新疆南疆地區(qū)犬戊型肝炎病毒的血清學調(diào)查

武軍元

（1．塔里木大學，新疆阿拉爾843300；2．新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團塔里木畜牧科技重點實驗室，新疆阿拉爾843300）

新疆南疆地區(qū)犬戊型肝炎病毒的血清學調(diào)查

武軍元1，2

（1．塔里木大學，新疆阿拉爾843300；2．新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團塔里木畜牧科技重點實驗室，新疆阿拉爾843300）

為了解新疆南疆地區(qū)犬戊型肝炎病毒（HEV）感染的情況及流行特點，為其科學防控提供參考依據(jù)，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗法，對新疆南疆地區(qū)采集的160份犬血清進行HEV IgG抗體檢測，并比較不同來源、品種、年齡及性別犬HEV IgG抗體的陽性率差異。結(jié)果表明：160份被檢血清中有21份HEV IgG抗體呈陽性，陽性率為13．13%。其中，農(nóng)村飼養(yǎng)犬的陽性率為25．46%（14／55），城市家養(yǎng)犬為6．67% （7／105），差異極顯著（P＜0．01）；5歲以上、2～5歲和2歲以下犬的抗體陽性率分別為10．71%、16．84%和5．41%，差異顯著（P＜0．05）；貴賓犬、金毛獵犬、京巴犬、牧羊犬和其他品種犬的抗體陽性率分別為25．71%、6．52%、7．90%、0%和18．18%，金毛獵犬和金巴犬間差異不顯著（P＞0．05），其他各品種間差異極顯著（P＜0．01）；雄性犬和雌性犬的抗體陽性率分別為19．77%和5．41%，差異極顯著（P＜0．01）。新疆南疆地區(qū)犬已受到HEV感染，應(yīng)加強人犬之間的公共衛(wèi)生防護。

犬；戊型肝炎病毒；流行病學；酶聯(lián)免疫

戊型肝炎（hepatitis E，HE）是由戊型肝炎病毒（hepatitis E virus，HEV）感染引起的一種經(jīng)糞口途徑傳播的疾病。HE是一種新出現(xiàn)的人獸共患病［13］，廣泛分布在亞、非及美洲等發(fā)展中國家［4］，該病預(yù)后良好，但是孕婦感染后死亡率高達20%～25%［5－6］。近年來，有研究證實，豬、羊、牛等多種與人類密切接觸的動物可以感染HEV，并且在雞［7］、鼠［8］、野豬［9］、雪貂［10］、蝙蝠［11］和鱒魚［12］中鑒定出HEV的變種。新疆是我國HE的高發(fā)地區(qū)，曾在1988—1998年爆發(fā)流行，是迄今為止世界上規(guī)模最大的一次流行，共計發(fā)病119 280例，死亡707例［13］。曾有研究表明，新疆地區(qū)豬感染HEV的陽性率高達61．84%［14］，當?shù)鼐d羊HEV感染比較普遍［1517］。犬是人們密切接觸的動物，在新疆地區(qū)養(yǎng)殖數(shù)量逐年增加，但當?shù)厝腥綡EV的情況目前未見報道。為了解新疆南疆地區(qū)犬戊型肝炎病毒感染的情況及流行特點，以期為其科學防控提供科學依據(jù)，對新疆南疆地區(qū)犬進行血清HEV IgG抗體檢測，并對不同來源、不同品種、不同年齡及不同性別犬感染HEV的差異性進行比較。

1材料與方法

1．1血清及試劑盒

2015年1—10月，從新疆南疆地區(qū)寵物門診采集犬血液，每份采集3mL并分離血清，－20℃保存，共計血清樣品160份，其中，農(nóng)村飼養(yǎng)犬55份，城市家養(yǎng)犬105份，所有樣品均有品種、年齡和性別記錄。戊型肝炎病毒IgG抗體雙抗原夾心法酶聯(lián)免疫診斷試劑盒，購自北京萬泰生物有限公司。

1．2抗體檢測

按照試劑盒說明書檢測血清樣品中的戊型肝炎病毒抗體，在BIO－TeK酶標儀上讀取OD450／620nm值，臨界值＝陰性對照孔OD均值NC＋0．12。樣品OD值≥臨界值者為HEV抗體陽性，OD值＜臨界值者為HEV抗體陰性。

1．3統(tǒng)計分析

檢測數(shù)據(jù)采用Spss 19．0軟件進行統(tǒng)計分析，比較不同來源、品種、年齡和性別犬HEV感染率的差異。

2結(jié)果與分析

從表中看出，在160份檢測血清中有21份HEV IgG抗體呈陽性，陽性率達13．13%。經(jīng)χ2檢驗，農(nóng)村飼養(yǎng)犬和城市家養(yǎng)犬間抗體陽性率差異極顯著（P＜0．01）。

在不同年齡犬中，2～5歲犬的HEV IgG抗體陽性率最高，為16．84%；＞5歲犬次之，為10．71%；＜2歲犬最低，為5．41%。經(jīng)χ2檢驗，不同年齡組間陽性率差異顯著（P＜0．05）。

在不同品種犬中，貴賓犬的HEV IgG抗體陽性率最高，為25．71%；金毛獵犬為6．52%；京巴犬為7．9%；牧羊犬無感染，其他品種為18．18%。經(jīng)χ2檢驗，除金毛獵犬和金巴犬之外，其他各品種間差異極顯著（P＜0．01）。

表 新疆南疆地區(qū)犬HEV IgG抗體檢測結(jié)果Table Result of anti－HEV IgG in Nanjiang Region of Xinjiang

在不同性別犬中，雄性的HEVIgG抗體陽性率高達19．77%，雌性為5．41%，經(jīng)χ2檢驗，不同性別犬間差異極顯著（P＜0．01）。

3結(jié)論與討論

戊型肝炎是一種由戊型肝炎病毒感染引起的人獸共患傳染病，經(jīng)口感染是戊型肝炎病毒感染的主要途徑［18］，至今，戊型肝炎沒有特效的治療辦法，唯一可行的辦法是預(yù)防［19］。近年來，大量研究證實多種與人類有密切接觸的動物均可以感染HEV，并且動物中分離的HEV與人體內(nèi)分離的HEV具有RNA序列的高度相似性［20］。目前，家犬與人類的接觸尤為密切，鑒于家犬對HEV的易感性［21－22］，以及家犬養(yǎng)殖數(shù)量逐年增加的趨勢，家犬HEV感染的防控已成為公共衛(wèi)生的安全隱患，因此，應(yīng)加強對犬HEV感染的流行病學監(jiān)測。

檢測結(jié)果表明，新疆南疆地區(qū)160份犬血清的戊型肝炎抗體陽性率為13．13%（21／160），表明當?shù)嘏c人類關(guān)系密切的家犬已經(jīng)存在HEV感染。農(nóng)村飼養(yǎng)犬的感染率達25．46%，明顯高于城市家養(yǎng)犬的感染率（6．67%），可能與HEV經(jīng)消化道傳播的途徑和家犬所處的飼養(yǎng)環(huán)境有關(guān)，相對于城市來講農(nóng)村家犬的養(yǎng)殖環(huán)境普遍較差，且處于散養(yǎng)，這種養(yǎng)殖方式使得家犬接觸HEV的機會明顯增多，因此，農(nóng)村飼養(yǎng)犬具有相對較高的感染率，與武軍元等［16］報道的當?shù)厣B(yǎng)綿羊感染HEV較高的特性相一致；在品種感染中，除金毛獵犬和金巴犬的陽性率差異不顯著（P＞0．05）外，其他各品種間差異極顯著（P＜0．01），說明家犬對HEV的感染呈現(xiàn)出品種間差異，該研究結(jié)果可以作為探討不同品種犬對HEV易感性的參考，需進一步深入研究家犬品種與HEV易感性的規(guī)律；家犬的年齡與HEV IgG陽性率明顯相關(guān)，5歲以上和2～5歲家犬的感染率顯著高于2歲以下家犬，與Masaharu T等［23］研究即日本大多數(shù)豬感染HEV與年齡呈正相關(guān)的結(jié)論一致。由于目前尚沒有動物用戊型肝炎疫苗獲準上市，且母源抗體在3個月齡以后滴度下降，2歲以上犬抗體呈現(xiàn)陽性應(yīng)是自然感染的結(jié)果；在性別感染的差異性比較中，雄性犬的感染率（19．77%）極顯著（P＜0．01）高于雌性犬（5．41%），可能與不同性別犬的生活習性有關(guān)。

本次調(diào)查在有限數(shù)量樣品的條件下得到上述結(jié)果，雖不能準確反映當?shù)丶胰腥綡EV的真實情況，但表明當?shù)丶胰艿紿EV感染。另外，采用人用戊型肝炎病毒抗體檢測試劑盒從犬血清中檢測到抗人戊型肝炎病毒抗體，進一步提示犬可能被人源HEV感染。戊型肝炎作為一種新型的人畜共患病，尚需要進一步分離鑒定其病原的基因型，以確定犬HEV與本地區(qū)人HEV的親緣關(guān)系，進而為研究HEV的致病機理以及抗HEV疫苗的研制提供參考。

致謝：感謝新疆阿克蘇地區(qū)動物疫病控制診斷中心康強在樣品采集中的幫助。

［參考文獻］

［1］Tei S，Kitagima N，Takahashi K，et a1．Zoonotic transmission of hepatitis E virus from deer to human beings［J］．Lancet，2003，362（9381）：371－373．

［2］Guthmann J P，Klovstad H，Boccia D，et al．A large outbreak of hepatitis E among a displaced population in Darfur，Sudan，2004：the role of water treatment methods［J］．Clin Infect Dis，2006，42（12）：1685－1691．

［3］Saad M D，Hussein H A，Bashandy M M，et al．Hepatitis E virus infection in work horses in Egypt ［J］．Infect Genet Evol，2007，7（3）：368－373．

［4］Dalton H R．hepatitis E：an emerging infection in developed countries［J］．Lancet Infect Dis，2008，8：698－709．

［5］Kamili S．Toward the development of a hepatitis E vaccine［J］．Virus Res，2011，161：93－100．

［6］Kamar N，Bendall R，Legrand－Abravanel F，et al．Hepatitis E［J］．Lancet，2012，379（9835）：2477－2488．

［7］Zhao Q，Zhou E M，Dong S W，et al．Analysis of avian hepatitis E virus from chickens，China［J］．Emerg Infect Dis，2010，16（9）：1469－1472．

［8］Johne R，Plenge－Bonig A，Hess M，et al．Detection of a novel hepatitis E－like virus in faeces of wild rats using a nested broad－spectrum RT－PCR［J］．The Journal of general virology，2010，91（3）：750－758．

［9］Takahashi M，Nishizawa T，Sato H，et al．Analysis of the full－length genome of a hepatitis E virus isolate obtained from a wild boar in Japan that is classifiable into a novel genotype［J］．The Journal of general virology，2011，92（4）：902－908．

［10］Raj V S，Smits S L，Pas S D，et al．Novel hepatitis E virus in ferrets，the Netherlands［J］．Emerging infectious diseases，2012，18（8）：1369－1370．

［11］Drexler J F，Seelen A，Corman V M，et al．Bats worldwide carry hepatitis E virus－related viruses that form a putative novel genus within the family Hepeviridae［J］．Journal of virology，2012，86（17）：9134－9147．

［12］Batts W，Yun S，Hedrick R，et al．A novel member of the family Hepeviridae from cutthroat trout（Oncorhynchus clarkii）［J］．Virus research，2011，158（1）：116－123．

［13］莊 輝，朱萬孚，李 凡，等．我國戊型肝炎研究進展［J］．中華微生物與免疫學雜志，1999，19（5）：448－450．

［14］馬 勛，陸承平，孟繼鴻．新疆地區(qū)豬戊型肝炎血清流行病學調(diào)查［J］．中國病毒學，2004，19（3）：285－287．

［15］武軍元，康 強，白萬勝，等．新疆阿克蘇地區(qū)綿羊戊型肝炎血清流行病學調(diào)查［J］．病毒學報，2010，26 （3）：234－237．

［16］武軍元，康 強，白萬勝，等．新疆南疆地區(qū)綿羊戊型肝炎血清流行病學調(diào)查［J］．中國預(yù)防獸醫(yī)學報，2009，31（6）：427－429．

［17］Wu J Y，Si F S，Jiang C Y，et al．Molecular detection of hepatitis E virus in sheep from southern Xinjiang，China［J］．virus genes，2015，50：410－417．

［18］楊紹基．傳染病學［M］．北京：人民衛(wèi)生出版社，2005：33．

［19］莊 輝．重視戊型肝炎研究［J］．中華肝臟病雜志，2004，12（1）：5－6．

［20］Meng X J．Novel strains of hepatitis E virus identified from humans and other animal species：is hepatitis E a zoonosis？［J］．J Hepatol，2000，33（5）：842－845．

［21］丁 福，孟繼鴻，張?zhí)m芳，等．與人類關(guān)系密切的7種動物對戊型肝炎病毒易感性的初步研究［J］．中國人獸共患病雜志，2004，20（1）：52－55．

［22］桑志迪．上海地區(qū)寵物犬戊型肝炎流行病學研究［D］．上海：上海交通大學農(nóng)業(yè)與生物學院，2008．

［23］Masaharu T，Tsutomu N，Haruko M，et al．Swine hepatitis E virus strains in Janpan from phylogenetic clusters comparable with those of Japanese isolate of human hepatitis E virus［J］．J Gen Virol，2003，84：851－862．

（責任編輯：馮 衛(wèi)）

Seroepidemiological Survey on Hepatitis E Virus Infection of Dogs in Nanjiang Region of Xinjiang

WU Junyuan1，2
（1．Tarim University，Alar，Xinjiang 843300；2．Key Laboratory of Tarim Animal Husbandry Science and Technology，Xinjiang Production ＆Construction Corps，Alar，Xinjiang843300，China）

To evaluate the infection rate of Hepatitis E virus among dogs in Nanjiang Region of Xinjiang and give an scientific reference for HEV prevention，a total of 160dog serum samples collected in Nanjiang Region of Xinjiang were tested by ELISA for the presence of IgG antibodies against hepatitis E virus（HEV），and the positive rate differences were compared based on sample sources，breeds，ages and genders by Chi－square test．The results showed that the total positive rate was 13．13%．21out of 160 subjects were anti－HEV IgG positive，of which 25．46%（14／55）was in rural feeding dog and 6．67% （7／105）was in urban feeding dog，the difference was highly significant（P＜0．01）；According to the ages，the positive rates of over five years，2to 5years and under 2years old dogs were 10．71%，16．84% and 5．41%，respectively，there were significant difference among each age groups（P＜0．05）；According to the breeds，the positive rates of poodle，golden retriever，jinba dog，sheepdog and others were 25．71%，6．52%，7．90%，0%and 18．18%，respectively，the difference was markedly significant（P＜0．01）except golden retriever and jingba dog；According to the genders，there was also a visible difference（P＜0．01）between male dogs（19．77%）and female dogs（5．41%）．The data confirmed that dog HEV was widespread in Nanjiang Region of Xinjiang，public health protection should be strengthened between human and dog．

dog；Hepatitis E virus；epidemiology；ELISA

S829．2；R512．99

A

1001－3601（2016）02－0075－0100－03

2015－11－26；2016－01－17修回

國家自然科學基金項目“新疆南疆地區(qū)綿羊戊型肝炎病毒感染性克隆的構(gòu)建與表達研究”（No．31160513）

武軍元（1980－），男，副教授，博士，從事人獸共患病學研究。E－mail：wjyn－w＠126．com