• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    一株醬醅中耐鹽酵母Meyerozyma guilliermondii的分離鑒定及其揮發(fā)性香氣成分分析

    2016-04-01 03:53:09楊陽(yáng)鄧岳劉彥希劉絨梅金玉蘭楊志榮孫群
    中國(guó)測(cè)試 2016年11期
    關(guān)鍵詞:醬油揮發(fā)性香氣

    楊陽(yáng),鄧岳,劉彥希,劉絨梅,金玉蘭,楊志榮,孫群

    (四川大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院資源微生物與微生物技術(shù)四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,四川成都610065)

    一株醬醅中耐鹽酵母Meyerozyma guilliermondii的分離鑒定及其揮發(fā)性香氣成分分析

    楊陽(yáng),鄧岳,劉彥希,劉絨梅,金玉蘭,楊志榮,孫群

    (四川大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院資源微生物與微生物技術(shù)四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,四川成都610065)

    為篩選具有醬油生產(chǎn)應(yīng)用潛能的微生物菌株,以推動(dòng)傳統(tǒng)產(chǎn)業(yè)與現(xiàn)代發(fā)酵的結(jié)合。從天然曬露法釀制醬油的第3年發(fā)酵醬醅中分離篩選到一株耐鹽酵母3-J15,經(jīng)鑒定為季也蒙畢赤酵母Meyerozyma guilliermondii。選用固相微萃?。瓪庀嗌V質(zhì)譜聯(lián)用(SPME-GC/MS)技術(shù),對(duì)分離株在鹽脅迫及非鹽脅迫條件下代謝產(chǎn)生的揮發(fā)性香氣成分進(jìn)行分離測(cè)定。結(jié)果表明,從酵母3-J15發(fā)酵液中檢測(cè)出包含醛、酮、醇、酸、酯在內(nèi)的10種特征香氣成分,其中主要的揮發(fā)性香氣物質(zhì)為3-甲基-1-丁醇和2-苯基乙醇。綜合已有研究,這些呈香物質(zhì)能夠?yàn)獒u油的特色風(fēng)味帶來(lái)正面影響,因此,酵母Meyerozyma guilliermondii具有進(jìn)一步應(yīng)用于醬油生產(chǎn)的開(kāi)發(fā)潛力。

    季也蒙畢赤酵母;醬油;香氣成分;SPME-GC/MS

    0 引言

    醬油俗稱(chēng)豉油,是起源于中國(guó)的傳統(tǒng)調(diào)味品,它以多種氨基酸鹽復(fù)合物為主體,其香氣物質(zhì)與多種微生物代謝產(chǎn)物(醇、酯、醛、酮、有機(jī)酸、呋喃等)密切相關(guān)[1]。具有悠久歷史的曬露釀制工藝采用天然制曲,菌種多而復(fù)雜,醬油成品滋味鮮美、口味醇厚[2]。雖然產(chǎn)品價(jià)格較高,但由于發(fā)酵啟動(dòng)慢、發(fā)酵周期長(zhǎng)、勞動(dòng)強(qiáng)度大、市場(chǎng)份額低,這項(xiàng)傳統(tǒng)技藝的生存空間已越來(lái)越小,亟待拯救。已有研究表明,醬醅發(fā)酵過(guò)程中的微生物種類(lèi)和數(shù)量繁多,微生物群落結(jié)構(gòu)和相互作用機(jī)理較為復(fù)雜,它們對(duì)于醬油的品質(zhì)及穩(wěn)定性的形成有重要影響。

    酵母菌目前已廣泛應(yīng)用于啤酒、白酒、果汁等飲料的生產(chǎn),其生物合成過(guò)程中會(huì)形成種類(lèi)繁多的香氣物質(zhì),對(duì)產(chǎn)品風(fēng)味影響較大[3]。關(guān)于產(chǎn)香酵母在醬油發(fā)酵中的應(yīng)用研究,目前主要集中在耐鹽酵母Zygosaccharomyces rouxii和Candida versatilis上,前者主要產(chǎn)生乙醇、高級(jí)醇等風(fēng)味物質(zhì)[4],后者能夠生成乙酸乙酯、乳酸乙酯及4-乙基愈創(chuàng)木酚[5],這些產(chǎn)物對(duì)醬油特色風(fēng)味的形成有著重要貢獻(xiàn),已被研究者用于高鹽稀態(tài)發(fā)酵醬油的部分生產(chǎn)中[6]。

    本研究從天然曬露發(fā)酵醬油的新鮮醬醅中篩選增香酵母,并通過(guò)固相微萃?。瓪庀嗌V質(zhì)譜聯(lián)用(SPME-GC/MS)的方法對(duì)其產(chǎn)香性能進(jìn)行初步探究,旨在篩選具有食品開(kāi)發(fā)潛力的酵母菌株,為研究酵母對(duì)醬油風(fēng)味物質(zhì)及質(zhì)量安全的影響奠定基礎(chǔ),同時(shí)為實(shí)現(xiàn)傳統(tǒng)發(fā)酵與現(xiàn)代工藝的產(chǎn)業(yè)化結(jié)合提供參考。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    醬醅樣品由四川省合江縣先市釀造食品有限公司提供,分別采自整個(gè)發(fā)酵過(guò)程中的第0.5,1,2,3,4年,每個(gè)年份的醬醅樣品均來(lái)自于5口不同醬缸(n =25)。醬缸位置的選取遵循隨機(jī)原則,稍作混合后從中心位置取料,保證每一醅料均從不同醬缸的同一位置、同一深度取到。樣品采集后,于4°C保存?zhèn)溆茫⒘⒓催M(jìn)行培養(yǎng)法實(shí)驗(yàn)。

    通用引物對(duì)ITS1/ITS4、NL1/NL4由Invitrogen公司(上海)合成;Premix Taq Version2.0(Loading dye mix),日本Takara公司;DNA Marker(D2000)、酵母DNA提取試劑盒、溶壁酶(Lyticase),北京天根公司;瓊脂糖、氯化鈉、山梨醇、氯霉素、蛋白胨、葡萄糖、酵母浸出粉、瓊脂粉等生化試劑均購(gòu)于成都博瑞克生物技術(shù)有限公司;小麥粉、黃豆粉、2-甲基-3-庚酮,購(gòu)于成都云德科技有限公司。

    PDA培養(yǎng)基(含氯霉素0.1g/L)、YPD、YPDA培養(yǎng)基按文獻(xiàn)[7]配置。發(fā)酵培養(yǎng)基:10 g黃豆粉,2.5 g小麥粉,50 g新鮮醬醅,用緩沖液Na2HPO4/ KH2PO4配置為1 L體系,煮勻攪拌后4層紗布過(guò)濾,pH 5~5.2;根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)分為額外添加150 g/L氯化鈉的鹽脅迫型及不添加氯化鈉的非鹽脅迫型。

    1.2 主要儀器與設(shè)備

    S1000 PCR儀、Wide Mini-Sub Cell GT型水平電泳槽、PowerPac Basic型電泳儀電源、Universal Hood II型凝膠成像系統(tǒng),美國(guó)Bio-rad公司;Legend Micro 21R型高速冷凍離心機(jī),美國(guó)Thermo Fisher Scientific公司;AFZ-1002-U型超純水儀,美國(guó)Aquapro公司;75 μm CAR/PDMS固相微萃取頭、手動(dòng)進(jìn)樣手柄,美國(guó)Supelco公司;DP73型顯微鏡成像系統(tǒng),日本Olympus公司;UV-2450紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)、QP2010 Plus型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀,日本Shimadzu公司。

    1.3 酵母的分離與鑒定

    無(wú)菌操作條件下,取醬醅樣品5 g加至提前裝有玻璃珠的45 mL滅菌生理鹽水中,37℃搖床振搖15 min。取1 mL樣品懸液依次進(jìn)行10倍梯度稀釋?zhuān)x擇合適的稀釋度涂布于含100 g/L氯化鈉的PDA培養(yǎng)基上。于28℃培養(yǎng)72 h后挑選特征性菌落,經(jīng)反復(fù)劃線純化后,接種至相應(yīng)液體培養(yǎng)基進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。提取目的菌株DNA,并使用通用引物ITS1/ITS4和NL1/NL4分別針對(duì)其ITS rDNA序列及26S rDNA D1/D2區(qū)域序列進(jìn)行特異性擴(kuò)增(引物序列如表1所示),PCR反應(yīng)條件為94℃預(yù)變性3 min;94℃變性30 s,55℃退火30 s,72℃延伸1 min,循環(huán)30次;72℃延伸5 min。產(chǎn)物送Invitrogen公司進(jìn)行測(cè)序。

    另對(duì)目的菌株進(jìn)行菌落形態(tài)觀察及顯微形態(tài)觀察。

    表1 PCR引物序列

    1.4 酵母生長(zhǎng)特性的探究

    對(duì)目的酵母生長(zhǎng)的最適pH、最適溫度進(jìn)行探究,并在最適pH、最適溫度、培養(yǎng)基氯化鈉含量為150 g/L的情況下,測(cè)定目的酵母的生長(zhǎng)曲線。

    1.5 酵母發(fā)酵液的制備

    酵母于YPD液體培養(yǎng)基活化,4000 r/min離心,取無(wú)菌生理鹽水反復(fù)洗滌菌體,將1mL,5×106CFU/mL的菌體懸浮液加入到已調(diào)至酵母最適生長(zhǎng)pH的30 mL發(fā)酵培養(yǎng)基中,在最適生長(zhǎng)溫度下120 r/min搖瓶至生長(zhǎng)穩(wěn)定期,適當(dāng)靜置,無(wú)菌條件下過(guò)濾收集發(fā)酵液。

    1.6 SPME-GC/MS

    準(zhǔn)確吸取6 mL發(fā)酵液樣品和20 μL 2-甲基-3-庚酮稀釋液(5 μL/L)于15 mL頂空瓶中,加蓋密封,將已完成老化的萃取頭插入瓶子的頂空部分,于60℃的恒溫水浴中萃取30 min。檢測(cè)時(shí)以未添菌的發(fā)酵培養(yǎng)基為陰性對(duì)照。

    樣品通過(guò)DB-5MS型彈性石英毛細(xì)色譜柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm)進(jìn)行分離;程序升溫條件為起始溫度40℃,以3℃/min升到120℃,保持2 min,再以15℃/min升至250℃,保持2 min;載氣為高純氦氣(1.0 mL/min);分流比10∶1。

    質(zhì)譜采用電子轟擊電離源;電子能量70 eV;離子源溫度230℃;掃描范圍35~350 m/z。

    對(duì)采集到的質(zhì)譜圖利用NIST08和WILEY09譜庫(kù)檢索進(jìn)行組分分析,并用氣相色譜峰面積歸一化計(jì)算出各香氣組分的相對(duì)含量。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 耐鹽產(chǎn)香酵母的分離與鑒定

    經(jīng)過(guò)多次分離純化,從5種不同年份的發(fā)酵醬醅中共分離出酵母30余株,通過(guò)菌落形態(tài)比較及鏡檢觀察,共選出18株酵母進(jìn)行分子鑒定,其中17株被鑒定為Meyerozyma guilliermondii,1株為Candida parapsilosis。

    考慮到Meyerozyma guilliermondii在前人研究中的食品發(fā)酵背景以及Candida parapsilosis為條件致病菌,加之酵母對(duì)產(chǎn)品的增香作用主要集中于大分子物質(zhì)已較大程度上被霉菌分解的發(fā)酵中后期,因此最終選擇了一株從第3年發(fā)酵醬醅中分離得到的酵母3-J15進(jìn)行產(chǎn)香潛能探究。如圖1所示,根據(jù)菌落形態(tài)觀察,酵母3-J15菌落為乳白色,奶油狀,表面光滑,邊緣整齊;光學(xué)顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞呈卵圓形,出芽生殖,無(wú)假菌絲。此酵母在不含鹽的PDA、YPDA培養(yǎng)基上可快速生長(zhǎng),在150 g/L鹽濃度的PDA、YPDA培養(yǎng)基上仍表現(xiàn)出良好的適應(yīng)性。

    圖1 酵母3-J15在YPDA培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)及顯微形態(tài)觀察

    以引物對(duì)ITS1/ITS4和NL1/NL4為擴(kuò)增引物,分別對(duì)菌株DNA的目標(biāo)序列進(jìn)行特異性擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)電泳后在1.5%瓊脂糖凝膠上呈單一條帶,無(wú)非特異擴(kuò)增現(xiàn)象,條帶長(zhǎng)短均約600 bp,如圖2所示。

    圖2 酵母3-J15 PCR產(chǎn)物凝膠電泳圖譜

    將測(cè)序得到的基因序列與NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)中已有序列進(jìn)行BLAST比對(duì),NL1/NL4引物對(duì)擴(kuò)增片段長(zhǎng)604 bp,與GenBank中的Meyerozyma guilliermondii標(biāo)準(zhǔn)株NG_042640相似率達(dá)99%;ITS1/ITS4引物對(duì)擴(kuò)增片段長(zhǎng)611 bp,與Meyerozyma guilliermondii標(biāo)準(zhǔn)株NR_111247的相似率為99%,結(jié)合菌株培養(yǎng)及形態(tài)特征,可初步鑒定3-J15為一株Meyerozyma guilliermondii(也稱(chēng)Pichia guilliermondii),即季也蒙畢赤酵母。

    2.2 酵母的生長(zhǎng)特性

    為了較為全面地了解M.guilliermondii 3-J15的生長(zhǎng)特性,同時(shí)為接下來(lái)的搖瓶發(fā)酵提供實(shí)驗(yàn)依據(jù),對(duì)該菌株在YPD液體培養(yǎng)基中的兩項(xiàng)重要生長(zhǎng)特性進(jìn)行了測(cè)定。如圖3所示,該菌的最適生長(zhǎng)溫度為30℃左右,最適生長(zhǎng)pH范圍較廣,為4~8,鑒于醬醅在實(shí)際發(fā)酵過(guò)程中的pH為5左右,在接下來(lái)的生長(zhǎng)曲線測(cè)定及發(fā)酵培養(yǎng)基配置步驟中均采用pH 5。

    圖3 酵母3-J15的生長(zhǎng)pH及溫度曲線

    在滿(mǎn)足最適溫度、最適pH且培養(yǎng)基中氯化鈉含量為150 g/L的條件下,對(duì)菌株3-J15的生長(zhǎng)情況進(jìn)行了測(cè)定,得到其在26 h內(nèi)的生長(zhǎng)曲線。如圖4所示,經(jīng)1~2 h的適應(yīng)期后,菌株逐漸進(jìn)入對(duì)數(shù)期,生長(zhǎng)旺盛,18 h后進(jìn)入穩(wěn)定期,菌株生長(zhǎng)速率逐漸平穩(wěn),代謝產(chǎn)物積累。

    圖4 酵母3-J15的生長(zhǎng)曲線

    2.3 酵母發(fā)酵液香氣成分的GC-MS分析

    經(jīng)譜庫(kù)檢索及資料分析,酵母3-J15在非鹽脅迫環(huán)境(培養(yǎng)基含鹽量約0.9%,鹽分僅來(lái)自于作為營(yíng)養(yǎng)成分添加的醬醅中本有的氯化鈉)及鹽脅迫環(huán)境(培養(yǎng)基含鹽量約15%,鹽分來(lái)自于醬醅及額外添加的氯化鈉)下發(fā)酵產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物中,主要的揮發(fā)性香氣成分如表2所示。

    鹽脅迫存在與否對(duì)于揮發(fā)性香氣物質(zhì)產(chǎn)生的差異在于當(dāng)培養(yǎng)基中添有150 g/L的氯化鈉時(shí),酵母額外代謝產(chǎn)生2-甲基丁醛、2-甲基丙酸、丁酸丙烯酯,當(dāng)不存在鹽脅迫時(shí),酵母可代謝產(chǎn)生2-丙酸乙烯酯、3-甲基-2-戊酮。已有研究表明,當(dāng)鹽脅迫存在時(shí),埃切假絲酵母分解底物產(chǎn)生乳酸、檸檬酸、琥珀酸的能力增強(qiáng)[8],釀酒酵母糖酵解途徑各支路的代謝產(chǎn)物通量均有所增加,而三羧酸循環(huán)(TCA)中各代謝產(chǎn)物的通量均有所減少[9]。這反映出鹽脅迫能夠?qū)湍干L(zhǎng)代謝中的某些通路造成影響,代謝通量由此發(fā)生改變。可以推測(cè),揮發(fā)性代謝產(chǎn)物的累積同樣會(huì)受到來(lái)自代謝層面的影響,產(chǎn)生本研究結(jié)果中所反映出的這些差異。

    表2 酵母3-J15在鹽脅迫及非鹽脅迫條件的主要揮發(fā)性成分相對(duì)含量%

    而無(wú)論鹽脅迫是否存在,酵母菌株M.guilliermondii 3-J15均能夠通過(guò)代謝產(chǎn)生2-苯基乙醇、3-甲基-1-丁醇、2-甲基丁酸、3-甲基丁酸、丁酸乙酯等香氣成分;其中,2-苯基乙醇和3-甲基-1-丁醇的相對(duì)含量遠(yuǎn)超其余成分,成為發(fā)酵液中主要的揮發(fā)性香氣物質(zhì)。Feng等[10]通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)3-甲基-1-丁醇是高鹽稀態(tài)發(fā)酵醬油中最強(qiáng)烈的香氣活性化合物之一,并證明在產(chǎn)品中添加適量3-甲基-1-丁醇能夠?qū)ζ渥罱K口感貢獻(xiàn)具有正面影響的酸味和焦糖味(p<0.05)。2-苯基乙醇作為酵母菌降解苯丙氨酸的代謝產(chǎn)物[11],具有花草香味和瓜果氣息,已被研究者用作醬油和豆瓣醬等發(fā)酵產(chǎn)品的增香手段[12]。2-甲基丁酸、3-甲基丁酸常見(jiàn)于多種醬油的特征性風(fēng)味成分中[13-14〗],酸可以緩解醬油中的咸味,使各種香味柔和[15]。丁酸乙酯出現(xiàn)在菠蘿[16]、西番蓮[17]等果實(shí)的香氣中,具有典型的甜果香,目前已廣泛應(yīng)用于日化、食用香精生產(chǎn)。

    以上結(jié)果表明,酵母3-J15在15%鹽濃度下生長(zhǎng)良好,并能夠適應(yīng)較廣的pH范圍,同時(shí)可發(fā)酵產(chǎn)生多種提升醬油風(fēng)味的香氣物質(zhì)。Aryuman等[18]曾從泰式醬油的發(fā)酵醅料中分離得到一株M.guilliermondii,它能夠產(chǎn)生谷氨酰胺酶且酶活性在18%高鹽濃度下達(dá)到最大,直接加速了從L-谷氨酰胺生成L-谷氨酸的反應(yīng),對(duì)產(chǎn)品鮮味的呈現(xiàn)具有重要貢獻(xiàn)。鑒于這些特性,本研究篩選得到的酵母3-J15在醬油發(fā)酵的人工高鹽環(huán)境中具有較強(qiáng)的應(yīng)用潛力,值得進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用。

    3 結(jié)束語(yǔ)

    本研究從天然曬露法釀制醬油的第3年發(fā)酵醬醅中分離篩選到一株耐鹽酵母3-J15,經(jīng)鑒定為季也蒙畢赤酵母。綜合前人研究,這株從醬醅中篩選得到的土著菌株代謝產(chǎn)生的多種呈香物質(zhì)能夠?yàn)獒u油的特色風(fēng)味帶來(lái)正面影響,在醬油發(fā)酵的高鹽環(huán)境中具有較強(qiáng)的應(yīng)用潛力,值得進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用,可首先作為培養(yǎng)起始物試用于醬油生產(chǎn)的制曲及發(fā)酵過(guò)程中。

    [1]WEI Q,WANG H,CHEN Z,et al.Profiling of dynamic changes in the microbial community during the soy sauce fermentation process[J].Applied Microbiology&Biotechnology,2013,97(20):9111-9119.

    [2]俞藹琪,季偉民.天然曬露發(fā)酵醬油細(xì)菌數(shù)超標(biāo)的原因[J].上海調(diào)味品,1987(3):18-20.

    [3]付俊淑,莊世文,徐丹丹,等.酵母分離株分子鑒定及其揮發(fā)性香氣成分檢測(cè)分析[J].食品與發(fā)酵工業(yè),2010 (2):44-48.

    [4]徐瑩,姜維,何曉霞.耐鹽性魯氏酵母的研究進(jìn)展[J].中國(guó)釀造,2009(10):1-4.

    [5]王聰,王檬,赫景鈺,等.醬油釀造風(fēng)味菌株T酵母耐鹽機(jī)理的初步研究[J].中國(guó)釀造,2015,34(2):26-30.

    [6]QI W,HOU L H,GUO H L,et al.Effect of salt-tolerant yeast of Candida versatilis and Zygosaccharomyces rouxii on the production of biogenic amines during soy sauce fermentation[J].Journal of the Science of Food&Agriculture,2014,94(8):1537-1542.

    [7]潘汝謙,關(guān)銘芳,徐大高,等.花生黑腐病菌的生物學(xué)特性[J].華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2011,30(6):701-706.

    [8]FENG J,ZHAN X B,WANG D,et al.Identification and analysis of the metabolic functions of a high-salt-tolerant halophilic aromatic yeast Candida etchellsii for soy sauce production[J].World Journal of Microbiology&Biotechnology,2012,28(4):1451-1458.

    [9]李明達(dá),陳霞,韓丹,等.鹽脅迫條件下釀酒酵母的代謝通量分析[J].吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(理學(xué)版),2010,48(4): 699-703.

    [10]FENG Y,YU C,SU G,et al.Evaluation of aroma differences between high-salt liquid-state fermentation and low-salt solid-state fermentation soy sauces from China[J].Food Chemistry,2014,145(145C):126-134.

    [11]李學(xué)偉,陳強(qiáng),朱新貴.添加生香酵母改善醬油風(fēng)味的研究[J].中國(guó)釀造,2014,33(3):121-124.

    [12]XIAO Z B,SUN Z Y,F(xiàn)ENG T,et al.Comparison of Volatile Flavor Components in Four Kinds of Chinese Fermented Black Soybeans(Glycine max(L.)Merrill)by HSSPME-GC/MS and Chemometrics[J].Food Science&Technology Research,2011,17(4):319-326.

    [13]SONG Y R,JEONG D Y,BAIK S H.Effects of indigenous yeasts on physicochemical and microbial properties of Korean soy sauce prepared by low-salt fermentation[J].Food Microbiology,2015(51):171-178.

    [14]STEINHAUS P,SCHIEBERLE P.Characterization of the key aroma compounds in soy sauce using approaches of molecular sensory science[J].Journal of Agricultural&Food Chemistry,2007,55(15):6262-6269.

    [15]張艷芳,陶文沂.兩種發(fā)酵醬油風(fēng)味物質(zhì)的分析研究[J].精細(xì)化工,2008,25(5):486-490.

    [16]劉勝輝,孫偉生,陸新華,等.6個(gè)菠蘿品種成熟果實(shí)香氣成分分析[J].熱帶作物學(xué)報(bào),2015,36(06):1179-1185.

    [17]陳玲,楊文彬,李劍政.海南西番蓮果實(shí)香氣成分研究[J].香料香精化妝品,2001(5):1-4.

    [18]ARYUMAN P,LERTSIRI S,VISESSANGUAN W,et al.Glutaminase-producing Meyerozyma(Pichia)guilliermondii isolated from Thai soy sauce fermentation[J].International Journal of Food Microbiology,2015(192):7-12.

    (編輯:莫婕)

    Molecular identification and analysis of volatile aroma components of a halotolerant yeast,Meyerozyma guilliermondii isolated from soy mash

    YANG Yang,DENG Yue,LIU Yanxi,LIU Rongmei,JIN Yulan,YANG Zhirong,SUN Qun
    (Sichuan Key Laboratory of Resource Microbiological and Biotechnology,College of Life Sciences,Sichuan University,Chengdu 610065,China)

    In order to screening microorganisms which have the potential for further application in soy sauce production from the natural sun-brewed fermentation to promote the combination of traditional and modern industry.In this study,a halotolerant aroma-producing strain 3-J15 was isolated from the soy mash of the 3rdyear fermented by natural sun-brewed manufacturing,which was identified as Meyerozyma guilliermondii.The metabolites of 3-J15 in a given growing environment with or without salt stress were further analyzed by solid-phase micro-extraction coupled with gas chromatography/mass spectrometry (SPME-GC/MS).A general volatile profile of 10 characteristic aromatic substances including aldehyde,ketone,alcohol,organic acid and ester was obtained.Among them,the major volatile compounds were 3-methyl-1-butanol and 2-phenylethanol.Combined with the previous studies,these aromatic substances were deemed contributive to have a positive impact on the characteristic flavor of soy sauce.Therefore,this strain of Meyerozyma guilliermondii has the potential for further application in soy sauce production.

    Meyerozyma guilliermondii;soy sauce;aroma components;SPME-GC/MS

    A

    1674-5124(2016)11-0055-05

    10.11857/j.issn.1674-5124.2016.11.012

    2016-06-09;

    2016-08-01

    川大-瀘州科技合作項(xiàng)目(2014CDLZ-S09)

    楊陽(yáng)(1992-),女,四川自貢市人,碩士研究生,專(zhuān)業(yè)方向?yàn)楣I(yè)微生物。

    孫群(1967-),女,教授,博士,研究方向?yàn)槲⑸锛夹g(shù)與食品安全。

    猜你喜歡
    醬油揮發(fā)性香氣
    鈰基催化劑在揮發(fā)性有機(jī)物催化燃燒治理中的研究進(jìn)展
    分子催化(2022年1期)2022-11-02 07:11:20
    揮發(fā)性有機(jī)物污染環(huán)保治理新思路的探討
    春日香氣
    買(mǎi)醬油
    香氣鎖定狙擊心中的他
    Coco薇(2017年8期)2017-08-03 20:46:09
    買(mǎi)醬油
    故事大王(2016年10期)2016-11-07 15:30:12
    與生活自然為伍的夏日香氣
    Coco薇(2016年8期)2016-10-09 02:08:33
    買(mǎi)醬油
    吹掃捕集-氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用測(cè)定水中18種揮發(fā)性有機(jī)物
    我把醬油打回來(lái)啦
    天堂中文最新版在线下载| 国产伦理片在线播放av一区| 日韩视频在线欧美| 国产亚洲一区二区精品| 最近手机中文字幕大全| 最近手机中文字幕大全| 久久国产亚洲av麻豆专区| 精品午夜福利在线看| 三级国产精品欧美在线观看| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 美女大奶头黄色视频| 国产成人精品久久久久久| 交换朋友夫妻互换小说| 插逼视频在线观看| 午夜影院在线不卡| 国产精品久久久久久久久免| 嘟嘟电影网在线观看| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 久久久久久人妻| 久久国内精品自在自线图片| 黑人猛操日本美女一级片| 国产欧美日韩综合在线一区二区 | 91精品一卡2卡3卡4卡| 国产精品一二三区在线看| 久久久久网色| 99热这里只有是精品在线观看| 国产免费一区二区三区四区乱码| 亚洲精品日韩av片在线观看| 精品久久久噜噜| 天堂8中文在线网| 亚洲怡红院男人天堂| 边亲边吃奶的免费视频| 伊人久久精品亚洲午夜| 一个人免费看片子| 免费在线观看成人毛片| 一区二区三区免费毛片| 国国产精品蜜臀av免费| 久久精品国产自在天天线| 欧美xxⅹ黑人| 欧美激情国产日韩精品一区| 观看免费一级毛片| 麻豆乱淫一区二区| 国产免费一区二区三区四区乱码| 精品一区在线观看国产| 精品国产一区二区久久| 日本午夜av视频| 少妇高潮的动态图| 久久久欧美国产精品| 欧美老熟妇乱子伦牲交| a级片在线免费高清观看视频| 久久久久久久国产电影| 热99国产精品久久久久久7| 国产成人免费无遮挡视频| 能在线免费看毛片的网站| av女优亚洲男人天堂| 国产色婷婷99| 国产精品一二三区在线看| 青春草亚洲视频在线观看| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 午夜91福利影院| 亚洲精品456在线播放app| 97在线人人人人妻| 日韩成人伦理影院| 国产av精品麻豆| 边亲边吃奶的免费视频| av免费观看日本| 久久久久久伊人网av| 18禁在线播放成人免费| 青青草视频在线视频观看| 亚洲色图综合在线观看| 视频中文字幕在线观看| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 一级毛片久久久久久久久女| 免费观看无遮挡的男女| 中文字幕精品免费在线观看视频 | 国产成人精品一,二区| 97超碰精品成人国产| 人妻一区二区av| 欧美日本中文国产一区发布| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 国产一区二区三区av在线| 国产欧美日韩综合在线一区二区 | 亚洲成人手机| 我要看黄色一级片免费的| 国产精品一二三区在线看| 成年av动漫网址| 内地一区二区视频在线| 亚洲国产成人一精品久久久| a级毛色黄片| 熟女人妻精品中文字幕| 国产亚洲精品久久久com| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 国精品久久久久久国模美| 久久99热这里只频精品6学生| 免费大片18禁| 激情五月婷婷亚洲| 亚洲成人手机| 大片免费播放器 马上看| 久久午夜综合久久蜜桃| 久久人人爽人人爽人人片va| av免费在线看不卡| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 一区二区三区精品91| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 成人毛片a级毛片在线播放| 大陆偷拍与自拍| 制服丝袜香蕉在线| 日韩av不卡免费在线播放| 亚洲真实伦在线观看| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 亚洲性久久影院| 免费少妇av软件| 欧美+日韩+精品| 久久久久久久久久人人人人人人| 国产男女超爽视频在线观看| 免费看光身美女| .国产精品久久| 成年美女黄网站色视频大全免费 | 久热这里只有精品99| 99热这里只有是精品在线观看| 六月丁香七月| 亚洲av.av天堂| 亚洲欧洲日产国产| 能在线免费看毛片的网站| 国产亚洲一区二区精品| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 国产精品99久久久久久久久| 女性生殖器流出的白浆| 国产欧美亚洲国产| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 在线观看av片永久免费下载| 久久热精品热| 免费观看a级毛片全部| 精品久久久久久久久av| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 国产老妇伦熟女老妇高清| 麻豆乱淫一区二区| 2021少妇久久久久久久久久久| 国产日韩一区二区三区精品不卡 | 男女啪啪激烈高潮av片| 男女边吃奶边做爰视频| 午夜91福利影院| 人妻少妇偷人精品九色| 国精品久久久久久国模美| 综合色丁香网| 精品少妇久久久久久888优播| 国产av国产精品国产| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 黄色毛片三级朝国网站 | 夫妻午夜视频| 777米奇影视久久| 多毛熟女@视频| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 在线观看免费高清a一片| 热99国产精品久久久久久7| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 丰满饥渴人妻一区二区三| 国产精品国产三级国产专区5o| 在线免费观看不下载黄p国产| 亚洲欧美一区二区三区国产| 亚洲欧美一区二区三区国产| 狂野欧美激情性bbbbbb| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 99热6这里只有精品| 人妻系列 视频| 男人狂女人下面高潮的视频| 晚上一个人看的免费电影| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 高清毛片免费看| 乱人伦中国视频| 又爽又黄a免费视频| 男人添女人高潮全过程视频| 秋霞伦理黄片| kizo精华| 成人亚洲精品一区在线观看| 在线天堂最新版资源| 日韩人妻高清精品专区| 精品一区二区免费观看| 久久午夜综合久久蜜桃| 久久6这里有精品| 午夜91福利影院| av女优亚洲男人天堂| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 日韩视频在线欧美| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 日本av免费视频播放| 2018国产大陆天天弄谢| 亚洲,一卡二卡三卡| 中文字幕精品免费在线观看视频 | 国产精品一区二区性色av| 26uuu在线亚洲综合色| 精品久久国产蜜桃| 色视频在线一区二区三区| 一区二区三区四区激情视频| 性色avwww在线观看| 国产黄色视频一区二区在线观看| 久久久国产欧美日韩av| 免费大片黄手机在线观看| 日韩av在线免费看完整版不卡| 中国三级夫妇交换| 精品一区在线观看国产| 久久午夜福利片| 欧美 日韩 精品 国产| 在线精品无人区一区二区三| 成人亚洲欧美一区二区av| 在线观看av片永久免费下载| 亚洲av.av天堂| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 免费看av在线观看网站| 欧美高清成人免费视频www| 亚洲第一区二区三区不卡| 日日啪夜夜撸| 久久精品国产自在天天线| 久久久久人妻精品一区果冻| 国产精品99久久99久久久不卡 | 国产精品人妻久久久影院| 免费久久久久久久精品成人欧美视频 | 久久热精品热| av福利片在线| 欧美精品国产亚洲| 亚洲色图综合在线观看| 麻豆成人午夜福利视频| 国产精品久久久久久精品古装| 成人综合一区亚洲| 免费av不卡在线播放| 22中文网久久字幕| 日本av免费视频播放| 国产成人免费观看mmmm| 夫妻午夜视频| av国产精品久久久久影院| 最近手机中文字幕大全| 欧美精品亚洲一区二区| 国产精品蜜桃在线观看| 国产高清三级在线| 另类亚洲欧美激情| 大香蕉久久网| 人妻夜夜爽99麻豆av| 欧美日韩在线观看h| 一级毛片 在线播放| 免费av中文字幕在线| av国产精品久久久久影院| 大香蕉97超碰在线| 麻豆乱淫一区二区| 高清在线视频一区二区三区| av视频免费观看在线观看| 成人免费观看视频高清| 国产精品一区二区性色av| 久久国产乱子免费精品| 在线观看三级黄色| 卡戴珊不雅视频在线播放| 亚洲va在线va天堂va国产| 亚洲人成网站在线播| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频 | 日韩成人av中文字幕在线观看| 国产免费一区二区三区四区乱码| 国产精品久久久久久精品古装| 日韩成人伦理影院| 免费观看在线日韩| 午夜av观看不卡| 啦啦啦在线观看免费高清www| 高清欧美精品videossex| 丝袜喷水一区| 国产免费福利视频在线观看| 爱豆传媒免费全集在线观看| 丰满少妇做爰视频| 在线观看人妻少妇| 国产精品一区二区在线观看99| 在线观看免费日韩欧美大片 | 日本vs欧美在线观看视频 | 精品人妻熟女毛片av久久网站| 亚洲精品,欧美精品| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 久久99热这里只频精品6学生| 我要看黄色一级片免费的| 少妇熟女欧美另类| 老女人水多毛片| 最近中文字幕2019免费版| 亚洲国产av新网站| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| av线在线观看网站| 亚洲久久久国产精品| 午夜福利网站1000一区二区三区| www.色视频.com| 精品少妇内射三级| 青春草国产在线视频| 黄色欧美视频在线观看| 欧美日韩综合久久久久久| 国产一区二区在线观看av| 亚洲高清免费不卡视频| 国产深夜福利视频在线观看| 熟女电影av网| 久久久久精品久久久久真实原创| 2018国产大陆天天弄谢| 亚洲情色 制服丝袜| 久久久久网色| 国产成人freesex在线| 日本午夜av视频| 日日爽夜夜爽网站| 欧美成人精品欧美一级黄| 久久久精品免费免费高清| 全区人妻精品视频| 哪个播放器可以免费观看大片| 精品久久久久久久久av| 亚洲国产最新在线播放| 91精品国产九色| 人人妻人人看人人澡| 国产成人精品无人区| 我的女老师完整版在线观看| 亚洲,一卡二卡三卡| 久久99热6这里只有精品| 日韩成人伦理影院| 美女主播在线视频| 人妻人人澡人人爽人人| 中文字幕免费在线视频6| 亚洲久久久国产精品| 在线看a的网站| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 丰满迷人的少妇在线观看| a 毛片基地| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 岛国毛片在线播放| 欧美精品一区二区免费开放| 免费av中文字幕在线| 亚洲av免费高清在线观看| 国产在线一区二区三区精| 欧美+日韩+精品| 婷婷色麻豆天堂久久| 有码 亚洲区| 亚洲精品成人av观看孕妇| 97超碰精品成人国产| 国产一区二区三区av在线| 久久国产亚洲av麻豆专区| 十八禁高潮呻吟视频 | 亚洲综合色惰| 丰满少妇做爰视频| 亚洲av在线观看美女高潮| 免费观看在线日韩| 成人漫画全彩无遮挡| 中文字幕免费在线视频6| 黄色日韩在线| 爱豆传媒免费全集在线观看| 99久国产av精品国产电影| 老女人水多毛片| 在线看a的网站| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 99久久人妻综合| 亚洲一区二区三区欧美精品| 9色porny在线观看| 国产高清三级在线| 最新的欧美精品一区二区| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 欧美丝袜亚洲另类| 人妻一区二区av| 交换朋友夫妻互换小说| 日韩大片免费观看网站| 国产精品熟女久久久久浪| 日韩在线高清观看一区二区三区| 日本午夜av视频| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 国产成人一区二区在线| 国产一区二区在线观看av| 乱系列少妇在线播放| av有码第一页| 亚洲国产精品一区三区| 91成人精品电影| 日本-黄色视频高清免费观看| 精品久久久久久久久av| 国产精品久久久久久久久免| 全区人妻精品视频| 在线观看国产h片| 成人二区视频| 亚洲久久久国产精品| 七月丁香在线播放| 国产精品久久久久久精品古装| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 成人影院久久| 免费黄网站久久成人精品| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 男男h啪啪无遮挡| h视频一区二区三区| 最黄视频免费看| 精品久久久精品久久久| 乱人伦中国视频| 九草在线视频观看| 一级黄片播放器| 国产成人午夜福利电影在线观看| 日韩精品有码人妻一区| 国产精品久久久久久精品电影小说| 亚洲在久久综合| 色吧在线观看| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 免费av中文字幕在线| 三级国产精品片| 国产欧美亚洲国产| 精品久久久久久电影网| 日本欧美国产在线视频| 欧美变态另类bdsm刘玥| 午夜av观看不卡| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 在线观看一区二区三区激情| 男女啪啪激烈高潮av片| 偷拍熟女少妇极品色| 亚洲av在线观看美女高潮| 寂寞人妻少妇视频99o| 国产高清国产精品国产三级| av黄色大香蕉| 深夜a级毛片| 欧美精品亚洲一区二区| 国产精品一区二区在线观看99| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| av不卡在线播放| 久久狼人影院| 国产精品国产三级专区第一集| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 午夜精品国产一区二区电影| av福利片在线观看| 亚州av有码| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 亚洲国产精品999| 日韩伦理黄色片| 婷婷色综合www| 欧美变态另类bdsm刘玥| 国产精品无大码| 99久久综合免费| 精品久久久噜噜| 久久久午夜欧美精品| 久久精品久久精品一区二区三区| 国产在线一区二区三区精| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 男女国产视频网站| 极品教师在线视频| 黑丝袜美女国产一区| 国产男女内射视频| 如何舔出高潮| 熟女电影av网| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 亚洲av在线观看美女高潮| 只有这里有精品99| 国产精品熟女久久久久浪| 伦理电影大哥的女人| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 午夜免费男女啪啪视频观看| 亚洲精品乱久久久久久| 涩涩av久久男人的天堂| 日韩伦理黄色片| 韩国av在线不卡| 看十八女毛片水多多多| 亚洲av福利一区| 成人二区视频| 永久网站在线| 久久 成人 亚洲| 99国产精品免费福利视频| 免费久久久久久久精品成人欧美视频 | 在线亚洲精品国产二区图片欧美 | 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 91精品伊人久久大香线蕉| 99久久精品一区二区三区| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 丝袜脚勾引网站| av.在线天堂| 在线观看免费高清a一片| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 九色成人免费人妻av| 精品久久久久久电影网| 国产精品欧美亚洲77777| 久久精品国产亚洲av天美| 中文欧美无线码| 下体分泌物呈黄色| av天堂中文字幕网| 91精品伊人久久大香线蕉| 伊人久久精品亚洲午夜| 九色成人免费人妻av| 久久久久久久国产电影| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 国产精品久久久久成人av| 三级经典国产精品| 亚洲色图综合在线观看| 亚洲在久久综合| 我要看日韩黄色一级片| 国产伦精品一区二区三区四那| 大码成人一级视频| 中文在线观看免费www的网站| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 亚洲精品国产av蜜桃| 欧美日韩在线观看h| 国产片特级美女逼逼视频| av天堂中文字幕网| 搡老乐熟女国产| 伊人久久国产一区二区| 最黄视频免费看| 色视频www国产| 久久99精品国语久久久| 99热6这里只有精品| 交换朋友夫妻互换小说| 美女cb高潮喷水在线观看| 黑丝袜美女国产一区| 一二三四中文在线观看免费高清| av视频免费观看在线观看| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 韩国av在线不卡| 男女免费视频国产| 国产精品久久久久久av不卡| 久久亚洲国产成人精品v| 亚洲av福利一区| 99久久人妻综合| 国产真实伦视频高清在线观看| 国产精品一区www在线观看| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 日本av手机在线免费观看| 久久婷婷青草| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 纯流量卡能插随身wifi吗| 婷婷色综合大香蕉| 国产精品伦人一区二区| 少妇人妻一区二区三区视频| 啦啦啦啦在线视频资源| 街头女战士在线观看网站| 韩国av在线不卡| 日本黄大片高清| 国模一区二区三区四区视频| 欧美人与善性xxx| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 亚洲图色成人| 亚洲天堂av无毛| 少妇人妻精品综合一区二区| 久久人妻熟女aⅴ| 亚洲成人手机| 亚洲在久久综合| av卡一久久| videos熟女内射| 日韩制服骚丝袜av| 丝袜在线中文字幕| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 免费观看的影片在线观看| 亚洲经典国产精华液单| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 久热这里只有精品99| 国产一区亚洲一区在线观看| 丝瓜视频免费看黄片| 亚洲熟女精品中文字幕| 少妇人妻精品综合一区二区| 日本黄大片高清| 成人无遮挡网站| 久久久久国产网址| 一级二级三级毛片免费看| 日韩一区二区视频免费看| 97超视频在线观看视频| 老熟女久久久| 国产极品粉嫩免费观看在线 | 亚洲精品色激情综合| 亚洲av在线观看美女高潮| 最黄视频免费看| 婷婷色av中文字幕| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 男人舔奶头视频| 丰满饥渴人妻一区二区三| 如日韩欧美国产精品一区二区三区 | 亚洲av欧美aⅴ国产| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 成人无遮挡网站| 色94色欧美一区二区| 国产成人免费无遮挡视频| 国产欧美亚洲国产| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 精品少妇内射三级| 熟女电影av网| 曰老女人黄片| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 热re99久久精品国产66热6| 街头女战士在线观看网站| 亚洲av不卡在线观看| 国产一区二区在线观看av| videos熟女内射| 久久久久视频综合| 欧美精品高潮呻吟av久久| xxx大片免费视频| 久久国产精品男人的天堂亚洲 | 午夜视频国产福利| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 欧美日本中文国产一区发布| videossex国产| 我的老师免费观看完整版| 色视频www国产| 视频区图区小说| 国产高清三级在线| 成人特级av手机在线观看| 国产探花极品一区二区| av卡一久久| 国产熟女欧美一区二区| 性色avwww在线观看| 中文字幕人妻丝袜制服| 中文字幕精品免费在线观看视频 | 久久久久久久精品精品| 三级经典国产精品| 色婷婷久久久亚洲欧美| 2022亚洲国产成人精品| 美女视频免费永久观看网站| 我的女老师完整版在线观看| 99久久精品一区二区三区| 青春草亚洲视频在线观看| 国产探花极品一区二区| 亚洲国产最新在线播放| 高清黄色对白视频在线免费看 | 国产精品一区二区性色av| 国产淫片久久久久久久久| 伊人亚洲综合成人网| 国产精品国产三级国产专区5o| 又大又黄又爽视频免费| 成人美女网站在线观看视频| 成人影院久久|