紫金化毒栓的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

夏澆 　張麗艷 　李艷英 ??　劉軍 　馬曉晴

【摘 要】 目的：建立紫金化毒栓的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法：采用薄層色譜法（TLC）對(duì)栓劑中金銀花、連翹、關(guān)黃柏、五倍子進(jìn)行定性鑒別[1]；采用高效液相色譜法（HPLC）對(duì)制劑中綠原酸和連翹苷進(jìn)行定量測(cè)定。結(jié)果：薄層鑒別專屬性強(qiáng)、斑點(diǎn)清晰、分離度好；綠原酸和連翹苷進(jìn)樣量分別在0.07976～1.994 μg（r=0.9998）、0.1202～3.005 μg（r=0.9999）范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，平均加樣回收率（n=6）分別為98.11%、99.17%，RSD分別為0.92%、0.85%。結(jié)論：所建立的定性、定量分析方法簡(jiǎn)便快速、重復(fù)性好、準(zhǔn)確度高，能夠有效控制紫金化毒栓的質(zhì)量。

【關(guān)鍵詞】 紫金化毒栓；HPLC；TLC

【中圖分類號(hào)】R286 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A 【文章編號(hào)】1007-8517（2016）06-0030-04

紫金化毒栓是名老中醫(yī)臨床經(jīng)驗(yàn)方，根據(jù)中醫(yī)辨證施治理論將金銀花、連翹、黃柏等中藥合理配伍，并按一定比例配方制成的栓劑[2]，具有清熱解毒、活血燥濕、消腫生肌的功效。主要用于濕熱瘀阻所致的帶下病，癥見(jiàn)帶下量多、色黃或異味、或陰部瘙癢以及宮頸炎高危型人乳頭瘤病毒感染（HPV）見(jiàn)上述證候者。為了保證臨床用藥的安全性、有效性，建立紫金化毒栓中有效成分的定性定量控制方法有至關(guān)重要的意義。本實(shí)驗(yàn)采用TLC法對(duì)處方中的金銀花、連翹、關(guān)黃柏、五倍子進(jìn)行定性鑒別，采用HPLC法測(cè)定栓劑中的金銀花中綠原酸的含量和連翹中連翹苷的含量，為紫金化毒栓臨床用藥的安全有效性提供了保障，也為紫金化毒栓的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)建立奠定基礎(chǔ)。

1 儀器與材料

1.1 儀器 LC-2010 AHT高效液相色譜儀（日本島津）；色譜柱 Dikma Diamonsil C18（250mm×4.6mm，5μm），色譜柱Platisil ODS C18（250mm×4.6mm，5 μm）；電子分析天平；UV-2450紫外分光光度計(jì)（島津）；KQ-250DB型數(shù)控超聲波清洗器；高速冷凍離心機(jī)；紫外分析儀。

1.2 材料 綠原酸對(duì)照品（批號(hào)：110753-200413，純度：96.2%）、連翹苷對(duì)照品（批號(hào)：110821-201112，純度：96.8%）、沒(méi)食子酸對(duì)照品（批號(hào)：11083-200803，純度：90.1%）、鹽酸小檗堿（批號(hào)：110713-201212，純度：86.7%）、金銀花對(duì)照藥材（批號(hào)：121060-200805）、關(guān)黃柏對(duì)照藥材（批號(hào)：120937-200506）、五倍子對(duì)照藥材（批號(hào)：121078--200402）、紫草對(duì)照藥材（新疆紫草）（批號(hào)：121430-201103）、連翹對(duì)照藥材（批號(hào)：120908-201218）均購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院；紫金化毒栓（批號(hào)：20130401，20130402，20130403，自制）；甲醇、乙腈為色譜純（迪馬公司），水為娃哈哈純凈水，其他試劑均為分析純；硅膠G板、硅膠H板、硅膠GF254板均為青島海洋化工廠產(chǎn)品。

2 方法與結(jié)果

2.1 薄層鑒別

2.1.1 金銀花的薄層鑒別 取本品1粒，置于100ml具塞錐形瓶中，加水30ml，水浴加熱使其完全溶散，超聲處理30min（40℃），冷凍30min（-20～-10℃），離心，過(guò)濾，濾液加入稀鹽酸1ml，搖勻，取30ml乙酸乙酯振搖提取，取乙酸乙酯液水浴蒸干，殘?jiān)尤爰状?ml使其溶解，作為供試品溶液。另取金銀花對(duì)照藥材0.5g，加甲醇30ml，超聲30min，過(guò)濾，濾液濃縮至約2ml，作為對(duì)照藥材溶液。吸取上述兩種溶液各3μl，分別點(diǎn)于同一高效硅膠G薄層板上，以乙酸丁酯-甲酸-水（7∶2.5∶2.5）的上層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干。置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性樣品無(wú)干擾，見(jiàn)圖1。

2.1.2 連翹的薄層鑒別[3]取本品2粒，置于100ml具塞錐形瓶中，加水40ml，水浴加熱使其完全溶散，超聲處理30min（40℃），冷凍30min（-20～-10℃），離心，過(guò)濾，濾液用乙酸乙酯振搖提取3次，每次30ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，殘?jiān)?0%甲醇5ml使溶解，加于中性氧化鋁柱（100～200目，2g，內(nèi)徑1cm，干法裝柱），用70%甲醇30ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)眉状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取連翹苷對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.25mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。再取連翹對(duì)照藥材1g，加石油醚（30～60℃）20ml，超聲處理15min，濾過(guò)，棄去石油醚液，殘?jiān)鼡]干，加甲醇20ml，超聲處理20min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。吸取上述三種溶液各5 μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇（20∶3）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干。噴以5%香草醛硫酸溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品和對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性樣品無(wú)干擾。見(jiàn)圖2。

2.1.3 關(guān)黃柏的薄層鑒別[4]取本品適量，切碎，取約1g，置于100ml具塞錐形瓶中，加50%乙醇25ml，水浴使溶散均勻，40℃超聲處理30min，冷凍（-20～-10℃）30min，離心，上清液用少量棉花濾過(guò)，濾液蒸干，加甲醇2ml使溶解，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液。另取鹽酸小檗堿對(duì)照品適量，加甲醇制成0.2mg·ml-1的對(duì)照品溶液。再取關(guān)黃柏對(duì)照藥材0.2g，加甲醇5ml，超聲處理30min，濾過(guò)，濾液作為對(duì)照藥材溶液。吸取上述三種溶液各2 μl，分別點(diǎn)于同一硅膠H薄層板，以乙酸丁酯-甲酸-水（7：2.5：2.5）的上層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干。置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品和對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性樣品無(wú)干擾。見(jiàn)圖3。

2.1.4 紫草的薄層鑒別[5]取本品1粒，置于100ml具塞錐形瓶中，加無(wú)水乙醇25ml，40℃超聲處理20min，冷凍（-20～-10℃）30min，離心，取上清液蒸干，殘?jiān)訜o(wú)水乙醇4ml使溶解，用0.45μm的微孔濾膜過(guò)濾，濾液作為供試品溶液。另取紫草對(duì)照藥材0.1g，加70%乙醇回流1h，濾過(guò)，濾液蒸干，加無(wú)水乙醇25ml，超聲處理20min，濾過(guò)，濾液濃縮至約4ml，作為對(duì)照藥材溶液。吸取上述兩種溶液各3μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（30～60℃）-甲酸乙酯-甲酸（15∶5∶1）的上層溶液為展開(kāi)劑，于10℃以下預(yù)飽和30min，展開(kāi)，取出，晾干，日光下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性樣品無(wú)干擾。見(jiàn)圖4。

2.1.5 五倍子的薄層鑒別 取本品1粒，置于100ml具塞錐形瓶中，加水25ml，水浴使溶散均勻，40℃超聲處理30min，冷凍（-20～-10℃）30min，離心，上清液用少量棉花濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取沒(méi)食子酸對(duì)照品，加甲醇制成每1mg·ml-1的溶液，作為對(duì)照品溶液。再取五倍子對(duì)照藥材0.5g，加水25ml，超聲處理30min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。吸取上述三種溶液各2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以三氯甲烷-甲酸乙酯-甲酸（5∶5∶1）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈（254nm）下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。噴以三氯化鐵試液，日光下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性樣品無(wú)干擾。見(jiàn)圖5。

2.2 含量測(cè)定

2.2.1 綠原酸的含量測(cè)定

2.2.1.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

2.2.1.1.1 色譜條件 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.4%磷酸（9∶91）為流動(dòng)相，體積流量 1.0ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)327nm；柱溫25℃ ；進(jìn)樣量10 μl。該條件下測(cè)出理論板數(shù)按綠原酸峰計(jì)算應(yīng)不低于2000，相鄰峰分離度均大于1.5且陰性樣品無(wú)干擾。

2.2.1.1.2 對(duì)照品溶液的制備 取綠原酸對(duì)照品適量，精密稱定，置棕色容量瓶中，加50%甲醇制成40μg·ml-1的溶液，即得（10℃以下保存）。

2.2.1.1.3 供試品溶液的制備 取本品，切碎，精密稱定0.5g，置具塞錐形瓶中，加硅藻土1.0g，精密加水50ml，稱定重量，置60℃水浴5min使溶散均勻，取出，40℃超聲處理（功率250W，頻率40kHz）30min，放冷，再稱定重量，用水補(bǔ)足減失的重量，搖勻，冷凍（-20～-10℃）30min，取出，離心10min（轉(zhuǎn)速為4000rpm），取上清液，濾過(guò)，即得。

2.2.1.1.4 測(cè)定方法 分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10 μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。

2.2.1.1.5 專屬性試驗(yàn) 除金銀花外，按處方比例稱取藥材及輔料按2.2.1.1.3項(xiàng)下制成陰性樣品，再按供試品制備方法，制備成陰性對(duì)照溶液，進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明：陰性樣品色譜中在與綠原酸相應(yīng)的保留時(shí)間上有色譜峰 ，但計(jì)算峰面積約為供試品峰面積的3.56%，小于5%，表明其他成分對(duì)綠原酸的測(cè)定干擾比較小，綠原酸峰的理論板數(shù)n大于2000。樣品中綠原酸色譜峰與相近峰分離完全，分離度均大于1.5。本品中綠原酸的含量具有專屬性。見(jiàn)圖6。

2.2.1.2 方法學(xué)考察

2.2.1.2.1 線性關(guān)系的考察 精密稱取綠原酸對(duì)照品9.97mg，置于25ml棕色容量瓶中，加入50%甲醇適量使其完全溶解并定容至刻度，搖勻，制得綠原酸對(duì)照品濃度為0.3988mg/ml；再精密量取0.2、0.5、1.0、2.0、3.0、5.0ml分置10ml棕色量瓶中，用50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，配制成7.976、19.94、39.88、79.76、119.64、199.4μg/ml的對(duì)照品溶液，搖勻，分別精密吸取10 μl，注入液相色譜儀進(jìn)行測(cè)定。回歸方程：Y=3139590.3720X-95257.0154（r=0.9998）。結(jié)果表明綠原酸含量在79.76～1994μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.2.1.2.2 精密度試驗(yàn) 取本品切碎，精密稱定0.5g，按2.2.1.1.3項(xiàng)下方法制備供試品，分別精密吸取10μl，注入液相色譜儀，進(jìn)行測(cè)定，同一供試品連續(xù)進(jìn)樣6次。結(jié)果綠原酸的峰面積RSD為0.13%，表明儀器精密度良好。

2.2.1.2.3 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取本品切碎，精密稱定0.5g，按2.2.1.1.3項(xiàng)下方法制備供試品，分別于0、2、4、8、12、24h精密吸取10 μl，注入液相色譜儀進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果RSD為0.21%，表明供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.2.1.2.4 重復(fù)性試驗(yàn) 取本品切碎，精密稱定6份，每份0.5 g，按2.2.1.1.3項(xiàng)下方法制備供試品，分別精密吸取10μl，注入液相色譜儀進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果RSD值為0.12%，RSD<2.0%，表明本方法的重復(fù)性良好。

2.2.1.2.5 加樣回收率試驗(yàn) 采用加樣回收法，精密稱取綠原酸對(duì)照品8.70mg，置10ml量瓶中，加50%甲醇使溶解并稀釋至刻度，搖勻，配制成0.87mg/ml的對(duì)照品溶液，精密吸取1ml（共6份），分置不同錐形瓶中，蒸干，然后取本品切碎，精密稱定6份，每份0.25g，分置上述錐形瓶中，分別加硅藻土1.0 g，精密加水50 ml，密塞，稱定重量，置60℃水浴5 min使溶散均勻，取出，40℃超聲處理（功率250W，頻率40kHz）30min，放冷，再稱定重量，用水補(bǔ)足減失的重量，搖勻，冷凍（-20～-10℃）30min，取出，離心10min（轉(zhuǎn)速為4000r/min），微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。結(jié)果綠原酸含量：3.3936mg/g，平均回收率為98.11%，RSD為0.92%。表明本方法具有較好的回收率。

2.2.1.2.6 樣品的含量測(cè)定 取三批樣品，按供試品溶液方法制備，按上述色譜條件測(cè)定，計(jì)算，得到三批樣品綠原酸的含量為：7.58、7.58、7.60mg/粒。根據(jù)三批樣品測(cè)定結(jié)果及所用的金銀花藥材中的綠原酸的含量，折算本品連翹苷的提取率均為55%左右；因此本品按2015年版《中國(guó)藥典》一部“金銀花”藥材項(xiàng)下綠原酸的含量限度1.5%折算制劑的理論含量為12.85mg/粒，結(jié)合實(shí)際大生產(chǎn)情況，按50%轉(zhuǎn)移率折算，暫定本品每片含金銀花以綠原酸（C16H18O9）計(jì)，不得少于6.5mg/粒。

2.2.2 連翹苷的含量測(cè)定

2.2.2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

2.2.2.1.1 色譜條件 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水（24∶76）為流動(dòng)相，流量 1.0ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm，柱溫40℃。理論板數(shù)按連翹苷峰計(jì)算應(yīng)不低于3000，相鄰峰分離度均大于1.5且陰性樣品無(wú)干擾。

2.2.2.1.2 對(duì)照品溶液的制備 取連翹苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成1μg/ml的溶液，即得。

2.2.2.1.3 供試品溶液的制備 取本品，切碎，取約2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加硅藻土2g，精密加入50%乙醇50ml，稱定重量，置60℃水浴15min使溶散均勻，取出，40℃超聲處理30min，放冷，再稱定重量，用50%乙醇溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，置于冰箱冷凍層（-20～-10℃）30min，取出，離心（轉(zhuǎn)速4000r/min）10min，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液25ml，置分液漏斗中，用三氯甲烷振搖提取5次，每次30ml，合并三氯甲烷提取液，蒸干，殘?jiān)蛹状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2.2.2.1.4 測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，進(jìn)行測(cè)定。

2.2.2.1.5 專屬性試驗(yàn) 除連翹藥材外，按處方比例稱取藥材及輔料按2.2.2.1.3項(xiàng)下制成陰性樣品，進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明陰性樣品色譜中在與連翹苷相應(yīng)的保留時(shí)間上無(wú)色譜峰，表明其他成分對(duì)本品中連翹苷的含量測(cè)定無(wú)干擾，連翹苷的理論板數(shù)n大于3000。樣品中連翹苷色譜峰與相近峰分離完全，分離度均大于1.5。以本法測(cè)定本品中連翹苷的含量具有專屬性。見(jiàn)圖7。

2.2.3 方法學(xué)考察

2.2.3.1 線性關(guān)系的考察 精密稱取連翹苷對(duì)照品7.76mg，置25ml量瓶中，加甲醇適量超聲處理（功率250W，頻率40kHz）使溶解，取出，放冷，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取0.2、0.5、1.0、2.0、3.0、5.0ml分置10ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，配制成6.01、15.02、30.05、60.1、90.15、150.25μg/ml的對(duì)照品溶液，搖勻，分別精密吸取20μl，注入液相色譜儀進(jìn)行測(cè)定，得回歸方程：Y=2209920.5724X-2526.4149（r=0.9999）。結(jié)果表明，連翹苷進(jìn)樣量在0.1202～3.005μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.2.3.2 精密度試驗(yàn) 取本品切碎，精密稱定2g，按2.2.2.1.3項(xiàng)下方法制備供試品，分別精密吸取20μl，注入液相色譜儀進(jìn)行測(cè)定，同一供試品連續(xù)進(jìn)樣6次，結(jié)果RSD為0.76%。表明該方法的儀器精密度良好。

2.2.3.3 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取本品切碎，精密稱定2g，按2.2.2.1.3項(xiàng)下方法制備供試品，分別于0、2、4、8、12、24h精密吸取10μl，注入液相色譜儀進(jìn)行測(cè)定。RSD為0.72%，表明供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.2.3.4 重復(fù)性試驗(yàn) 取本品切碎，取約2g（共6份），按2.2.2.1.3項(xiàng)下方法制備供試品，分別于0、2、4、8、12、24h精密吸取10μl，注入液相色譜儀進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果RSD為0.72%，小于2.0%，表明該方法的重復(fù)性良好。

2.2.3.5 加樣回收率試驗(yàn) 采用加樣回收法，精密稱取連翹苷對(duì)照品14.95mg，置25ml量瓶中，加甲醇使溶解并稀釋至刻度，搖勻，配制成0.5789mg/ml的對(duì)照品溶液；精密吸取4ml置10ml量瓶中，用甲醇定容至刻度，搖勻，配制成231.56μg/ml的對(duì)照品溶液，分別精密吸取1.5ml（共6份），分置不同錐形瓶中，蒸干，再取本品切碎，取約1g（共6份），精密稱定，分置上述錐形瓶中，分別加硅藻土2g，精密加入50%乙醇50ml，密塞，稱定重量，置60℃水浴15min使溶散均勻，取出，40℃超聲處理（功率250W，頻率40kHz）30min，放冷，再稱定重量，用50%乙醇溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，置于冰箱冷凍層（-20～-10℃）30min，取出，離心（轉(zhuǎn)速4000r/min）10min，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液25ml，置分液漏斗中，用三氯甲烷振搖提取5次，每次30ml，合并三氯甲烷提取液，蒸干，殘?jiān)蛹状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。結(jié)果連翹苷含量：0.3223mg/g，平均回收率為99.17%，RSD為0.85%。說(shuō)明本方法具有較好的回收率。

2.2.3.6 樣品的含量測(cè)定 取三批樣品，按供試品溶液方法制備，按上述色譜條件測(cè)定，計(jì)算，得到三批樣品連翹苷的含量為：0.91、0.93、0.92mg/粒。根據(jù)三批樣品中連翹苷的測(cè)定結(jié)果及所用的連翹藥材中的連翹苷的含量，折算本品連翹苷的提取率均為50%左右；因此本品按2015年版《中國(guó)藥典》一部“連翹”藥材項(xiàng)下連翹苷的含量限度0.15%折算制劑的理論含量為1.28mg/粒，按50%轉(zhuǎn)移率折算，暫定本品每片含連翹以連翹苷（C27H34O11）計(jì)，不得少于0.65mg/粒。

3 討論

3.1 紫金化毒栓為未在國(guó)內(nèi)上市銷售的中藥六類復(fù)方制劑，為保證成品質(zhì)量，對(duì)方中藥材的主要特征成分進(jìn)行了鑒別試驗(yàn)。本實(shí)驗(yàn)所建立的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)薄層鑒別專屬性強(qiáng)，斑點(diǎn)清晰、快速、簡(jiǎn)便、重現(xiàn)性好、分離度好；利用HPLC法對(duì)樣品中綠原酸、連翹苷進(jìn)行測(cè)定具有操作簡(jiǎn)單、重復(fù)性好、分析時(shí)間短、分離效果好等優(yōu)點(diǎn)，能很好的用于紫金化毒栓的質(zhì)量控制，保證臨床用藥的安全、有效。

3.2 該栓劑基質(zhì)為脂溶性基質(zhì)，薄層色譜鑒別中供試品都進(jìn)行低溫冷凍處理使油脂分離，排除基質(zhì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾。連翹藥材提取為水提，故連翹的鑒別中用水作為提取溶劑，但結(jié)果背景較深，且分離度不好，需進(jìn)一步純化樣品，參考《中國(guó)藥典》連翹苷含量測(cè)定方法，增加過(guò)中性氧化鋁柱的步驟結(jié)果排除了背景雜質(zhì)的影響，顯色斑點(diǎn)清晰可見(jiàn)，故確定為本實(shí)驗(yàn)的薄層鑒別方法。金銀花參照藥典中金銀花藥材的薄層鑒別條件結(jié)果，供試品溶液中含栓劑基質(zhì)太多，無(wú)法點(diǎn)樣，因此加入鹽酸進(jìn)一步純化，最后用乙酸乙酯萃取，除去了基質(zhì)中干擾雜質(zhì)。

3.3 本復(fù)方中由于連翹、金銀花為君藥，其含有的成分連翹苷、綠原酸均具有抗菌作用，因此確定連翹苷、綠原酸作為本品的含量測(cè)定成分。金銀花加樣回收試驗(yàn)樣品制備過(guò)程加入硅藻土，吸附了基質(zhì)中的油脂，排除其對(duì)含量的影響，以便更好地控制產(chǎn)品質(zhì)量。

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（收稿日期：2015.12.31）