干化學(xué)法與智能顯微鏡檢聯(lián)合檢測尿液紅細(xì)胞和白細(xì)胞的應(yīng)用價(jià)值*

粟理禮

(廣西壯族自治區(qū)南溪山醫(yī)院，廣西 桂林　541002)

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干化學(xué)法與智能顯微鏡檢聯(lián)合檢測尿液紅細(xì)胞和白細(xì)胞的應(yīng)用價(jià)值*

粟理禮

(廣西壯族自治區(qū)南溪山醫(yī)院，廣西 桂林541002)

摘要：目的探討干化學(xué)法與智能顯微鏡檢法聯(lián)合檢測尿液紅細(xì)胞(RBC)和白細(xì)胞(WBC)的臨床應(yīng)用價(jià)值。方法通過2種方法檢測住院患者22842例中段尿液，對尿液RBC和WBC的檢測結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果尿液干化學(xué)法與智能顯微鏡檢RBC和WBC的結(jié)果P均<0.01，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2種方法檢測RBC(3+)符合率為95.1%，(2+)符合率為82.2%，(1+)符合率為49.0% ，(-)符合率為95.1%；WBC(3+)符合率為97.9%，(2+)符合率為90.2%，(1+)符合率為64.2%，(-)符合率為89.4%。尿液干化學(xué)法RBC陽性率為19.4%，WBC陽性率為16.0%，智能顯微鏡檢RBC陽性率為16.8%，WBC陽性率為21.5%。結(jié)論2種方法聯(lián)合檢測尿液RBC和WBC具有快速、簡便、易于規(guī)范化和標(biāo)準(zhǔn)化的優(yōu)點(diǎn)，提高了工作效率及尿液檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

關(guān)鍵詞：尿液干化學(xué)法；智能顯微鏡檢；紅細(xì)胞；白細(xì)胞

臨床中采用尿液自動(dòng)化分析儀進(jìn)行檢測已得到廣泛的認(rèn)可，該方法具有標(biāo)本用量少、速度快、項(xiàng)目多、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)。而傳統(tǒng)人工顯微鏡檢由于存在一定的局限性，已經(jīng)不能滿足當(dāng)前需要[1]，近年來隨著科技的進(jìn)步，檢驗(yàn)儀器得以迅速發(fā)展，尿常規(guī)的檢測已經(jīng)進(jìn)入了自動(dòng)化的時(shí)代，顯微鏡形態(tài)學(xué)鏡檢自動(dòng)化劃時(shí)代的突破，機(jī)器視覺做鏡檢(智能顯微鏡檢)，可以在一定程度上代替人工顯微鏡檢，從而提高工作效率和檢出率。而單純應(yīng)用干化學(xué)法對尿常規(guī)進(jìn)行檢測，因方法學(xué)影響因素干擾而具有較多假陰性和假陽性，傳統(tǒng)人工顯微鏡檢速度慢、重復(fù)性差。本研究用AVE-752全自動(dòng)尿液干化學(xué)分析儀與AVE-764B全自動(dòng)尿液有形成分分析儀測定尿常規(guī)，分析尿液干化學(xué)法與智能顯微鏡檢檢測尿液RBC和WBC兩種方法統(tǒng)計(jì)學(xué)差異結(jié)果符合率?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1材料與方法

1.1材料搜集本院2014年6月至2015年5月住院患者22842例，男12201例，女10641例，年齡1月至103歲?；颊哂靡淮涡詽崈舾稍锏乃芰夏虮羧≈卸文蛞杭s50 ml，取10 ml置于有蓋一次性塑料尿管中并盡快送檢，2h內(nèi)完成檢測。

1.2儀器和試劑AVE-752全自動(dòng)尿液干化學(xué)分析儀，AVE-764B全自動(dòng)尿液有形成分分析儀。兩個(gè)檢測系統(tǒng)均使用原裝配套試劑。

1.3檢測方法

1.3.1干化學(xué)分析法嚴(yán)格遵守儀器操作規(guī)范流程進(jìn)行，用高、低值兩種質(zhì)控品進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)量控制，若在控，尿液標(biāo)本去蓋，放入自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)行檢測。

1.3.2智能顯微鏡檢法嚴(yán)格遵守儀器操作規(guī)范流程進(jìn)行，樣本進(jìn)行檢測前將儀器焦距校準(zhǔn)，采用配套質(zhì)控品對室內(nèi)質(zhì)量進(jìn)行控制，確保儀器正常運(yùn)行。由干化學(xué)法檢測過的尿液經(jīng)儀器自動(dòng)傳輸至樣裝置，轉(zhuǎn)移到AVE-764B尿液有形成分分析儀，儀器自動(dòng)混勻后進(jìn)行自動(dòng)顯微鏡檢，通過全自動(dòng)顯微鏡和數(shù)碼圖像采集單元的配合，采用計(jì)算機(jī)圖像處理與識別軟件，自動(dòng)跟蹤、識別和分類計(jì)數(shù)尿液有形成分，再通過檢驗(yàn)人員進(jìn)行輔助判別及確認(rèn)后得出最終檢測結(jié)果。

1.4判斷標(biāo)準(zhǔn)

1.4.1AVE-752全自動(dòng)尿液干化學(xué)分析儀法檢測結(jié)果所對應(yīng)的RBC數(shù)分別為：(-)為<5 cell /μl、(1+)約5~10 cell /μl、(2+)約50 cell /μl、(3+)約300 cell /μl；WBC數(shù)分別為：(-)為<10 cell /μl、(1+)約25 cell /μl、(2+)約75 cell/μl、(3+)約500 cell/μl。

1.4.2AVE-764B全自動(dòng)尿液有形成分分析儀法RBC：男性0~4.5 cell /μl，女性0~7.5 cell /μl；WBC：男性0~5.75 cell/μ l，女性0~13.5 cell /μl；超出此范圍為陽性[2]。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS17.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，構(gòu)成比的比較采用χ2檢驗(yàn)，以P≤0.05為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

22842例住院患者尿液標(biāo)本RBC和WBC尿液干化學(xué)法與智能顯微鏡檢法檢測結(jié)果見表1，2。

表1　尿液干化學(xué)法與智能顯微鏡檢RBC的結(jié)果比較(n)

注：χ2=318.6，P<0.01。

表2　尿液干化學(xué)法與智能顯微鏡檢WBC的結(jié)果比較(n)

注：χ2=79.6，P<0.01。

尿液干化學(xué)法與智能顯微鏡檢RBC、WBC的結(jié)果P均<0.01，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2種方法檢測RBC(3+)符合率為95.1%，(2+)符合率為82.2%，(1+)符合率為49.0% ，(-)符合率為95.1%；WBC(3+)符合率為97.9%，(2+)符合率為90.2%，(1+)符合率為64.2%，(-)符合率為89.4%。尿液干化學(xué)法RBC陽性率為19.4%，WBC陽性率為16.0%，智能顯微鏡檢RBC陽性率為16.8%，WBC陽性率為21.5%。

3討論

造成尿液干化學(xué)法與智能顯微鏡檢RBC、WBC的結(jié)果差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的主要原因是干化學(xué)法對RBC和WBC等屬于間接檢測，對RBC及WBC形態(tài)特征和血尿來源無法進(jìn)行判斷，另外由于儀器和試劑的質(zhì)量問題以及受到其他干擾因素的影響，出現(xiàn)假陽性和假陰性所致。智能顯微鏡檢誤認(rèn)的主要原因是圓形草酸鈣、真菌孢子在形態(tài)上與RBC相似；小圓上皮細(xì)胞、鱗狀上皮細(xì)胞脫核，滴蟲等成分與WBC相似，出現(xiàn)假陽性。對這些雜質(zhì)較多的樣本，檢驗(yàn)人員要認(rèn)真閱圖，加以甄別、判定以改正。有時(shí)受尿的滲透壓、pH、尿液在膀胱中儲(chǔ)存過久以及病理情況的影響而尿中RBC、WBC破壞，出現(xiàn)假陰性。因此，當(dāng)出現(xiàn)兩種方法進(jìn)行測定的結(jié)果不相符合的同時(shí)，應(yīng)由臨床醫(yī)師視病情情況進(jìn)行綜合判斷，避免出現(xiàn)誤診和漏診。

本研究結(jié)果顯示，尿液干化學(xué)法檢測RBC的陽性率較智能顯微鏡檢法高(干化學(xué)法為19.4%，智能顯微鏡檢法為16.8%)，WBC的陽性率低(干化學(xué)法為16.0%，智能顯微鏡檢法為21.5%)，與柯慶喜等[3]報(bào)道一致。干化學(xué)法檢查尿RBC主要是通過尿試紙帶里面的四甲基聯(lián)苯胺，與尿液里面具有氧化酶樣的活性物質(zhì)(血紅蛋白及肌紅蛋白等)發(fā)生作用，使得四甲基聯(lián)苯胺脫氫由無色變?yōu)樗{(lán)色，其能夠?qū)ν暾幕蛘咂茐牡腞BC均有反應(yīng)，也能夠?qū)τ坞x的血紅蛋白發(fā)生反應(yīng)[4]。部分腎病患者尿液中含有對熱不穩(wěn)定酶、肌紅蛋白、菌尿等，造成了干化學(xué)法檢測顯示假陽性[5]；次氯酸鹽、甲醛或含有過氧化物的清潔劑也可引起假陽性。若尿液標(biāo)本中含有大量維生素C，pH值<5，高比重尿、高蛋白等，也可以造成假陰性的出現(xiàn)。另外當(dāng)RBC膜的脆性增大時(shí)，容易出現(xiàn)假陰性，通過智能顯微鏡觀察可發(fā)現(xiàn)完整的RBC。腎病患者RBC在腎臟或泌尿道被破壞，或者尿pH值偏高以及尿滲透壓過低等，也可導(dǎo)致假陽性。干化學(xué)法對WBC進(jìn)行檢測主要是通過中性粒細(xì)胞胞質(zhì)中的脂酶對試劑條帶模塊內(nèi)的吲哚酚酯起到作用，使得吲哚酚酯釋放出吲哚酚，吲哚酚與重氮鹽發(fā)生反應(yīng)出現(xiàn)紫色，利用其顯色深淺轉(zhuǎn)換為WBC個(gè)數(shù)。不過該方法僅可以對胞質(zhì)中脂酶的粒細(xì)胞進(jìn)行檢測，無法判斷缺乏脂酶的WBC。因此，在尿液中出現(xiàn)單核細(xì)胞或淋巴細(xì)胞時(shí)，就可導(dǎo)致假陰性。另外當(dāng)尿蛋白>5 g/L或者是尿液中含有大劑量先鋒藥物Ⅳ或慶大霉素等藥物時(shí)，也可導(dǎo)致結(jié)果偏低或假陰性出現(xiàn)。尿液被尿素、甲醛、陰道分泌物以及高濃度膽紅素等污染時(shí)，則會(huì)出現(xiàn)假陽性。AVE-764B尿液有形成分分析儀主要是采用“機(jī)器視覺”技術(shù)，通過CCD對流動(dòng)計(jì)數(shù)池內(nèi)尿液有形成分的圖像進(jìn)行攝取，并傳輸至計(jì)算機(jī)圖像采集卡對圖像進(jìn)行采集，由計(jì)算機(jī)自動(dòng)識別，對可疑的細(xì)胞進(jìn)行人工判讀審核，人機(jī)結(jié)合對尿液內(nèi)有形成分的形態(tài)做出識別再分類計(jì)數(shù)，最終得出單位體積內(nèi)尿液中有形成分的數(shù)量[6]。RBC和WBC相似的部分尿液有形成分是導(dǎo)致RBC及WBC檢測假陽性的主要干擾因素。因此，當(dāng)存在相似的干擾因素時(shí)，應(yīng)當(dāng)仔細(xì)閱圖，認(rèn)真進(jìn)行甄別和判定，確保結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

綜上所述，尿液干化學(xué)法可以對RBC破壞后的血紅蛋白進(jìn)行檢測，有利于腎病和溶血性疾病的診斷，當(dāng)智能顯微鏡檢無法判斷破壞的尿液RBC形態(tài)時(shí)，高靈敏度的干化學(xué)法能夠提供一定的參考價(jià)值，對智能顯微鏡檢的不足起到了彌補(bǔ)作用。但是，單純依賴干化學(xué)法可能會(huì)導(dǎo)致誤診和漏診的發(fā)生，本研究顯示RBC(2+)符合率為82.2%、(1+)符合率為49.0%，WBC(1+)符合率為64.2%、(-)符合率為89.4%，正好說明誤診和漏診的存在。而智能顯微鏡檢能檢測尿中淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞及其他細(xì)胞成分，又彌補(bǔ)了干化學(xué)法的不足。所以將干化學(xué)法與智能顯微鏡檢法有機(jī)地結(jié)合起來，不僅實(shí)現(xiàn)了檢測全自動(dòng)化，簡化分析過程，縮短檢測時(shí)間，提高工作效率；同時(shí)降低假陽性及假陰性，有效地保證尿液紅細(xì)胞白細(xì)胞檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。為臨床診斷、治療提供可靠的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，大大提高其臨床應(yīng)用價(jià)值。

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Investigation in the clinical significance of combining dry chemical andintelligent microscope methods to detect the RBC and WBC in urine

SULi-li

(Nanxishan Hospital of Guangxi Zhuang Autonomous Region, Guilin 541002, China)

Abstract:Objective：To investigate the clinical significance of combining dry chemical and intelligent microscope methods to detect the RBC and WBC in urine. Methods：These two ways were used to detect the WBC and RBC of midstream urine from 22842 samples in hospital, and the results were compared with each other.Results：The P values of WBC and RBC obtained by the two methods were <0.01, which was considered to be significant. The accordance rate of RBC(3+),(2+),(1+),(-)was 95.1%, 82.2%，49.0%，95.1%, and WBC(3+), (2+),(1+),(-)was 97.9%, 90.2%, 64.2%, 89.4%. The positive rates of RBC and WBC detected by dry chemical method were 19.4% and 16.0%, and the positive rates of RBC and WBC acquired by intelligent microscope were 16.8% and 21.5%.Conclusion： Using the two methods to detect WBC and RBC in urine can improve working efficiency and veracity, because of the advantages of rapidness, simpleness and standardization of these two methods.

Key words:urine dry chemical method; intelligent microscope; white blood cell; red blood cell

(收稿日期2015-11-18)

doi:10.3969/j.issn.1004-7115.2016.03.013

中圖分類號：R446

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1004-7115(2016)03-0279-03

*作者簡介：粟理禮(1966-)，男，湖南邵陽人，本科，主管技師，主要從事臨床檢驗(yàn)工作。