• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    采用大孔樹脂分離純化核桃青皮中多酚

    2016-05-09 01:48:19馬樂韓軍岐白歡歡張有林
    食品與發(fā)酵工業(yè) 2016年3期
    關(guān)鍵詞:分離純化多酚

    馬樂,韓軍岐,白歡歡,張有林

    (陜西師范大學(xué) 食品工程與營養(yǎng)科學(xué)學(xué)院, 陜西 西安,710119)

    ?

    采用大孔樹脂分離純化核桃青皮中多酚

    馬樂,韓軍岐*,白歡歡,張有林

    (陜西師范大學(xué) 食品工程與營養(yǎng)科學(xué)學(xué)院, 陜西 西安,710119)

    摘要通過吸附、解吸試驗(yàn),篩選適合分離純化核桃青皮多酚的大孔樹脂,并對分離純化條件進(jìn)行優(yōu)化。以沒食子酸、原兒茶素等9種標(biāo)準(zhǔn)品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,采用HPLC對所得核桃青皮多酚物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析。結(jié)果表明:NKA-9樹脂是分離純化核桃青皮多酚的最佳樹脂,吸附條件為上樣液多酚濃度0.574 mg/mL,pH 1.0,上樣速率1.3 mL/min,吸附率可達(dá)90.1%;洗脫條件為體積分?jǐn)?shù)50%的乙醇洗脫劑,pH 3.0,洗脫速率0.43 mL/min,解吸率達(dá)87.9%。經(jīng) HPLC鑒定和分析,核桃青皮酚類物質(zhì)主要由原兒茶素、綠原酸、咖啡酸、表兒茶素、阿魏酸、蘆丁等單體組成,其中含量較高的為表兒茶素、原兒茶素和蘆丁。

    關(guān)鍵詞核桃青皮;多酚;大孔樹脂;分離純化

    核桃(JuglansregiaL.)是一種經(jīng)濟(jì)價(jià)值較高的核桃屬植物,我國核桃資源豐富,截至2010年,核桃栽培面積達(dá)到400萬hm2,產(chǎn)量可達(dá)128萬t[1]。核桃青皮(walnut green husk)又名青龍衣,是核桃外部一層厚厚的綠色果皮,其味辛、苦,性平、澀,早在1 200多年前,唐朝《食療本草》中記載核桃青皮有藥用價(jià)值[2]。植物多酚類化合物具有抗腫瘤、抗氧化、抗輻射、抗病毒、抗癌、抑菌等多種活性[3]。目前研究表明,核桃青皮中含有沒食子酸、阿魏酸、綠原酸、蘆丁、槲皮素等多種多酚類物質(zhì)[4],因此具有較強(qiáng)的抗氧化作用。大孔吸附樹脂具有吸附量大,操作簡單,安全,能耗較低,有利于大規(guī)模生產(chǎn)的實(shí)現(xiàn)且樹脂可再生節(jié)約成本等特點(diǎn)[5]。蘇曉東等[6]通過優(yōu)化大孔樹脂吸附解吸條件,獲得純化荔枝果肉多酚的最佳工藝; WU等[7]通過試驗(yàn)篩選出D101樹脂對枸杞類黃酮具有很好的分離純化效果等。但很少見此方法應(yīng)用于分離純化核桃青皮多酚的相關(guān)報(bào)道。本研究通過采用不同性能大孔樹脂(見表1)進(jìn)行吸附、解吸試驗(yàn),篩選適宜樹脂種類,對核桃青皮多酚分離純化條件進(jìn)行優(yōu)化,以獲得最佳純化效果。

    1材料與方法

    1.1材料與試劑

    青皮核桃:于8月中旬采摘于陜西省藍(lán)田縣,將青皮核桃取青皮,切碎,經(jīng)冷凍干燥后研磨粉碎,過60目篩,密封盛裝于棕色玻璃瓶內(nèi),冷藏備用。

    表1 4種大孔樹脂的基本性能

    大孔吸附樹脂:AB-8、S-8、NKA-9、D-101,西安藍(lán)曉科技新材料股份有限公司。

    單酚標(biāo)準(zhǔn)品沒食子酸、原兒茶素、綠原酸、香草酸、咖啡酸、表兒茶素、阿魏酸、蘆丁、槲皮素,均為美國Sigma 公司所產(chǎn)。

    Na2WO4、Li2SO4、Na2MO4、濃H3PO4、濃HCl、NaOH、無水乙醇、無水Na2CO3固體(分析純),天津富宇化工有限公司;溴水(分析純),成都市科龍?jiān)噭S;乙腈,色譜純,美國Fisher公司;甲酸(色譜純),天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司。

    1.2主要儀器設(shè)備

    數(shù)控超聲波清洗器(KQ3200DE型),昆山市超聲儀器有限公司;旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(RE-52型),上海安亭實(shí)驗(yàn)儀器有限公司;數(shù)顯恒溫水浴鍋(HH-S型),江蘇省金壇市醫(yī)療儀器廠;紫外可見分光光度計(jì)(UV-1100型),上海美譜達(dá)儀器有限公司;恒溫振蕩器(SHZ-82型),金壇市富華儀器有限公司;恒流泵(HL-2S型),上海滬西分析儀器廠有限公司;精密pH計(jì)(PHS-3C型),上海精密科學(xué)儀器有限公司;電子天平(JA1203型),上海精密科學(xué)儀器有限公司;冷凍干燥機(jī)(LGJ-18C型),北京四環(huán)科學(xué)儀器廠;高相液相色譜儀(Breeze1525型),美國Waters公司。

    1.3實(shí)驗(yàn)方法

    1.3.1樣品溶液的制備

    稱量一定量的核桃青皮干粉,用體積分?jǐn)?shù)50%乙醇,在溫度35 ℃,料液比 1∶17(g∶mL)條件下超聲提取30 min,提取2次。提取液真空抽濾,取濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā),得核桃青皮多酚粗提液,稀釋至相應(yīng)濃度, 4 ℃冷藏備用。

    1.3.2多酚含量的測定

    核桃青皮中多酚總含量測定采用Folin-Ciocaileu[8-9]法,以沒食子酸作為標(biāo)準(zhǔn)品。稱取沒食子酸0.250 0 g,定容至50 mL,分別移取0,0.5,1.0,1.5,2.5,5.0 mL沒食子酸溶液到50 mL容量瓶中,用去離子水定容。從上面不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液中分別移取0.2 mL,加入到10 mL容量瓶中,加入0.5 mL FC試劑,混合均勻,在1 min內(nèi)加入1.5 mL 20%Na2CO3溶液,混合,用去離子水定容,將上述溶液在40 ℃下暗放置2 h后,以不加標(biāo)準(zhǔn)液的溶液做為空白對照,在760 nm波長下測定吸光度值。

    1.3.3大孔樹脂的預(yù)處理

    大孔樹脂用質(zhì)量分?jǐn)?shù)4% NaOH 溶液浸泡處理4 h,蒸餾水不斷沖洗至中性;然后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)4% HCl 溶液浸泡4 h,蒸餾水洗樹脂至中性;最后再用體積分?jǐn)?shù)95%乙醇浸泡處理4 h,蒸餾水洗至無醇味為止,備用。

    1.3.4大孔樹脂靜態(tài)吸附與解吸

    (1) 靜態(tài)吸附實(shí)驗(yàn): 稱取1.0 g 各濕樹脂于50 mL三角瓶中,加入樣品液30 mL,密封置于175 r/min搖床上,25 ℃下振蕩12 h,從上清液中取樣,測定多酚含量。據(jù)以下公式計(jì)算吸附量和吸附率[8,10]。

    qe=(c0-c1)×V1/m

    (1)

    E/% =[(c0-c1)/ C0]×100

    (2)

    式中:qe,吸附量,mg/g;E,吸附率, %; c0,起始濃度,mg/mL;c1,平衡濃度,mg/mL;V1,吸附溶液體積,mL;m,樹脂的質(zhì)量,g。

    (2) 靜態(tài)解吸實(shí)驗(yàn): 將已充分吸附后的樹脂用蒸餾水清洗,直至表面無樣品液殘留,再用濾紙吸干水分,置于三角瓶中,加入30mL不同濃度乙醇溶液,密封放置于175r/min振蕩器中,25 ℃下解吸12h,從上清液中取樣,測多酚含量。據(jù)以下公式計(jì)算解吸率和解吸量[8,11-13]:

    D/% = (c2×V2×100)/[(c0-c1)×V1]

    (3)

    qd=c2×V2/m

    (4)

    式中:D,解吸率, %;qd,解吸量, mg/g;c0,起始濃度, mg/mL;c1,平衡濃度, mg/mL;c2,解吸液中多酚濃度, mg/mL;V1,吸附溶液體積,mL;V2,解吸溶液體積,mL;m,樹脂取量, g。

    1.3.5大孔樹脂動態(tài)吸附與解吸

    將預(yù)處理好的樹脂濕法裝入(16 mm×500 mm)層析柱中,用蒸餾水平衡后,將樣品液以一定的速率上樣并收集流出液,每10 mL為一管,檢測并計(jì)算流出液濃度,確定流速、體積等條件,得到最佳吸附條件,繪制動態(tài)吸附曲線。

    將已吸附飽和的樹脂進(jìn)行解吸實(shí)驗(yàn),用蒸餾水洗至無樣品液殘留,以一定的流速用適當(dāng)濃度乙醇溶液進(jìn)行洗脫,收集洗脫液,計(jì)算流出液濃度,確定洗脫流速、體積等條件,得到最佳洗脫條件,繪制動態(tài)洗脫曲線。

    1.4核桃青皮單體酚組成及含量 HPLC 分析

    通過大孔樹脂分離純化后的核桃青皮多酚提取物采用HPLC法測定其單體酚的組成及含量。具體方法為:Diamonsil C18柱(5 μm,250 mm×4.6 mm);檢測波長 280 nm;流速1.0 mL/min;柱溫 30 ℃;進(jìn)樣量 20 μL;流動相A(0.1%甲酸高純水)和流動相B(0.1%甲酸乙腈);梯度洗脫程序:93%A,7%B,0 min;82%A,18%B,30 min;78%A,22%B,40 min;50%A,50% B,45 min;50%A,50% B,50 min。樣品峰保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)品保留時(shí)間進(jìn)行對比,判斷單體酚種類,按照峰面積計(jì)算單體酚含量,結(jié)果以(μg/g)核桃青皮干粉計(jì)。

    1.5統(tǒng)計(jì)分析

    試驗(yàn)重復(fù)3次,以(均值±標(biāo)準(zhǔn)差)表示,采用Excel和DPS軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

    2結(jié)果與分析

    2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

    以沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X,mg/L),吸光度值為縱坐標(biāo)(Y),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得回歸方程為:Y=0.002 8X-0.000 9,R2=0.999 5,說明該曲線在0~350 mg/L有良好的線性關(guān)系。

    2.2樹脂篩選結(jié)果

    由于樹脂的結(jié)構(gòu)、孔結(jié)構(gòu)、表面化學(xué)性質(zhì)及被吸附分子的大小、極性等不同是影響樹脂吸附性能的主要因素。

    由圖1可知,NKA-9對核桃青皮多酚的吸附量最高,可達(dá)17.39 mg/g;其次是AB-8吸附量為16.15 mg/g;D101、S-8分別為14.19 mg/g和11.7 mg/g。通過4種大孔樹脂解吸性能試驗(yàn)可知,NKA-9對多酚的解吸性能最好,解吸率達(dá)84.56%;其次AB-8為80.5%;S-8的解吸率最差僅有44.96%。這一現(xiàn)象說明,大孔樹脂對核桃青皮多酚類物質(zhì)的吸附和解吸存在一定的選擇性。而NKA-9的吸附量明顯高于其他幾種樹脂,可能是由于樹脂與核桃青皮多酚分子大小相近、極性相似。因此,選NKA-9大孔樹脂作為純化的最佳樹脂。

    圖1 4種大孔樹脂靜態(tài)吸附和解吸性能的比較分析Fig.1 The static adsorption and desorption analysis of 4 macroporous resins

    2.3靜態(tài)吸附與解吸條件的優(yōu)化

    2.3.1樹脂對粗提液多酚的吸附性能

    在NKA-9大孔樹脂中加入多酚粗提液進(jìn)行靜態(tài)吸附,不同時(shí)間測定多酚濃度,計(jì)算多酚吸附量。再將吸附飽和的樹脂進(jìn)行一段時(shí)間的靜態(tài)解吸,計(jì)算多酚解吸量,以橫坐標(biāo)為時(shí)間(h),縱坐標(biāo)為吸附量(mg/g),繪制靜態(tài)吸附和解吸動力學(xué)曲線。

    從圖2可知,靜態(tài)吸附起始階段NKA-9樹脂對多酚的吸附量上升速度快,隨著時(shí)間的增加,吸附量逐漸達(dá)到飽和。當(dāng)?shù)竭_(dá)4 h時(shí)樹脂基本到達(dá)吸附平衡,如果再延長吸附時(shí)間,吸附量變化不大。通過解吸曲線可知,解吸初期隨著時(shí)間的增加解吸量不斷增大,當(dāng)處在2h時(shí)樹脂解吸量已達(dá)較大,再延長解吸時(shí)間變化不太明顯,由此表明2 h后就可達(dá)到解吸平衡態(tài)。

    圖2 NKA-9樹脂靜態(tài)吸附和解吸動力學(xué)曲線Fig.2 The static adsorption and desorption kinetic curve of NKA-9 resin

    2.3.2粗提液pH值對樹脂吸附效果的影響

    將粗提液pH值分別調(diào)節(jié)為1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0,7.0,樹脂經(jīng)一段時(shí)間靜態(tài)吸附,測多酚含量,計(jì)算吸附率。

    吸附要達(dá)到良好效果就必須使吸附過程中吸附質(zhì)保持容易被吸附的狀態(tài)。核桃青皮多酚在酸性條件下能夠保持此狀態(tài),有利于NKA-9樹脂吸附。如圖3所示,當(dāng)pH 1.0時(shí),樹脂吸附多酚效果較佳,隨著pH逐漸升高,多酚吸附量逐漸下降,這是由于多酚類化合物具有酚羥基結(jié)構(gòu),具備一定的酸性,其中—OH基團(tuán)中的氫離子可以解離出來,以離子的形式存在于水中,此時(shí)不易被樹脂吸附[14]。因此選擇pH 1.0作為粗提液多酚吸附的較佳pH值。

    圖3 pH對多酚吸附率的影響Fig.3 The effect of pH on adsorption ratio of polyphenols

    2.3.3粗提液多酚濃度對樹脂吸附效果的影響

    配制多酚質(zhì)量濃度為0.246~0.708 mg/mL粗提液,對樹脂進(jìn)行靜態(tài)吸附試驗(yàn),測定吸附后多酚含量,計(jì)算吸附率。

    圖4 不同濃度多酚靜態(tài)吸附曲線Fig.4 Static adsorption curve of different polyphenols concentration

    由圖4可知,多酚濃度較低條件下,隨著溶液濃度提高,多酚的吸附率逐漸增加,當(dāng)多酚濃度達(dá)到0.574 mg/mL左右時(shí),吸附率上升逐漸變緩,這是因?yàn)槎喾优c雜質(zhì)同時(shí)競爭對樹脂的吸附從而達(dá)到動態(tài)平衡,且高濃度多酚溶液溶解性降低不利于與樹脂的結(jié)合,以及高濃度下分子擴(kuò)散受抑制導(dǎo)致樹脂吸附能力下降,容易使其他恒定條件的控制難度增加以及容易造成上樣困難[15]。所以試驗(yàn)選用上樣濃度為0.574 mg/mL。

    2.3.4乙醇濃度對樹脂解吸效果的影響

    將不同濃度的乙醇溶液分別加入到吸附飽和的樹脂中,經(jīng)過一段時(shí)間的靜態(tài)解吸測定解吸多酚濃度,計(jì)算解吸率,結(jié)果如圖5所示。

    圖5 乙醇濃度對多酚解吸效果的影響Fig.5 Effect of ethanol concentration on desorption rate of polyphenols

    核桃青皮多酚一般用于醫(yī)藥及食品領(lǐng)域,所以從安全、簡便角度考慮,試驗(yàn)選用乙醇作為洗脫劑,考察乙醇濃度對樹脂洗脫效果的影響。由圖5可知,隨乙醇濃度增加,多酚解吸率逐漸增大。當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)達(dá)到50%后,再進(jìn)一步增加乙醇濃度,解吸率增加變緩,這是由于洗脫劑的極性在一定程度上可能會影響吸附質(zhì)的解吸作用??紤]到成本節(jié)約和減少浪費(fèi),故選體積分?jǐn)?shù)50%乙醇作為最佳濃度的洗脫劑。

    2.3.5解吸液pH值對樹脂解吸效果的影響

    將解吸液pH值分別調(diào)節(jié)為1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0,對樹脂進(jìn)行靜態(tài)解吸試驗(yàn),測定多酚含量,計(jì)算解吸率。

    圖6 pH對多酚解吸率的影響Fig.6 Effect of pH on desorption rate of polyphenols

    由圖6可知,隨著pH值的逐漸升高,多酚的解吸率逐漸增加,pH 3.0時(shí)已達(dá)到最大值,隨著pH值升高至中性時(shí),解吸率反而不斷下降。這說明在中性條件下,酚類化合物結(jié)構(gòu)發(fā)生不可逆變化,使其性質(zhì)發(fā)生改變,導(dǎo)致多酚解吸率減低。而在pH 3.0的條件下,由于樹脂和多酚之間作用強(qiáng)度較弱容易被解吸,所以解吸率可達(dá)最大。

    2.4動態(tài)吸附與解吸條件的優(yōu)化

    2.4.1上柱流速對樹脂吸附效果的影響

    將大孔樹脂濕法裝柱, 粗提液多酚分別以0.43、1.3、2.17 mL/min的流速上樣, 收集流出液,檢測并計(jì)算流出液濃度,繪制動態(tài)吸附曲線。

    由于上樣流速主要影響粗提液多酚向樹脂的擴(kuò)散效果,也因此決定最終吸附的效果。為使擴(kuò)散有效進(jìn)行,離子交換過程中大孔樹脂和粗提液多酚就必須要充分接觸。如果流速過快,樹脂和粗提液不能夠充分接觸,致使部分酚類物質(zhì)流出柱子,降低其吸附量;如果流速過慢,雖有利于樹脂對酚類物質(zhì)的吸附,但卻會降低生產(chǎn)效率,影響生產(chǎn)周期。由圖7可知,在0.43 mL/min和1.3 mL/min 2種上樣流速下樹脂吸附量均優(yōu)于流速為2.17 mL/min的情況。在0.43、1.3 mL/min速率下,樹脂吸附能力相差不大(P>0.05),試驗(yàn)選用1.3 mL/min為較佳的上樣流速。

    圖7 流速對樹脂吸附效果的影響Fig.7 Influence of flowing rates on adsorption effect

    2.4.2洗脫劑流速對樹脂解吸效果的影響

    將吸附飽和的樹脂,用體積分?jǐn)?shù)50%乙醇溶液進(jìn)行洗脫,洗脫流速分別為0.43、1.3、2.17 mL/min,收集洗脫液,測定乙醇溶液對飽和樹脂的動態(tài)洗脫效果,繪制動態(tài)洗脫曲線。

    一般來說,洗脫速度對解吸效果有顯著影響。洗脫流速要求慢,但如果流速過慢,則會引起解吸時(shí)間延長,且在流動過程中被洗脫的多酚可能會被重新吸附,兩相間會重新建立動態(tài)平衡,降低解吸量;如果流速過快,則會導(dǎo)致洗脫劑不能和吸附飽和的樹脂充分接觸而快速流出,使得解吸量降低,生產(chǎn)效率下降[16]。由圖8可知,隨著洗脫流速的加快,解吸量不斷降低,當(dāng)洗脫流速在0.43 mL/min時(shí)解吸效果較好,故采用此流速為洗脫流速。

    圖8 洗脫劑流速對樹脂解吸效果的影響Fig.8 Influence of eluting rates on desorption effect

    2.5核桃青皮多酚單體組成及含量的比較

    以9種單體酚為混標(biāo),通過采用HPLC法對核桃青皮粗多酚及NKA-9純化后的提取物檢測并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。核桃青皮中共檢測到7種單體酚類物質(zhì),單體酚種類及純化前后的含量如表2所示。NKA-9樹脂能較好的分離純化核桃青皮中的酚類物質(zhì),由表2可知,經(jīng)純化后其中含量較高的為表兒茶素、原兒茶素和蘆丁,且三者占總酚含量的70.58%。NKA-9純化前后的核桃青皮多酚提取物 HPLC譜見圖9,核桃青皮多酚純化前保留時(shí)間2~5 min和48~50 min之間的雜峰經(jīng)過純化后被降低,且純化前后剩余峰基本被保留,說明此種樹脂適用于初步純化核桃青皮多酚。此次試驗(yàn)檢測出7種單體酚,尚余留一些未知峰尚有待做進(jìn)一步的分離純化,再經(jīng)核磁或高分辨質(zhì)譜等手段鑒定分析。

    表2 NKA-9大孔樹脂純化前后核桃青皮單體

    注:含量以 μg/ g核桃青皮粉計(jì),均值±標(biāo)準(zhǔn)差 保留率:核桃青皮單體酚純化后與純化前含量的比值。

    a-純化前;b-純化后;c-多酚混合標(biāo)準(zhǔn)品1-沒食子酸;2-原兒茶素;3-綠原酸;4-香草酸;5-咖啡酸;6-表兒茶素;7-阿魏酸;8-蘆??;9-槲皮素圖9 NKA-9大孔樹脂純化前、后的核桃青皮提取物HPLC圖及多酚混合標(biāo)準(zhǔn)品HPLC圖Fig.9 Effects of NKA-9 resin on HPLC spectrum of walnut green husk extract and theHPLC chromatogram of polyphenols standards

    3結(jié)論

    試驗(yàn)對4種不同型號的大孔樹脂進(jìn)行篩選,得到NKA-9樹脂具有良好的吸附和解吸性能,通過考察核桃青皮多酚質(zhì)量濃度、pH值、洗脫劑濃度以及上樣液流速等影響因素,初步確定了分離純化條件。 最佳吸附和解吸條件:提取液多酚濃度為0.574 mg/mL,pH 1.0時(shí),以1.3 mL/min流速上樣,此條件下樹脂對多酚的吸附率最高,可達(dá)90.1%; 體積分?jǐn)?shù)50%乙醇洗脫劑,pH 3.0時(shí),流速0.43 mL/min洗脫,解吸效果較好,解吸率達(dá)87.9%。青皮多酚中主要由沒食子酸、原兒茶素、綠原酸、咖啡酸、表兒茶素、蘆丁和槲皮素等7種酚類物質(zhì)組成,經(jīng)過樹脂純化后含量較高的為表兒茶素、原兒茶素和蘆丁。結(jié)果表明,NKA-9樹脂作為核桃青皮多酚初步純化材料是可行的,且分離純化條件也可為工業(yè)生產(chǎn)提供理論參考。

    參考文獻(xiàn)

    [1]許新橋,孟丙南.我國核桃產(chǎn)業(yè)潛力及發(fā)展對策研究[J].林業(yè)經(jīng)濟(jì),2013,11(2):35-39.

    [2]王紅萍,尹江艷.核桃青皮的有效成分及綜合利用[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2013,41(24):10 129-10 133.

    [3]ATHANASIOS V,THOMAIS V.Plant polyphenols:recent advances in epidemiological research and other studies on cancer prevention[J].Studies in Natural Products Chemistry,2013,39:269-295.

    [4]萬政敏.核桃青皮中多酚類物質(zhì)及其抗氧化性的分析[D].呼和浩特:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué),2007.

    [5]劉丹.親水性多酚分離純化技術(shù)研究[D].大連:大連理工大學(xué),2010.

    [6]蘇東曉,張瑞芬,張名位,等.荔枝果肉酚類物質(zhì)大孔樹脂分離純化工藝優(yōu)化[J].中國農(nóng)業(yè)科學(xué),2014,47(14):2 897-2 906.

    [7]WU Song-hai,WANG Yan-yan,GONG Gui-li,et al.Adsorption and desorption properties of macroporous resins for flavonoids from the extract of Chinese wolfberry (LyciumbarbarumL.)[J].Food and Bioproducts Processing,2014,93(1):465-472.

    [8]LIN Lian-zhu,ZHAO Hai-feng,DONG Yi,et al.Macroporous resin purification behavior of phenolics and rosmarinic acid from Rabdosia serra (MAXIM.) HARA leaf [J].Food Chemistry,2012,130(2):417-424.

    [9]PAULO J M,JOANA S V,LUS M.Goncalves et al.Isolation of phenolic compounds from hop extracts using polyvinylpolypyrrolidone:Characterization by high-performance liquid chromatography-diode array detection-electrospray tandem mass spectrometry [J].Journal of Chromatography A,2010,1217(19):3 258-3 268.

    [10]SUN Yan,YUAN Hong-yan,HAO Li-li,et al.Enrichment and antioxidant properties of flavone C-glycosides from trollflowers using macroporous resin [J].Food Chemistry,2013,141(1):533-541.

    [11]XIONG Qing-ping,ZHANG Qiang-hua,ZHANG Dan-yan,et al.Preliminary separation and purification of resveratrol from extract of peanut(Arachishypogaea) sprouts by macroporous adsorption resins[J].Food Chemistry,2014,145(15):1-7.

    [12]曹增梅,黃和.大孔樹脂純化番石榴多酚的工藝優(yōu)化[J].食品工業(yè)科技,2013,34(7):215-218.

    [13]熊何健,吳國宏.大孔吸附樹脂分離純化葡萄多酚的研究[J].食品研究與開發(fā),2007,28(11):74-76.

    [14]葉春,張婧.大孔樹脂對野菊花總黃酮吸附分離特性的影響[J].食品科學(xué),2010,31(12):127-131.

    [15]焦巖,王振宇.大孔樹脂純化大果沙棘果渣總黃酮的工藝研究[J].食品科學(xué),2010,31(16):16-20.

    [16]趙平,宋學(xué)娟,張?jiān)缕?大孔樹脂對葡萄籽原花青素的吸附研究[J].中國中藥雜志,2007,32(20):2 196-2 201.

    Separation and purification of polyphenols from walnut green husk by macroporous resin

    MA Le, HAN Jun-qi*, BAI Huan-huan, ZHANG You-lin

    (Shaanxi Normal University College of Food Engineering and Nutritional Science,Xi'an 710119, China)

    ABSTRACTThe appropriate macroporous for separation and purification of polyphenols in walnut green husk was chosen by the adsorption and desorption experiment. The separation and purification condition was also optimized. Then the polyphenols from walnut green husk were qualitatively and quantitatively analyzed by HPLC (high performance liquid chromatography) using gallic acid and protocatechuic acid as standards. Results showed that macroporous resin NKA-9 was suitable for purification of walnut green husk polyphenols. The absorption condition was: polyphenols 0.574 mg/mL, pH 1.0, feeding rate 1.3 mL/min. Under the above conditions, the adsorption could reach to 90.1%. The desorption of walnut green husk polyphenols could be obtained when the elution rate was 0.43 mL/min with 50% ethanol, pH 3.0. The desorption ratio was 87.9%. Moreover, the HPLC test showed that polyphenols in walnut green husk contained protocatechuic acid, chlorogenic acid, caffeic acid, epicatechin, ferulic acid and rutin. Among those polyphenols, Epicatechin, protocatechuic acid and rutin content were higher.

    Key wordswalnut green husk; polyphenols; macroporous resin; separation and purification

    收稿日期:2015-09-02,改回日期:2015-10-14

    基金項(xiàng)目:西安市農(nóng)業(yè)創(chuàng)新計(jì)劃項(xiàng)目(NC1505.4)資助

    DOI:10.13995/j.cnki.11-1802/ts.201603042

    第一作者:碩士研究生(韓軍岐博士為通訊作者)。

    猜你喜歡
    分離純化多酚
    生姜中多酚提取方法研究現(xiàn)狀
    油茶中產(chǎn)多酚內(nèi)生真菌的篩選
    澳洲堅(jiān)果果皮不同溶劑提取物的含量和抗氧化活性
    香蕉果實(shí)發(fā)育成熟過程中多酚物質(zhì)的變化規(guī)律
    蠅蛆抗氧化肽的制備及其純化
    番茄紅素分離純化研究
    車前子多糖的分離純化及其功能性質(zhì)研究
    雙齒圍沙蠶化學(xué)成分及其浸膏抗腫瘤活性的研究
    大葉白麻總多酚提取工藝研究
    豆甾醇的研究及開發(fā)進(jìn)展
    亚洲欧美色中文字幕在线| 欧美精品一区二区免费开放| 久久久欧美国产精品| 久热这里只有精品99| 免费黄网站久久成人精品| 99久国产av精品国产电影| 在线 av 中文字幕| 少妇熟女欧美另类| 久久人人97超碰香蕉20202| 久久久欧美国产精品| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 又大又黄又爽视频免费| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 久久99热这里只频精品6学生| 久久青草综合色| 日韩 亚洲 欧美在线| 午夜影院在线不卡| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 亚洲美女视频黄频| 男女边吃奶边做爰视频| 热re99久久国产66热| 最后的刺客免费高清国语| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 亚洲久久久国产精品| 亚洲精品自拍成人| 国产片内射在线| 国产片特级美女逼逼视频| 亚洲精品一区蜜桃| 90打野战视频偷拍视频| 99香蕉大伊视频| 免费大片18禁| 欧美3d第一页| 精品亚洲成a人片在线观看| 女人久久www免费人成看片| 国产精品无大码| 在线观看国产h片| 在现免费观看毛片| 91成人精品电影| av有码第一页| 久久久久精品久久久久真实原创| 91精品国产国语对白视频| 亚洲av综合色区一区| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 亚洲一区二区三区欧美精品| 久久ye,这里只有精品| 一二三四中文在线观看免费高清| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 高清视频免费观看一区二区| 91aial.com中文字幕在线观看| 在线观看国产h片| 麻豆乱淫一区二区| 尾随美女入室| 免费观看a级毛片全部| 欧美性感艳星| 国产精品久久久久久精品古装| a级片在线免费高清观看视频| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 九色成人免费人妻av| 老司机影院成人| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 大话2 男鬼变身卡| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 日韩 亚洲 欧美在线| 人妻 亚洲 视频| 久久久久久久久久久久大奶| 国产视频首页在线观看| 久久久精品区二区三区| 午夜福利,免费看| 中文欧美无线码| 丰满迷人的少妇在线观看| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 两个人免费观看高清视频| 亚洲av欧美aⅴ国产| 九色成人免费人妻av| 亚洲国产精品成人久久小说| 少妇的逼水好多| 一级片免费观看大全| 一级毛片电影观看| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 亚洲精品一二三| 寂寞人妻少妇视频99o| 亚洲精品,欧美精品| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 99久久综合免费| 青春草国产在线视频| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 日日啪夜夜爽| videos熟女内射| 日韩一区二区视频免费看| 亚洲精品国产色婷婷电影| 久久韩国三级中文字幕| 国产精品熟女久久久久浪| 啦啦啦啦在线视频资源| 伊人久久国产一区二区| 日韩成人伦理影院| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 黄片无遮挡物在线观看| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 亚洲成人手机| 久久国内精品自在自线图片| 久久这里只有精品19| 日韩中文字幕视频在线看片| 国产成人av激情在线播放| 久久精品国产综合久久久 | 97在线人人人人妻| 成年人免费黄色播放视频| 国产福利在线免费观看视频| 男女边摸边吃奶| 日韩伦理黄色片| 多毛熟女@视频| 免费观看性生交大片5| 亚洲精品日本国产第一区| 国产精品久久久久久久久免| 国产成人精品一,二区| 熟女av电影| 成人免费观看视频高清| 美女大奶头黄色视频| 日日撸夜夜添| 男男h啪啪无遮挡| 热re99久久精品国产66热6| 久久女婷五月综合色啪小说| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 一区二区三区乱码不卡18| 亚洲欧美色中文字幕在线| 满18在线观看网站| 欧美另类一区| 99热这里只有是精品在线观看| 深夜精品福利| 亚洲美女视频黄频| 咕卡用的链子| 国产xxxxx性猛交| 91午夜精品亚洲一区二区三区| www.熟女人妻精品国产 | 久久精品久久久久久噜噜老黄| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 亚洲少妇的诱惑av| 中文天堂在线官网| av一本久久久久| 久久99热6这里只有精品| 久久av网站| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 99九九在线精品视频| av在线老鸭窝| 街头女战士在线观看网站| 在线观看美女被高潮喷水网站| 18禁观看日本| 全区人妻精品视频| 国产精品一区二区在线不卡| 久久久久久人人人人人| 国产精品久久久久久久电影| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 肉色欧美久久久久久久蜜桃| av一本久久久久| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 亚洲第一区二区三区不卡| 亚洲欧洲日产国产| 欧美 日韩 精品 国产| 国产av精品麻豆| 高清av免费在线| 一边摸一边做爽爽视频免费| 亚洲经典国产精华液单| 免费av中文字幕在线| 啦啦啦啦在线视频资源| 老司机影院毛片| 国产成人精品婷婷| 如何舔出高潮| 亚洲av日韩在线播放| 国产精品一区二区在线不卡| 日日爽夜夜爽网站| 国产又爽黄色视频| 亚洲一区二区三区欧美精品| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 一区二区日韩欧美中文字幕 | 美女国产高潮福利片在线看| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 极品人妻少妇av视频| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 五月开心婷婷网| 国产一区亚洲一区在线观看| 性色av一级| 亚洲成色77777| 九色成人免费人妻av| 国产一级毛片在线| 中文字幕人妻丝袜制服| 9色porny在线观看| 在线观看人妻少妇| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 91在线精品国自产拍蜜月| 乱码一卡2卡4卡精品| 久久免费观看电影| 热re99久久国产66热| 精品视频人人做人人爽| 精品国产乱码久久久久久小说| 亚洲欧美清纯卡通| 在线精品无人区一区二区三| 亚洲国产欧美在线一区| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 欧美xxⅹ黑人| 黄色毛片三级朝国网站| 久久这里有精品视频免费| 欧美人与性动交α欧美精品济南到 | 大片电影免费在线观看免费| 成人二区视频| 成人免费观看视频高清| 两性夫妻黄色片 | 午夜福利,免费看| 色94色欧美一区二区| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 午夜激情久久久久久久| 免费观看性生交大片5| 婷婷成人精品国产| 成人午夜精彩视频在线观看| 久久久国产精品麻豆| 日韩一本色道免费dvd| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 久久99热这里只频精品6学生| 国产老妇伦熟女老妇高清| 日本欧美视频一区| 国产精品久久久久久久电影| 国产国语露脸激情在线看| av在线播放精品| 亚洲成人一二三区av| 国产xxxxx性猛交| 色网站视频免费| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 亚洲精品av麻豆狂野| 飞空精品影院首页| 精品少妇黑人巨大在线播放| 免费高清在线观看视频在线观看| 97在线视频观看| 人妻少妇偷人精品九色| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 日本-黄色视频高清免费观看| 亚洲伊人久久精品综合| 国产在视频线精品| 亚洲三级黄色毛片| 欧美日韩成人在线一区二区| 成年人午夜在线观看视频| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 九色成人免费人妻av| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃 | 婷婷色av中文字幕| 亚洲av中文av极速乱| 精品久久久精品久久久| 九草在线视频观看| 9色porny在线观看| 精品人妻在线不人妻| 精品一区二区三区四区五区乱码 | 纵有疾风起免费观看全集完整版| 看免费av毛片| 赤兔流量卡办理| av免费在线看不卡| 欧美3d第一页| 国产亚洲精品久久久com| 国产成人免费无遮挡视频| 日韩一区二区三区影片| 国产高清三级在线| 中国美白少妇内射xxxbb| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀 | 久久久久人妻精品一区果冻| 国产综合精华液| 国产成人免费无遮挡视频| 亚洲人与动物交配视频| 免费少妇av软件| 久久久久久久久久久免费av| 欧美日韩成人在线一区二区| 国产亚洲最大av| 老司机影院成人| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 免费看不卡的av| 街头女战士在线观看网站| 久久久精品94久久精品| 中文字幕精品免费在线观看视频 | 午夜福利在线观看免费完整高清在| av免费观看日本| 成人影院久久| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 亚洲第一区二区三区不卡| 伦理电影免费视频| 国产乱人偷精品视频| 满18在线观看网站| 一本大道久久a久久精品| 蜜桃在线观看..| 日韩伦理黄色片| 99久久精品国产国产毛片| 亚洲精品美女久久av网站| 各种免费的搞黄视频| 国产精品一二三区在线看| 亚洲人成77777在线视频| 亚洲情色 制服丝袜| 亚洲图色成人| 亚洲av中文av极速乱| 国产免费一区二区三区四区乱码| 亚洲丝袜综合中文字幕| www.色视频.com| 欧美精品亚洲一区二区| 精品国产一区二区三区久久久樱花| av国产精品久久久久影院| 在线观看一区二区三区激情| 国产极品粉嫩免费观看在线| 国产 精品1| 熟女电影av网| 丰满迷人的少妇在线观看| 麻豆乱淫一区二区| freevideosex欧美| 人妻人人澡人人爽人人| 中国美白少妇内射xxxbb| 精品久久蜜臀av无| 又黄又爽又刺激的免费视频.| av在线观看视频网站免费| 国产 精品1| 国产精品.久久久| 校园人妻丝袜中文字幕| 亚洲人成网站在线观看播放| 男女国产视频网站| 亚洲国产毛片av蜜桃av| www.色视频.com| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 国产高清不卡午夜福利| 日韩欧美精品免费久久| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 一本色道久久久久久精品综合| 99热这里只有是精品在线观看| 久久免费观看电影| 亚洲av免费高清在线观看| 欧美激情国产日韩精品一区| 国产综合精华液| 精品一区二区三卡| 久久这里只有精品19| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 国产片特级美女逼逼视频| 日本-黄色视频高清免费观看| 久久青草综合色| 欧美3d第一页| 一区二区三区精品91| 国产成人aa在线观看| 国产高清不卡午夜福利| 久久精品国产综合久久久 | 久久青草综合色| 男人添女人高潮全过程视频| 有码 亚洲区| 免费黄网站久久成人精品| 最新的欧美精品一区二区| a 毛片基地| 国产成人精品婷婷| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 丝袜人妻中文字幕| 一二三四在线观看免费中文在 | 国产亚洲最大av| 久久人人97超碰香蕉20202| 日本-黄色视频高清免费观看| 成人综合一区亚洲| 性高湖久久久久久久久免费观看| 1024视频免费在线观看| 国产成人a∨麻豆精品| 乱码一卡2卡4卡精品| 伊人亚洲综合成人网| 午夜免费鲁丝| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 亚洲av电影在线进入| 大码成人一级视频| 国产日韩欧美视频二区| 久久av网站| 哪个播放器可以免费观看大片| 最新中文字幕久久久久| 精品久久久精品久久久| 丝袜喷水一区| 男女下面插进去视频免费观看 | 黄色视频在线播放观看不卡| 少妇的逼水好多| 亚洲欧洲国产日韩| 性色avwww在线观看| 成年女人在线观看亚洲视频| 美女主播在线视频| 咕卡用的链子| av视频免费观看在线观看| 久久这里只有精品19| 一本久久精品| 精品视频人人做人人爽| 香蕉国产在线看| 美女内射精品一级片tv| 欧美激情极品国产一区二区三区 | 老女人水多毛片| 亚洲伊人久久精品综合| 中文字幕免费在线视频6| 日本与韩国留学比较| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 最新的欧美精品一区二区| 成年人午夜在线观看视频| 伊人亚洲综合成人网| 99久久精品国产国产毛片| 寂寞人妻少妇视频99o| 亚洲成人手机| 亚洲第一区二区三区不卡| 美女内射精品一级片tv| 欧美xxⅹ黑人| 美国免费a级毛片| 久久女婷五月综合色啪小说| 午夜福利视频精品| 色网站视频免费| 国产成人免费无遮挡视频| 久久女婷五月综合色啪小说| 男男h啪啪无遮挡| 欧美日韩综合久久久久久| 一区二区三区四区激情视频| 国产精品一区二区在线观看99| 午夜久久久在线观看| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 国产精品.久久久| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 在线观看三级黄色| 久久久国产欧美日韩av| 午夜福利网站1000一区二区三区| 看非洲黑人一级黄片| 国产亚洲精品久久久com| 亚洲经典国产精华液单| 国国产精品蜜臀av免费| 免费黄网站久久成人精品| 99香蕉大伊视频| 热99国产精品久久久久久7| 久久久a久久爽久久v久久| 免费观看a级毛片全部| 又黄又粗又硬又大视频| 国产一区二区三区综合在线观看 | 女性被躁到高潮视频| 国产伦理片在线播放av一区| 各种免费的搞黄视频| 国产精品国产三级国产专区5o| 亚洲在久久综合| 男女边吃奶边做爰视频| 久久久久久人人人人人| 欧美最新免费一区二区三区| 97在线视频观看| 内地一区二区视频在线| 这个男人来自地球电影免费观看 | 亚洲国产成人一精品久久久| 亚洲精品自拍成人| 国产成人a∨麻豆精品| 人妻 亚洲 视频| 精品国产乱码久久久久久小说| 欧美国产精品va在线观看不卡| 五月开心婷婷网| 在线观看三级黄色| 韩国高清视频一区二区三区| 波野结衣二区三区在线| 国产激情久久老熟女| 中文字幕亚洲精品专区| 久久99蜜桃精品久久| 2021少妇久久久久久久久久久| 国产成人精品在线电影| 国产激情久久老熟女| 晚上一个人看的免费电影| 中国美白少妇内射xxxbb| 久久久久视频综合| 另类精品久久| 久久毛片免费看一区二区三区| 色婷婷av一区二区三区视频| 国产片特级美女逼逼视频| 亚洲精品美女久久av网站| 一级毛片电影观看| 亚洲国产精品国产精品| 交换朋友夫妻互换小说| 日韩av在线免费看完整版不卡| 一级毛片 在线播放| 三级国产精品片| 久久久久久久久久人人人人人人| 久久久精品94久久精品| 美女中出高潮动态图| 一本色道久久久久久精品综合| 老熟女久久久| 五月伊人婷婷丁香| 美女国产高潮福利片在线看| 国产欧美亚洲国产| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 一本久久精品| 性高湖久久久久久久久免费观看| 一边亲一边摸免费视频| 另类精品久久| 国产av码专区亚洲av| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 欧美成人午夜精品| 亚洲av欧美aⅴ国产| 国产黄频视频在线观看| 午夜91福利影院| 黄色配什么色好看| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 考比视频在线观看| 99香蕉大伊视频| 国产精品久久久久久久久免| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 婷婷色综合www| 国产欧美亚洲国产| 一级a做视频免费观看| 欧美精品高潮呻吟av久久| 香蕉国产在线看| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 国产精品一区二区在线观看99| 亚洲欧洲日产国产| 黄色 视频免费看| 免费高清在线观看视频在线观看| 久久国产亚洲av麻豆专区| 99re6热这里在线精品视频| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 亚洲精品456在线播放app| 久久99精品国语久久久| 日韩欧美精品免费久久| 91精品三级在线观看| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 在线观看人妻少妇| 少妇被粗大猛烈的视频| 男人爽女人下面视频在线观看| 性高湖久久久久久久久免费观看| 久久99热这里只频精品6学生| 成年动漫av网址| 国产精品成人在线| 国产在视频线精品| 少妇高潮的动态图| 久久久久久久精品精品| 午夜福利乱码中文字幕| 亚洲综合色网址| 亚洲精品456在线播放app| 天天操日日干夜夜撸| 大片免费播放器 马上看| 精品一品国产午夜福利视频| 中国三级夫妇交换| 国产日韩欧美亚洲二区| 日本午夜av视频| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 亚洲av欧美aⅴ国产| 精品一区二区三区视频在线| 性高湖久久久久久久久免费观看| 国产成人av激情在线播放| 精品国产一区二区三区四区第35| 久久99一区二区三区| 国产精品熟女久久久久浪| 国产成人精品在线电影| 亚洲av福利一区| 亚洲欧美色中文字幕在线| 免费在线观看黄色视频的| 亚洲国产精品成人久久小说| 在线看a的网站| xxxhd国产人妻xxx| 久久国产精品男人的天堂亚洲 | 国产精品久久久久久精品电影小说| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 免费久久久久久久精品成人欧美视频 | 激情五月婷婷亚洲| av在线app专区| 七月丁香在线播放| 中文字幕制服av| 国产精品国产三级专区第一集| av女优亚洲男人天堂| 欧美日韩综合久久久久久| 热re99久久国产66热| 尾随美女入室| 多毛熟女@视频| 成年动漫av网址| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 美女视频免费永久观看网站| 美女主播在线视频| 国产精品国产三级国产专区5o| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 国产精品偷伦视频观看了| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 一级,二级,三级黄色视频| 热re99久久国产66热| 欧美老熟妇乱子伦牲交| av福利片在线| 性色av一级| kizo精华| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 在线观看一区二区三区激情| 国产麻豆69| av线在线观看网站| 十分钟在线观看高清视频www| 久久久久久久国产电影| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| videossex国产| videosex国产| 精品少妇久久久久久888优播| 尾随美女入室| 男女高潮啪啪啪动态图| 尾随美女入室| 97在线视频观看| 精品一区二区三卡| 欧美另类一区| 少妇被粗大的猛进出69影院 | 亚洲美女黄色视频免费看| 国产精品久久久久久精品古装| 成人亚洲精品一区在线观看| 精品久久久精品久久久| 免费高清在线观看日韩| 国内精品宾馆在线| 免费观看av网站的网址| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 免费观看在线日韩| 午夜老司机福利剧场| 熟女电影av网| 性色avwww在线观看| 国产男女超爽视频在线观看| 老司机亚洲免费影院| 日本-黄色视频高清免费观看| 亚洲色图综合在线观看| 成人亚洲欧美一区二区av| 亚洲综合色网址| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 亚洲精品自拍成人| 少妇 在线观看| 久久99一区二区三区| 亚洲五月色婷婷综合| 久久久久久久久久久久大奶| 国产精品一二三区在线看| 人成视频在线观看免费观看| av不卡在线播放|