利用固相萃取和定量濃縮系統(tǒng)富集水中的痕量微囊藻毒素

■田春明

（江蘇省地質(zhì)調(diào)查研究院江蘇南京210018）

利用固相萃取和定量濃縮系統(tǒng)富集水中的痕量微囊藻毒素

■田春明

（江蘇省地質(zhì)調(diào)查研究院江蘇南京210018）

淡水中藍(lán)綠藻屬分泌產(chǎn)生的藍(lán)藻毒素是目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的污染范圍最廣，研究最多的一類藻毒素。其中的微囊藻毒素-LR是目前已知的毒性最強(qiáng)的、急性危害最大的一種淡水藍(lán)藻毒素。全球已經(jīng)發(fā)生了多起有關(guān)藻毒素中毒并引起死亡的事故。近年來淡水藻類污染已成為一個(gè)全球性的環(huán)境問題。

目前各國(guó)飲水中的藻毒素含量標(biāo)準(zhǔn)一般都為微囊藻毒素-LR的含量。世界衛(wèi)生組織（WHO）推薦的飲用水中的藻毒素標(biāo)準(zhǔn)為1.0ug/L，我國(guó)現(xiàn)頒布執(zhí)行的生活飲用水水質(zhì)衛(wèi)生規(guī)范（2001，0.001mg/L）和地表水環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（GB3838-2002。微囊藻毒素-LR，0.001mg/L）都包含了微囊藻毒素的檢測(cè)項(xiàng)目。

本文將Sepex全自動(dòng)固相萃取系統(tǒng)和AdVap定量濃縮系統(tǒng)聯(lián)合用于水中痕量微囊藻毒素的萃取與濃縮，最后用液相色譜進(jìn)行測(cè)定。目的在于驗(yàn)證Sepex全自動(dòng)固相萃取系統(tǒng)分離富集水中痕量污染物的能力，以及AdVap自動(dòng)定量濃縮系統(tǒng)蒸發(fā)濃縮樣品時(shí)依然保持樣品高回收率的能力。

1　所用儀器和條件

（1）Sepex全自動(dòng)固相萃取系（LabTech）；

（2）SPE 47mmC18萃取盤（JT.Baker）；

（3）AdVap定量濃縮系統(tǒng)（LabTech）；

（4）LC600高效液相色譜儀（Labtech）。

2　方法摘要

（1）微囊藻毒素-LR標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：取100ug微囊藻毒素-LR標(biāo)準(zhǔn)樣品，用甲醇溶解并定容至10mL，-20℃保存。此標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液濃度為10ug/mL；

（2）取1L蒸餾水，加微囊藻毒素-LR標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液至1.0 ug/L；

（3）樣品均使用Sepex全自動(dòng)固相萃取系統(tǒng)萃取，方法參照Table1；

（4）萃取液用AdVap濃縮系統(tǒng)進(jìn)行濃縮并定容至1mL，參數(shù)設(shè)置參照Table 2；

（5）用液相色譜測(cè)定。

3　液相色譜條件

色譜柱：Labtech C18（250mm×4.6mm，5um）

流動(dòng)相：甲醇-磷酸鹽緩沖溶液*（57：43）

流速：1.0 mL/min

檢測(cè)波長(zhǎng)：238nm

柱溫：40℃

進(jìn)樣量：20 uL

*磷酸鹽緩沖溶液的配制：用20%（體積分?jǐn)?shù)）的磷酸溶液將0.05mol/L的磷酸二氫鉀溶液調(diào)至pH 3.0。

4　結(jié)果與討論

本實(shí)驗(yàn)選用C18萃取盤用于水中痕量微囊藻毒素-LR的萃取，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如Table3所示。

從上表中的數(shù)據(jù)可以看出，微囊藻毒素-LR的加標(biāo)回收率均在97～100%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.05%。充分證明了Sepex全自動(dòng)固相萃取系統(tǒng)優(yōu)越的性能，具有很好的準(zhǔn)確度和精密度。并且全自動(dòng)SPE可減少溶劑使用量、消除乳狀液形成、減少暴露溶劑機(jī)會(huì)，同時(shí)可提高結(jié)果的回收率和一致性、提高工作效率、降低實(shí)驗(yàn)費(fèi)用。

同時(shí)，AdVap？全自動(dòng)定量濃縮系統(tǒng)集特有的包圍式式加熱器、真空以及氮吹技術(shù)于一體，可快速地對(duì)樣品進(jìn)行濃縮和定量，并能獲得很好的一致性和較高的回收率，即使對(duì)于揮發(fā)性的化合物，也能取得滿意的結(jié)果。并且它特有的疏水膜，可自動(dòng)在線去除樣品中殘留的水分。把繁瑣的干燥、濃縮和定量過程變成快速和方便的簡(jiǎn)單一步。

5　結(jié)論

從上述分析結(jié)果可以看出，采用固相萃取、定量濃縮以及液相色譜分析相結(jié)合的方法，完全能夠滿足水中痕量微囊藻毒素-LR的分析要求。