芒果套袋前后噴施吡蟲啉·噻嗪酮農(nóng)藥的消解動(dòng)態(tài)研究

李胤均+錢程+謝德芳

摘要： 建立噴施清水的對(duì)照、套袋前噴藥、套袋后噴藥、不套袋噴藥4種處理方法，噴施38%吡蟲啉和噻嗪酮混合懸浮劑，建立芒果中吡蟲啉、噻嗪酮?dú)埩舻母咝б合嗌V（HPLC）檢測方法。結(jié)果表明，在0.05～0.5 mg/kg添加水平下，吡蟲啉和噻嗪酮的平均回收率分別為82.6%～93.8%、101.4%～104.2%，相對(duì)偏差（RSD）分別為1.9%～45%、9.3%～15.6%。芒果中吡蟲啉、噻嗪酮的最小檢出量均為0.01 mg/kg。吡蟲啉套袋前施藥、套袋后施藥、不套袋施藥3種處理方式下的半衰期分別是16.74、6.38、8.10 d。噻嗪酮在套袋前施藥、不套袋施藥2種處理方式下的半衰期分別是9.72、9.23 d。套袋后施藥的噻嗪酮的殘留量低，第3天已經(jīng)低于檢出限。套袋處理降低了2種農(nóng)藥在芒果上的消解速率，吡蟲啉在芒果上有較強(qiáng)的內(nèi)吸性。

關(guān)鍵詞： 吡蟲啉；噻嗪酮；芒果；動(dòng)態(tài)；內(nèi)吸性

中圖分類號(hào)： S481+.8 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號(hào)：1002-1302（2016）03-0276-03

我國于20世紀(jì)90年代從日本引進(jìn)套袋技術(shù)，主要應(yīng)用在蘋果、葡萄、梨等溫帶果樹上。近年來，隨著套袋技術(shù)的推廣，套袋技術(shù)在熱帶作物上的應(yīng)用也越來越普及。芒果是熱帶作物，栽培環(huán)境需要高濕高熱，常常會(huì)受到病菌、害蟲的侵襲。每年我國因病蟲害造成的芒果產(chǎn)量損失占總產(chǎn)量的30%[1]。套袋技術(shù)的應(yīng)用可以避免果實(shí)受病蟲害侵襲，減少機(jī)械損傷，提高外觀品質(zhì)，減少農(nóng)藥使用次數(shù)，對(duì)芒果的種植具有積極影響[2]。套袋技術(shù)不能完全代替農(nóng)藥對(duì)作物的保護(hù)作用。本研究探索對(duì)作物噴施農(nóng)藥的前提下如何更有效地使用套袋技術(shù)，確保農(nóng)藥在作物上的消解半衰期更短，從而指導(dǎo)實(shí)際生產(chǎn)。

國內(nèi)外關(guān)于芒果套袋研究較多，主要集中在套袋對(duì)果實(shí)品質(zhì)影響以及套袋對(duì)農(nóng)藥殘留的影響。一般認(rèn)為，套袋能提高芒果的外觀品質(zhì)，增強(qiáng)芒果表面的光潔度、減少斑點(diǎn)、改善色澤，從而提高芒果的商品品質(zhì)。套袋處理可以降低水果中的農(nóng)藥殘留。絕大多數(shù)農(nóng)藥殘留試驗(yàn)的處理方式是套袋后對(duì)果樹進(jìn)行噴藥處理[3-4]，這種處理減少了果實(shí)和農(nóng)藥的直接接觸，農(nóng)藥的原始積累量降低了，因此必定降低了農(nóng)藥殘留量。在實(shí)際生產(chǎn)中，芒果從?；ū９焦麑?shí)的最后成熟期間，往往多次噴藥，在未套袋之前，芒果可能已經(jīng)接觸到農(nóng)藥。且不同性質(zhì)的農(nóng)藥對(duì)最終殘留量也有較大影響，套袋前后噴藥對(duì)于內(nèi)吸性農(nóng)藥與不內(nèi)吸農(nóng)藥的影響也不相同。吡蟲啉是煙堿類超高效殺蟲劑，具有內(nèi)吸、胃毒、拒食等作用，目前已成為世界上普遍使用的農(nóng)藥品種[5-6]。我國對(duì)蚍蟲啉在芒果中的限量還未作規(guī)定，國際食品法典委員會(huì)（CAC）規(guī)定，吡蟲啉在芒果上的MRL值為0.2 mg/kg。噻嗪酮是抑制昆蟲生長的新型選擇性殺蟲劑，對(duì)飛虱、葉蟬、粉虱有特效[7]。CAC規(guī)定，噻嗪酮在芒果中的MRL值為0.1 mg/kg。本研究通過建立吡蟲啉、噻嗪酮2種農(nóng)藥的HPLC方法，對(duì)比芒果套袋前后噴藥的消解動(dòng)態(tài)，研究套袋與施藥順序?qū)γ⒐限r(nóng)藥的消解影響，旨在為降低吡蟲啉、噻嗪酮2種農(nóng)藥在芒果中的殘留量提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 主要儀器、藥劑與試劑

waters 2695高效液相色譜配waters 2496紫外檢測器，乙腈（色譜純），IKAT25高速勻漿機(jī)（上海萬捷科技有限公司），R206旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海申生科技有限公司），AL204電子天平、DL 2002/01 電子頂載天平[梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司]，Srata NH2柱[500 mg/6 mL，NH2柱使用前用正己烷-丙酮（V/V為6 ∶ 4）溶液6 mL活化，美國Phenomenex公司]，乙腈、正己烷、甲醇（均為色譜純，上海Fisher Scientific公司），丙酮（色譜純，美國Tedia公司），氯化鈉（分析純，使用前160 ℃煅燒4 h，廣州化學(xué)試劑廠），吡蟲啉（純度為995%）、噻嗪酮（純度為99.6%）標(biāo)準(zhǔn)品。

1.2 方法

1.2.1 田間試驗(yàn) 芒果樹品種為臺(tái)農(nóng)，試驗(yàn)地點(diǎn)為海南省昌江天河農(nóng)場芒果園，選擇生長狀況基本一致的芒果樹32棵，分成12個(gè)小區(qū)，每小區(qū)2棵樹，4種處理方法，每處理設(shè)3個(gè)重復(fù)，4種處理方法分別為：噴施清水的對(duì)照，套袋前噴藥，套袋后噴藥，不套袋噴藥。所用的農(nóng)藥為38%吡蟲啉和噻嗪酮混合的懸浮劑，其中噻嗪酮含量為34%，吡蟲啉含量為4%，施藥濃度為379.5 mg/kg（有效劑量），套袋在第二次生理落果結(jié)束、芒果長至雞蛋大小時(shí)進(jìn)行[8]。2014年4月15日對(duì)所選果樹進(jìn)行套袋和噴藥處理，采收距施藥間隔期為0、1、2、3、5、7、14、21、28、42 d，采果后當(dāng)天把芒果送往中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院分析測試中心，選擇果實(shí)大小、成熟度相同的果品進(jìn)行制樣檢測。

1.2.2 樣品前處理 樣品通過制樣機(jī)打成漿狀攪拌均勻，稱取25 g樣品置于干凈的燒杯中，加入50 mL乙腈，在勻漿機(jī)上勻漿3 min，過濾到裝有氯化鈉（已煅燒4 h）的具塞量筒內(nèi)，振蕩1 min后靜置1 h。待具塞量筒中溶液明顯分層且乙腈層澄清，用移液管移取10 mL乙腈于圓底燒瓶內(nèi)，置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干，配制丙酮 ∶ 正己烷體積比為4 ∶ 6的淋洗液，用淋洗液潤洗圓底燒瓶，過SPE NH2小柱，置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干后定容。過0.22 μm濾膜，待測。

1.2.3 高效液相色譜檢測條件 色譜柱：waters C18色譜柱150 mm×4.6 mm，5 μm。流動(dòng)相：乙腈+超純水梯度洗脫（表1），流速為1.0 mL/min；進(jìn)樣量10 μL；柱溫40 ℃，檢測波長：245、270 nm。

2 結(jié)果與分析

2.1 高效液相色譜檢測色譜圖

液相色譜中吡蟲啉出峰時(shí)間為2.272 min，噻嗪酮出峰時(shí)間為9.274 min（圖1、圖2）。

2.2 線性范圍和檢出限

在建立的色譜分析條件下，采用外標(biāo)法定量，以3倍信噪比（S/N=3）確定儀器的最低檢出限，結(jié)果顯示，吡蟲啉、噻嗪酮在芒果中的最低檢出限分別為0.005、0.01 mg/kg。其中標(biāo)準(zhǔn)曲線方程和相關(guān)系數(shù)見表2。

2.3 方法的平均回收率和標(biāo)準(zhǔn)偏差

向空白的芒果樣品中添加3個(gè)濃度水平的2種農(nóng)藥的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照上述的前處理以及儀器檢測方法進(jìn)行回收率試驗(yàn)，每個(gè)添加濃度做5個(gè)平行試驗(yàn)，結(jié)果見表3。2種農(nóng)藥的平均回收率為82.6%～104.2%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為 1.9%～15.6%，符合農(nóng)藥殘留標(biāo)準(zhǔn)要求。

2.4 樣品檢測結(jié)果

從吡蟲啉、噻嗪酮在芒果中的殘留動(dòng)態(tài)曲線圖可以看出：吡蟲啉在套袋前施藥、套袋后施藥、不套袋施藥3種處理方法的原始累積量分別為0.463、0.071、0.367 mg/kg。噻嗪酮在套袋前施藥、套袋后施藥、不套袋施藥3種處理方法的原始累積量分別為0.460、0.05、0.299 mg/kg。因套袋處理方式不同，農(nóng)藥的原始累積量差異較大。2種殺蟲劑套袋前施藥的原始積累量大于不套袋，這可能是由于不套袋的果樹在施藥后，藥劑順著果實(shí)滴下，減少了果實(shí)上農(nóng)藥的原始積累量。套袋前施藥的果實(shí)，藥劑黏附在果袋上，與果實(shí)接觸，從而增加了果實(shí)的原始積累量（圖3、圖4）。

由圖3可以看出，3種處理方式下，施藥后吡蟲啉在芒果中的檢出量先逐漸上升，達(dá)到最高值后逐漸下降，第3天達(dá)到最高值。由此可知，吡蟲啉在芒果上具有內(nèi)吸性，果實(shí)中的農(nóng)藥除了噴施直接滲透外，還包括植物內(nèi)部的疏導(dǎo)組織從根部、葉片部分運(yùn)輸至果實(shí)。

由圖4可以看出，套袋前施藥和不套袋施藥處理下，噻嗪酮在芒果中的檢出量也呈先上升后下降的趨勢(shì)。套袋后施藥處理方式下，吡蟲啉、噻嗪酮在芒果中都有少量的原始積累量，這可能是由于對(duì)果樹噴施農(nóng)藥后，農(nóng)藥隨著果梗流到果實(shí)上。隨后吡蟲啉在果品中的檢出量升高，最高達(dá) 0.248 mg/kg，說明吡蟲啉在芒果上的內(nèi)吸性強(qiáng)。第3天噻嗪酮在芒果上的檢出量低于檢出限。

由圖5可以看出，套袋前施藥處理下，吡蟲啉的降解速率大于不套袋施藥處理，說明套袋減緩了吡蟲啉的降解速率。從表4可以看出，套袋后施藥處理下，吡蟲啉的半衰期為 6.38 d，是3種施藥處理中半衰期最短的方式。套袋前施藥處理下吡蟲啉半衰期最長，達(dá)16.74 d。不套袋施藥處理下吡蟲啉半衰期是8.1 d。由此可見，套袋前施藥處理下，芒果果面受光照減少、雨水沖刷減少、空氣流動(dòng)減少等原因降低了吡蟲啉在芒果中的降解速率。套袋前施藥和不套袋施藥處理下噻嗪酮的半衰期變化不明顯，說明套袋對(duì)噻嗪酮的降解速率影響不大（圖6）。

3 結(jié)論與討論

本研究通過對(duì)套袋前、套袋后施藥方式進(jìn)行比較，探究吡蟲啉、噻嗪酮2種殺蟲劑在芒果上的降解動(dòng)態(tài)，顯示了內(nèi)吸性殺蟲劑吡蟲啉的特性，在芒果上即使沒有原始積累量，噴施在植株上的藥劑通過內(nèi)吸作用也可以到達(dá)芒果內(nèi)部，從而影響殘留量。Laurent 等利用14C 標(biāo)記吡蟲啉，用吡蟲啉包衣向日葵籽后檢測了向日葵植株不同生長階段藥劑在不同部位的分布情況，結(jié)果表明，當(dāng)植株開花時(shí)，各個(gè)葉片中藥劑的含量不均勻，在向日葵植株中吡蟲啉具有明顯的頂端優(yōu)勢(shì)，向日葵最頂部葉片中的藥劑濃度是最底部葉片的20倍[9]。宗建平通過在番茄、甘藍(lán)葉片上噴施吡蟲啉，采集1、2、4、7、10 d的葉片，一部分葉片進(jìn)行沖刷處理，一部分葉片不沖刷，對(duì)比兩者中吡蟲啉的含量，確定吡蟲啉的內(nèi)吸性，結(jié)果表明，沖刷率在10 d內(nèi)基本保持不變，說明吡蟲啉在番茄、甘藍(lán)的葉片上不具備內(nèi)吸作用[10]。本研究結(jié)果表明，對(duì)芒果樹噴施吡蟲啉，其內(nèi)吸作用可以傳輸?shù)焦麑?shí)中。徐鳳仙研究噻嗪酮在柑橘內(nèi)的消解動(dòng)態(tài)，結(jié)果表明，噻嗪酮在柑橘內(nèi)無內(nèi)吸作用[11]。戴志一等用相同濃度的噻嗪酮對(duì)水稻進(jìn)行粗噴霧、潑澆、彌霧、毒土等不同施藥方式處理，發(fā)現(xiàn)水稻上的內(nèi)吸作用和稻莖對(duì)田水中藥劑的吸收、富集能力是該藥在田間長效的主要原因[12]。本研究結(jié)果表明，噻嗪酮在套袋前施藥和不套袋施藥處理方式下都有內(nèi)吸現(xiàn)象，說明噻嗪酮在不同作物中的內(nèi)吸性不同。雖然套袋前施藥和不套袋施藥處理方式下噻嗪酮的消解趨勢(shì)均為先上升后下降，但套袋后施藥噻嗪酮沒有上升趨勢(shì)，因此不能確定噻嗪酮在芒果上是否具有內(nèi)吸性，應(yīng)開展進(jìn)一步研究。

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