrodiconiferyl9acetate； structure elucidation

doi：10.4268/cjcmm20160815

尼泊爾菊三七Gynura nepalensis DC為菊科Compositae菊三七屬多年生草本植物，在國(guó)內(nèi)西南個(gè)別地區(qū)有零星野生分布，偶有栽培品[12]。據(jù)文獻(xiàn)記載，包括尼泊爾菊三七在內(nèi)的菊三七屬植物有藥用功效，民間用其治療支氣管炎、肺結(jié)核、崩漏、臃腫、燙傷、跌打損傷、刀傷出血、身體創(chuàng)傷等多種疾病[35]。雖然已有一些文獻(xiàn)報(bào)道了從菊三七屬植物中分離鑒定了生物堿、黃酮、氨基酸、揮發(fā)油、萜烯等多種類(lèi)型化合物[68]，但有關(guān)尼泊爾菊三七的化學(xué)成分研究還很少，僅有本課題組報(bào)道從其地上部分分離鑒定了10個(gè)化合物，主要為7個(gè)增碳環(huán)香葉烷型單萜（其中6個(gè)化合物也可分類(lèi)為大柱香波龍烷型C13降倍半萜），其他3個(gè)化合物分屬有機(jī)酸酯和吲哚生物堿[2]。鑒于這些化合物的較豐富的結(jié)構(gòu)多樣性以及文獻(xiàn)對(duì)尼泊爾菊三七的民間藥用記載等，本課題組繼續(xù)開(kāi)展了對(duì)該植物化學(xué)成分的研究。從采自北京郊區(qū)的栽培尼泊爾菊三七的地上部分進(jìn)一步獲得4個(gè)化合物，包括1個(gè)新的苯并呋喃型新木脂素和3個(gè)首次從尼泊爾菊三七中分離得到的木脂素類(lèi)化合物。本文報(bào)道這些化合物的分離和結(jié)構(gòu)鑒定。

1材料

Varian Mercury400型和Bruker AvanceⅢ600型核磁共振波譜儀；Nicolet 5700型傅里葉變換紅外光譜儀；PerkinElmer 241型旋光測(cè)定儀；JASCO J810型CD光譜儀；Agilent 1100 LC/MSD Trap SL型液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀；LC6AD制備型高效液相色譜儀（配有SPD20A紫外檢測(cè)器， 20 mm×250 mm PRCODS色譜柱）；柱色譜硅膠（200～300目）和薄層色譜用硅膠預(yù)制板均為青島海洋化工廠(chǎng)產(chǎn)品；Sephadex LH20為Pharmacia公司產(chǎn)品；色譜純?cè)噭镕isher公司產(chǎn)品；水為市售純凈水；其他試劑均為分析純產(chǎn)品。

實(shí)驗(yàn)用尼泊爾菊三七的植物原料采集、基原鑒定和標(biāo)本保存見(jiàn)文獻(xiàn)[2]。

2提取分離

干燥的尼泊爾菊三七莖和葉67 kg的前處理、溶劑提取、溶劑萃取粗分離和乙酸乙酯萃取物的硅膠柱色譜法粗分離見(jiàn)文獻(xiàn)描述[2]。前文硅膠柱色譜分離后獲得的Fr3 （15 g，石油醚乙酸乙酯4∶1）洗脫組分再經(jīng)硅膠柱色譜，以石油醚乙酸乙酯混合洗脫劑系統(tǒng)梯度洗脫分成3個(gè)洗脫組分（Fr31～Fr33），F(xiàn)r32（297 mg，石油醚乙酸乙酯10∶1）經(jīng)凝膠柱色譜，以甲醇洗脫分成3個(gè)洗脫組分（Fr321～Fr323）；Fr323 （98 mg）經(jīng)制備高效液相色譜分離（以水甲醇 20∶80為流動(dòng)相，流速6 mL·min-1，以210 nm作為UV檢測(cè)波長(zhǎng)）得到化合物1（4 mg）和3（3 mg）。前文Fr4洗脫組分（1 g，石油醚乙酸乙酯3∶1）再經(jīng)硅膠柱色譜，以石油醚乙酸乙酯混合洗脫劑系統(tǒng)梯度洗脫分成7個(gè)洗脫組分（Fr41～Fr47）；Fr45 （163 mg，石油醚乙酸乙酯5∶1）經(jīng)凝膠柱色譜，以甲醇洗脫分成4個(gè)洗脫組分（Fr451～Fr454）；Fr452 （62 mg）用制備高效液相色譜（以水甲醇 20∶80為流動(dòng)相，流速6 mL·min-1，以210 nm作為UV檢測(cè)波長(zhǎng)）分離得到化合物2（4 mg）和4（3 mg）（圖1）。

3結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1白色無(wú)定形粉末，[α]20D-385

化合物2白色無(wú)定形粉末；其正離子模式高分辨ESIMS給出質(zhì)子加合的準(zhǔn)分子離子峰m/z 387180 3（C22H27O6計(jì)算值為387180 2）、鈉加合的準(zhǔn)分子離子峰m/z 409163 1（C22H26NaO6計(jì)算值為409162 2），結(jié)合其13CNMR數(shù)據(jù)，確定其分子式為C22H26O6，不飽和度為10。對(duì)化合物2進(jìn)行了1HNMR，13CNMR，DEPT，1H1H COSY，HSQC，HMBC和1D NOE差譜等波譜學(xué)實(shí)驗(yàn)，其1H和13CNMR數(shù)據(jù)與化合物1非常相似，主要區(qū)別在于化合物2中不存在化合物1的乙酰基信號(hào)δH197 （3H，s），δC1703 （s）和206 （q），且H9a，H9b和H8的化學(xué)位移分別向高場(chǎng)位移了Δδ-066，-064和-028，C9的化學(xué)位移向高場(chǎng)位移了Δδ-19，C8的化學(xué)位移向低場(chǎng)位移了Δδ+37。經(jīng)深入的數(shù)據(jù)分析及歸屬，鑒定其為已知化合物9′O乙基去氫雙松柏醇[11]。鑒于文獻(xiàn)已報(bào)道了丙酮為測(cè)試溶劑的數(shù)據(jù)歸屬，本研究中化合物2以DMSOd6為測(cè)試溶劑的1H和13CNMR數(shù)據(jù)見(jiàn)表1。

化合物3白色無(wú)定形粉末；其正離子模式高分辨ESIMS給出鈉加合的準(zhǔn)分子離子峰m/z 465156 2（C24H26NaO8計(jì)算值為465152 0），結(jié)合其13CNMR數(shù)據(jù)，確定其分子式為C24H26O8，不飽和度為12。對(duì)化合物3進(jìn)行了1HNMR，13CNMR，DEPT，1H1H COSY，HSQC，HMBC和1D NOE差譜等波譜學(xué)實(shí)驗(yàn)，經(jīng)深入的數(shù)據(jù)分析及歸屬，鑒定其為已知化合物去氫雙松柏醇9，9′二乙酸酯。鑒于文獻(xiàn)已報(bào)道了氯仿為測(cè)試溶劑的數(shù)據(jù)歸屬，本研究中化合物3以DMSOd6為測(cè)試溶劑的1H和13CNMR數(shù)據(jù)見(jiàn)表1。

化合物4淡黃色粉末；1HNMR（DMSOd6，400 MHz）δ：889（1H，s，OH4′），824（1H，s，OH4），688（1H，d，J=18 Hz，H2′），674（1H，dd，J=84，18 Hz，H6′），671（1H，d，J=84 Hz，H5′），658（2H，s，H2，6），459（2H，m，H7，7′），412（2H，m，H9a，9′a），375（3H，s，OMe3′），374（6H，s，OMe3，5），373（2H，m，H9b，9′b），303（2H，m，H8，8′）；13CNMR（DMSOd6，150 MHz）δ：1478（s，C3，5），1474（s，C3′），1458（s，C4′），1347（s，C4），1321（s，C1′），1313（s，C1），1185（d，C6′），1150（d，C5′），1103（d，C2′），1035（d，C2，6），852（d，C7），850（d，C7′），709（t，C9′），708（t，C9），559（q，OMe3，5），555（q，OMe3′），536（d，C8），534（d，C8′）。ESIMS m/z 389[M+H]+。數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[1213]報(bào)道的（+）梣皮樹(shù)脂醇一致。

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[責(zé)任編輯丁廣治]