胃癌組織中Notch1、Jagged1表達(dá)變化及意義

王春斐，李登欣，桂忠娜

(1濰坊醫(yī)學(xué)院，山東濰坊 261053；2濰坊市人民醫(yī)院)

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胃癌組織中Notch1、Jagged1表達(dá)變化及意義

王春斐1，李登欣2，桂忠娜2

(1濰坊醫(yī)學(xué)院，山東濰坊 261053；2濰坊市人民醫(yī)院)

摘要：目的觀察胃癌組織中Notch1及其配體Jagged1的表達(dá)變化，并探討其臨床意義。方法采用免疫組化法檢測26例胃癌組織及其20例相應(yīng)的癌旁正常胃組織中的Notch1、Jagged1蛋白，并分析其與胃癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系。結(jié)果在胃癌組織和癌旁組織中Notch1陽性表達(dá)率分別為38.5%、75.0%，Jagged1陽性表達(dá)率分別為34.6%、80.0%，P均<0.05；Notch1、Jagged1表達(dá)與胃癌有無脈管浸潤、分化程度、浸潤深度有關(guān)(P均<0.05)，而與患者的年齡、性別及腫瘤TNM分期、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān)(P均>0.05)。Spearman相關(guān)性分析顯示，在胃癌組織中Notch1和Jagged1表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.032，P<0.05)。結(jié)論Notch信號信號通路中Notch1受體及其配體Jagged1在胃癌組織中低表達(dá)，二者在胃癌的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用。

關(guān)鍵詞：胃癌；Notch1蛋白；Jagged1蛋白

Notch信號通路是一種進(jìn)化過程中高度保守的信號通路，在胚胎發(fā)育、組織分化、干細(xì)胞干性維持、細(xì)胞增殖及凋亡中起重要作用[1]。近年來，國內(nèi)外研究對Notch通路在胃癌發(fā)生、發(fā)展過程中起促癌還是抑癌作用觀點(diǎn)不一。本研究觀察了Notch通路中Notch1及其配體Jagged1在胃癌組織的表達(dá)，并探討其臨床意義。

1資料與方法

1.1臨床資料選擇2015年4～6月濰坊市人民醫(yī)院行手術(shù)治療且術(shù)后病理證實(shí)的胃癌患者26例，男16例，女10例；年齡41～75歲，平均60.54歲；術(shù)前均未行放療、化療治療。腫瘤細(xì)胞浸潤深度未及漿膜層12例，侵及漿膜層14例；高、中分化腺癌14例，低分化腺癌12例；臨床TNM分期：Ⅰ、Ⅱ期8例，Ⅲ、Ⅳ期18例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移18例，有脈管浸潤8例。術(shù)中取26例患者的胃癌組織及20例患者的癌旁正常組織，離體后經(jīng)甲醛固定、石蠟包埋，-80 ℃冷凍備用。

1.2Notch1、Jagged1檢測方法采用免疫組化法。兔抗人Notch1、Jagged1多克隆抗體購自北京博奧森生物科技有限公司，免疫組化SP9000試劑盒購自北京中山金橋生物科技有限公司，按說明書步驟進(jìn)行操作。用已知標(biāo)準(zhǔn)的Notch1和Jagged1表達(dá)陽性的正常胃組織標(biāo)本作為陽性對照，用PBS代替一抗作為陰性對照，顯微鏡下觀察。細(xì)胞陽性染色程度按無色、淡棕黃色、棕黃色、棕褐色分別計(jì)為0、1、2、3分。隨機(jī)計(jì)數(shù)5個高倍鏡中陽性細(xì)胞的百分比，<5%為0分，5%～<25%為1分，25%～<50%為2分，≥50%為3分。兩項(xiàng)評分之積≥3為陽性表達(dá)，<3為陰性表達(dá)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)數(shù)資料組間比較采用Fisher確切概率法，相關(guān)關(guān)系采用Spearman等級相關(guān)分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1胃癌組織和癌旁組織中Notch1、Jagged1表達(dá)在胃癌組織和癌旁組織中Notch1陽性表達(dá)率分別為38.5%(10/26)、75.0%(15/20)，Jagged1陽性表達(dá)率分別為為34.6%(9/26)、80.0%(16/20)，P均<0.05；Spearman相關(guān)性分析顯示，在胃癌組織中Notch1和Jagged1表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.032，P<0.05)。

2.2 Notch1、Jagged1表達(dá)與胃癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系Notch1、Jaggd1表達(dá)與胃癌患者的性別、年齡及腫瘤TNM分期、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均無關(guān)(P均>0.05)，與腫瘤分化程度、浸潤深度、有無脈管浸潤有關(guān)(P均<0.05)。詳見表1。

3討論

表1　Notch1、Jagged1表達(dá)與胃癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系(例)

在哺乳動物體內(nèi)，目前發(fā)現(xiàn)4種Notch受體(Notch1～4)和5種Notch配體(Delta1、Delta3、Delta4、Jagged1和Jagged2)[2]。Notch是一種跨膜受體，成熟的Notch分子是由胞外域和跨膜區(qū)/胞內(nèi)域2個亞基組成的異三聚體。Notch胞外區(qū)在與其配體結(jié)合后，通過調(diào)節(jié)細(xì)胞間相互作用而激活Notch，經(jīng)過3次裂解產(chǎn)生Nicdn，其為Notch的活化形式[3]。Notch1與腫瘤的關(guān)系最早于1991年在人類T淋巴細(xì)胞白血病中被確定，隨后發(fā)現(xiàn)染色體易位t(7；9)(q34；q3403)使位于9號染色體的Notch1基因斷裂并導(dǎo)致Notch1胞外區(qū)丟失，使胞內(nèi)區(qū)獲得活性而表現(xiàn)出致癌作用[4]。Jagged1是Notch的主要配體之一，Notch1與Jagged1共同參與組織生長發(fā)育的調(diào)控。Jagged1與Notch1的胞外域結(jié)合后觸發(fā)Notch信號通路，通過HES-1、Deltax和NF-κB等轉(zhuǎn)錄因子參與調(diào)節(jié)靶基因的轉(zhuǎn)錄[5]。

本研究結(jié)果顯示，Notch1、Jagged1在胃癌組織的陽性表達(dá)明顯低于癌旁正常組織，且二者表達(dá)呈正相關(guān)。提示Notch1、Jagged1通過協(xié)同作用對胃癌的發(fā)生起負(fù)性調(diào)控作用，與默娟[6]、勾朝陽等[7]的研究結(jié)果一致。但也有研究顯示，Notch1、Jagged1在胃癌發(fā)展過程中起促癌作用[8，9]。從臨床病理學(xué)分析，Notch1、Jagged1表達(dá)與胃癌有無脈管浸潤、分化程度、浸潤深度有關(guān)，提示Notch1、Jagged1表達(dá)與胃癌患者的臨床預(yù)后密切相關(guān)。值得注意的是，Notch信號通路與腫瘤的關(guān)系極其復(fù)雜。有研究顯示，在不同組織，Notch的作用可能不同，在同一組織腫瘤的不同發(fā)展階段，Notch的作用也可能不同。俞海等[10]報(bào)道，Notch1在宮頸癌早期起促癌作用，而在晚期則起抑癌作用。由于Notch信號通路的共享性及其配體、靶基因的多樣性[11～15]，不能僅由Notch1、Jagged1在胃癌中的表達(dá)情況判斷Notch通路在胃癌組織的增殖、分化中起抑癌還是促癌作用。因此，今后我們應(yīng)全面探討Notch所有配體、受體在胃癌組織中的表達(dá)及其相互作用，可更系統(tǒng)地闡述Notch通路與胃癌的關(guān)系。

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(收稿日期：2016-12-08)

中圖分類號：R735.2

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B

文章編號：1002-266X(2016)10-0040-02

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2016.10.016

通信作者：李登欣(E-mail： Lidengxin0515@sina.com)

基金項(xiàng)目：山東省醫(yī)藥衛(wèi)生科技發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(2014WS0263)。