甘肅省規(guī)模場豬PRRSV變異株疫苗免疫抗體檢測與分析

摘 要：【方法】采用間接ELISA方法，對采自23個規(guī)模場戶的419份血清，進行PRRSV變異株疫苗免疫抗體檢測。【結(jié)果】17個場戶免疫抗體合格率在70 %以上，平均合格率為79.71 %，其中種豬為90.52 %、保育豬為80.17 %，育肥豬為70.48 %；11個滅活疫苗免疫場戶中有6個場戶免疫抗體合格率在70 %以上，平均抗體合格率為71.48 %，12個弱毒疫苗免疫場戶中有10個場戶免疫抗體合格率在70 %以上，平均抗體合格率為87.55 %。【結(jié)論】滅活疫苗免疫種豬、保育豬和育肥豬抗體合格率存在明顯差異，弱毒疫苗免疫種豬和保育豬與育肥豬抗體合格率之間存在明顯差異。

關(guān)鍵詞：PRRSV變異株；免疫抗體；間接ELISA

中圖分類號：S855.3 文獻標識碼：A 文章編號：1001-0769（2016）10-0030-03

高致病性豬藍耳病是由缺失Nsp2基因的豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）引起的一種以持續(xù)高熱、高發(fā)病率和高死亡率為特征的疫病。2006年國內(nèi)首次發(fā)生。2007年，我省豬群中豬繁殖與呼吸綜合征變異株病毒感染率為0.54 %，血清抗體陽性率為42.83 %[1]。此后，有關(guān)我省豬PRRSV變異株疫苗免疫效果免疫調(diào)查情況除蘭州市有報道外，全省鮮有報道。為了解當(dāng)前甘肅省規(guī)模養(yǎng)豬場戶PRRSV變異株疫苗免疫效果，我們選擇中小規(guī)模養(yǎng)豬比較集中的23個養(yǎng)殖場戶進行了免疫抗體檢測，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 材料與方法

1.1 樣品采集

隨機選擇全省12個市州的采用PRRSV變異株疫苗免疫30 d以上的23個規(guī)模養(yǎng)殖場采集種豬、保育豬和肥育豬并分離血清。共采集種豬8場114份，保育豬6場116份，肥育豬9場166份共計419份血清樣品。

1.2 檢測方法與結(jié)果判定

1.2.1 間接ELISA，按試劑說明書操作

1.2.2 結(jié)果判定

陽性對照OD630 nm≥0.7，陰性對照OD630 nm<0.3時試驗成立，計算KQ值。

KQ=（樣品OD630 nm值/陽性對照OD630 nm平均值）×100

當(dāng)KQ≥20，判定為抗體陽性及免疫合格；KQ<20，判定為抗體陰性。

1.3 試劑來源

ELISA試劑盒購自武漢科動物生物制品有限責(zé)任公司，批號：150101。

1.4 疫苗來源

弱毒疫苗主要來源于哈爾濱維科生物技術(shù)開發(fā)公司、天津輝瑞生物制品有限公司、上海海利生物制品有限公司、吉林正業(yè)生物制品有限公司4家，滅活疫苗主要來源于洛陽普萊柯生物工程有限公司、齊魯動物保健品有限公司、中牧實業(yè)股份有限公司成都藥械廠，瑞普（保定）生物藥業(yè)有限公司4家。

2 檢測結(jié)果（表1）

（1） 共檢測23個規(guī)模養(yǎng)豬場戶血清419份（種豬8場137份，保育豬6場116份，肥育豬9場166份）。其中檢測滅活疫苗免疫場戶11個202份，抗體合格144份，平均合格率為71.28 %；檢測弱毒疫苗免疫場戶12個217份，抗體合格190份，平均合格率為87.56 %。

（2） 11個滅活疫苗免疫場戶中6個場戶免疫抗體合格率在70 %以上，群體免疫合格率為 54.55 %，種豬、保育豬和育肥豬合格率分別為89.53 %、60.71 %和55 %；12個弱毒疫苗免疫場戶中有10個場戶免疫抗體合格率在70 %以上，群體免疫合格率為83.33 %，種豬、保育豬和育肥豬合格率分別為92.16 %、91.67 %和79.25 %；各場檢測結(jié)果詳見附表。

3 小結(jié)與討論

（1） 本次調(diào)查表明，規(guī)模場戶群體和個體免疫效果均是弱毒苗明顯好于滅活苗。本次共檢測23個規(guī)模場戶，其中弱毒疫苗免疫場戶12個，滅活疫苗免疫場戶11個，共有17個場戶免疫抗體合格率達到70 %以上，其中弱毒疫苗免疫場戶10個，滅活苗免疫場戶7個。弱毒疫苗免疫場戶群體和個體免疫合格率分別為83.33 %和87.55 %。滅活疫苗免疫場戶群體和個體免疫合格率分別為54.55 %和71.48 %。無論是群體還是個體，免疫合格率均是弱毒苗明顯高于滅活苗。

（2） 統(tǒng)計檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)，無論是滅活疫苗還是弱毒疫苗，種豬免疫效果均明顯好于保育豬和育肥豬。本次檢測種豬滅活疫苗和弱毒疫苗免疫抗體合格率分別為89.53 %和92.16 %，兩者相差僅2.63 %。而保育豬和育肥豬滅活疫苗免疫抗體合格率與種豬相比，相差近20 %或以上；保育豬弱毒疫苗免疫抗體合格率91.67 %，與種豬抗體合格率92.16 %無明顯差異。而種豬與育肥豬抗體合格率79.25 %相差12.91 %；這與規(guī)模豬場重視種豬免疫和種豬多次免疫有關(guān)。保育豬弱毒疫苗效果好還與PRRSV免疫母源抗體存留時間長有關(guān)。

（3） 本次調(diào)查通過對各場檢測結(jié)果和比較各場使用不同類型疫苗情況分析，未發(fā)現(xiàn)不同廠家生產(chǎn)的弱毒疫苗和滅活疫苗，在使用相同免疫劑量的情況下，其效果存在明顯差異，且免疫安全性均較好。

（4） PRRSV經(jīng)典株和變異株弱毒疫苗多用于感染壓力大的豬場和仔豬使用，病毒陰性豬場和種豬特別是在妊娠期的母豬不提倡使用。滅活疫苗主要用于預(yù)防后備母豬和經(jīng)產(chǎn)母豬感染PRRS所造成的繁殖障礙[2]。因此，各場應(yīng)根據(jù)當(dāng)?shù)豍RRS兩種毒株疫情風(fēng)險和場內(nèi)是否存在兩種毒株的隱性感染決定選用何種疫苗。當(dāng)前我省的規(guī)模豬場幾乎都是PRRSV陽性場，因此使用PRRS變異株和經(jīng)典株對豬群進行免疫注射免疫預(yù)防的必須措施，同時有針對性的開展兩種毒株流行病學(xué)調(diào)查和疫苗免疫效果評價，尋找切合自身場戶的科學(xué)免疫程序及實施綜合防控措施才是預(yù)防和控制該病的重要手段?！酢?/p>

參考文獻：

[1] 韓慶彥，宋建國，周 峰，等. 甘肅省高致病性豬繁殖與呼吸綜合征分布調(diào)查[J].動物醫(yī)學(xué)進展，2012，11（6）：140-142.

[2] 陳弟詩，李金海，鄧永強，等.豬繁殖與呼吸綜合征免疫的重重疑云[J].豬業(yè)科學(xué)，2012（12）：92-94.