飼料中添加酪氨酸對(duì)龍睛金魚(yú)體色的影響

O 張光晨 魏東 許金華 仲雨濃

（天津農(nóng)學(xué)院水產(chǎn)學(xué)院水族科學(xué)系 天津 300384）

飼料中添加酪氨酸對(duì)龍睛金魚(yú)體色的影響

O 張光晨 魏東 許金華 仲雨濃

（天津農(nóng)學(xué)院水產(chǎn)學(xué)院水族科學(xué)系 天津 300384）

本實(shí)驗(yàn)以紅色龍睛金魚(yú)為試驗(yàn)對(duì)象，在實(shí)驗(yàn)飼料當(dāng)中分別添加0%、1%、1.5%、2%、2.5%濃度的酪氨酸。實(shí)驗(yàn)金魚(yú)共分5個(gè)組，進(jìn)行52天的養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)，且每個(gè)實(shí)驗(yàn)組下設(shè)置3個(gè)平行組。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，對(duì)實(shí)驗(yàn)魚(yú)進(jìn)行體色和生長(zhǎng)指標(biāo)的測(cè)量。結(jié)果表明，添加了不同濃度的酪氨酸的實(shí)驗(yàn)組飼料對(duì)龍睛金魚(yú)體色有顯著影響(P＜0.05)，并且各實(shí)驗(yàn)組飼料都對(duì)龍睛金魚(yú)的生長(zhǎng)起到了促進(jìn)的作用。

酪氨酸；龍睛金魚(yú)；體色

本文依托于2015年天津市大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目“酪氨酸及色氨酸對(duì)龍睛金魚(yú)體色的影響及調(diào)控機(jī)制”。項(xiàng)目編號(hào)：201510061004

一、前言

金魚(yú)(Carassius auratus)屬鯉形目鯉科鯽屬。是由野生鯽魚(yú)演化形成的觀賞魚(yú)類。并其色彩絢麗，體態(tài)優(yōu)美，被譽(yù)為“水中牡丹”。龍睛金魚(yú)(Dragon-eye Goldfish)屬于龍種金魚(yú)，其最大的特點(diǎn)是隆起的眼睛，這也是龍睛金魚(yú)的一個(gè)重要鑒賞特征。

二、材料與方法

1.試驗(yàn)材料

實(shí)驗(yàn)用龍睛金魚(yú)來(lái)自北京市水產(chǎn)科學(xué)研究所小湯山基地培育的苗種，魚(yú)體健康活躍，無(wú)病無(wú)傷。體長(zhǎng)（4.39 ±0.79）cm，體重（10.76±7.76）g。酪氨酸的添加量分別為0%、1%、1.5%、2%、2.5%，并記作L0、L1、L2、L3、L4五個(gè)實(shí)驗(yàn)組。實(shí)驗(yàn)金魚(yú)共分5個(gè)組，進(jìn)行52天的養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)，且每個(gè)實(shí)驗(yàn)組下設(shè)置3個(gè)平行組，每組20尾魚(yú)?；A(chǔ)飼料由北京三元飼料廠提供，粗蛋白含量34%。日投飼率為6%,飼養(yǎng)時(shí)間為52天。試驗(yàn)飼料中所添加的酪氨酸購(gòu)于四川峨眉山龍騰生物科技有限公司。

2.試驗(yàn)方法

在養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)前，用20mg/L高錳酸鉀對(duì)魚(yú)缸進(jìn)行消毒，養(yǎng)殖用水為小湯山基地地下水，水質(zhì)指標(biāo)：DO＞5mg/ L、NH3-N＜0.3 mg/L、pH7.6-8.2。

3.測(cè)定指標(biāo)與方法

(1)生長(zhǎng)指標(biāo)

計(jì)算試驗(yàn)用魚(yú)的增質(zhì)量率、飼料系數(shù)和成活率，計(jì)算公式如下：

訓(xùn)練樣本集 D={(x1,y1),(x2,y2),...,(xm,ym)}，yi∈{-1,+1}，分類學(xué)習(xí)最基本的想法就是基于訓(xùn)練集D在樣本空間中找到一個(gè)劃分超平面，將不同類別的樣本分開(kāi)[15]。樣本空間中，劃分超平面通過(guò)如下線性方程描述：

增質(zhì)量率(mass gain,MG)=(末均質(zhì)量-初均質(zhì)量)/初均質(zhì)量×100%；

飼料系數(shù)(feed conversion ratio,FCR)=總投飼量/(末質(zhì)量-初質(zhì)量)；

成活率(survival rate,SR)=實(shí)驗(yàn)?zāi)~(yú)尾數(shù)/實(shí)驗(yàn)初魚(yú)尾數(shù)×100 %。

(2)體色指標(biāo)

在試驗(yàn)龍睛金魚(yú)進(jìn)行養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)之前和結(jié)束后利用扇形比色扇對(duì)實(shí)驗(yàn)金魚(yú)體色進(jìn)行逐條的測(cè)定。將魚(yú)從魚(yú)缸中撈到白瓷盤內(nèi)，測(cè)量它體色的色值，然后將魚(yú)放回缸內(nèi)，并記錄。按照這個(gè)步驟將15個(gè)實(shí)驗(yàn)組的龍睛金魚(yú)體色進(jìn)行測(cè)定。并且利用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定魚(yú)鱗的吸光度值。取實(shí)驗(yàn)龍睛金魚(yú)的側(cè)線以上的魚(yú)鱗，放入離心管內(nèi)，再向其中加入丙酮，再加入0.1g的亞硫酸鈉，然后用勻漿器將色素勻入丙酮溶液中。標(biāo)記號(hào)碼，放冰箱里冷藏24小時(shí)，第二天取出，放到離心機(jī)以每分鐘4000轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)速將離心管離心10分鐘，將離心后的上清液移入測(cè)吸光度的管內(nèi)，以丙酮原液作為空白組，調(diào)零，然后進(jìn)行測(cè)定并記錄。

(3)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析和多重比較，P＜0.05時(shí)差異顯著。

三、結(jié)果與分析

1.酪氨酸對(duì)實(shí)驗(yàn)龍睛金魚(yú)生長(zhǎng)性能的影響

在試驗(yàn)飼料中添加不同濃度的酪氨酸對(duì)試驗(yàn)龍睛金魚(yú)生長(zhǎng)性能的影響見(jiàn)表1。結(jié)果表明，在飼料中添加酪氨酸對(duì)實(shí)驗(yàn)金魚(yú)增加質(zhì)量率顯著影響(P＜0.05);在酪氨酸的添加濃度大于0%時(shí),飼料系數(shù)有降低趨勢(shì),各組實(shí)驗(yàn)金魚(yú)成活率均保持在較高水平，添加酪氨酸為1.5%的實(shí)驗(yàn)組的龍睛金魚(yú)成活率比其他組較低。在飼料中添加不同濃度的酪氨酸，對(duì)實(shí)驗(yàn)龍睛金魚(yú)的成活率不顯著（P＞0.05）。

表1

2.酪氨酸對(duì)試驗(yàn)龍睛金魚(yú)體色的影響

酪氨酸添加量為2.5%濃度的飼料組被投喂開(kāi)始5天后，其組龍睛金魚(yú)的體色發(fā)生了明顯的增色變化，而其余各組在接下來(lái)的幾天里逐漸發(fā)現(xiàn)有變色跡象。由表2可見(jiàn)，在飼料中添加不同水平的酪氨酸對(duì)實(shí)驗(yàn)金魚(yú)體色的增色作用較為明顯，且隨著酪氨酸添加水平的增加試驗(yàn)龍睛金魚(yú)的體色變更深。分光光度計(jì)所測(cè)的鱗片的吸光度值如表3。

表2 酪氨酸對(duì)實(shí)驗(yàn)龍睛金魚(yú)體色的影響

表3 酪氨酸對(duì)實(shí)驗(yàn)龍睛金魚(yú)鱗片吸光度值的影響

注：平均數(shù)肩標(biāo)字母表示不同濃度的酪氨酸對(duì)龍睛金魚(yú)鱗片吸光度值影響的差異性，肩標(biāo)字母相同表示差異不顯著(P＞0.05)，肩標(biāo)字母不同表示差異顯著(P＜0.05)。

四、討論

1.酪氨酸對(duì)龍睛金魚(yú)體色的影響

酪氨酸是酪氨酸酶單酚酶功能的催化底物，是最終形成優(yōu)黑素和褐黑素的主要原料。而酪氨酸酶就是催化這一過(guò)程的關(guān)鍵酶。酪氨酸酶(Tyrosinase)是一種含銅的金屬酶，來(lái)源于胚胎神經(jīng)鞘細(xì)胞，廣泛分布于微生物、動(dòng)植物及人體中，又稱多酚氧化酶或兒茶酚氧化酶。酪氨酸酶將L-酪氨酸轉(zhuǎn)化為L(zhǎng)-多巴，L-多巴繼續(xù)被酪氨酸酶轉(zhuǎn)化可生成多巴醌，多巴醌通過(guò)反應(yīng)生成白色多巴色素，而白色多巴色素可以通過(guò)魚(yú)體的系列反應(yīng)生成多巴色素，然后后由多巴色素形成了5,6二羥基吲哚，最后通過(guò)一系列的反應(yīng)生成黑色素。這就是由酪氨酸酶參與的將酪氨酸經(jīng)過(guò)若干反應(yīng)生成黑色素的過(guò)程。而黑色素的形成與沉積將影響魚(yú)的體色。而黑色素是不溶于水和大多數(shù)溶劑的褐色或黑色小顆粒，發(fā)生于黑色素細(xì)胞中。廣泛存在于龍睛金魚(yú)的肌肉、皮膚、鱗片等部位。根據(jù)黑色素的種類和含量不同，龍睛金魚(yú)皮膚的顏色也有所不同。

由表2所示，添加酪氨酸1.5%、2%和2.5%的實(shí)驗(yàn)組飼料對(duì)龍睛金魚(yú)體色增色影響都差不多。據(jù)推測(cè)，原因一是能被龍睛金魚(yú)魚(yú)體所合成的酪氨酸有一個(gè)最大值，也就是說(shuō)當(dāng)達(dá)到了魚(yú)體內(nèi)所能消耗酪氨酸做為影響體色體色合成黑色素的一個(gè)飽和點(diǎn)時(shí)，且在一個(gè)正常的飼料氨基酸添加范圍之內(nèi)，添加再多的酪氨酸在飼料中，龍睛金魚(yú)也不會(huì)因?yàn)樘砑拥睦野彼岫嗔梭w色就變的更深。二是因?yàn)楸旧磉@幾組實(shí)驗(yàn)組飼料中的酪氨酸的添加水平所能改變體色的能力十分接近。也就是說(shuō)可能這三個(gè)含量的差異在整個(gè)酪氨酸對(duì)龍睛金魚(yú)體色改變的整體水平來(lái)說(shuō)是可以忽略不計(jì)的，但這并非實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的不理想，因?yàn)槔野彼嶙鳛轸~(yú)類的非必須氨基酸，它是可以通過(guò)體內(nèi)自身合成的。畢竟試驗(yàn)只進(jìn)行了52天，并不是一個(gè)特別長(zhǎng)期的喂養(yǎng)過(guò)程，所以如果對(duì)龍睛金魚(yú)進(jìn)行足夠長(zhǎng)期的喂養(yǎng)的，也會(huì)產(chǎn)生不一樣的效果。

鱗片吸光度值的大小，與鱗片中色素的多少有關(guān)。如表3所示，酪氨酸在2.0%濃度下對(duì)龍睛金魚(yú)鱗片吸光度值有顯著影響（P＜0.05）。且鱗片的吸光度值在0%-2.0%濃度下遞增，但卻2.5%濃度下較2.0%濃度下降。其原因可能是在取實(shí)驗(yàn)金魚(yú)時(shí)，隨機(jī)挑選的原因?qū)е隆?/p>

2.酪氨酸對(duì)龍睛金魚(yú)生長(zhǎng)的影響

如表1所示，各個(gè)實(shí)驗(yàn)組與空白對(duì)照組相比，在飼料中添加了不同水平的酪氨酸后、魚(yú)體平均體重變化、增重質(zhì)率都有不同程度的上升。而另外飼料系數(shù)也發(fā)生了降低的現(xiàn)象，而成活率基本上沒(méi)有影響。這表明在飼料中添加酪氨酸金魚(yú)的魚(yú)體平均質(zhì)量變化、增重質(zhì)率、飼料系數(shù)都會(huì)有不同的影響。在1.5%的龍睛金魚(yú)組的成活率最低。而其他各組都相差無(wú)幾。造成1.5%添加組的龍睛金魚(yú)的成活率較低這個(gè)現(xiàn)象可能與酪氨酸的添加量有關(guān)。但與其它各組相比，也有可能是存在其它的外界原因造成其成活率較低。從平均體重變化和增重質(zhì)率這兩個(gè)指標(biāo)上，添加了酪氨酸的實(shí)驗(yàn)組都比沒(méi)添加酪氨酸的空白實(shí)驗(yàn)組更高?？赡苁怯捎谠陲暳显鲋刭|(zhì)率最高。并且添加酪氨酸從1.0%到2.0%的組試驗(yàn)龍睛金魚(yú)呈一個(gè)上升的趨勢(shì)，到2.5%有一個(gè)較小的下降。

五、結(jié)論

通過(guò)以上分析可以看出，在飼料中添加酪氨酸對(duì)龍睛金魚(yú)的體色有增色影響，且在酪氨酸添加量為2.0%和2.5%時(shí)對(duì)龍睛金魚(yú)的增色效果最強(qiáng)。并且其對(duì)龍睛金魚(yú)的生長(zhǎng)有促進(jìn)作用。且由于增加酪氨酸的添加量，會(huì)提高飼料的成本，所以在飼料中添加2.0%的酪氨酸對(duì)龍睛金魚(yú)體色和生長(zhǎng)最佳，且最為經(jīng)濟(jì)。

[1]孟慶聞.魚(yú)類分類學(xué)[M].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，1995: 249.

[2]馮冰冰，梅肖樂(lè).龍睛金魚(yú)表型性狀與體質(zhì)量的相關(guān)與通徑分析[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，41(11):255-257.

[3]傅建軍,張建新.雞血藤對(duì)金魚(yú)增色作用的研究[J].2008,13(15): 4-6.

[4]陳林,符秋娟.四種食用色素對(duì)金魚(yú)體色的影響[J].上海水產(chǎn)大學(xué)學(xué)報(bào),2007.1:79-82.

[5]程云生,陳世金,李靜等.飼料中組合色素對(duì)紅草金魚(yú)體色的影響[J].淡水漁業(yè),2015.5:94-99.

[6]冷向軍,石英,李小勤等.飼料中添加葉黃素對(duì)金魚(yú)體色的影響[J].浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版),2010.2:168-174.

[7]崔凌飛,王遂.玉米皮色素提取及其穩(wěn)定性研究[J].食品科學(xué), 2002,23(5)：66－70.

[8]方春林,賀剛.飼料中三種添加劑對(duì)金魚(yú)體色影響的研究[J].科學(xué)養(yǎng)魚(yú),2013.8:73-74.

[9]王銳,費(fèi)曉紅.四種增色劑在觀賞魚(yú)中應(yīng)用的研究[J].北京水產(chǎn).2005.4:37－38.

[10]黃辨非,馮端林.飼料中添加紅辣椒粉對(duì)紅草金魚(yú)體色及生長(zhǎng)的影響[J].水利漁業(yè),2008,7:52-54.

[11]陳曉明,徐學(xué)明,金征宇.富含蝦青素的法夫酵母對(duì)金魚(yú)體色的影響[J].中國(guó)水產(chǎn)科學(xué),2004.1:70-73.

[12]黃斌,黃勇,汪利.日糧添加蕪萍對(duì)紅色草金魚(yú)生長(zhǎng)及體色的影響[J].水產(chǎn)科學(xué),2011.10:617-620.

[13]姚元鋒,趙廣榮.L-酪氨酸代謝工程研究進(jìn)展[J].食品與發(fā)酵工業(yè),2013,39(5):132-137.

[14]Geiuseppe T,Maria L C,Guido G J.Oxidative polymerzation of phenols by a phenol oxidase from green olives.Enzyme and microbial Technology,2003,33(1): 47-54.

Influence on the Body Color of Telescope Goldfish by Adding Tyrosine into Fodder

Zhang Guangchen，Wei Dong, Xu Jinhua,Zhong Yunong
（Aquaria Science Department of Fisheries School of Tianjin Agricultural University,Tianjin,300384）

In this experiment, taking red telescope goldfish as test object, it adds respectively tyrosine with concentration of 0%, 1%, 1.5%, 2%, 1.5% into fodder.Experimental goldfish are divided into five groups with 52 days of breeding experiment, besides, it sets up three parallel groups under each experimental group.After the experiment, taking measurement on the body color and growth indicators of experiment fish . Results show that the group fodder in which add different concentrations of tyrosine has a significant effect(P ＜ 0.05) on the body color of telescope goldfish, and the fodder in each group plays an important role in promoting the growth of telescope goldfish.

tyrosine；telescope goldfish；body color

T

A

張光晨（1993～），男，天津農(nóng)學(xué)院水產(chǎn)學(xué)院水族科學(xué)系，研究方向：觀賞水族動(dòng)物養(yǎng)殖。魏東（1970～）,男，天津農(nóng)學(xué)院水產(chǎn)學(xué)院水族科學(xué)系，研究方向：觀賞水族養(yǎng)殖。