胱抑素C和NGAL與先天性心臟病患兒術(shù)后急性腎損傷的相關(guān)性研究

劉會(huì)瓊?范太兵?袁心剛

【摘要】 目的 探討胱抑素C和中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白（NGAL）與先天性心臟病患兒術(shù)后急性腎損傷的相關(guān)性。方法 100例接受先天性心臟病手術(shù)的患兒， 根據(jù)患兒術(shù)后是否發(fā)生急性腎損傷分為研究組（發(fā)生腎損傷）和對(duì)照組（未發(fā)生腎損傷）， 各50例。對(duì)比兩組手術(shù)時(shí)間、體外循環(huán)時(shí)間、術(shù)中尿量及手術(shù)前、手術(shù)后NGAL 及胱抑素 C水平。結(jié)果 兩組手術(shù)時(shí)間、體外循環(huán)時(shí)間及術(shù)中尿量比較， 差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。兩組手術(shù)前NGAL 及胱抑素C水平比較， 差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；兩組手術(shù)后NGAL 及胱抑素 C水平比較， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 胱抑素C和NGAL水平的測(cè)定對(duì)預(yù)測(cè)先天性心臟病患兒術(shù)后急性腎損傷有較好的診斷價(jià)值。

【關(guān)鍵詞】 胱抑素C；中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白；腎損傷

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.10.023

急性腎損傷是圍手術(shù)期一種常見的并發(fā)癥， 主要原因與腎臟血流低灌注氧供減少有關(guān)。病理上可以看到近端小管刷狀緣脫失， 導(dǎo)致管型形成、小管梗阻， 腎小球?yàn)V過率下降。目前還有學(xué)者指出急性腎損傷有炎癥機(jī)制、凝血功能異常的參與。急性腎損傷患者預(yù)后差， 死亡率高達(dá)24%～70%。有學(xué)者指出NGAL、胱抑素C是預(yù)測(cè)急性腎損傷理想的生物標(biāo)志物[1]。因此作者擬收集接受先天性心臟病手術(shù)的患兒， 探討胱抑素C和NGAL測(cè)定的價(jià)值?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 收集2009年2月～2013年2月接受先天性心臟病手術(shù)的100例患兒， 手術(shù)類型為室間隔或房間隔缺損修補(bǔ)術(shù)、動(dòng)脈導(dǎo)管封堵術(shù)等。根據(jù)患兒術(shù)后是否發(fā)生急性腎損傷分為研究組（發(fā)生腎損傷）和對(duì)照組（未發(fā)生腎損傷）， 每組50例。研究組年齡5個(gè)月～2歲， 男24例， 女26例。對(duì)照組年齡5個(gè)月～2歲， 男29例， 女21例。兩組患兒一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 入選及排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)： ①術(shù)前經(jīng)多普勒超聲心動(dòng)圖檢查確診為先天性心臟病， 年齡<14周歲；②心功能Ⅰ～Ⅲ級(jí)。排除標(biāo)準(zhǔn)：研究時(shí)腦、肝、腎等重要臟器功能不全者。

1. 3 觀察方法 對(duì)比兩組手術(shù)時(shí)間、體外循環(huán)時(shí)間、術(shù)中尿量及兩組手術(shù)前、手術(shù)后NGAL 和胱抑素 C水平。

1. 3. 1 NGAL 的測(cè)定方法 用純化的人NGAL抗體包被微孔板， 制成固相抗體， 加入TMB底物、酶標(biāo)試劑50 μl， 酶標(biāo)儀測(cè)定450 nm波長下的吸光度， 通過計(jì)算機(jī)測(cè)定NGAL濃度。

1. 3. 2 胱抑素C的測(cè)定方法 用純化的人半胱氨酸蛋白酶抑制蛋白C抗體包被微孔板， 制成固相抗體， 加入HRP酶、稀釋液50 μl， 在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在450 nm波長下測(cè)定吸光度， 通過計(jì)算機(jī)測(cè)定胱抑素 C濃度。

1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用 SPSS15.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。 P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 兩組手術(shù)時(shí)間、體外循環(huán)時(shí)間及術(shù)中尿量比較 兩組手術(shù)時(shí)間、體外循環(huán)時(shí)間及術(shù)中尿量比較， 差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表1。

2. 2 兩組手術(shù)前、手術(shù)后NGAL 及胱抑素 C水平比較 兩組手術(shù)前NGAL 及胱抑素 C水平比較， 差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；手術(shù)后兩組NGAL 及胱抑素C水平比較， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

3 討論

急性腎損傷是心臟手術(shù)和心肺體外循環(huán)一種常見的嚴(yán)重并發(fā)癥。如果在剛出現(xiàn)腎損傷時(shí)即進(jìn)行干預(yù)， 則可防止向腎損傷發(fā)展并延緩其發(fā)展速度， 因此早對(duì)急性腎損傷診斷非常重要。

有研究在1981年檢測(cè)了人胱氨酸蛋白酶抑制劑C的氨基酸系列， 經(jīng)過20多年的研究， 人胱氨酸蛋白酶抑制劑家族目前已有明確11種蛋白組成。胱抑素C是一個(gè)13 kD的半胱氨酸蛋白酶抑制劑， 可在腎小球自由過濾。正常情況下胱抑素C通過腎小球?yàn)V過膜， 幾乎完全被腎小管重吸收且不被分泌。有學(xué)者指出胱抑素C比血肌酐能更敏感地反映腎功能受損的情況。還有學(xué)者指出胱抑素C是反映腎小球?yàn)V過率的主要標(biāo)志， 在腎小球?yàn)V過率開始下降時(shí)胱抑素C血藥濃度會(huì)明顯上升[2]。當(dāng)腎小球出現(xiàn)輕微損傷時(shí)血中胱抑素C濃度即可出現(xiàn)升高。一項(xiàng)薈萃分析顯示血清胱抑素C對(duì)臨界值各不相同（0.80～2.04 mg/L）。還有人應(yīng)用免疫染色與免疫雜交法發(fā)現(xiàn)急性腎損傷的患者體內(nèi)胱抑素C水平升高后， 可通過氧化應(yīng)激誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞、單核細(xì)胞表達(dá)趨化因子， 而趨化因子在炎癥反應(yīng)中起重要作用。目前胱抑素C的測(cè)定方法主要采用改良免疫比濁分析法， 其優(yōu)勢(shì)為整個(gè)分析過程只需2～3 min， 而且不受標(biāo)本是否溶血和脂血的影響。

NGAL是 lipocalin 超家族的一員， 分子量為25 kD， 其有類似于轉(zhuǎn)鐵蛋白的鐵轉(zhuǎn)運(yùn)功能， 可被早期的原始腎小管上皮細(xì)胞攝取， 不受年齡、性別、攝食和炎癥等的影響。從中性粒細(xì)胞內(nèi)提純出的低分子蛋白。有學(xué)者指出在早期急性腎功能損傷時(shí)血、尿NGAL濃度通常會(huì)迅速升高， 2 h最為明顯（ 比臨界值升高幾十至幾百倍） ， 血清肌酐、尿酶等傳統(tǒng)指標(biāo)往往要在24～72 h后才明顯升高， 因而NGAL可用于急性腎功能的早期診斷。還有學(xué)者指出尿NGAL 每升高100 ng/ml， 腎移植患者發(fā)生腎功能延遲恢復(fù)的幾率就增加20%。研究顯示在急性腎損傷時(shí)NGAL會(huì)大量地出現(xiàn)在髓袢升支粗端和集合管[3]。除此之外還有學(xué)者指出心臟手術(shù)后， 靜脈注入造影劑后， 尿NGAL升高比血肌酐提前1.2 d， 而且術(shù)后2 h尿NGAL的受試者工作曲線為0.998。美國辛辛那提研究組發(fā)現(xiàn)心臟手術(shù)2 h尿中NGAL增加與體外循環(huán)時(shí)間、主動(dòng)脈阻斷時(shí)間之間顯著相關(guān)[4]。還有學(xué)者認(rèn)為兒童心臟術(shù)后發(fā)生急性腎衰竭的患兒在術(shù)后2 h血、尿NGAL水平可明顯升高， 表明血清NGAL水平與尿白蛋白排泄率相關(guān)， 與腎損害的嚴(yán)重程度相一致。

綜上所述， 胱抑素C和NGAL水平的測(cè)定對(duì)預(yù)測(cè)先天性心臟病患兒術(shù)后急性腎損傷有較好的診斷價(jià)值。

參考文獻(xiàn)

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[4] Pak O， Aldashev A， Welsh D， et al. The effects of hypoxia on the cells of the pulmonary vasculature. Eur Respir J， 2012， 30（2）：364-372.

[收稿日期：2015-11-25]