幼魚階段電刺激對(duì)稀有鯽性腺發(fā)育及繁殖的影響

陳冬明，劉小紅，黃自豪，王志堅(jiān)

(西南大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，淡水魚類資源與生殖發(fā)育教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，

水產(chǎn)科學(xué)重慶市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，重慶　400715)

?

陳冬明，劉小紅，黃自豪，王志堅(jiān)

(西南大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，淡水魚類資源與生殖發(fā)育教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，

水產(chǎn)科學(xué)重慶市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，重慶400715)

摘要：控制水域電壓為75 V，電流280 mA，持續(xù)電刺激5 500 ms左右，電刺激的作用強(qiáng)度是使魚既能達(dá)到休克昏迷狀態(tài)又能在幾分鐘內(nèi)蘇醒。通過對(duì)1月齡的稀有鯽(Gobiocypris rarus)進(jìn)行電刺激，觀察電刺激對(duì)其性腺發(fā)育及性成熟后繁殖的影響，以期為漁政部門評(píng)價(jià)電捕魚行為對(duì)魚類資源的影響提供參考。結(jié)果表明，電刺激1次組、電刺激3次組和電刺激5次組可以促進(jìn)雌雄魚的生長(zhǎng)和性腺發(fā)育，連續(xù)電刺激組對(duì)雄魚的生長(zhǎng)和性腺發(fā)育影響不大卻會(huì)抑制雌魚的生長(zhǎng)和性腺發(fā)育；電刺激1次組、電刺激3次組和電刺激5次組對(duì)性成熟后雌雄魚的繁殖沒有產(chǎn)生顯著差異，而連續(xù)電刺激組對(duì)性成熟后雄魚的繁殖沒有產(chǎn)生顯著差異，卻會(huì)造成雌魚不產(chǎn)卵、或產(chǎn)出的卵顏色泛白，且可產(chǎn)卵雌魚的產(chǎn)卵周期平均延長(zhǎng)4.5 d，產(chǎn)卵量平均減少36粒，受精率平均降低9.2%。組織切片觀察發(fā)現(xiàn)，電刺激1次組、電刺激3次組和電刺激5次組對(duì)性成熟后雌魚的卵巢沒有造成影響，而連續(xù)的周期性電刺激對(duì)性成熟后雌魚卵巢中大的卵細(xì)胞的細(xì)胞膜造成了損壞，細(xì)胞膜界限變得不清晰；電刺激對(duì)性成熟后雄魚精巢沒有造成影響。

關(guān)鍵詞：電刺激；性腺發(fā)育；生長(zhǎng)；繁殖；稀有鯽(Gobiocypris rarus)

魚類的生長(zhǎng)繁衍受各種環(huán)境因子的影響，包括溫度、光照、鹽度、溶氧和pH等，這些因子及相互作用決定魚類生長(zhǎng)繁衍的內(nèi)在潛力[1]。魚類在受到外界各類環(huán)境因子的刺激后會(huì)作出反應(yīng)，克服由環(huán)境變化而引起的傷害[2]。電刺激屬于一種物理性環(huán)境刺激因子，魚類在水中受到不同強(qiáng)度的電場(chǎng)刺激時(shí)，會(huì)產(chǎn)生各種異常反應(yīng)，當(dāng)電場(chǎng)電壓過高時(shí)則會(huì)引起魚的死亡[3]。電捕魚就是利用魚類在水中受到一定強(qiáng)度的電場(chǎng)刺激會(huì)被擊暈、休克、失去活動(dòng)性而進(jìn)行捕撈的一種方法。《中華人民共和國(guó)漁業(yè)法 》明確規(guī)定，禁止采取電魚等破壞漁業(yè)資源的方法進(jìn)行捕撈，但電捕魚行為屢禁不止。有關(guān)魚類在各種電場(chǎng)中行為反應(yīng)特征的研究已有大量報(bào)道[4-9]。有研究發(fā)現(xiàn)，電刺激對(duì)魚類會(huì)造成不利影響，如引起魚類死亡[10]、缺氧[11]以及行為形態(tài)異常[12]等；也有研究發(fā)現(xiàn)，電刺激對(duì)魚類會(huì)產(chǎn)生有利影響，如提高魚苗存活率[13]、誘導(dǎo)雄魚精液排放[14]、促進(jìn)河豚分泌毒素[15]以及提高雄魚精子壽命[16]等。有關(guān)電刺激對(duì)親魚繁殖的影響研究，僅Marriott[17]研究了電刺激對(duì)性成熟細(xì)磷大麻哈魚(pinksalmon)繁殖的影響以及孫照林[18]研究了電捕草魚(Ctenopharyngodonidellus)親魚的催產(chǎn)試驗(yàn)。而有關(guān)幼魚階段電刺激對(duì)其性腺發(fā)育及性成熟后繁殖的影響研究，目前未見報(bào)道。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1電刺激方法與試驗(yàn)分組

試驗(yàn)儀器為實(shí)驗(yàn)室自制的電刺激儀。電刺激時(shí)控制水域電壓75 V，電流280 mA，持續(xù)電刺激5 500 ms左右。該作用強(qiáng)度下，受試魚休克昏迷后能在幾分鐘內(nèi)蘇醒。本研究所使用的電刺激方法參照吳弈錦等[16]的實(shí)驗(yàn)方法。電刺激時(shí)間為晚上20∶00。試驗(yàn)設(shè)置1個(gè)對(duì)照組，4個(gè)處理組。對(duì)照組(A組)不進(jìn)行電刺激，處理組分別電刺激1次(B組)、電刺激3次(C組)、電刺激5次(D組)和連續(xù)電刺激(E組)。選取30日齡的幼魚425尾(電刺激實(shí)驗(yàn)后，375尾用于性腺發(fā)育觀察，50尾用于繁殖觀察)，平均每組85尾，并開始第一次電刺激，之后每隔5天電刺激1次，直至結(jié)束繁殖觀察實(shí)驗(yàn)。從60日齡開始取材，每組15尾，90日齡開始第二次取材，之后每隔15天取材一次，直至135日齡(基本達(dá)性成熟)共需取5次。每次取材用游標(biāo)卡尺測(cè)量體長(zhǎng)、千分之一天平測(cè)量體重，并取性腺通過組織切片觀察性腺發(fā)育情況。達(dá)性成熟后，每組分別選取雌雄魚各5尾作為親魚，用于繁殖觀察。

1.2.2性腺發(fā)育

性腺不易取出的(小于105日齡)，斷頭去尾后用Bouin′s液固定，經(jīng)脫水包埋、石蠟切片(厚度5 μm)、H.E染色后在顯微鏡(Nikon DXM1200)下拍照，觀察性腺的發(fā)育情況。可取出性腺的個(gè)體(大于105日齡)直接取出性腺后用于組織切片觀察(方法同上)，并稱量性腺重，去掉內(nèi)臟團(tuán)稱量空殼重，計(jì)算性腺成熟系數(shù)。公式：成熟系數(shù)(GSI)=性腺重/空殼重×100%。性腺發(fā)育分期參照代麗[19]和晏正碧[20]的方法。

1.2.3繁殖觀察

1.2.3.1雌魚

雌魚達(dá)性成熟后，每天晚上20∶00左右開始觀察雌魚的產(chǎn)卵情況，當(dāng)觀察到有雄魚開始持續(xù)追逐雌魚，并用頭部頂撞雌魚腹部等產(chǎn)卵跡象時(shí)，將雌魚撈出與對(duì)照組雄魚進(jìn)行交配，采用擠壓法進(jìn)行干法授精獲得受精卵。記錄產(chǎn)卵周期和產(chǎn)卵量。產(chǎn)卵周期為每次產(chǎn)卵和前一次產(chǎn)卵的時(shí)間間隔，共持續(xù)記錄1個(gè)月；產(chǎn)卵量為直接計(jì)數(shù)產(chǎn)出卵子的數(shù)量。隨機(jī)選取10粒受精卵在Nikon SMZ1000解剖鏡下觀察拍照，并用Image-Pro Plus 6.0圖像軟件測(cè)量卵徑。再隨機(jī)選取50粒受精卵置于直徑120 mm培養(yǎng)皿中，觀察胚胎發(fā)育和死亡情況，每隔8 h觀察1次，記錄胚胎死亡數(shù)和出膜數(shù)，并及時(shí)清除死亡個(gè)體，計(jì)算受精率、孵化率和出膜時(shí)間。全部出膜后統(tǒng)計(jì)初孵仔魚畸形數(shù)，計(jì)算初孵仔魚畸形率。受精后每24 h換1/3曝氣自來水。

1.2.3.2雄魚

雄魚達(dá)性成熟后，各組的雄魚與對(duì)照組雌魚進(jìn)行交配。隨機(jī)選取20粒胚胎置于培養(yǎng)皿中，觀察胚胎發(fā)育和死亡情況，每隔8 h觀察1次，記錄胚胎死亡數(shù)和出膜數(shù)，并及時(shí)清除死亡個(gè)體，計(jì)算受精率、孵化率和出膜時(shí)間。全部出膜后統(tǒng)計(jì)初孵仔魚畸形數(shù)，計(jì)算初孵仔魚畸形率。受精后每24 h換1/3曝氣自來水。

1.3數(shù)據(jù)分析

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用EXCEL(2003)進(jìn)行常規(guī)計(jì)算后，利用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行單因素方差分析(One-way ANOVA)。所有統(tǒng)計(jì)值均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤(mean±SE)表示，P<0.05(*)表示差異顯著，P<0.01(**)表示差異極顯著。

2結(jié)果與分析

2.1生長(zhǎng)

2.1.1雌魚

60日齡，電刺激組雌魚的體長(zhǎng)和體重與對(duì)照組無顯著差異；90日齡，電刺激1次組、電刺激3次組和電刺激5次組體長(zhǎng)和體重的值均大于對(duì)照組，但僅電刺激3次組與對(duì)照組產(chǎn)生顯著差異，連續(xù)電刺激組的值小于對(duì)照組，但無顯著差異；105日齡，電刺激1次組、電刺激3次組和電刺激5次組體長(zhǎng)和體重的值均大于對(duì)照組，且電刺激3次組與對(duì)照組產(chǎn)生極顯著差異，電刺激5次組與對(duì)照組產(chǎn)生顯著差異，而連續(xù)電刺激組的值小于對(duì)照組，但無顯著差異；120日齡，電刺激1次組、電刺激3次組和電刺激5次組體長(zhǎng)和體重的值均大于對(duì)照組，而連續(xù)電刺激組的值小于對(duì)照組，但均無顯著差異；135日齡，電刺激1次組和電刺激5次組體長(zhǎng)和體重的值大于對(duì)照組，電刺激3次組的值與對(duì)照組接近，但均無顯著差異。而連續(xù)電刺激組的值小于對(duì)照組，且產(chǎn)生顯著差異(圖1、2)。

圖1　幼魚階段電刺激對(duì)稀有　鯽雌魚體長(zhǎng)的影響

圖2　幼魚階段電刺激對(duì)稀有　鯽雌魚體重的影響

2.1.2雄魚

60日齡，電刺激組雄魚體長(zhǎng)和體重的值均大于對(duì)照組，且電刺激1次組雄魚的體重與對(duì)照組產(chǎn)生顯著差異，電刺激3次組雄魚的體長(zhǎng)和體重與對(duì)照組產(chǎn)生顯著差異，電刺激5次組和連續(xù)電刺激組雄魚的體長(zhǎng)和體重與對(duì)照組產(chǎn)生極顯著差異；90日齡，電刺激1次組、電刺激3次組和電刺激5次組體長(zhǎng)和體重的值均大于對(duì)照組，且電刺激1次組與對(duì)照組產(chǎn)生顯著差異，而連續(xù)電刺激組的值與對(duì)照組接近；105日齡，電刺激1次組、電刺激3次組和電刺激5次組體長(zhǎng)和體重的值均大于對(duì)照組，而連續(xù)電刺激組的值與對(duì)照組接近(圖3、4)。

圖3　幼魚階段電刺激對(duì)稀有　鯽雄魚體長(zhǎng)的影響

圖4　幼魚階段電刺激對(duì)稀有　鯽雄魚體重的影響

2.2性腺發(fā)育

2.2.1卵巢發(fā)育

60日齡和90日齡，各組雌魚卵巢均處于Ⅱ期。

105日齡，對(duì)照組卵巢多數(shù)處于Ⅱ期，少量處于Ⅲ期。而電刺激1次組出現(xiàn)Ⅳ期卵巢，并且開始出現(xiàn)Ⅳ期晚期卵巢，Ⅳ時(shí)相末卵母細(xì)胞所占面積為10.4%。電刺激3次組和電刺激5次組也有Ⅳ期卵巢，但沒有出現(xiàn)Ⅳ期晚期卵巢。連續(xù)電刺激組卵巢多數(shù)處于Ⅱ期，少量處于Ⅲ期。

120日齡，對(duì)照組開始出現(xiàn)Ⅳ期晚期卵巢，Ⅳ時(shí)相末卵母細(xì)胞所占面積為13.1%，另外還有處于Ⅱ期和Ⅲ期卵巢。電刺激1次組、電刺激3次組和電刺激5次組卵巢多數(shù)處于Ⅳ期晚期，Ⅳ時(shí)相末卵母細(xì)胞所占面積分別為46.9%、40.3%和21.8%，只有少量處于Ⅱ期或Ⅲ期。而連續(xù)電刺激組仍未出現(xiàn)Ⅳ期晚期卵巢，只有少量處于Ⅲ期，多數(shù)處于Ⅱ期。

135日齡，對(duì)照組卵巢只有少數(shù)處于Ⅳ期晚期，Ⅳ時(shí)相末卵母細(xì)胞所占面積為13.9%，多數(shù)處于Ⅲ期。電刺激1次組卵巢多數(shù)處于Ⅳ期晚期，Ⅳ時(shí)相末卵母細(xì)胞所占面積為51.5%，只有少量處于Ⅲ期。電刺激3次組卵巢全部處于Ⅳ期晚期，Ⅳ時(shí)相末卵母細(xì)胞所占面積為61.8%。電刺激5次組卵巢少量處于Ⅳ期晚期，Ⅳ時(shí)相末卵母細(xì)胞所占面積為34.4%，其余處于Ⅲ期和Ⅳ期。連續(xù)電刺激組仍未出現(xiàn)處于Ⅳ期晚期卵巢，只有少量處于Ⅳ期，多數(shù)處于Ⅱ期(表1)。

表1　幼魚階段電刺激對(duì)稀有　鯽雌魚卵巢發(fā)育的影響

120日齡和135日齡，計(jì)算各組的成熟系數(shù)(GSI)發(fā)現(xiàn)，電刺激1次組、電刺激3次組和電刺激5次組的值均高于對(duì)照組，而連續(xù)電刺激組的值均低于對(duì)照組。且在120日齡，電刺激1次組和電刺激3次組與對(duì)照組產(chǎn)生顯著差異，在135日齡，電刺激3次組與對(duì)照組產(chǎn)生顯著差異。這與組織切片觀察的結(jié)果相一致(圖5)。

圖5　幼魚階段電刺激對(duì)稀有　鯽雌魚成熟系數(shù)的影響

2.2.2精巢發(fā)育

60日齡，各組精巢多數(shù)處于Ⅰ期，未見有Ⅴ期精巢出現(xiàn)。此時(shí)，電刺激5次組和連續(xù)電刺激組的電刺激次數(shù)相同，兩者均開始出現(xiàn)Ⅳ期精巢，而其余各組精巢僅發(fā)育到Ⅱ期或Ⅲ期。

90日齡，對(duì)照組開始出現(xiàn)少量Ⅴ期精巢，成熟小葉腔所占面積為1.3%，一半處于Ⅰ期。電刺激1次組精巢一半處于Ⅴ期，成熟小葉腔所占面積為7.8%。電刺激3次組精巢少數(shù)處于Ⅴ期，成熟小葉腔所占面積為6.4%。電刺激5次組開始出現(xiàn)少量Ⅴ期精巢，成熟小葉腔所占面積為2.0%。連續(xù)電刺激組還未出現(xiàn)Ⅴ期精巢，僅發(fā)育到Ⅳ期。

105日齡，對(duì)照組精巢少數(shù)處于Ⅴ期，成熟小葉腔所占面積為10.9%，另外還有少數(shù)處于Ⅱ期和Ⅲ期。電刺激1次組、電刺激3次組和電刺激5次組精巢均多數(shù)處于Ⅴ期，成熟小葉腔所占面積分別為13.6%、27.5%和16.9%，少量處于Ⅳ期。連續(xù)電刺激組精巢少量處于Ⅴ期，成熟小葉腔所占面積為10.7%，多數(shù)處于Ⅳ期，少量處于Ⅲ期(表2)。

表2　幼魚階段電刺激對(duì)稀有　鯽雄魚精巢發(fā)育的影響

2.3繁殖觀察

2.3.1雌魚

圖6　電刺激對(duì)稀有　鯽卵巢的影響

(A：電刺激1次、3次和5次組雌魚卵巢，箭頭1示正常Ⅳ時(shí)相末卵母細(xì)胞；B：連續(xù)電刺激組不產(chǎn)卵雌魚卵巢，箭頭2示退化Ⅲ時(shí)相卵細(xì)胞；C：連續(xù)電刺激組雌魚產(chǎn)出的卵異常；D：連續(xù)電刺激組雌魚卵巢異常，箭頭3示退化Ⅳ時(shí)相末卵母細(xì)胞)

2.3.2雄魚

表3　幼魚階段電刺激對(duì)稀有　鯽雌魚性成熟后繁殖的影響

表4　幼魚階段電刺激對(duì)稀有　鯽雄魚性成熟后繁殖的影響

3討論

3.1環(huán)境因子對(duì)魚類生長(zhǎng)的影響

3.2電刺激對(duì)魚類性腺發(fā)育的影響

3.3電刺激對(duì)魚類繁殖的影響

參考文獻(xiàn)：

[1]許國(guó)晶,段登選,張金路,等.幾個(gè)環(huán)境因子對(duì)魚類生長(zhǎng)發(fā)育影響的研究進(jìn)展[J].山東師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2014,29(1):147-150.

[2]胡應(yīng)高.魚類的應(yīng)激反應(yīng)[J].淡水漁業(yè),2004,34(4):61-63.

[3]普羅塔索夫著.何大仁,俞文釗譯.魚類的行為[M].北京:科學(xué)出版社,1984:245.

[4]蔡厚才,池弘福,陳志遠(yuǎn),等.鯉、鯽魚對(duì)交流電刺激的反應(yīng)特性[J].浙江水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報(bào),1993,12(4):271-277.

[5]平慧敏,吳永漢,劉瓊.魚在脈沖電刺激后產(chǎn)生昏迷反應(yīng)試驗(yàn)的觀察和分析[J].云南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),1998,20(S1):27-28.

[6]柯福恩,曹正光,張啟倫,等.幾種淡水魚類對(duì)水中交流電場(chǎng)強(qiáng)度反應(yīng)的試驗(yàn)[J].淡水漁業(yè),1982,12(5):25-28.

[7]Demski L S.Eye movements evoked by electrical stimulation of the brain in anesthetized fishes[J].Brain Behav Evolut,1975,11(2):109-129.

[8]Roques J A C,Abbink W,Chereau G,et al.Physiological and behavioral responses to an electrical stimulus in Mozambique tilapia (Oreochromismossambicus)[J].Fish Physiol Biochem,2012,38(6):1855.

[9]Stewart P A M.A study of the response of flatfish (Pleuronectidae) to electrical stimulation[J].J Conseil,1977,37(2):123-129.

[10]許傳才,姜昭陽,陳勇.直流電場(chǎng)中鯉的行為特性及體長(zhǎng)與電刺激閾值的關(guān)系[J].大連水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報(bào),2006,21(3):264-267.

[11]蔡厚才,呂煒泓,錢小榮,等.鯽魚在強(qiáng)直流電場(chǎng)中的行為初探[J].浙江水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報(bào),1994,13(4):282-287.

[12]馬師薈.電擊對(duì)黃顙魚機(jī)體影響的研究[J].河北漁業(yè),2010,34(10):14-17.

[13]凌長(zhǎng)明,植仲培,劉斌,等.周期性電擊對(duì)羅非魚魚苗存活率的影響[J].湛江海洋大學(xué)學(xué)報(bào),2004,24(4):67-68.

[14]Demski L S,Bauer D H,Gerald J W.Sperm release evoked by electrical stimulation of the fish brain:A functional-anatomical study[J].J Exp Zool,1975,191(2):215-231.

[15]Kodama M,Ogata T,Sato S.External secretion of tetrodotoxin from puffer fishes stimulated by electric shock[J].Mar Biol,1985,87(2):199-202.

[17]Marriott R A.Effects of electric shocking on fertility of mature pink salmon[J].Prog fish Cult,1973,35(4):191-194.

[18]孫照林.電捕草魚親魚的催產(chǎn)試驗(yàn)[J].淡水漁業(yè),1979,9(6):35.

[21]殷名稱.魚類生態(tài)學(xué)[M].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,1995:38.

[22]王川,金麗,劉曉蕾,等.延遲首次投喂對(duì)胭脂魚仔魚生長(zhǎng)、攝食及消化酶活性的影響[J].水產(chǎn)學(xué)報(bào),2013,37(11):1706-1715.

[23]孫麗慧,王際英,丁立云,等.投喂頻率對(duì)星斑川鰈幼魚生長(zhǎng)和體組成影響的初步研究[J].上海海洋大學(xué)學(xué)報(bào),2010,19(2):190-195.

[24]季延濱,程民杰,孫學(xué)亮,等.不同投喂方式對(duì)革胡子鯰生長(zhǎng)性能的影響[J].湖南農(nóng)業(yè)科學(xué),2014,53(2):385-388.

[25]李孝珠,常艷利,康清娟,等.溫度對(duì)池沼公魚仔魚生長(zhǎng)發(fā)育的影響[J].水生態(tài)學(xué)雜志,2011,32(2):96-99.

[26]胡發(fā)文,潘雷,高鳳祥,等.溫度和鹽度變化對(duì)大瀧六線魚幼魚存活與生長(zhǎng)的影響[J].海洋科學(xué),2012,36(7):44-48.

[27]黃寧宇,程起群,高露嬌,等.流速、溫度對(duì)西伯利亞鱘幼魚生長(zhǎng)的影響[J].水產(chǎn)學(xué)報(bào),2007,31(1):31-37.

[28]郭文學(xué),尹家勝,佟廣香,等.養(yǎng)殖方式、光照強(qiáng)度對(duì)哲羅魚稚魚生長(zhǎng)與存活的影響[J].海洋與湖沼,2014,46(2):265-273.

[29]李大鵬,莊平,嚴(yán)安生,等.光照、水流和養(yǎng)殖密度對(duì)史氏鱘稚魚攝食、行為和生長(zhǎng)的影響[J].水產(chǎn)學(xué)報(bào),2004,28(1):54-61.

[30]李大鵬,莊平,王明學(xué),等.史氏鱘稚魚的趨光性及不同光照周期對(duì)其生長(zhǎng)的影響[J].華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2001,20(6):564-567.

[31]高露姣,陳立僑,宋兵.饑餓和補(bǔ)償生長(zhǎng)對(duì)史氏鱘幼魚攝食、生長(zhǎng)和體成分的影響[J].水產(chǎn)學(xué)報(bào),2004,28(3):279-284.

[32]李秀明.運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練對(duì)中華倒刺鰓幼魚生長(zhǎng)的影響[D].重慶:西南大學(xué),2013.

[33]Pitt T K.Changes in abundance and certain biological characters of Grand Bank American plaice,Hippoglossoides plaslessoides[J].J fish res board Can,1975,32 (8):1383-1398.

[34]溫海深,林浩然.環(huán)境因子對(duì)硬骨魚類性腺發(fā)育成熟及其排卵和產(chǎn)卵的調(diào)控[J].應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào),2001,12(1):151-155.

[35]林浩然.魚類生理學(xué)[M].廣州:中山大學(xué)出版社,2011:148.

[36]王吉橋.應(yīng)激刺激對(duì)養(yǎng)殖魚類繁殖的影響[J].北京水產(chǎn),2002,19(2):12-14.

[37]翟中和,王喜忠,丁明孝.細(xì)胞生物學(xué)[M].北京:高等教育出版社,2007:455.

[38]劉義保,陳樹德,陳家森.電磁場(chǎng)對(duì)細(xì)胞的作用[J].自然雜志,1999,21(2):88-91.

[39]Kazuo S,Yuzo K,Masahiko H.Direct and indirect effects of electrical stimulation on the motility of human sperm[J].Int J Urol,1999,6(4):196-199.

[40]Gaylor D C,Prakah-Asantea K,Leea R C.Significance of cell size and tissue structure in electrical trauma[J].J Theoret Biol,1988,133(2):223-237.

(責(zé)任編輯：張紅林)

Effects of larval electrical stimulation on the gonadal development and reproduction of Gobiocypris rarus

CHEN Dong-ming,LIU Xiao-hong,HUANG Zi-hao,WANG Zhi-jian

(KeyLaboratoryofFreshwaterFishReproductionandDevelopment,MinistryofEducation/ChongqingKeyLaboratoryofAquaticScience/SchoolofLifeScience,SouthwestUniversity,Chongqing400715,China)

Abstract：After the artificial control of waterborne electrical stimulation (75v,280mA,5500ms) performed to one month old larvae,which made the fish to be shock or coma,and can be revived in a few minutes,we detected the later effects of electrical stimulation on the gonadal development and reproduction of Gobiocypris rarus,in order to provide basic data for the fishery department to evaluate the behavior of electric fishing.The results showed that electrical stimulation of once and electrical stimulation of three times and electrical stimulation of five times could promote the growth and gonadal development of larvae.The continuous electrical stimulation had no effect on male fish,but restrained the growth and gonadal development of female.Electrical stimulation of once and electrical stimulation of three times and electrical stimulation of five times performed to larvae had no effect on the reproduction of both male and female fish.The continuous electrical stimulation had no effect on the reproduction of male fish, but caused female un-spawned or laying of unfertilizable white eggs.The spawning period of spawnable femalefish was equally prolonged to 4.5 days,and the egg amount was equally decreased to 36,and the fertilization rate was equally reduced by 9.2%.After electrical stimulation of once and electrical stimulation of three times and electrical stimulation of five times to larvae,no effect was observed on the female ovary by histological method,while the continuous cyclical electrical stimulation injured the large egg cells of female ovary.No effect of larval stimulation on the structure of testis was observed.

Key words：electrical stimulation;gonadal development;growth;reproduction;Gobiocypris rarus

中圖分類號(hào)：S917.45

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1000-6907-(2016)02-0020-09

作者簡(jiǎn)介：第一陳冬明(1989-)，男，碩士研究生，專業(yè)方向?yàn)橘Y源動(dòng)物學(xué)。E-mail：18883251881@163.com通訊作者：王志堅(jiān)。E-mail：wangzj1969@126.com

收稿日期：2015-04-14；

修訂日期：2015-07-20

資助項(xiàng)目：公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)(201203086)，重慶市科委重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室專項(xiàng)經(jīng)費(fèi)