豬支原體肺炎的流行特點(diǎn)及其防控措施

吳斌

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豬支原體肺炎的流行特點(diǎn)及其防控措施

吳斌

（福建省光澤縣農(nóng)業(yè)局動物疫病預(yù)防控制中心 354100）

豬肺炎支原體病是由豬肺炎支原體感染的一種接觸性慢性呼吸道傳染病。普遍存在不同規(guī)模的養(yǎng)殖場，極大危害養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展。本文簡述了豬支原體肺炎的病原學(xué)特點(diǎn)、流行特點(diǎn)、臨床癥狀、鑒別診斷及其綜合防控措施。

豬支原體肺炎(Mycoplasmal Pneumonia of Swine，MPS)是豬肺炎支原體(Mycoplasma hyopneumoniae，Mhp)所引發(fā)的是一種以氣喘為主要癥狀，以肺部對稱性肉變?yōu)橹饕±碜兓穆?、接觸性呼吸道傳染病，其主要病變特征是融合性支氣管肺炎，尖葉、心葉、中間葉和膈葉前緣呈“肉樣”或者“蝦肉樣”實(shí)質(zhì)性病變，不同年齡、性別、品種的豬均能感染，患病豬大多表現(xiàn)為生長發(fā)育不良，飼料的利用率會大大降低，給養(yǎng)豬的生產(chǎn)效益帶來巨大損失，極大危害養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展。

1 病原學(xué)特點(diǎn)

（1）豬肺炎支原體無細(xì)胞壁，顯微鏡下呈多形態(tài)，有點(diǎn)狀、絲狀、桿狀、球形等形狀，直徑0.2~0.5μm，革蘭氏染色呈陰性，著色不佳，用姬姆薩和瑞特氏染色良好。Mhp是一種介于細(xì)菌和病毒之間，能自行繁殖的原核生物，結(jié)構(gòu)簡單，僅有細(xì)胞膜、核糖體及細(xì)胞核3種細(xì)胞器。外膜是厚度7.5~10nm的三層結(jié)構(gòu)，中層含蠟質(zhì)，內(nèi)外層含有豐富糖類和蛋白質(zhì)，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含有核糖體和染色體DNA。豬肺炎支原體的雙股DNA全長為1070kb。由于染色體DNA中含有較低的G+C含量，被評價為系統(tǒng)發(fā)育上與革蘭陽性菌最為接近，不同于一般基因密碼子含義的支原體。（2）Mhp對外界自然環(huán)境及物理化學(xué)因素的抵抗力不強(qiáng)，隨病豬咳嗽、喘氣排出體外，污染豬舍墻壁、地面、用具、空氣，日光、干燥及常用的消毒藥液，都可在較短時間殺滅病原。Mhp在固體培養(yǎng)基上生長緩慢；在含有水解乳蛋白的豬血清、酵母浸液和組織緩沖液的液體培養(yǎng)基生長時，可以適當(dāng)增加其中營養(yǎng)基質(zhì)含量能促進(jìn)Mhp菌落的繁殖。將病料人工接種乳兔，經(jīng)連續(xù)傳代至600多代后，病原致病力雖變?nèi)?，但仍保持著較良好的免疫原性。菌體的主要抗原物質(zhì)存在于莢膜和細(xì)胞膜。莢膜中含有多種黏附蛋白和黏附相關(guān)蛋白等膜分子，而Mhp致病過程主要是由表面黏附蛋白介導(dǎo)完成的。蛋白質(zhì)與脂質(zhì)是Mhp主要的抗原組成成分，其中膜蛋白是產(chǎn)生免疫反應(yīng)的主要免疫原之一。

2 流行病學(xué)特點(diǎn)

（1）目前，我國大部分養(yǎng)豬主產(chǎn)區(qū)均有豬支原體肺炎發(fā)生和流行，呈現(xiàn)發(fā)病率高、死亡率低特點(diǎn)。本病只感染豬，其他種家畜、動物和人都不感染。不同年齡、性別和品種的豬均可感染發(fā)病。病豬與健康豬直接接觸均可經(jīng)呼吸道感染發(fā)病。病豬和隱性帶菌豬是本病的主要傳染源，很多豬場由于購買種豬或互相買賣，將隱性病豬引入后，造成本病的流行。育肥豬發(fā)病較少，病情較輕，但是乳豬和斷奶仔豬感染率、發(fā)病率和病死率較高。這主要是由于豬在初生長階段時，未免疫接種Mhp疫苗，其母源抗體水平減弱，處于免疫力低狀態(tài)所致，導(dǎo)致豬在初生長階段感染的頻率最高。在哺乳期，該病通過母豬傳給小豬，小豬在6周齡時可能才出現(xiàn)臨床癥狀；其次是懷孕末期和哺乳期的母豬，妊娠后期母豬經(jīng)常急性發(fā)作，死亡率較高。本病一旦傳入后，需要采取積極嚴(yán)密的措施，否則繼發(fā)其他疾病，很難徹底撲滅。（2）本病發(fā)生無明顯的季節(jié)性，一年四季均可發(fā)生，尤其是在氣候多變、陰濕、寒冷的冬春季節(jié)發(fā)病嚴(yán)重，癥狀明顯。因此，氣候變化是影響本病發(fā)生和加劇病情的主要因素之一。此外，不良的飼養(yǎng)管理和衛(wèi)生條件會降低豬只的抵抗力，特別是高密度飼養(yǎng)、通風(fēng)不良、衛(wèi)生條件差的豬場，發(fā)病情況更為嚴(yán)重，導(dǎo)致豬群整體生長速度下降，飼料利用率降低；存在豬圓環(huán)病毒病、豬流感、豬繁殖與呼吸綜合征感染等免疫抑制性疾病以及飼料中霉菌素超標(biāo)等免疫抑制因素的豬場更容易繼發(fā)本病和死亡率明顯上升。

3 臨床癥狀

（1）本病多呈慢性經(jīng)過，主要臨診癥狀為咳嗽和氣喘，體溫、食欲和精神都無明顯變化，隨著病情的發(fā)展，癥狀會表現(xiàn)明顯和加重。早期癥狀咳嗽，多為單聲干咳；中期喘氣，腹式呼吸；后期呼吸急促，次數(shù)增多；重病豬呈犬坐姿勢，張口呼吸，表情痛苦，咳嗽次數(shù)少而沉弱，似有分泌物堵塞，難以咳出；聽診肺部有干性或濕性啰音，呼吸音似拉風(fēng)箱樣；病豬精神委頓，食欲廢絕，體溫可能超過40.5℃，最后可因衰竭窒息而死亡。（2）病理變化主要體現(xiàn)肺門淋巴結(jié)和肺縱膈淋巴結(jié)腫大，在肺心葉、尖葉的背側(cè)和橫膈膜葉的前端肉樣病變，肺部氣管出現(xiàn)卡他性分泌物。病變過程大多從肺心葉開始，初始為點(diǎn)狀或絮狀病變，進(jìn)而逐漸大面積擴(kuò)散成炎性病變及肺氣腫，肺部結(jié)締組織增生、實(shí)質(zhì)性變化，呈現(xiàn)對稱性肉樣病變或?qū)ΨQ性胰腺樣典型病變。

4 鑒別診斷

根據(jù)臨床癥狀和病理變化的特征可做出初步判斷，必要時可做實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)以確診。（1）X線對本病診斷具有重要價值。檢查時，病豬在背腹位肺野中央?yún)^(qū)域的兩心膈角區(qū)域或心臟外圍呈現(xiàn)不規(guī)則大片彌漫性的云絮狀滲出性陰影。（2）通過檢測血清抗體水平可以判斷豬是否患有MPS，其中ELISA檢測方法最為常用。劉茂軍等(2007)選用豬肺炎支原體MhpJ株培養(yǎng)物制備抗原，建立了檢測豬肺炎支原體抗體的間接ELISA方法。結(jié)果顯示，ELISA試驗(yàn)的最佳反應(yīng)條件為：抗原包被濃度為1.5μg/ml，待檢血清的最佳稀釋濃度1:100，2%明膠作封閉液，抗原抗體最佳結(jié)合時間為90min，酶標(biāo)抗體1:10000(體積比)稀釋，最佳作用時間為60min。對136份樣品檢測結(jié)果表明，建立的豬肺炎支原體間接ELISA抗體檢測方法與美國IDEXX公司生產(chǎn)的豬肺炎支原體抗體檢測試劑盒檢測的符合率達(dá)到83.8%，假陰性率8.8%，假陽性率1.5%。祝永琴等(2010)將已構(gòu)建的含有豬肺炎支原體P36基因的酵母表達(dá)質(zhì)粒pPICZα-A-P36在酵母菌X-33里進(jìn)行表達(dá)，并對表達(dá)的蛋白進(jìn)行Western-blotting鑒定。將其作為包被抗原包被酶標(biāo)板，用羊抗豬IgG-HRP作為酶標(biāo)二抗，并分別對抗原濃度、血清稀釋度、酶標(biāo)二抗稀釋度以及作用時間等進(jìn)行了優(yōu)化，最終建立了穩(wěn)定的抗豬肺炎支原體IgG的間接ELISA檢測方法。應(yīng)用該方法檢測豬鼻支原體、豬絮狀支原體、豬圓環(huán)病毒陽性血清等都是陰性，說明該方法具有良好的特異性。批內(nèi)重復(fù)性試驗(yàn)和批間重復(fù)性試驗(yàn)的變異系數(shù)均小于8%，說明該方法具有良好的重復(fù)性。利用該方法檢測豬肺炎支原體活疫苗(168株)免疫豬血清中IgG的動態(tài)變化，結(jié)果表明，免疫豬血清中的IgG在免疫后分泌逐漸增加，直至免疫后8周，而經(jīng)強(qiáng)毒攻毒后抗體滴度明顯增高。（3）分子生物學(xué)診斷方面：逯曉敏等(2010)根據(jù)豬肺炎支原體P36(L-乳酸脫氫酶)全基因序列，建立了豬肺炎支原體套式PCR檢測方法。運(yùn)用該方法豬肺炎支原體不同菌種均能擴(kuò)增出427bp的目的條帶，而其他病原菌未出現(xiàn)特異性擴(kuò)增條帶，最低檢測限度為10個CCU(顏色變化單位)。武昱孜等(2012)根據(jù)豬肺炎支原體(Mhp)P97基因序列設(shè)計(jì)，建立了一種快速檢測Mhp的TaqMan-BHQ熒光定量PCR方法。結(jié)果顯示，該方法特異性良好，與其他病原不發(fā)生交叉反應(yīng)；最低檢測限可達(dá)10copies/μl，敏感性高；不同梯度定量模板的拷貝數(shù)的對數(shù)值與Ct值之間有良好的線性關(guān)系，擴(kuò)增效率為95.85%，重復(fù)性良好。朱鳳瓊等(2012)通過設(shè)計(jì)1對針對16srDNA的引物，建立了該病原的PCR檢測方法，該方法能從標(biāo)準(zhǔn)株和分離株中獲得陽性擴(kuò)增，但不會與其他種類支原體或者是豬呼吸道中的常見微生物發(fā)生交叉反應(yīng)。為證實(shí)擴(kuò)增產(chǎn)物的特異性，對2個PCR產(chǎn)物進(jìn)行純化、測序和序列分析，證實(shí)為肺炎支原體。（4）華利忠等(2013)建立了一個豬場豬肺炎支原體氣溶膠富集及檢測技術(shù)。實(shí)驗(yàn)室模擬采樣的采集效率達(dá)到(37.04±6.43)%，人工感染豬肺炎支原體后7d即在飼養(yǎng)房間的氣溶膠中檢到豬肺炎支原體；2個豬場共11個不同豬舍氣溶膠中豬肺炎支原體檢測結(jié)果均為陽性，檢出率100%。肖國生等(2008)在豬肺炎支原體的16SrRNA、P36和P463個基因內(nèi)設(shè)計(jì)3個靶基因片段，用PCR標(biāo)記Cy3探針，建立了用于檢測和鑒定豬肺炎支原體的檢測芯片。試驗(yàn)結(jié)果顯示，豬肺炎支原體與檢測芯片的3個靶基因(Mhp-16S、Mhp-P46和Mhp-P36)雜交呈陽性，豬鼻支原體只與Mhp-16S靶基因雜交呈陽性，其它所測細(xì)菌和病毒不與檢測芯片的靶基因雜交。檢測芯片的檢測靈敏度和PCR相同，能達(dá)到10pg基因組DNA/50μL標(biāo)記體系或反應(yīng)體系。

5 防治措施

5.1 建立健全的生物安全體系 （1）推行自繁自養(yǎng)及全進(jìn)全出管理模式。規(guī)?；i場盡量堅(jiān)持自繁自養(yǎng)，是長效防控本病的基本策略。一般堅(jiān)持飼養(yǎng)外種雜交品種、外種與本地雜交品種(二元、三元雜交)豬較少發(fā)病，本地品種豬發(fā)病率相對較高。自繁自養(yǎng)本地品種，建議良繁提純過程中要加強(qiáng)檢疫檢驗(yàn)，嚴(yán)格淘汰本病隱性個體，消除源頭疫病隱患。在養(yǎng)殖期末，規(guī)模場務(wù)必執(zhí)行嚴(yán)格的“全進(jìn)全出”制度，因?yàn)樵谪i群育肥過程中有極大的隱性感染風(fēng)險，其產(chǎn)生的排泄物、分泌物等也可能對環(huán)境構(gòu)成污染，必須在全出后實(shí)施到位的糞污、墊料無害化處置，并堅(jiān)持足夠休養(yǎng)期，才能有效控制環(huán)境中病原微生物數(shù)量，從而降低今后飼養(yǎng)豬群的發(fā)病風(fēng)險。（2）做好舍內(nèi)環(huán)境衛(wèi)生和消毒工作：每天早晚清掃舍內(nèi)糞便及舍區(qū)周圍的污染物，規(guī)模豬場3d消毒1次。只有這樣才能最大限度地降低場內(nèi)的病原微生物數(shù)量，從而減少豬肺炎支原體的感染率。（3）加強(qiáng)豬場的日常管理工作：懷孕母豬實(shí)行單圈飼養(yǎng)，斷奶仔豬按窩集中育肥，做到“母豬不見面，仔豬不竄圈”。讓仔豬感染本病只能來自本窩母豬，檢查母豬是否為帶菌母豬或發(fā)病母豬．逐步確定無本病的健康母豬群，使之?dāng)U大為無本病的健康豬場。獸醫(yī)和飼養(yǎng)員平時加強(qiáng)對豬群的觀察，從豬群中檢出早期病豬，一要聽咳嗽，特別注意在夜間、清晨、喂食和運(yùn)動時，豬只有無咳嗽、噴嚏現(xiàn)象，二要查呼吸，豬群休息時注意呼吸次數(shù)和呼吸深度。確定病豬及早挑出并集中隔離飼養(yǎng)，進(jìn)行有效的治療和消毒處理，這是防止擴(kuò)散、迅速控制本病發(fā)展的重要環(huán)節(jié)。

5.2 做到科學(xué)的飼養(yǎng)管理 （1）構(gòu)建適宜養(yǎng)殖環(huán)境條件：一是防止強(qiáng)冷風(fēng)、粉塵、有害氣體、刺激性消毒劑等刺激、損傷豬群呼吸道黏膜。二是豬舍內(nèi)構(gòu)建良性環(huán)境，尤其是仔豬舍，要長期保持“干燥、清潔、無菌”的良性環(huán)境，并在大幅降溫時節(jié)采取保溫措施，主動將仔豬舍內(nèi)溫度控制于25~28℃、相對濕度70%~75%左右；育成豬舍溫度18~22℃、相對濕度65%~70%，如此可以大大降低本病發(fā)病。三是豬舍內(nèi)禁止任何可能攜帶病原的人、其他動物、用具等進(jìn)入，長期堅(jiān)持制度化衛(wèi)生治理、防疫消毒。四是豬群定期驅(qū)除體內(nèi)外寄生蟲，包括蚊蠅、鼠害等均要嚴(yán)格防范，以掐斷中間傳播媒介，降低本病發(fā)病。（2）加強(qiáng)檢疫檢驗(yàn)及源頭凈化：現(xiàn)代規(guī)?；i場引進(jìn)良種種豬(種公豬、種母豬)在所難免，加強(qiáng)引種檢疫檢驗(yàn)及隔離飼養(yǎng)、觀察制度管理，提高本病的檢出率，從源頭上控制本病進(jìn)入本場。養(yǎng)殖場豬群要合理分群、限密飼養(yǎng)，母豬實(shí)行專舍(單圈)飼養(yǎng)，斷奶仔豬、育成豬群、育肥豬群要按照“同窩、同舍、體況基本一致”的原則組群飼養(yǎng)，禁止隨意轉(zhuǎn)舍(欄)、并群，并要加強(qiáng)日常監(jiān)測，定期檢疫檢驗(yàn)，及時隔離、清除可疑患豬另舍飼養(yǎng)，以此凈化豬群、優(yōu)化整群，從而防止本病發(fā)病及蔓延。

5.3 預(yù)防與治療措施 選擇敏感的抗菌藥物脈沖式給藥可減緩疾病的臨床癥狀并避免繼發(fā)感染，尤其是在易感階段用藥，可以收到較好的效果，但是容易導(dǎo)致病原體產(chǎn)生耐藥性。藥物治療的關(guān)鍵是早起用藥。常用的藥物有喹諾酮類、大環(huán)內(nèi)酯類、四環(huán)素類、林可胺類、以卡那霉素類。對病豬實(shí)行注射給藥，尤其是胸腔內(nèi)或肺內(nèi)注射給藥效果比較理想。

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（2016–06–21）

S858.28

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1007-1733(2016)09-0085-03