999感冒靈醇沉工藝得失均衡研究

潘紅燁 鄧海欣 陳周全 張躍飛 王龍虎

[摘要]醇沉工藝是現代中藥生產中常用的精制方法，其目的是去除雜質而提高藥品療效。但是，由于包裹損失等原因，醇沉過程難免會造成有效成分部分損失。所以，判定醇沉工藝優(yōu)劣的重要依據在于相關物質的得失均衡。作為感冒藥，感冒靈在臨床上得到了廣泛和良好的使用，其生產工藝的各環(huán)節(jié)需要有針對性的深入研究。該文著眼于感冒靈水提液醇沉工藝過程的去除雜質和保留有效成分的平衡關系，選擇了有效成分蒙花苷的保留率和干浸膏得率作為評價指標，前者反映有效成分保留，而后者反映雜質去除。研究工作用單因素實驗，考察了醇沉時間、初始乙醇濃度、終點乙醇含量及初膏密度等多種工藝因素對感冒靈醇沉的影響，在得失均衡的原則下確定了感冒靈醇沉工藝的優(yōu)化參數是，醇沉時間為16 h，初始乙醇濃度為95%，終點乙醇含量為70%，初膏相對密度為110。該研究的意義在于，它為感冒靈醇沉工藝優(yōu)化提供實驗研究基礎，同時對于其他中藥口服劑的醇沉工藝優(yōu)化也有借鑒作用。

[關鍵詞]感冒靈；醇沉；蒙花苷；干浸膏

[Abstract]Ganmaoling granule is the first brand of domestic cold medicine sales， but its preparation method and process control parameters are relatively rough Therefore it is urgent to upgrade the technologies of large varieties of traditional Chinese medicine （TCM）. This paper focused on the balance between the remove of impurity and the retention of linarin during the process of alcohol precipitation of Ganmaoling granules The effects of four factors on the process were investigated via single factor experiments The results showed that the precipitating period， the initial ethanol concentration and the final ethanol concentration had a great effect on retention of linarin while the initial density of the extract has not Similarly， the initial ethanol concentration， the final ethanol concentration and the initial extract density have a great effect on the yield of dry extract while the time of alcohol precipitation has not The parameters of alcohol precipitation of Ganmaoling granules were optimized as 16 h of precipitating period， 95% ethanol as the initial reagent， 70% of the final ethanol concentration， and 110 of the initial extract density

[Key words]Ganmaoling granules； alcohol precipitation； linarin； dry extract

doi：10.4268/cjcmm20160802

感冒靈處方是由三叉苦、崗梅、金盞銀盤、野菊花等中藥與對乙酰氨基酚、馬來酸氯苯那敏、咖啡因3味化學藥組成，具有中西藥結合治療感冒協(xié)同增效的特點[1]。雖然感冒靈療效突出、服用安全，深受消費者的歡迎，但是作為較早研發(fā)上市的藥物，感冒靈顆粒的基礎研究相對簡單，與現在的新藥法規(guī)相比，缺少完整系統(tǒng)的生產工藝，其生產工藝較傳統(tǒng)，質量標準較低，對于藥品質量的控制性差，其生產工藝的各環(huán)節(jié)迫切需要有針對性的深入研究，其中也包括醇沉工段。感冒靈中藥水提液含一些無效成分如糊化淀粉、油脂、脂溶性色素、樹脂、樹膠等，為了保證藥品質量和穩(wěn)定性，需要醇沉除雜[2]。在中藥制劑中，醇沉是常用的精制純化方法，其目的是去除雜質而提高藥品療效。目前為止，有關醇沉工藝和機理的研究卻不多[3]。醇沉工藝優(yōu)化經常采用正交實驗[49]。醇沉工藝是一個涉及多因素共同發(fā)揮作用的復雜過程，正交實驗只反映綜合結果，無法揭示解析內在原因。有人也采用單因素實驗研究醇沉過程，但評價指標較單一難以全面地反映醇沉工藝的效果[10]。與已有研究思路不同，本文著眼于醇沉工藝的得失均衡，有針對性選擇蒙花苷保留率和干浸膏得率作為評價指標。前者反映有效成分保留，而后者反映雜質去除，二者結合以反映醇沉的去除雜質與保留有效成分的對立統(tǒng)一，從而優(yōu)化感冒靈醇沉工藝。

1材料

Agilent 1200高效液相色譜儀（美國安捷倫公司），H1650W高速離心機（長沙湘儀儀器有限公司）；851型磁力攪拌器（上海志威實驗裝置有限公司）。

蒙花苷對照品（成都曼斯特公司，批號MUST12081203）；甲醇為色譜純，其他試劑為分析純。實驗所用的感冒靈清浸膏由華潤三九醫(yī)藥股份公司提供。

2方法及結果

21蒙花苷含量測定蒙花苷含量測定參考文獻[11]的方法。相同的體積下的蒙花苷保留率（θ）計算方法如下。

θ=醇沉上清液中蒙花苷含量/醇沉前清膏中蒙花苷含量×100%。

22干浸膏得率測定精密量取醇沉后上清液25 mL，于水浴蒸干后于烘箱中干燥到恒重，置于干燥器中冷卻后稱定質量。干浸膏得率（η）計算方法如下。

η=（干浸膏質量/25）×上清液總體積/初膏質量×100%。

23醇沉時間影響稱取50 g相對密度為110（16 ℃測定，下同）的感冒靈清膏5份，以10 mL·min-1勻速加入95%乙醇使藥液終點乙醇濃度為65%，然后于室溫下分別放置8，12，16，24，32 h，再量取上清液體積，測定蒙花苷含量并計算θ，并按22項下公式計算η，結果見圖1，2。

由圖1可知，在一定范圍內，隨著醇沉時間的延長，蒙花苷保留率逐漸升高。當醇沉時間超過16 h時，蒙花苷保留率反而開始下降。這是因為在16 h之后由于沉淀顆粒逐漸增大，顆粒與顆粒間間隙變小，逐漸聚集成板結的團塊狀，容易把蒙花苷包裹夾帶在其中從而造成損失。圖2則反映，醇沉時間對干浸膏得率影響不大。雜質在乙醇溶液的析出在8 h內已達到平衡，再延長醇沉時間，雜質去除量變化不大。

24初始乙醇濃度影響再取相同的感冒靈清膏5份，以相同的流速分別加入75%，80%，85%，90%，95%乙醇使藥液終點乙醇含量為65%，乙醇加完后將燒杯密封，于常溫下放置24 h后量取上清液體積，同樣方法測定并計算θ和η，結果見圖3，4。

隨著初始乙醇濃度增加，蒙花苷的保留率呈上升趨勢。實驗發(fā)現，如果初始乙醇濃度低于90%，醇沉液靜置24 h后，其中沉淀依然為泥糊狀，故醇沉不完全，難以過濾，上清液總體積減少。而最終的沉淀成型狀態(tài)不僅影響到有效成分的轉移率及雜質的去除率，而且關系到最后的排渣問題。若沉淀呈細膩泥糊狀，表明沉淀不完全，必然會降低有效成分轉移率及雜質去除率；若沉淀黏稠板結成塊則排渣困難。因此，在優(yōu)化的醇沉工藝條件下所形成的沉淀物應該是疏松的易于固液分離的顆粒狀團聚物。這一點對于中藥生產過程的實際操作至關重要。綜合考慮多方面因素，本文認為，初始乙醇應該選擇95%乙醇。

25終點乙醇含量的影響取相同的感冒靈清膏5份，同樣的方法加入95%乙醇使藥液終點乙醇含量分別為55%，60%，65%，70%，75%，加完放置24 h，然后量取上清液體積，同樣方法測定并計算θ和η，結果見圖5，6。

由圖5可知，在一定范圍內，隨著終點乙醇含量的增加，蒙花苷保留率逐漸升高；當乙醇含量大于70%時，隨著乙醇含量升高，蒙花苷保留率卻降低。其原因是，當終點乙醇含量過高，形成的沉淀顆粒粒度增大，沉淀板結，使蒙花苷更易被包裹于沉淀之中造成損失。由圖6知，終點乙醇含量越高，干浸膏得率越低。這說明，乙醇含量越高，水溶性物質在其中的溶解度越小，除雜率越高。沉淀越多，除去的物質成分越多，包括無效雜質和其他可能的有效活性物質。所以，醇沉工藝選擇需要考慮到去除雜質與保留有效成分的對立統(tǒng)一。因此，終點乙醇含量確定為70%。

26初膏密度的影響分別稱取500 g感冒靈清膏5份，其相對密度分別為105，110，115，120，125，以10 mL·min-1加入95%乙醇使藥液終點乙醇濃度為65%，然后室溫下放置24 h，再量取上清液并記錄其體積，然后同樣方法測定并計算θ和η，結果見圖7，8。

由圖7可知，除相對密度為105的初膏醇沉的保留率偏低外，其他初膏的蒙花苷保留率均無明顯差異。實驗過程發(fā)現，相對密度為105的清膏加入乙醇并放置24 h后沉淀呈泥糊狀，沉淀與上清液分界模糊，沉淀不完全，上清液總體積減少。而其他密度的初膏醇沉后上清液與沉淀分界清晰。因此，在一定范圍內，初膏密度對蒙花苷保留率影響不大。圖8表明，隨著初膏密度的增大，干浸膏得率也增大。這是因為初膏相對密度越小，含水量越多，要達到同等的終點乙醇含量則需要消耗更多的乙醇。隨著乙醇量的增多則雜質的去除率也相應增大，即干浸膏得率減少。

3結論

眾所周知，醇沉的本質是利用有效成分能溶于乙醇而雜質不溶于乙醇的特性，在加入乙醇后，有效成分轉溶于乙醇中而雜質則被沉淀出來。但醇沉工藝條件不當，則不但不能很好地去除雜質，反而會對有效成分造成很大的損失。醇沉工藝的優(yōu)化工作對中藥制劑生產的整個過程至關重要。

一般來說，影響醇沉工藝的因素有初膏密度、初始乙醇濃度、終點乙醇含量、醇沉時間、醇沉溫度、加醇方式及攪拌速度等[1214]。本文結合感冒靈顆粒大生產實際情況及預實驗結果，從相關物質的得失均衡角度考慮，研究了醇沉時間、初始乙醇濃度、終點乙醇含量及初膏密度等對醇沉工藝效果的影響作用，從雜質去除和蒙花苷保留率兩方面評價醇沉工藝。最終確定了感冒靈醇沉工藝的優(yōu)化參數是，醇沉時間為16 h，初始乙醇濃度為95%，終點乙醇含量為70%，初膏相對密度為110。

選擇該工藝條件的依據在于，在保證有效物質損失不嚴重的前提下，通過工藝調整而有效地去除那些無效物質。因為感冒靈顆粒是口服劑，醇沉除雜不宜過分，所以要求控制適量的干浸膏得率，避免有效成分損失。另一方面，中藥作用機理復雜，其中有效成分尚沒有完全探究透徹，所以，醇沉的程度要合適控制，得失均衡，適當地保留一些多糖類化合物，有利于保證中藥療效。

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[責任編輯孔晶晶]