高效液相色譜儀結(jié)果不確定度分析

摘 要：液相色譜技術(shù)本質(zhì)上是高效的分離分析技術(shù)，隨著專業(yè)技術(shù)水平的提高，其用于檢測(cè)的精度也不斷提高。為充分發(fā)揮其所具有的優(yōu)勢(shì)，需要對(duì)現(xiàn)存的結(jié)構(gòu)不確定度問題進(jìn)行分析，確定各影響因素，并采取措施進(jìn)行優(yōu)化，本文對(duì)此進(jìn)行了簡(jiǎn)要分析。

關(guān)鍵詞：液相色譜儀；不確定度；檢定

1 高效液相色譜儀結(jié)果不確定度分析

1.1 不確定度分析

高效液相色譜儀結(jié)果不確定度，即被測(cè)值不能確定的程度，反應(yīng)了測(cè)試結(jié)果的信賴程度，是衡量檢定結(jié)果質(zhì)量的重要標(biāo)準(zhǔn)。最終所得檢定數(shù)值與所述結(jié)果越接近，則證明質(zhì)量和水平越高，具有更高的價(jià)值。不確定度越大，則證明測(cè)量結(jié)果質(zhì)量越低，使用價(jià)值越小。與傳統(tǒng)測(cè)量誤差表述結(jié)果相比，不確定度可以更準(zhǔn)確的表達(dá)測(cè)量值不確定度，表示了各項(xiàng)值與平均值的最大距離。如果檢測(cè)結(jié)果為一列數(shù)：A1，A2，…，An，平均值為A，則不確定度為max{|A-Ai|，i=1，2...n}。

1.2 不確定度原因

1.2.1 輸液系統(tǒng)

（1）梯度誤差

主要體現(xiàn)在4個(gè)方面，即：兩段輸出信號(hào)間距離測(cè)量所存不確定度；紫外檢測(cè)器對(duì)丙酮相應(yīng)非線性造成的不確定度；記錄器記錄信號(hào)值產(chǎn)生的不確定度；B溶劑含量不確定度。

（2）泵流量誤差

對(duì)于輸液系統(tǒng)檢定，一般應(yīng)用的計(jì)量器包括天平、秒表以及容量瓶，根據(jù)泵流量設(shè)定值誤差和流量穩(wěn)定性誤差計(jì)算公式，可得知不確定度存在的原因是天平砝碼校準(zhǔn)不當(dāng)，流量的質(zhì)量稱量不準(zhǔn)，以及流動(dòng)相密度與要求相差較大等。

1.2.2 檢測(cè)器

（1）波長(zhǎng)示值錯(cuò)誤

主要體現(xiàn)在2個(gè)方面：一方面是固定波長(zhǎng)UV檢測(cè)器波長(zhǎng)示值誤差；另一方面則是可調(diào)波長(zhǎng)UV檢測(cè)器波長(zhǎng)示值錯(cuò)誤，以及重復(fù)性檢定結(jié)果不確定性。

（2）基線噪聲和基線漂移

一方面是基線噪聲產(chǎn)生的檢定不確定度，保羅記錄儀靈敏度較低原因。另一方面，則是極限漂移檢定產(chǎn)生的不確定度，即起始點(diǎn)、終點(diǎn)測(cè)量誤差，和運(yùn)行時(shí)間控制造成的不準(zhǔn)確度。

1.2.3 柱溫箱溫度檢定

柱溫箱溫度檢定所用器具主要包括數(shù)字溫度計(jì)和數(shù)字電壓表，利用溫度設(shè)定值偏差和控溫穩(wěn)定性計(jì)算公式可以確定，出現(xiàn)不確定度的原因，主要是因?yàn)槎啻螠y(cè)量重復(fù)性、溫度設(shè)定值準(zhǔn)確性以及數(shù)字溫度計(jì)校準(zhǔn)不確定度，和數(shù)字電壓表校準(zhǔn)不確定度。

2 高效液相色譜儀結(jié)果不確定度分析

2.1 測(cè)量過程

溫度控制在15～30℃，相對(duì)濕度控制在20%～85%。液相色譜儀為L(zhǎng)C-6A型；秒表為J9-1型，分度值小于0.01；分析天平為328a型，測(cè)量范圍為0.1～100g，分度值為0.1mg；數(shù)字溫度測(cè)量范圍在0～100℃，最小分度值為0.1℃；注射器為10μl、50μl、10ml各一支；容量瓶共包括10個(gè)50ml型號(hào)，2個(gè)250ml燒杯。另外，還需要試劑甲醛、丙酮、異丙醇等。檢定用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)包括1×10-6、1×10-9g/ml硫酸奎寧/高氯酸水溶液，1×10-4、1×10-7g/ml萘甲醇溶液。利用液相色譜對(duì)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行檢定，要求不確定度在4%以內(nèi)，k=3。并且10μl微量進(jìn)樣器，不確定度應(yīng)控制在1%，k=3。正式測(cè)量時(shí)，將一定量溶液注射到溶液進(jìn)儀器內(nèi)，通過儀器讀取響應(yīng)值-峰面積，然后選擇標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品溶液組分，將濃度差異小的注射到相同量溶液進(jìn)儀器，得到響應(yīng)值。

2.2 檢定結(jié)果不確定度評(píng)定

2.2.1 泵流量設(shè)定值誤差

3 結(jié)語

為提高液相色譜儀檢定結(jié)果的有效性，需要基于結(jié)果不確定度對(duì)各影響因素進(jìn)行分析，并且面對(duì)不同型號(hào)的儀器和計(jì)量器具，需要采取相應(yīng)的措施進(jìn)行分析評(píng)定，提高評(píng)定結(jié)果的有效性。

參考文獻(xiàn)

[1]馬靜芳.液相色譜儀測(cè)量結(jié)果不確定度分析與評(píng)定[J].科技資訊，2015，（6）：228.

（作者單位：山東魯抗生物制造有限公司）