關(guān)于益陽市某餐館大腸桿菌中毒的調(diào)查報告

羅婕 田雙如 徐波

（長沙醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院 湖南長沙 410219）

關(guān)于益陽市某餐館大腸桿菌中毒的調(diào)查報告

羅婕 田雙如 徐波

（長沙醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院 湖南長沙 410219）

目的：分析益陽市食物中毒案列流行病學(xué)特點及其流行的原因，為今后類似的相關(guān)案列采取針對性的措施提供科學(xué)依據(jù)。方法：針對此次食物中毒案列的調(diào)查進行科學(xué)的分析。結(jié)果：此次食物中毒均為因致病菌感染的食物中毒事件。

大腸桿菌 食物中毒 調(diào)查報告

大腸埃希氏菌類于腸桿菌科，歸屬于埃希菌屬，是人和許多動物腸道中最主要且數(shù)量最多的一種細菌，主要寄生在大腸內(nèi)。它侵入人體一些部位時，起病一般較慢，也可急性起病。輕癥不發(fā)熱，主要癥狀為腹瀉，大便每天3～5次，呈黃色蛋花樣帶奶瓣，量多。病情繼續(xù)發(fā)展則出現(xiàn)發(fā)熱、嘔吐、食欲缺乏、腹脹、中毒性腸麻痹。在出現(xiàn)腸麻痹前腹瀉加重，可出現(xiàn)黏液血便。成人患者常急性起病，有臍周隱痛、腹鳴，偶有里急后重，表現(xiàn)為“痢疾樣”。在食品安全、環(huán)境監(jiān)測、疾病預(yù)防等方面造成了巨大的威脅，對人體健康造成了很大危害。下面我將深入研究一起由于大腸桿菌所引起的食物中毒事件。

1 事件的相關(guān)回顧

2015年，某餐館， 7人聚餐，吃完飯后5-7小時內(nèi)，先后5人發(fā)病。到當天深夜發(fā)病住院人數(shù)4人。發(fā)病者的主要癥狀是為腹瀉，嘔吐、腹脹、并出現(xiàn)發(fā)熱溫度均在38℃以下，少數(shù)病人出現(xiàn)黏液血便。發(fā)病者去益陽市四醫(yī)院采用抗菌相關(guān)治療和輸液補水對癥處理后，患者都痊愈并且無不良預(yù)后表現(xiàn)。

經(jīng)過去餐館調(diào)查，發(fā)現(xiàn)該公司食堂的衛(wèi)生條件差，廚房餐具保存不合格，防蠅防塵設(shè)施不合格，食材也不新鮮，有些食材在餐前一到兩天已經(jīng)買來。經(jīng)過調(diào)差和采訪相關(guān)食堂相關(guān)員工，初步確定是細菌性的食物中毒事件。

2 取樣

2.1 樣品來源： 當天用餐所剩的食物，瘦肉1份，蝦1份，蔬菜1份，餐具2份，以及患者肛拭子1份、糞便樣品3份，共計9份檢樣。將涂抹樣品保存于緩沖蛋白胨肉湯中，其余都放置在無菌袋中冷藏保存。并帶回實驗室檢測。

3 菌種檢測

實驗設(shè)備及材料：冰箱、溫箱、恒溫水浴、顯微鏡、均衡器或乳缽、天平、培養(yǎng)皿、試管、吸管、廣口瓶或三角瓶、載玻片、酒精燈、玻璃珠、試管架。

培養(yǎng)基和試劑：乳糖膽鹽發(fā)酵管G B 4 7 8 9.2 8、乳糖發(fā)酵管GB4789.28、EC肉湯GB4789.28、伊紅美藍瓊脂平板GB4789.28、生理鹽水、磷酸鹽緩沖稀釋液GB4789.28、革蘭氏染色液GB4789.28。

實驗方法：

檢樣稀釋：無菌操作，將9份樣品分別放入225ml滅菌生理鹽水中，玻璃瓶內(nèi)放入適量玻璃珠，經(jīng)充分振蕩后研磨成1：10的均勻稀釋液。固體檢樣選用均感器，以8000-10000r/min，做成1：10均勻稀釋液。用1ml無菌吸管吸取1：10稀釋液1ml，注入含有9ml滅菌生理鹽水中充分混勻，配成1：100稀釋液。另取1ml吸管重復(fù)以上操作。根據(jù)食品衛(wèi)生標準［1］要求估計選擇3個稀釋度，每個接種度稀釋3管。

乳糖發(fā)酵實驗： 將待檢樣品接種于乳糖膽鹽發(fā)酵管內(nèi)，每一個稀釋度接種3管于36+1℃溫箱中培養(yǎng)24+2h，若全部乳糖膽鹽發(fā)酵管都不產(chǎn)氣，則報告為大腸菌群陰性，如有產(chǎn)氣者按下列操作進行。

分離培養(yǎng)：將產(chǎn)氣小管接種于伊紅美籃瓊脂平板上（糞便可接種于EC肉湯管內(nèi)，置入44.5+0.2℃水浴鍋中培養(yǎng)24+2h，如都不產(chǎn)氣則報告為陰性，如產(chǎn)氣則接種于伊紅美籃平板上），置入36+1℃溫箱中培養(yǎng)18-24h，取出，觀察菌落的形態(tài)，同時做革蘭氏染色及證實實驗。

證實實驗：在以上平板中挑取1-2個可疑菌落進行革蘭氏染色，同時接種乳糖發(fā)酵管，置于36+1℃溫箱中培養(yǎng)18-24h，觀察產(chǎn)氣狀況，凡乳糖管產(chǎn)氣且革蘭氏染色為陰性的無芽孢桿菌，方可報告為大腸菌群陽性［2］。

產(chǎn)氣原因：大腸菌群發(fā)酵乳糖產(chǎn)氣；腸球菌與其他革蘭氏陰性菌共同利用乳糖產(chǎn)氣（需要幾日才能進行，如果樣品中原來就有乳糖，就不需要這么長時間）；產(chǎn)芽孢菌發(fā)酵乳糖產(chǎn)氣；大腸菌群或非大腸菌群利用樣品中的葡萄糖或其他糖類物質(zhì)產(chǎn)氣。

4 討論

假設(shè)有30個大腸菌群在1000毫升樣品中。如果按9管法接種，分別接33。3毫升。這樣按照統(tǒng)計學(xué)的方法計算這9管中能有大腸菌群生長的概率，大概只有一管有可能有大腸菌群。如此類推，按一定公式推算出mpn表。陽性管數(shù)就是可能有大腸菌群的管。

大腸菌群陰性的致病菌也不是沒有，如有些氣單胞菌、類志賀鄰單胞菌，也能引起腹瀉。因此大腸菌群陽性不代表樣品中一定有致病菌，但比大腸菌群陰性的樣品有致病菌的概率更高。

5 結(jié)論

這次細菌性中毒事件由于準備不充分未能采集所有的樣品和患者癥狀。有些樣品餐館可能已經(jīng)做了消毒處理。從實驗結(jié)果分析，本次食物中毒事件瘦肉中分離出的可疑菌落，經(jīng)過生化檢測和血清學(xué)檢測，根據(jù)微生物檢驗國家標準《GB 4789.4-2010 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗大腸桿菌檢驗》，可以明確本次食物中毒由大腸桿菌引起。大腸桿菌所引起的食物中毒大多數(shù)發(fā)生在夏秋季節(jié)。大腸桿菌所引起食物中毒主要是在肉奶類較多。預(yù)防大腸桿菌食物中毒首先應(yīng)應(yīng)禁止食用病畜、病禽，注意飲食、飲水衛(wèi)生，對肉、禽、奶、蛋類食品加工，儲存應(yīng)嚴防污染。食用時要煮熟、煮透、存放，加工時生熟食物要分開。相關(guān)的職能部門也要做好監(jiān)督抽查檢查工作。

［1］中國人民共和國衛(wèi)生部.食品安全國家標準食品微生物學(xué)檢驗大腸桿菌檢驗［Z］.2010

［2］.何金林.夏鐵英.國內(nèi)細菌性食物中毒檢驗進展［J］.中國衛(wèi)生檢驗雜志，2015.12（8）：1015-1016.

R599

A

1674-2060（2016）02-0052-01

長沙醫(yī)學(xué)院大學(xué)生創(chuàng)新性項目（醫(yī)教〔2014〕10號）