喀什紅棗病害致病菌分離鑒定及藥劑防治研究

宋開(kāi)艷，孫濤，何健，任玲

1.喀什地區(qū)林業(yè)技術(shù)推廣站2.喀什地區(qū)林業(yè)有害生物防治檢疫局，新疆喀什844000

喀什紅棗病害致病菌分離鑒定及藥劑防治研究

宋開(kāi)艷1，孫濤2，何健1，任玲2

1.喀什地區(qū)林業(yè)技術(shù)推廣站2.喀什地區(qū)林業(yè)有害生物防治檢疫局，新疆喀什844000

由于喀什地區(qū)農(nóng)民栽培管理技術(shù)的不到位及投入不足，導(dǎo)致部分紅棗園內(nèi)紅棗果實(shí)病害發(fā)生，嚴(yán)重制約著喀什地區(qū)紅棗產(chǎn)業(yè)的發(fā)展和林農(nóng)增收。本文通過(guò)對(duì)紅棗病害的致病菌分離鑒定和室內(nèi)藥劑防治的效果研究，了解紅棗黑斑病、縮果病的發(fā)病原因和規(guī)律，篩選出有效的防治藥劑并進(jìn)行推廣應(yīng)用，為今后紅棗病害研究提供理論依據(jù)。

喀什；紅棗；致病菌；分離；防治研究

喀什位于新疆南部，具有充足的光熱資源，無(wú)霜期長(zhǎng)，晝夜溫差大，降雨少，氣候干燥等獨(dú)特的氣候條件，適宜紅棗產(chǎn)業(yè)快速發(fā)展。目前全地區(qū)紅棗種植面積已達(dá)200萬(wàn)畝，但近幾年，由于喀什地區(qū)降水逐步增多，紅棗直播建園矮化密植栽培模式廣泛采用，農(nóng)民栽培管理技術(shù)不到位，投入不足，導(dǎo)致部分棗園紅棗果實(shí)病害嚴(yán)重發(fā)生，尤其駿棗果實(shí)發(fā)病率高達(dá)50%以上。通過(guò)目前初步判定的紅棗果實(shí)病害主要有黑斑病、縮果病、裂果病等，這些病害如不及時(shí)有效控制，將嚴(yán)重制約著喀什地區(qū)紅棗產(chǎn)業(yè)的發(fā)展和林農(nóng)增收。本文通過(guò)致病菌分離鑒定和室內(nèi)藥劑防治效果研究，了解紅棗黑斑病、縮果病的發(fā)病原因和規(guī)律，篩選出防治紅棗黑斑病、縮果病的有效藥劑進(jìn)行推廣應(yīng)用，為今后紅棗病害研究提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

紅棗品種：灰棗和駿棗。

品種來(lái)源：疏勒縣、岳普湖縣、麥蓋提縣等地的棗園。

1.2 方法

1.2.1 原料的預(yù)處理

采回的紅棗樣品，用溫水清洗干凈后放入冰箱保鮮層存放。

1.2.2 病原菌的分離

采用組織塊分離法。挑選紅棗病果10個(gè)進(jìn)行組織分離，用70%酒精進(jìn)行表面消毒，然后用無(wú)菌水進(jìn)行沖洗3次放入超凈工作臺(tái)上。在無(wú)菌工作臺(tái)中，用解剖刀在病健交界處切取果實(shí)組織0.5 cm2先放人70%的酒精中l(wèi)min，再放入升汞中3 min進(jìn)行消毒，最后用無(wú)菌水進(jìn)行表面沖洗3次后再植入PDA上，置于27℃恒溫箱中培養(yǎng)23d，當(dāng)培養(yǎng)出的菌落生長(zhǎng)到直徑為1cm時(shí)，用接種針在菌落邊緣挑取少量菌絲植入另一PDA上培養(yǎng)，重復(fù)上述操作即可作為純化菌種備用。

1.2.3 致病性鑒定

（1）把分離純化的菌株返接在紅棗果實(shí)上的準(zhǔn)備：選取健康無(wú)病果實(shí)，用清水洗凈后再用70%酒精浸泡1min，用無(wú)菌水沖洗后，放在超凈工作臺(tái)上吹干備用。每個(gè)菌株接種在5個(gè)健康紅棗果實(shí)上，并且分為有傷、無(wú)傷以及空白對(duì)照。（2）接種所用病原菌的制備：挑選在PDA上培養(yǎng)4～5d的新鮮菌株，用打孔器（直徑為5mm）打菌餅。（3）返接試驗(yàn)：把已純化的菌株接種在健康果實(shí)上，分有傷和無(wú)傷2種接種方式。通過(guò)接種觀察病斑發(fā)展速度與發(fā)病程度，判斷菌株致病能力的大小。有傷接種方式：先在每個(gè)葡萄果粒上分別用接種針刺破5個(gè)孔眼可集中在一起使直徑約為5mm；再把病原菌株接種在傷口處，分別在25℃和5℃條件下培養(yǎng)4～5d。無(wú)傷接種方式為取健康紅棗果實(shí)直接接種，分別在25℃和5℃條件下培養(yǎng)4～5d。

1.2.4 返接后培養(yǎng)

把接種后的果實(shí)放人250mL燒杯內(nèi)培養(yǎng)，蓋口用八層紗布蓋住并用繩子系緊，可以起到保濕、密封、透氣、防污染的作用。

1.2.5 病原茵鑒定

把分離到的各種菌株重新接種在寄主果實(shí)上，如果發(fā)病癥狀與貯運(yùn)中腐爛癥狀相符合，才能作為采后病害病原菌，然后進(jìn)一步鑒定到屬種。根據(jù)各致病菌株在PDA上的菌落特征，分生孢子及分生孢子梗形態(tài)特征進(jìn)行鑒定，并且挑取少量菌絲進(jìn)行鏡檢，然后根據(jù)形態(tài)特征，參照有關(guān)鑒定手冊(cè)鑒定到屬[1-4]。

1.2.6 防治藥劑的篩選

采用平皿生長(zhǎng)速率法篩選藥劑。80%代森錳鋅可濕性粉劑、40%腈菌唑可濕性粉劑、24%腈苯唑懸浮劑、78%波爾·錳鋅（波爾多液48%、代森錳鋅30%）、福星（氟硅唑乳油）等5種藥劑與PDA培養(yǎng)基混合稀釋成不同濃度（表1）倒入培養(yǎng)皿中，在PDA平板中接種一個(gè)病原菌餅，25℃恒溫培養(yǎng)，逐日觀察并記錄結(jié)果。

2 結(jié)果與分析

2.1 致病菌的分離與鑒定

根據(jù)菌株的培養(yǎng)形態(tài)特征和致病力測(cè)定結(jié)果，依據(jù)真菌分離物在PDA培養(yǎng)基上的菌落特征，顯微鏡下觀察到的分生孢子及分生孢子梗形態(tài)特征，參照《真菌鑒定手冊(cè)》，初步確定引起紅棗黑斑病和縮果病的病原菌為細(xì)鏈格孢菌lternaria alternate（Fr.）。

2.2 黑斑病和縮果病癥狀及發(fā)病規(guī)律

2.2.1 黑斑病

8月份果實(shí)開(kāi)始初顯癥狀，病斑凹陷，深褐色至黑色，直徑3～5mm，擴(kuò)展較慢，遇到雨水較多的天氣，病果將會(huì)大量出現(xiàn)，尤其發(fā)生裂果的果實(shí)發(fā)病最為迅速，并組織呈倒半圓形，深入果肉3～5 mm，病斑表面長(zhǎng)長(zhǎng)出黑色霉?fàn)钗?。采收后保險(xiǎn)貯藏或晾曬期感病的，病斑出現(xiàn)的部位不確定，發(fā)病較為迅速。

2.2.2 縮果病

在幼果期和果實(shí)膨大期開(kāi)始發(fā)病，平均氣溫達(dá)到23～26℃時(shí)為盛發(fā)期，若遇到多雨潮濕天氣，易暴發(fā)成災(zāi)[5]。發(fā)病初期，現(xiàn)在肩部形成不規(guī)則的變色斑，邊緣清晰，進(jìn)而果皮呈水漬狀斑塊，土黃色，病果逐漸失水而發(fā)軟萎縮。果肉初為淺土黃色小斑塊，逐漸向果肉深層延伸，嚴(yán)重時(shí)整個(gè)果肉變?yōu)辄S褐色，組織呈海綿狀壞死，味苦。果柄變?yōu)楹稚蚝诤稚崆靶纬呻x層而脫落。被侵害果實(shí)的癥狀通常有暈環(huán)、水漬、提前著色、萎縮和脫落5個(gè)階段[6]。

2.3 病原菌侵入途徑和致病溫度

通過(guò)致病力測(cè)定和返接實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)細(xì)鏈格孢菌在有傷和無(wú)傷條件下均可侵入組織，潮濕環(huán)境發(fā)病最為嚴(yán)重，低溫和高溫狀態(tài)下均可致病。

2.4 防治藥劑的篩選

經(jīng)平皿生長(zhǎng)速率法進(jìn)行篩選，發(fā)現(xiàn)40%腈菌唑可濕性粉劑2000倍液和福星（氟硅唑乳油）8000倍液對(duì)致病菌的抑菌效果最好，抑菌率為96%，78%波爾·錳鋅抑菌500倍液抑菌效果最差，抑菌率為51.38%。詳見(jiàn)表1。

表15 種稀釋成不同梯度的藥劑對(duì)致病菌的抑制效果

3 結(jié)論與討論

研究發(fā)現(xiàn)細(xì)鏈格孢菌Alternariaalternate能引起紅棗果實(shí)黑斑病和縮果病。通過(guò)展開(kāi)室內(nèi)藥劑篩選試驗(yàn)得出，40%腈菌唑可濕性粉劑2000倍液和福星（氟硅唑乳油）8000倍液對(duì)致病菌的抑菌效果最好，適合大力推廣應(yīng)用?？s果病發(fā)病較早造成果實(shí)提前掉落，黑斑病在果實(shí)著色期才開(kāi)始發(fā)病，遇到多雨潮濕天氣，紅棗果實(shí)出現(xiàn)裂果，三種病害混合發(fā)生，發(fā)病迅速，防治難度增加，造成紅棗產(chǎn)量和品質(zhì)降低。但不同的棗品種抗病能力不同，駿棗發(fā)病重，灰棗發(fā)病較輕，密植棗園發(fā)病重，間作棗園的發(fā)病率普遍高于單作棗園，綜合管理水平高，樹(shù)勢(shì)強(qiáng)的發(fā)病輕[7]。

[1]方仲達(dá).植病研究方法[M].北京:農(nóng)業(yè)出版社,1997．

[2]魏景超.真菌鑒定手冊(cè)[K].上海:上?？萍汲霭嫔?1979．

[3]陸家云.真菌病害診斷(第二版)[M].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,1997．

[4]俞大鈸,植物病理和真菌技術(shù)匯編[G].北京:人民教育出版社,1977．

[5]湯顯春,張立春.中國(guó)新疆阿克蘇紅棗病蟲(chóng)害及其防治措施[G]//干果研究進(jìn)展(5).北京中國(guó)農(nóng)業(yè)科技出版社, 2007:347-356．

[6]張朝紅,劉盂軍.棗縮果病研究進(jìn)展[J].山西農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009(1):74-77.

[7]曲曉晨.太谷棗區(qū)縮果病危害及發(fā)病規(guī)律調(diào)查[J].山西林業(yè)，2007(3):38-39．

10.3969/j.issn.1007-3574.2016.03.025

宋開(kāi)艷（1985年—），新疆喀什人，碩士學(xué)歷，研究方向?yàn)楣麡?shù)學(xué)。

2016-05-08