• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    一株醬醅中耐鹽酵母Meyerozyma guilliermondii的分離鑒定及其揮發(fā)性香氣成分分析

    2016-04-01 03:53:09楊陽(yáng)鄧岳劉彥希劉絨梅金玉蘭楊志榮孫群
    中國(guó)測(cè)試 2016年11期
    關(guān)鍵詞:醬油揮發(fā)性香氣

    楊陽(yáng),鄧岳,劉彥希,劉絨梅,金玉蘭,楊志榮,孫群

    (四川大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院資源微生物與微生物技術(shù)四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,四川成都610065)

    一株醬醅中耐鹽酵母Meyerozyma guilliermondii的分離鑒定及其揮發(fā)性香氣成分分析

    楊陽(yáng),鄧岳,劉彥希,劉絨梅,金玉蘭,楊志榮,孫群

    (四川大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院資源微生物與微生物技術(shù)四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,四川成都610065)

    為篩選具有醬油生產(chǎn)應(yīng)用潛能的微生物菌株,以推動(dòng)傳統(tǒng)產(chǎn)業(yè)與現(xiàn)代發(fā)酵的結(jié)合。從天然曬露法釀制醬油的第3年發(fā)酵醬醅中分離篩選到一株耐鹽酵母3-J15,經(jīng)鑒定為季也蒙畢赤酵母Meyerozyma guilliermondii。選用固相微萃?。瓪庀嗌V質(zhì)譜聯(lián)用(SPME-GC/MS)技術(shù),對(duì)分離株在鹽脅迫及非鹽脅迫條件下代謝產(chǎn)生的揮發(fā)性香氣成分進(jìn)行分離測(cè)定。結(jié)果表明,從酵母3-J15發(fā)酵液中檢測(cè)出包含醛、酮、醇、酸、酯在內(nèi)的10種特征香氣成分,其中主要的揮發(fā)性香氣物質(zhì)為3-甲基-1-丁醇和2-苯基乙醇。綜合已有研究,這些呈香物質(zhì)能夠?yàn)獒u油的特色風(fēng)味帶來(lái)正面影響,因此,酵母Meyerozyma guilliermondii具有進(jìn)一步應(yīng)用于醬油生產(chǎn)的開(kāi)發(fā)潛力。

    季也蒙畢赤酵母;醬油;香氣成分;SPME-GC/MS

    0 引言

    醬油俗稱(chēng)豉油,是起源于中國(guó)的傳統(tǒng)調(diào)味品,它以多種氨基酸鹽復(fù)合物為主體,其香氣物質(zhì)與多種微生物代謝產(chǎn)物(醇、酯、醛、酮、有機(jī)酸、呋喃等)密切相關(guān)[1]。具有悠久歷史的曬露釀制工藝采用天然制曲,菌種多而復(fù)雜,醬油成品滋味鮮美、口味醇厚[2]。雖然產(chǎn)品價(jià)格較高,但由于發(fā)酵啟動(dòng)慢、發(fā)酵周期長(zhǎng)、勞動(dòng)強(qiáng)度大、市場(chǎng)份額低,這項(xiàng)傳統(tǒng)技藝的生存空間已越來(lái)越小,亟待拯救。已有研究表明,醬醅發(fā)酵過(guò)程中的微生物種類(lèi)和數(shù)量繁多,微生物群落結(jié)構(gòu)和相互作用機(jī)理較為復(fù)雜,它們對(duì)于醬油的品質(zhì)及穩(wěn)定性的形成有重要影響。

    酵母菌目前已廣泛應(yīng)用于啤酒、白酒、果汁等飲料的生產(chǎn),其生物合成過(guò)程中會(huì)形成種類(lèi)繁多的香氣物質(zhì),對(duì)產(chǎn)品風(fēng)味影響較大[3]。關(guān)于產(chǎn)香酵母在醬油發(fā)酵中的應(yīng)用研究,目前主要集中在耐鹽酵母Zygosaccharomyces rouxii和Candida versatilis上,前者主要產(chǎn)生乙醇、高級(jí)醇等風(fēng)味物質(zhì)[4],后者能夠生成乙酸乙酯、乳酸乙酯及4-乙基愈創(chuàng)木酚[5],這些產(chǎn)物對(duì)醬油特色風(fēng)味的形成有著重要貢獻(xiàn),已被研究者用于高鹽稀態(tài)發(fā)酵醬油的部分生產(chǎn)中[6]。

    本研究從天然曬露發(fā)酵醬油的新鮮醬醅中篩選增香酵母,并通過(guò)固相微萃?。瓪庀嗌V質(zhì)譜聯(lián)用(SPME-GC/MS)的方法對(duì)其產(chǎn)香性能進(jìn)行初步探究,旨在篩選具有食品開(kāi)發(fā)潛力的酵母菌株,為研究酵母對(duì)醬油風(fēng)味物質(zhì)及質(zhì)量安全的影響奠定基礎(chǔ),同時(shí)為實(shí)現(xiàn)傳統(tǒng)發(fā)酵與現(xiàn)代工藝的產(chǎn)業(yè)化結(jié)合提供參考。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    醬醅樣品由四川省合江縣先市釀造食品有限公司提供,分別采自整個(gè)發(fā)酵過(guò)程中的第0.5,1,2,3,4年,每個(gè)年份的醬醅樣品均來(lái)自于5口不同醬缸(n =25)。醬缸位置的選取遵循隨機(jī)原則,稍作混合后從中心位置取料,保證每一醅料均從不同醬缸的同一位置、同一深度取到。樣品采集后,于4°C保存?zhèn)溆茫⒘⒓催M(jìn)行培養(yǎng)法實(shí)驗(yàn)。

    通用引物對(duì)ITS1/ITS4、NL1/NL4由Invitrogen公司(上海)合成;Premix Taq Version2.0(Loading dye mix),日本Takara公司;DNA Marker(D2000)、酵母DNA提取試劑盒、溶壁酶(Lyticase),北京天根公司;瓊脂糖、氯化鈉、山梨醇、氯霉素、蛋白胨、葡萄糖、酵母浸出粉、瓊脂粉等生化試劑均購(gòu)于成都博瑞克生物技術(shù)有限公司;小麥粉、黃豆粉、2-甲基-3-庚酮,購(gòu)于成都云德科技有限公司。

    PDA培養(yǎng)基(含氯霉素0.1g/L)、YPD、YPDA培養(yǎng)基按文獻(xiàn)[7]配置。發(fā)酵培養(yǎng)基:10 g黃豆粉,2.5 g小麥粉,50 g新鮮醬醅,用緩沖液Na2HPO4/ KH2PO4配置為1 L體系,煮勻攪拌后4層紗布過(guò)濾,pH 5~5.2;根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)分為額外添加150 g/L氯化鈉的鹽脅迫型及不添加氯化鈉的非鹽脅迫型。

    1.2 主要儀器與設(shè)備

    S1000 PCR儀、Wide Mini-Sub Cell GT型水平電泳槽、PowerPac Basic型電泳儀電源、Universal Hood II型凝膠成像系統(tǒng),美國(guó)Bio-rad公司;Legend Micro 21R型高速冷凍離心機(jī),美國(guó)Thermo Fisher Scientific公司;AFZ-1002-U型超純水儀,美國(guó)Aquapro公司;75 μm CAR/PDMS固相微萃取頭、手動(dòng)進(jìn)樣手柄,美國(guó)Supelco公司;DP73型顯微鏡成像系統(tǒng),日本Olympus公司;UV-2450紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)、QP2010 Plus型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀,日本Shimadzu公司。

    1.3 酵母的分離與鑒定

    無(wú)菌操作條件下,取醬醅樣品5 g加至提前裝有玻璃珠的45 mL滅菌生理鹽水中,37℃搖床振搖15 min。取1 mL樣品懸液依次進(jìn)行10倍梯度稀釋?zhuān)x擇合適的稀釋度涂布于含100 g/L氯化鈉的PDA培養(yǎng)基上。于28℃培養(yǎng)72 h后挑選特征性菌落,經(jīng)反復(fù)劃線純化后,接種至相應(yīng)液體培養(yǎng)基進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。提取目的菌株DNA,并使用通用引物ITS1/ITS4和NL1/NL4分別針對(duì)其ITS rDNA序列及26S rDNA D1/D2區(qū)域序列進(jìn)行特異性擴(kuò)增(引物序列如表1所示),PCR反應(yīng)條件為94℃預(yù)變性3 min;94℃變性30 s,55℃退火30 s,72℃延伸1 min,循環(huán)30次;72℃延伸5 min。產(chǎn)物送Invitrogen公司進(jìn)行測(cè)序。

    另對(duì)目的菌株進(jìn)行菌落形態(tài)觀察及顯微形態(tài)觀察。

    表1 PCR引物序列

    1.4 酵母生長(zhǎng)特性的探究

    對(duì)目的酵母生長(zhǎng)的最適pH、最適溫度進(jìn)行探究,并在最適pH、最適溫度、培養(yǎng)基氯化鈉含量為150 g/L的情況下,測(cè)定目的酵母的生長(zhǎng)曲線。

    1.5 酵母發(fā)酵液的制備

    酵母于YPD液體培養(yǎng)基活化,4000 r/min離心,取無(wú)菌生理鹽水反復(fù)洗滌菌體,將1mL,5×106CFU/mL的菌體懸浮液加入到已調(diào)至酵母最適生長(zhǎng)pH的30 mL發(fā)酵培養(yǎng)基中,在最適生長(zhǎng)溫度下120 r/min搖瓶至生長(zhǎng)穩(wěn)定期,適當(dāng)靜置,無(wú)菌條件下過(guò)濾收集發(fā)酵液。

    1.6 SPME-GC/MS

    準(zhǔn)確吸取6 mL發(fā)酵液樣品和20 μL 2-甲基-3-庚酮稀釋液(5 μL/L)于15 mL頂空瓶中,加蓋密封,將已完成老化的萃取頭插入瓶子的頂空部分,于60℃的恒溫水浴中萃取30 min。檢測(cè)時(shí)以未添菌的發(fā)酵培養(yǎng)基為陰性對(duì)照。

    樣品通過(guò)DB-5MS型彈性石英毛細(xì)色譜柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm)進(jìn)行分離;程序升溫條件為起始溫度40℃,以3℃/min升到120℃,保持2 min,再以15℃/min升至250℃,保持2 min;載氣為高純氦氣(1.0 mL/min);分流比10∶1。

    質(zhì)譜采用電子轟擊電離源;電子能量70 eV;離子源溫度230℃;掃描范圍35~350 m/z。

    對(duì)采集到的質(zhì)譜圖利用NIST08和WILEY09譜庫(kù)檢索進(jìn)行組分分析,并用氣相色譜峰面積歸一化計(jì)算出各香氣組分的相對(duì)含量。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 耐鹽產(chǎn)香酵母的分離與鑒定

    經(jīng)過(guò)多次分離純化,從5種不同年份的發(fā)酵醬醅中共分離出酵母30余株,通過(guò)菌落形態(tài)比較及鏡檢觀察,共選出18株酵母進(jìn)行分子鑒定,其中17株被鑒定為Meyerozyma guilliermondii,1株為Candida parapsilosis。

    考慮到Meyerozyma guilliermondii在前人研究中的食品發(fā)酵背景以及Candida parapsilosis為條件致病菌,加之酵母對(duì)產(chǎn)品的增香作用主要集中于大分子物質(zhì)已較大程度上被霉菌分解的發(fā)酵中后期,因此最終選擇了一株從第3年發(fā)酵醬醅中分離得到的酵母3-J15進(jìn)行產(chǎn)香潛能探究。如圖1所示,根據(jù)菌落形態(tài)觀察,酵母3-J15菌落為乳白色,奶油狀,表面光滑,邊緣整齊;光學(xué)顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞呈卵圓形,出芽生殖,無(wú)假菌絲。此酵母在不含鹽的PDA、YPDA培養(yǎng)基上可快速生長(zhǎng),在150 g/L鹽濃度的PDA、YPDA培養(yǎng)基上仍表現(xiàn)出良好的適應(yīng)性。

    圖1 酵母3-J15在YPDA培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)及顯微形態(tài)觀察

    以引物對(duì)ITS1/ITS4和NL1/NL4為擴(kuò)增引物,分別對(duì)菌株DNA的目標(biāo)序列進(jìn)行特異性擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)電泳后在1.5%瓊脂糖凝膠上呈單一條帶,無(wú)非特異擴(kuò)增現(xiàn)象,條帶長(zhǎng)短均約600 bp,如圖2所示。

    圖2 酵母3-J15 PCR產(chǎn)物凝膠電泳圖譜

    將測(cè)序得到的基因序列與NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)中已有序列進(jìn)行BLAST比對(duì),NL1/NL4引物對(duì)擴(kuò)增片段長(zhǎng)604 bp,與GenBank中的Meyerozyma guilliermondii標(biāo)準(zhǔn)株NG_042640相似率達(dá)99%;ITS1/ITS4引物對(duì)擴(kuò)增片段長(zhǎng)611 bp,與Meyerozyma guilliermondii標(biāo)準(zhǔn)株NR_111247的相似率為99%,結(jié)合菌株培養(yǎng)及形態(tài)特征,可初步鑒定3-J15為一株Meyerozyma guilliermondii(也稱(chēng)Pichia guilliermondii),即季也蒙畢赤酵母。

    2.2 酵母的生長(zhǎng)特性

    為了較為全面地了解M.guilliermondii 3-J15的生長(zhǎng)特性,同時(shí)為接下來(lái)的搖瓶發(fā)酵提供實(shí)驗(yàn)依據(jù),對(duì)該菌株在YPD液體培養(yǎng)基中的兩項(xiàng)重要生長(zhǎng)特性進(jìn)行了測(cè)定。如圖3所示,該菌的最適生長(zhǎng)溫度為30℃左右,最適生長(zhǎng)pH范圍較廣,為4~8,鑒于醬醅在實(shí)際發(fā)酵過(guò)程中的pH為5左右,在接下來(lái)的生長(zhǎng)曲線測(cè)定及發(fā)酵培養(yǎng)基配置步驟中均采用pH 5。

    圖3 酵母3-J15的生長(zhǎng)pH及溫度曲線

    在滿(mǎn)足最適溫度、最適pH且培養(yǎng)基中氯化鈉含量為150 g/L的條件下,對(duì)菌株3-J15的生長(zhǎng)情況進(jìn)行了測(cè)定,得到其在26 h內(nèi)的生長(zhǎng)曲線。如圖4所示,經(jīng)1~2 h的適應(yīng)期后,菌株逐漸進(jìn)入對(duì)數(shù)期,生長(zhǎng)旺盛,18 h后進(jìn)入穩(wěn)定期,菌株生長(zhǎng)速率逐漸平穩(wěn),代謝產(chǎn)物積累。

    圖4 酵母3-J15的生長(zhǎng)曲線

    2.3 酵母發(fā)酵液香氣成分的GC-MS分析

    經(jīng)譜庫(kù)檢索及資料分析,酵母3-J15在非鹽脅迫環(huán)境(培養(yǎng)基含鹽量約0.9%,鹽分僅來(lái)自于作為營(yíng)養(yǎng)成分添加的醬醅中本有的氯化鈉)及鹽脅迫環(huán)境(培養(yǎng)基含鹽量約15%,鹽分來(lái)自于醬醅及額外添加的氯化鈉)下發(fā)酵產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物中,主要的揮發(fā)性香氣成分如表2所示。

    鹽脅迫存在與否對(duì)于揮發(fā)性香氣物質(zhì)產(chǎn)生的差異在于當(dāng)培養(yǎng)基中添有150 g/L的氯化鈉時(shí),酵母額外代謝產(chǎn)生2-甲基丁醛、2-甲基丙酸、丁酸丙烯酯,當(dāng)不存在鹽脅迫時(shí),酵母可代謝產(chǎn)生2-丙酸乙烯酯、3-甲基-2-戊酮。已有研究表明,當(dāng)鹽脅迫存在時(shí),埃切假絲酵母分解底物產(chǎn)生乳酸、檸檬酸、琥珀酸的能力增強(qiáng)[8],釀酒酵母糖酵解途徑各支路的代謝產(chǎn)物通量均有所增加,而三羧酸循環(huán)(TCA)中各代謝產(chǎn)物的通量均有所減少[9]。這反映出鹽脅迫能夠?qū)湍干L(zhǎng)代謝中的某些通路造成影響,代謝通量由此發(fā)生改變。可以推測(cè),揮發(fā)性代謝產(chǎn)物的累積同樣會(huì)受到來(lái)自代謝層面的影響,產(chǎn)生本研究結(jié)果中所反映出的這些差異。

    表2 酵母3-J15在鹽脅迫及非鹽脅迫條件的主要揮發(fā)性成分相對(duì)含量%

    而無(wú)論鹽脅迫是否存在,酵母菌株M.guilliermondii 3-J15均能夠通過(guò)代謝產(chǎn)生2-苯基乙醇、3-甲基-1-丁醇、2-甲基丁酸、3-甲基丁酸、丁酸乙酯等香氣成分;其中,2-苯基乙醇和3-甲基-1-丁醇的相對(duì)含量遠(yuǎn)超其余成分,成為發(fā)酵液中主要的揮發(fā)性香氣物質(zhì)。Feng等[10]通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)3-甲基-1-丁醇是高鹽稀態(tài)發(fā)酵醬油中最強(qiáng)烈的香氣活性化合物之一,并證明在產(chǎn)品中添加適量3-甲基-1-丁醇能夠?qū)ζ渥罱K口感貢獻(xiàn)具有正面影響的酸味和焦糖味(p<0.05)。2-苯基乙醇作為酵母菌降解苯丙氨酸的代謝產(chǎn)物[11],具有花草香味和瓜果氣息,已被研究者用作醬油和豆瓣醬等發(fā)酵產(chǎn)品的增香手段[12]。2-甲基丁酸、3-甲基丁酸常見(jiàn)于多種醬油的特征性風(fēng)味成分中[13-14〗],酸可以緩解醬油中的咸味,使各種香味柔和[15]。丁酸乙酯出現(xiàn)在菠蘿[16]、西番蓮[17]等果實(shí)的香氣中,具有典型的甜果香,目前已廣泛應(yīng)用于日化、食用香精生產(chǎn)。

    以上結(jié)果表明,酵母3-J15在15%鹽濃度下生長(zhǎng)良好,并能夠適應(yīng)較廣的pH范圍,同時(shí)可發(fā)酵產(chǎn)生多種提升醬油風(fēng)味的香氣物質(zhì)。Aryuman等[18]曾從泰式醬油的發(fā)酵醅料中分離得到一株M.guilliermondii,它能夠產(chǎn)生谷氨酰胺酶且酶活性在18%高鹽濃度下達(dá)到最大,直接加速了從L-谷氨酰胺生成L-谷氨酸的反應(yīng),對(duì)產(chǎn)品鮮味的呈現(xiàn)具有重要貢獻(xiàn)。鑒于這些特性,本研究篩選得到的酵母3-J15在醬油發(fā)酵的人工高鹽環(huán)境中具有較強(qiáng)的應(yīng)用潛力,值得進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用。

    3 結(jié)束語(yǔ)

    本研究從天然曬露法釀制醬油的第3年發(fā)酵醬醅中分離篩選到一株耐鹽酵母3-J15,經(jīng)鑒定為季也蒙畢赤酵母。綜合前人研究,這株從醬醅中篩選得到的土著菌株代謝產(chǎn)生的多種呈香物質(zhì)能夠?yàn)獒u油的特色風(fēng)味帶來(lái)正面影響,在醬油發(fā)酵的高鹽環(huán)境中具有較強(qiáng)的應(yīng)用潛力,值得進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用,可首先作為培養(yǎng)起始物試用于醬油生產(chǎn)的制曲及發(fā)酵過(guò)程中。

    [1]WEI Q,WANG H,CHEN Z,et al.Profiling of dynamic changes in the microbial community during the soy sauce fermentation process[J].Applied Microbiology&Biotechnology,2013,97(20):9111-9119.

    [2]俞藹琪,季偉民.天然曬露發(fā)酵醬油細(xì)菌數(shù)超標(biāo)的原因[J].上海調(diào)味品,1987(3):18-20.

    [3]付俊淑,莊世文,徐丹丹,等.酵母分離株分子鑒定及其揮發(fā)性香氣成分檢測(cè)分析[J].食品與發(fā)酵工業(yè),2010 (2):44-48.

    [4]徐瑩,姜維,何曉霞.耐鹽性魯氏酵母的研究進(jìn)展[J].中國(guó)釀造,2009(10):1-4.

    [5]王聰,王檬,赫景鈺,等.醬油釀造風(fēng)味菌株T酵母耐鹽機(jī)理的初步研究[J].中國(guó)釀造,2015,34(2):26-30.

    [6]QI W,HOU L H,GUO H L,et al.Effect of salt-tolerant yeast of Candida versatilis and Zygosaccharomyces rouxii on the production of biogenic amines during soy sauce fermentation[J].Journal of the Science of Food&Agriculture,2014,94(8):1537-1542.

    [7]潘汝謙,關(guān)銘芳,徐大高,等.花生黑腐病菌的生物學(xué)特性[J].華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2011,30(6):701-706.

    [8]FENG J,ZHAN X B,WANG D,et al.Identification and analysis of the metabolic functions of a high-salt-tolerant halophilic aromatic yeast Candida etchellsii for soy sauce production[J].World Journal of Microbiology&Biotechnology,2012,28(4):1451-1458.

    [9]李明達(dá),陳霞,韓丹,等.鹽脅迫條件下釀酒酵母的代謝通量分析[J].吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(理學(xué)版),2010,48(4): 699-703.

    [10]FENG Y,YU C,SU G,et al.Evaluation of aroma differences between high-salt liquid-state fermentation and low-salt solid-state fermentation soy sauces from China[J].Food Chemistry,2014,145(145C):126-134.

    [11]李學(xué)偉,陳強(qiáng),朱新貴.添加生香酵母改善醬油風(fēng)味的研究[J].中國(guó)釀造,2014,33(3):121-124.

    [12]XIAO Z B,SUN Z Y,F(xiàn)ENG T,et al.Comparison of Volatile Flavor Components in Four Kinds of Chinese Fermented Black Soybeans(Glycine max(L.)Merrill)by HSSPME-GC/MS and Chemometrics[J].Food Science&Technology Research,2011,17(4):319-326.

    [13]SONG Y R,JEONG D Y,BAIK S H.Effects of indigenous yeasts on physicochemical and microbial properties of Korean soy sauce prepared by low-salt fermentation[J].Food Microbiology,2015(51):171-178.

    [14]STEINHAUS P,SCHIEBERLE P.Characterization of the key aroma compounds in soy sauce using approaches of molecular sensory science[J].Journal of Agricultural&Food Chemistry,2007,55(15):6262-6269.

    [15]張艷芳,陶文沂.兩種發(fā)酵醬油風(fēng)味物質(zhì)的分析研究[J].精細(xì)化工,2008,25(5):486-490.

    [16]劉勝輝,孫偉生,陸新華,等.6個(gè)菠蘿品種成熟果實(shí)香氣成分分析[J].熱帶作物學(xué)報(bào),2015,36(06):1179-1185.

    [17]陳玲,楊文彬,李劍政.海南西番蓮果實(shí)香氣成分研究[J].香料香精化妝品,2001(5):1-4.

    [18]ARYUMAN P,LERTSIRI S,VISESSANGUAN W,et al.Glutaminase-producing Meyerozyma(Pichia)guilliermondii isolated from Thai soy sauce fermentation[J].International Journal of Food Microbiology,2015(192):7-12.

    (編輯:莫婕)

    Molecular identification and analysis of volatile aroma components of a halotolerant yeast,Meyerozyma guilliermondii isolated from soy mash

    YANG Yang,DENG Yue,LIU Yanxi,LIU Rongmei,JIN Yulan,YANG Zhirong,SUN Qun
    (Sichuan Key Laboratory of Resource Microbiological and Biotechnology,College of Life Sciences,Sichuan University,Chengdu 610065,China)

    In order to screening microorganisms which have the potential for further application in soy sauce production from the natural sun-brewed fermentation to promote the combination of traditional and modern industry.In this study,a halotolerant aroma-producing strain 3-J15 was isolated from the soy mash of the 3rdyear fermented by natural sun-brewed manufacturing,which was identified as Meyerozyma guilliermondii.The metabolites of 3-J15 in a given growing environment with or without salt stress were further analyzed by solid-phase micro-extraction coupled with gas chromatography/mass spectrometry (SPME-GC/MS).A general volatile profile of 10 characteristic aromatic substances including aldehyde,ketone,alcohol,organic acid and ester was obtained.Among them,the major volatile compounds were 3-methyl-1-butanol and 2-phenylethanol.Combined with the previous studies,these aromatic substances were deemed contributive to have a positive impact on the characteristic flavor of soy sauce.Therefore,this strain of Meyerozyma guilliermondii has the potential for further application in soy sauce production.

    Meyerozyma guilliermondii;soy sauce;aroma components;SPME-GC/MS

    A

    1674-5124(2016)11-0055-05

    10.11857/j.issn.1674-5124.2016.11.012

    2016-06-09;

    2016-08-01

    川大-瀘州科技合作項(xiàng)目(2014CDLZ-S09)

    楊陽(yáng)(1992-),女,四川自貢市人,碩士研究生,專(zhuān)業(yè)方向?yàn)楣I(yè)微生物。

    孫群(1967-),女,教授,博士,研究方向?yàn)槲⑸锛夹g(shù)與食品安全。

    猜你喜歡
    醬油揮發(fā)性香氣
    鈰基催化劑在揮發(fā)性有機(jī)物催化燃燒治理中的研究進(jìn)展
    分子催化(2022年1期)2022-11-02 07:11:20
    揮發(fā)性有機(jī)物污染環(huán)保治理新思路的探討
    春日香氣
    買(mǎi)醬油
    香氣鎖定狙擊心中的他
    Coco薇(2017年8期)2017-08-03 20:46:09
    買(mǎi)醬油
    故事大王(2016年10期)2016-11-07 15:30:12
    與生活自然為伍的夏日香氣
    Coco薇(2016年8期)2016-10-09 02:08:33
    買(mǎi)醬油
    吹掃捕集-氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用測(cè)定水中18種揮發(fā)性有機(jī)物
    我把醬油打回來(lái)啦
    伦理电影大哥的女人| 午夜免费观看性视频| 国产黄a三级三级三级人| 久久热精品热| 国产探花在线观看一区二区| 国产精品伦人一区二区| 性色avwww在线观看| 久久99热这里只频精品6学生| 男女下面进入的视频免费午夜| 亚洲一区二区三区欧美精品 | 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 99久久精品一区二区三区| 亚洲人成网站在线播| 久久久久网色| 日韩成人av中文字幕在线观看| 久久人人爽人人爽人人片va| 国产真实伦视频高清在线观看| 2021天堂中文幕一二区在线观| av.在线天堂| 国产伦理片在线播放av一区| 国产欧美日韩精品一区二区| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 一本色道久久久久久精品综合| 波野结衣二区三区在线| 国产一区有黄有色的免费视频| 久久精品夜色国产| 最近手机中文字幕大全| 国产精品久久久久久精品电影| 欧美日韩视频精品一区| 欧美精品一区二区大全| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 男人添女人高潮全过程视频| 日本一本二区三区精品| 国产成人精品久久久久久| 成人欧美大片| 夜夜爽夜夜爽视频| 午夜免费男女啪啪视频观看| 亚洲,欧美,日韩| 日韩,欧美,国产一区二区三区| av在线亚洲专区| 国产伦在线观看视频一区| 一个人看的www免费观看视频| 插逼视频在线观看| 日本-黄色视频高清免费观看| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 亚洲精品日韩av片在线观看| 国产精品成人在线| 少妇被粗大猛烈的视频| 在线观看三级黄色| 国产精品爽爽va在线观看网站| 午夜福利视频精品| 最近的中文字幕免费完整| 免费在线观看成人毛片| 直男gayav资源| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 免费看光身美女| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 麻豆久久精品国产亚洲av| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 在线观看美女被高潮喷水网站| 国产中年淑女户外野战色| 日韩视频在线欧美| 国产精品.久久久| 中文天堂在线官网| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 国产免费一区二区三区四区乱码| 老司机影院成人| 久久久久精品性色| 男人狂女人下面高潮的视频| 国产精品伦人一区二区| 亚洲国产成人一精品久久久| 午夜精品国产一区二区电影 | 国产高清不卡午夜福利| 1000部很黄的大片| 少妇被粗大猛烈的视频| 久久人人爽人人爽人人片va| 91久久精品国产一区二区成人| 国产老妇伦熟女老妇高清| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 成人美女网站在线观看视频| 亚洲性久久影院| 一个人看的www免费观看视频| 免费观看在线日韩| 精品人妻偷拍中文字幕| 神马国产精品三级电影在线观看| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 亚州av有码| 超碰av人人做人人爽久久| 国产免费一区二区三区四区乱码| 又爽又黄无遮挡网站| 久热这里只有精品99| 99久久九九国产精品国产免费| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 精品酒店卫生间| 国产精品成人在线| 男的添女的下面高潮视频| 亚洲av中文av极速乱| www.色视频.com| 搡老乐熟女国产| 国内精品宾馆在线| 香蕉精品网在线| 青春草视频在线免费观看| 国产精品99久久久久久久久| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 精品国产露脸久久av麻豆| 久久久午夜欧美精品| 91aial.com中文字幕在线观看| 国产成人精品婷婷| av在线播放精品| 简卡轻食公司| 在线亚洲精品国产二区图片欧美 | 日韩成人伦理影院| 寂寞人妻少妇视频99o| eeuss影院久久| 成人国产av品久久久| 欧美 日韩 精品 国产| 亚洲在线观看片| 欧美变态另类bdsm刘玥| 日韩国内少妇激情av| 身体一侧抽搐| 男女下面进入的视频免费午夜| 欧美精品国产亚洲| 校园人妻丝袜中文字幕| 深爱激情五月婷婷| 国产精品熟女久久久久浪| 亚洲av不卡在线观看| 日日啪夜夜爽| 亚洲丝袜综合中文字幕| 国产毛片在线视频| 在线看a的网站| 日本wwww免费看| 男女国产视频网站| 午夜福利视频1000在线观看| 韩国高清视频一区二区三区| 亚洲图色成人| 免费少妇av软件| 亚洲,欧美,日韩| 中文天堂在线官网| 99热网站在线观看| a级毛片免费高清观看在线播放| 久久国内精品自在自线图片| 下体分泌物呈黄色| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 国产精品人妻久久久久久| 成人亚洲欧美一区二区av| 日韩一本色道免费dvd| 丰满人妻一区二区三区视频av| 国产黄a三级三级三级人| 午夜免费鲁丝| av女优亚洲男人天堂| 高清在线视频一区二区三区| 丝袜喷水一区| 欧美变态另类bdsm刘玥| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 深夜a级毛片| 国产一区二区在线观看日韩| 午夜免费鲁丝| 日日摸夜夜添夜夜爱| 午夜老司机福利剧场| 99热6这里只有精品| 性色av一级| 精品视频人人做人人爽| 91精品一卡2卡3卡4卡| 一个人看的www免费观看视频| 精品熟女少妇av免费看| 深夜a级毛片| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 69av精品久久久久久| 性色av一级| 91精品一卡2卡3卡4卡| 男的添女的下面高潮视频| 精品国产乱码久久久久久小说| 亚洲av.av天堂| 一级二级三级毛片免费看| 国模一区二区三区四区视频| 午夜精品国产一区二区电影 | 边亲边吃奶的免费视频| 搡女人真爽免费视频火全软件| 欧美高清性xxxxhd video| 别揉我奶头 嗯啊视频| 久久久久九九精品影院| 午夜爱爱视频在线播放| 国产久久久一区二区三区| 伊人久久精品亚洲午夜| 亚洲av.av天堂| 欧美xxxx性猛交bbbb| 亚洲国产日韩一区二区| 国产黄a三级三级三级人| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 亚洲色图综合在线观看| 日韩一区二区视频免费看| 26uuu在线亚洲综合色| 午夜福利视频精品| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 大片电影免费在线观看免费| 直男gayav资源| 91午夜精品亚洲一区二区三区| av在线播放精品| av在线app专区| 欧美精品一区二区大全| 99九九线精品视频在线观看视频| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 22中文网久久字幕| 久久99热这里只频精品6学生| 男女那种视频在线观看| 街头女战士在线观看网站| 男插女下体视频免费在线播放| 日韩成人伦理影院| 日韩av免费高清视频| 一级av片app| 国内精品美女久久久久久| 视频中文字幕在线观看| 久久久久久久亚洲中文字幕| 五月伊人婷婷丁香| 在线免费观看不下载黄p国产| 国产精品.久久久| 欧美少妇被猛烈插入视频| 亚洲av在线观看美女高潮| 22中文网久久字幕| 99久久精品国产国产毛片| 国产毛片在线视频| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 亚洲欧美日韩东京热| 久久久国产一区二区| 久久久久久久大尺度免费视频| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 一二三四中文在线观看免费高清| 久久久欧美国产精品| 久久99热这里只有精品18| 亚洲精品成人av观看孕妇| 波野结衣二区三区在线| 久久久久久久精品精品| a级一级毛片免费在线观看| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 97精品久久久久久久久久精品| 成人亚洲欧美一区二区av| 青春草亚洲视频在线观看| 中文在线观看免费www的网站| 亚洲欧美精品专区久久| 黄色视频在线播放观看不卡| 少妇高潮的动态图| av在线天堂中文字幕| 男女那种视频在线观看| 少妇人妻 视频| 久久久久国产精品人妻一区二区| 99视频精品全部免费 在线| 婷婷色麻豆天堂久久| 国产高清有码在线观看视频| 熟女av电影| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 午夜福利高清视频| 最近手机中文字幕大全| 网址你懂的国产日韩在线| 亚州av有码| 中文字幕制服av| 亚洲一区二区三区欧美精品 | 亚洲av国产av综合av卡| 一级毛片我不卡| 国产成人freesex在线| 高清av免费在线| 久久精品国产亚洲av天美| 一区二区三区精品91| 2021少妇久久久久久久久久久| 亚洲最大成人中文| 视频中文字幕在线观看| 91精品一卡2卡3卡4卡| 亚洲自偷自拍三级| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 久久国产乱子免费精品| 人妻系列 视频| 成年女人看的毛片在线观看| 一区二区三区免费毛片| 五月开心婷婷网| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 欧美日韩亚洲高清精品| 日韩一本色道免费dvd| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 一个人看视频在线观看www免费| 男女边吃奶边做爰视频| 联通29元200g的流量卡| 各种免费的搞黄视频| 中文字幕制服av| 亚洲真实伦在线观看| 亚洲最大成人手机在线| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 青春草国产在线视频| 欧美xxⅹ黑人| 性色avwww在线观看| 亚洲国产日韩一区二区| 69人妻影院| 熟女av电影| 亚洲欧洲日产国产| 秋霞伦理黄片| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 极品少妇高潮喷水抽搐| 国产精品久久久久久精品电影| 欧美日韩亚洲高清精品| 五月伊人婷婷丁香| 亚洲精品456在线播放app| 亚洲精品自拍成人| 久久久久网色| 麻豆久久精品国产亚洲av| 日韩欧美精品免费久久| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 一级片'在线观看视频| 又爽又黄a免费视频| 少妇被粗大猛烈的视频| 国产精品蜜桃在线观看| 美女主播在线视频| 18禁动态无遮挡网站| 国产极品天堂在线| 亚洲精品第二区| 国产高潮美女av| 99久久精品国产国产毛片| av福利片在线观看| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 天天一区二区日本电影三级| 久久精品久久精品一区二区三区| 天天一区二区日本电影三级| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 五月开心婷婷网| 嫩草影院新地址| 国产伦理片在线播放av一区| 一级毛片久久久久久久久女| 搞女人的毛片| 视频中文字幕在线观看| 天天一区二区日本电影三级| 亚洲,一卡二卡三卡| 久久久久久久久久成人| 久久综合国产亚洲精品| 特级一级黄色大片| 视频中文字幕在线观看| 亚洲最大成人中文| 丝袜美腿在线中文| 久久女婷五月综合色啪小说 | 免费看不卡的av| 国国产精品蜜臀av免费| 国产又色又爽无遮挡免| 亚洲最大成人av| 可以在线观看毛片的网站| av又黄又爽大尺度在线免费看| 中文在线观看免费www的网站| www.色视频.com| 高清毛片免费看| 五月伊人婷婷丁香| 亚洲人成网站在线播| 精品久久久久久久久亚洲| 国产69精品久久久久777片| 久久99精品国语久久久| 韩国高清视频一区二区三区| 欧美日韩视频精品一区| 欧美极品一区二区三区四区| 一区二区av电影网| 久久精品国产a三级三级三级| 国内揄拍国产精品人妻在线| 欧美极品一区二区三区四区| 一区二区av电影网| 中文在线观看免费www的网站| 免费av毛片视频| 内地一区二区视频在线| 美女国产视频在线观看| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 99热网站在线观看| 国产高清三级在线| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 国产色婷婷99| 久久久久久国产a免费观看| 久久这里有精品视频免费| 一级a做视频免费观看| 秋霞伦理黄片| 久久影院123| 日韩成人伦理影院| 免费观看性生交大片5| 国产一区二区三区综合在线观看 | 久久久久久久国产电影| 精品国产三级普通话版| 亚洲国产精品国产精品| 我的女老师完整版在线观看| 久久久久久久亚洲中文字幕| 有码 亚洲区| 日韩一区二区视频免费看| 97在线视频观看| 人人妻人人看人人澡| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 国产欧美日韩精品一区二区| 国产视频首页在线观看| av在线亚洲专区| 18禁在线播放成人免费| 黄色配什么色好看| av卡一久久| 亚洲经典国产精华液单| 亚洲精品国产av成人精品| 插逼视频在线观看| 麻豆成人午夜福利视频| 久久精品人妻少妇| 成年免费大片在线观看| eeuss影院久久| 九九爱精品视频在线观看| 99久久精品热视频| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 亚洲精品乱久久久久久| 日韩欧美一区视频在线观看 | 亚洲精品乱久久久久久| 欧美潮喷喷水| 国产视频首页在线观看| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 少妇人妻 视频| 丝瓜视频免费看黄片| 精品国产三级普通话版| 国产69精品久久久久777片| 91久久精品电影网| 免费在线观看成人毛片| 看非洲黑人一级黄片| 熟妇人妻不卡中文字幕| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 看非洲黑人一级黄片| 日本三级黄在线观看| 成人国产av品久久久| 精品一区在线观看国产| 十八禁网站网址无遮挡 | 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 各种免费的搞黄视频| 青春草视频在线免费观看| a级毛片免费高清观看在线播放| 免费看光身美女| 久久韩国三级中文字幕| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 人妻少妇偷人精品九色| 一区二区三区精品91| 欧美 日韩 精品 国产| 国产精品av视频在线免费观看| 免费黄频网站在线观看国产| 97在线视频观看| 国产成人一区二区在线| 国产精品久久久久久av不卡| 国内精品美女久久久久久| 亚洲人与动物交配视频| 日本色播在线视频| videos熟女内射| xxx大片免费视频| 亚洲人成网站在线观看播放| 色视频在线一区二区三区| 超碰97精品在线观看| 久久热精品热| 国产v大片淫在线免费观看| 男女下面进入的视频免费午夜| 乱码一卡2卡4卡精品| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91 | 国产色爽女视频免费观看| 高清av免费在线| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 色播亚洲综合网| 全区人妻精品视频| 国产精品福利在线免费观看| 久久久成人免费电影| 高清午夜精品一区二区三区| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 日韩亚洲欧美综合| 人人妻人人看人人澡| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 亚洲丝袜综合中文字幕| 国产精品三级大全| 国产伦精品一区二区三区四那| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| a级一级毛片免费在线观看| 激情五月婷婷亚洲| 亚洲人成网站在线观看播放| 大码成人一级视频| 亚洲天堂国产精品一区在线| 一区二区av电影网| 极品少妇高潮喷水抽搐| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 美女视频免费永久观看网站| 亚洲天堂av无毛| 最近2019中文字幕mv第一页| 亚洲av中文av极速乱| 男男h啪啪无遮挡| 欧美最新免费一区二区三区| 久久6这里有精品| 少妇高潮的动态图| av国产久精品久网站免费入址| 人体艺术视频欧美日本| 日韩免费高清中文字幕av| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 日本黄大片高清| 丝袜脚勾引网站| 边亲边吃奶的免费视频| 国产淫片久久久久久久久| 久久精品人妻少妇| 色视频www国产| 日本色播在线视频| 亚洲精品中文字幕在线视频 | 欧美3d第一页| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 国产一级毛片在线| 26uuu在线亚洲综合色| 极品少妇高潮喷水抽搐| 国产一区亚洲一区在线观看| 精品一区二区三卡| 精品久久国产蜜桃| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 亚洲欧洲日产国产| 欧美97在线视频| 久久久国产一区二区| 青春草视频在线免费观看| 夫妻午夜视频| 国产精品国产av在线观看| 欧美一区二区亚洲| 久久鲁丝午夜福利片| 91在线精品国自产拍蜜月| 亚洲无线观看免费| 国产av国产精品国产| 天天一区二区日本电影三级| 毛片一级片免费看久久久久| 欧美区成人在线视频| 亚洲av免费高清在线观看| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 插阴视频在线观看视频| 日本-黄色视频高清免费观看| 国产成人aa在线观看| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 中文字幕亚洲精品专区| 黄片无遮挡物在线观看| 亚洲国产成人一精品久久久| 26uuu在线亚洲综合色| 国产色爽女视频免费观看| 亚州av有码| 午夜视频国产福利| 校园人妻丝袜中文字幕| 免费大片黄手机在线观看| 亚洲av一区综合| 亚洲国产精品999| 国产精品女同一区二区软件| 亚洲国产精品999| 国产av国产精品国产| 熟女电影av网| 最近2019中文字幕mv第一页| 日韩av在线免费看完整版不卡| 99热全是精品| 91aial.com中文字幕在线观看| 午夜精品国产一区二区电影 | 欧美成人一区二区免费高清观看| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 男人和女人高潮做爰伦理| 日本黄大片高清| 亚洲av免费高清在线观看| 寂寞人妻少妇视频99o| 乱系列少妇在线播放| 在线观看av片永久免费下载| 日韩 亚洲 欧美在线| 日日啪夜夜撸| 亚洲精品第二区| 国产精品偷伦视频观看了| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 免费观看的影片在线观看| 国内精品美女久久久久久| 熟女人妻精品中文字幕| 蜜臀久久99精品久久宅男| 成人二区视频| 国内揄拍国产精品人妻在线| 超碰97精品在线观看| 日本黄大片高清| 成年人午夜在线观看视频| 亚洲av欧美aⅴ国产| 插阴视频在线观看视频| 久久久久久九九精品二区国产| 中文字幕亚洲精品专区| 激情五月婷婷亚洲| 国产有黄有色有爽视频| 国产一级毛片在线| 男女边吃奶边做爰视频| 国产老妇女一区| 免费看日本二区| 2018国产大陆天天弄谢| 老司机影院毛片| 欧美丝袜亚洲另类| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 国产精品99久久99久久久不卡 | 18+在线观看网站| 99久久精品国产国产毛片| 看非洲黑人一级黄片| 看黄色毛片网站| 免费观看的影片在线观看| 国产一区二区在线观看日韩| 人人妻人人看人人澡| 免费观看的影片在线观看| 美女主播在线视频| 国产精品国产av在线观看| 99久久精品国产国产毛片| 26uuu在线亚洲综合色| 97超碰精品成人国产| 大香蕉97超碰在线| 日韩中字成人| 波多野结衣巨乳人妻| 美女cb高潮喷水在线观看| 少妇丰满av| 欧美日本视频| 亚洲av免费高清在线观看| 亚洲av成人精品一二三区| 人妻一区二区av| 国产精品一区www在线观看| 99久久中文字幕三级久久日本| 亚洲国产日韩一区二区| 秋霞在线观看毛片| 亚洲av福利一区| av福利片在线观看| 国产精品伦人一区二区| 男女国产视频网站| 国产免费福利视频在线观看|