• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    一株醬醅中耐鹽酵母Meyerozyma guilliermondii的分離鑒定及其揮發(fā)性香氣成分分析

    2016-04-01 03:53:09楊陽(yáng)鄧岳劉彥希劉絨梅金玉蘭楊志榮孫群
    中國(guó)測(cè)試 2016年11期
    關(guān)鍵詞:醬油揮發(fā)性香氣

    楊陽(yáng),鄧岳,劉彥希,劉絨梅,金玉蘭,楊志榮,孫群

    (四川大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院資源微生物與微生物技術(shù)四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,四川成都610065)

    一株醬醅中耐鹽酵母Meyerozyma guilliermondii的分離鑒定及其揮發(fā)性香氣成分分析

    楊陽(yáng),鄧岳,劉彥希,劉絨梅,金玉蘭,楊志榮,孫群

    (四川大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院資源微生物與微生物技術(shù)四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,四川成都610065)

    為篩選具有醬油生產(chǎn)應(yīng)用潛能的微生物菌株,以推動(dòng)傳統(tǒng)產(chǎn)業(yè)與現(xiàn)代發(fā)酵的結(jié)合。從天然曬露法釀制醬油的第3年發(fā)酵醬醅中分離篩選到一株耐鹽酵母3-J15,經(jīng)鑒定為季也蒙畢赤酵母Meyerozyma guilliermondii。選用固相微萃?。瓪庀嗌V質(zhì)譜聯(lián)用(SPME-GC/MS)技術(shù),對(duì)分離株在鹽脅迫及非鹽脅迫條件下代謝產(chǎn)生的揮發(fā)性香氣成分進(jìn)行分離測(cè)定。結(jié)果表明,從酵母3-J15發(fā)酵液中檢測(cè)出包含醛、酮、醇、酸、酯在內(nèi)的10種特征香氣成分,其中主要的揮發(fā)性香氣物質(zhì)為3-甲基-1-丁醇和2-苯基乙醇。綜合已有研究,這些呈香物質(zhì)能夠?yàn)獒u油的特色風(fēng)味帶來(lái)正面影響,因此,酵母Meyerozyma guilliermondii具有進(jìn)一步應(yīng)用于醬油生產(chǎn)的開(kāi)發(fā)潛力。

    季也蒙畢赤酵母;醬油;香氣成分;SPME-GC/MS

    0 引言

    醬油俗稱(chēng)豉油,是起源于中國(guó)的傳統(tǒng)調(diào)味品,它以多種氨基酸鹽復(fù)合物為主體,其香氣物質(zhì)與多種微生物代謝產(chǎn)物(醇、酯、醛、酮、有機(jī)酸、呋喃等)密切相關(guān)[1]。具有悠久歷史的曬露釀制工藝采用天然制曲,菌種多而復(fù)雜,醬油成品滋味鮮美、口味醇厚[2]。雖然產(chǎn)品價(jià)格較高,但由于發(fā)酵啟動(dòng)慢、發(fā)酵周期長(zhǎng)、勞動(dòng)強(qiáng)度大、市場(chǎng)份額低,這項(xiàng)傳統(tǒng)技藝的生存空間已越來(lái)越小,亟待拯救。已有研究表明,醬醅發(fā)酵過(guò)程中的微生物種類(lèi)和數(shù)量繁多,微生物群落結(jié)構(gòu)和相互作用機(jī)理較為復(fù)雜,它們對(duì)于醬油的品質(zhì)及穩(wěn)定性的形成有重要影響。

    酵母菌目前已廣泛應(yīng)用于啤酒、白酒、果汁等飲料的生產(chǎn),其生物合成過(guò)程中會(huì)形成種類(lèi)繁多的香氣物質(zhì),對(duì)產(chǎn)品風(fēng)味影響較大[3]。關(guān)于產(chǎn)香酵母在醬油發(fā)酵中的應(yīng)用研究,目前主要集中在耐鹽酵母Zygosaccharomyces rouxii和Candida versatilis上,前者主要產(chǎn)生乙醇、高級(jí)醇等風(fēng)味物質(zhì)[4],后者能夠生成乙酸乙酯、乳酸乙酯及4-乙基愈創(chuàng)木酚[5],這些產(chǎn)物對(duì)醬油特色風(fēng)味的形成有著重要貢獻(xiàn),已被研究者用于高鹽稀態(tài)發(fā)酵醬油的部分生產(chǎn)中[6]。

    本研究從天然曬露發(fā)酵醬油的新鮮醬醅中篩選增香酵母,并通過(guò)固相微萃?。瓪庀嗌V質(zhì)譜聯(lián)用(SPME-GC/MS)的方法對(duì)其產(chǎn)香性能進(jìn)行初步探究,旨在篩選具有食品開(kāi)發(fā)潛力的酵母菌株,為研究酵母對(duì)醬油風(fēng)味物質(zhì)及質(zhì)量安全的影響奠定基礎(chǔ),同時(shí)為實(shí)現(xiàn)傳統(tǒng)發(fā)酵與現(xiàn)代工藝的產(chǎn)業(yè)化結(jié)合提供參考。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    醬醅樣品由四川省合江縣先市釀造食品有限公司提供,分別采自整個(gè)發(fā)酵過(guò)程中的第0.5,1,2,3,4年,每個(gè)年份的醬醅樣品均來(lái)自于5口不同醬缸(n =25)。醬缸位置的選取遵循隨機(jī)原則,稍作混合后從中心位置取料,保證每一醅料均從不同醬缸的同一位置、同一深度取到。樣品采集后,于4°C保存?zhèn)溆茫⒘⒓催M(jìn)行培養(yǎng)法實(shí)驗(yàn)。

    通用引物對(duì)ITS1/ITS4、NL1/NL4由Invitrogen公司(上海)合成;Premix Taq Version2.0(Loading dye mix),日本Takara公司;DNA Marker(D2000)、酵母DNA提取試劑盒、溶壁酶(Lyticase),北京天根公司;瓊脂糖、氯化鈉、山梨醇、氯霉素、蛋白胨、葡萄糖、酵母浸出粉、瓊脂粉等生化試劑均購(gòu)于成都博瑞克生物技術(shù)有限公司;小麥粉、黃豆粉、2-甲基-3-庚酮,購(gòu)于成都云德科技有限公司。

    PDA培養(yǎng)基(含氯霉素0.1g/L)、YPD、YPDA培養(yǎng)基按文獻(xiàn)[7]配置。發(fā)酵培養(yǎng)基:10 g黃豆粉,2.5 g小麥粉,50 g新鮮醬醅,用緩沖液Na2HPO4/ KH2PO4配置為1 L體系,煮勻攪拌后4層紗布過(guò)濾,pH 5~5.2;根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)分為額外添加150 g/L氯化鈉的鹽脅迫型及不添加氯化鈉的非鹽脅迫型。

    1.2 主要儀器與設(shè)備

    S1000 PCR儀、Wide Mini-Sub Cell GT型水平電泳槽、PowerPac Basic型電泳儀電源、Universal Hood II型凝膠成像系統(tǒng),美國(guó)Bio-rad公司;Legend Micro 21R型高速冷凍離心機(jī),美國(guó)Thermo Fisher Scientific公司;AFZ-1002-U型超純水儀,美國(guó)Aquapro公司;75 μm CAR/PDMS固相微萃取頭、手動(dòng)進(jìn)樣手柄,美國(guó)Supelco公司;DP73型顯微鏡成像系統(tǒng),日本Olympus公司;UV-2450紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)、QP2010 Plus型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀,日本Shimadzu公司。

    1.3 酵母的分離與鑒定

    無(wú)菌操作條件下,取醬醅樣品5 g加至提前裝有玻璃珠的45 mL滅菌生理鹽水中,37℃搖床振搖15 min。取1 mL樣品懸液依次進(jìn)行10倍梯度稀釋?zhuān)x擇合適的稀釋度涂布于含100 g/L氯化鈉的PDA培養(yǎng)基上。于28℃培養(yǎng)72 h后挑選特征性菌落,經(jīng)反復(fù)劃線純化后,接種至相應(yīng)液體培養(yǎng)基進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。提取目的菌株DNA,并使用通用引物ITS1/ITS4和NL1/NL4分別針對(duì)其ITS rDNA序列及26S rDNA D1/D2區(qū)域序列進(jìn)行特異性擴(kuò)增(引物序列如表1所示),PCR反應(yīng)條件為94℃預(yù)變性3 min;94℃變性30 s,55℃退火30 s,72℃延伸1 min,循環(huán)30次;72℃延伸5 min。產(chǎn)物送Invitrogen公司進(jìn)行測(cè)序。

    另對(duì)目的菌株進(jìn)行菌落形態(tài)觀察及顯微形態(tài)觀察。

    表1 PCR引物序列

    1.4 酵母生長(zhǎng)特性的探究

    對(duì)目的酵母生長(zhǎng)的最適pH、最適溫度進(jìn)行探究,并在最適pH、最適溫度、培養(yǎng)基氯化鈉含量為150 g/L的情況下,測(cè)定目的酵母的生長(zhǎng)曲線。

    1.5 酵母發(fā)酵液的制備

    酵母于YPD液體培養(yǎng)基活化,4000 r/min離心,取無(wú)菌生理鹽水反復(fù)洗滌菌體,將1mL,5×106CFU/mL的菌體懸浮液加入到已調(diào)至酵母最適生長(zhǎng)pH的30 mL發(fā)酵培養(yǎng)基中,在最適生長(zhǎng)溫度下120 r/min搖瓶至生長(zhǎng)穩(wěn)定期,適當(dāng)靜置,無(wú)菌條件下過(guò)濾收集發(fā)酵液。

    1.6 SPME-GC/MS

    準(zhǔn)確吸取6 mL發(fā)酵液樣品和20 μL 2-甲基-3-庚酮稀釋液(5 μL/L)于15 mL頂空瓶中,加蓋密封,將已完成老化的萃取頭插入瓶子的頂空部分,于60℃的恒溫水浴中萃取30 min。檢測(cè)時(shí)以未添菌的發(fā)酵培養(yǎng)基為陰性對(duì)照。

    樣品通過(guò)DB-5MS型彈性石英毛細(xì)色譜柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm)進(jìn)行分離;程序升溫條件為起始溫度40℃,以3℃/min升到120℃,保持2 min,再以15℃/min升至250℃,保持2 min;載氣為高純氦氣(1.0 mL/min);分流比10∶1。

    質(zhì)譜采用電子轟擊電離源;電子能量70 eV;離子源溫度230℃;掃描范圍35~350 m/z。

    對(duì)采集到的質(zhì)譜圖利用NIST08和WILEY09譜庫(kù)檢索進(jìn)行組分分析,并用氣相色譜峰面積歸一化計(jì)算出各香氣組分的相對(duì)含量。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 耐鹽產(chǎn)香酵母的分離與鑒定

    經(jīng)過(guò)多次分離純化,從5種不同年份的發(fā)酵醬醅中共分離出酵母30余株,通過(guò)菌落形態(tài)比較及鏡檢觀察,共選出18株酵母進(jìn)行分子鑒定,其中17株被鑒定為Meyerozyma guilliermondii,1株為Candida parapsilosis。

    考慮到Meyerozyma guilliermondii在前人研究中的食品發(fā)酵背景以及Candida parapsilosis為條件致病菌,加之酵母對(duì)產(chǎn)品的增香作用主要集中于大分子物質(zhì)已較大程度上被霉菌分解的發(fā)酵中后期,因此最終選擇了一株從第3年發(fā)酵醬醅中分離得到的酵母3-J15進(jìn)行產(chǎn)香潛能探究。如圖1所示,根據(jù)菌落形態(tài)觀察,酵母3-J15菌落為乳白色,奶油狀,表面光滑,邊緣整齊;光學(xué)顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞呈卵圓形,出芽生殖,無(wú)假菌絲。此酵母在不含鹽的PDA、YPDA培養(yǎng)基上可快速生長(zhǎng),在150 g/L鹽濃度的PDA、YPDA培養(yǎng)基上仍表現(xiàn)出良好的適應(yīng)性。

    圖1 酵母3-J15在YPDA培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)及顯微形態(tài)觀察

    以引物對(duì)ITS1/ITS4和NL1/NL4為擴(kuò)增引物,分別對(duì)菌株DNA的目標(biāo)序列進(jìn)行特異性擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)電泳后在1.5%瓊脂糖凝膠上呈單一條帶,無(wú)非特異擴(kuò)增現(xiàn)象,條帶長(zhǎng)短均約600 bp,如圖2所示。

    圖2 酵母3-J15 PCR產(chǎn)物凝膠電泳圖譜

    將測(cè)序得到的基因序列與NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)中已有序列進(jìn)行BLAST比對(duì),NL1/NL4引物對(duì)擴(kuò)增片段長(zhǎng)604 bp,與GenBank中的Meyerozyma guilliermondii標(biāo)準(zhǔn)株NG_042640相似率達(dá)99%;ITS1/ITS4引物對(duì)擴(kuò)增片段長(zhǎng)611 bp,與Meyerozyma guilliermondii標(biāo)準(zhǔn)株NR_111247的相似率為99%,結(jié)合菌株培養(yǎng)及形態(tài)特征,可初步鑒定3-J15為一株Meyerozyma guilliermondii(也稱(chēng)Pichia guilliermondii),即季也蒙畢赤酵母。

    2.2 酵母的生長(zhǎng)特性

    為了較為全面地了解M.guilliermondii 3-J15的生長(zhǎng)特性,同時(shí)為接下來(lái)的搖瓶發(fā)酵提供實(shí)驗(yàn)依據(jù),對(duì)該菌株在YPD液體培養(yǎng)基中的兩項(xiàng)重要生長(zhǎng)特性進(jìn)行了測(cè)定。如圖3所示,該菌的最適生長(zhǎng)溫度為30℃左右,最適生長(zhǎng)pH范圍較廣,為4~8,鑒于醬醅在實(shí)際發(fā)酵過(guò)程中的pH為5左右,在接下來(lái)的生長(zhǎng)曲線測(cè)定及發(fā)酵培養(yǎng)基配置步驟中均采用pH 5。

    圖3 酵母3-J15的生長(zhǎng)pH及溫度曲線

    在滿(mǎn)足最適溫度、最適pH且培養(yǎng)基中氯化鈉含量為150 g/L的條件下,對(duì)菌株3-J15的生長(zhǎng)情況進(jìn)行了測(cè)定,得到其在26 h內(nèi)的生長(zhǎng)曲線。如圖4所示,經(jīng)1~2 h的適應(yīng)期后,菌株逐漸進(jìn)入對(duì)數(shù)期,生長(zhǎng)旺盛,18 h后進(jìn)入穩(wěn)定期,菌株生長(zhǎng)速率逐漸平穩(wěn),代謝產(chǎn)物積累。

    圖4 酵母3-J15的生長(zhǎng)曲線

    2.3 酵母發(fā)酵液香氣成分的GC-MS分析

    經(jīng)譜庫(kù)檢索及資料分析,酵母3-J15在非鹽脅迫環(huán)境(培養(yǎng)基含鹽量約0.9%,鹽分僅來(lái)自于作為營(yíng)養(yǎng)成分添加的醬醅中本有的氯化鈉)及鹽脅迫環(huán)境(培養(yǎng)基含鹽量約15%,鹽分來(lái)自于醬醅及額外添加的氯化鈉)下發(fā)酵產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物中,主要的揮發(fā)性香氣成分如表2所示。

    鹽脅迫存在與否對(duì)于揮發(fā)性香氣物質(zhì)產(chǎn)生的差異在于當(dāng)培養(yǎng)基中添有150 g/L的氯化鈉時(shí),酵母額外代謝產(chǎn)生2-甲基丁醛、2-甲基丙酸、丁酸丙烯酯,當(dāng)不存在鹽脅迫時(shí),酵母可代謝產(chǎn)生2-丙酸乙烯酯、3-甲基-2-戊酮。已有研究表明,當(dāng)鹽脅迫存在時(shí),埃切假絲酵母分解底物產(chǎn)生乳酸、檸檬酸、琥珀酸的能力增強(qiáng)[8],釀酒酵母糖酵解途徑各支路的代謝產(chǎn)物通量均有所增加,而三羧酸循環(huán)(TCA)中各代謝產(chǎn)物的通量均有所減少[9]。這反映出鹽脅迫能夠?qū)湍干L(zhǎng)代謝中的某些通路造成影響,代謝通量由此發(fā)生改變。可以推測(cè),揮發(fā)性代謝產(chǎn)物的累積同樣會(huì)受到來(lái)自代謝層面的影響,產(chǎn)生本研究結(jié)果中所反映出的這些差異。

    表2 酵母3-J15在鹽脅迫及非鹽脅迫條件的主要揮發(fā)性成分相對(duì)含量%

    而無(wú)論鹽脅迫是否存在,酵母菌株M.guilliermondii 3-J15均能夠通過(guò)代謝產(chǎn)生2-苯基乙醇、3-甲基-1-丁醇、2-甲基丁酸、3-甲基丁酸、丁酸乙酯等香氣成分;其中,2-苯基乙醇和3-甲基-1-丁醇的相對(duì)含量遠(yuǎn)超其余成分,成為發(fā)酵液中主要的揮發(fā)性香氣物質(zhì)。Feng等[10]通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)3-甲基-1-丁醇是高鹽稀態(tài)發(fā)酵醬油中最強(qiáng)烈的香氣活性化合物之一,并證明在產(chǎn)品中添加適量3-甲基-1-丁醇能夠?qū)ζ渥罱K口感貢獻(xiàn)具有正面影響的酸味和焦糖味(p<0.05)。2-苯基乙醇作為酵母菌降解苯丙氨酸的代謝產(chǎn)物[11],具有花草香味和瓜果氣息,已被研究者用作醬油和豆瓣醬等發(fā)酵產(chǎn)品的增香手段[12]。2-甲基丁酸、3-甲基丁酸常見(jiàn)于多種醬油的特征性風(fēng)味成分中[13-14〗],酸可以緩解醬油中的咸味,使各種香味柔和[15]。丁酸乙酯出現(xiàn)在菠蘿[16]、西番蓮[17]等果實(shí)的香氣中,具有典型的甜果香,目前已廣泛應(yīng)用于日化、食用香精生產(chǎn)。

    以上結(jié)果表明,酵母3-J15在15%鹽濃度下生長(zhǎng)良好,并能夠適應(yīng)較廣的pH范圍,同時(shí)可發(fā)酵產(chǎn)生多種提升醬油風(fēng)味的香氣物質(zhì)。Aryuman等[18]曾從泰式醬油的發(fā)酵醅料中分離得到一株M.guilliermondii,它能夠產(chǎn)生谷氨酰胺酶且酶活性在18%高鹽濃度下達(dá)到最大,直接加速了從L-谷氨酰胺生成L-谷氨酸的反應(yīng),對(duì)產(chǎn)品鮮味的呈現(xiàn)具有重要貢獻(xiàn)。鑒于這些特性,本研究篩選得到的酵母3-J15在醬油發(fā)酵的人工高鹽環(huán)境中具有較強(qiáng)的應(yīng)用潛力,值得進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用。

    3 結(jié)束語(yǔ)

    本研究從天然曬露法釀制醬油的第3年發(fā)酵醬醅中分離篩選到一株耐鹽酵母3-J15,經(jīng)鑒定為季也蒙畢赤酵母。綜合前人研究,這株從醬醅中篩選得到的土著菌株代謝產(chǎn)生的多種呈香物質(zhì)能夠?yàn)獒u油的特色風(fēng)味帶來(lái)正面影響,在醬油發(fā)酵的高鹽環(huán)境中具有較強(qiáng)的應(yīng)用潛力,值得進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用,可首先作為培養(yǎng)起始物試用于醬油生產(chǎn)的制曲及發(fā)酵過(guò)程中。

    [1]WEI Q,WANG H,CHEN Z,et al.Profiling of dynamic changes in the microbial community during the soy sauce fermentation process[J].Applied Microbiology&Biotechnology,2013,97(20):9111-9119.

    [2]俞藹琪,季偉民.天然曬露發(fā)酵醬油細(xì)菌數(shù)超標(biāo)的原因[J].上海調(diào)味品,1987(3):18-20.

    [3]付俊淑,莊世文,徐丹丹,等.酵母分離株分子鑒定及其揮發(fā)性香氣成分檢測(cè)分析[J].食品與發(fā)酵工業(yè),2010 (2):44-48.

    [4]徐瑩,姜維,何曉霞.耐鹽性魯氏酵母的研究進(jìn)展[J].中國(guó)釀造,2009(10):1-4.

    [5]王聰,王檬,赫景鈺,等.醬油釀造風(fēng)味菌株T酵母耐鹽機(jī)理的初步研究[J].中國(guó)釀造,2015,34(2):26-30.

    [6]QI W,HOU L H,GUO H L,et al.Effect of salt-tolerant yeast of Candida versatilis and Zygosaccharomyces rouxii on the production of biogenic amines during soy sauce fermentation[J].Journal of the Science of Food&Agriculture,2014,94(8):1537-1542.

    [7]潘汝謙,關(guān)銘芳,徐大高,等.花生黑腐病菌的生物學(xué)特性[J].華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2011,30(6):701-706.

    [8]FENG J,ZHAN X B,WANG D,et al.Identification and analysis of the metabolic functions of a high-salt-tolerant halophilic aromatic yeast Candida etchellsii for soy sauce production[J].World Journal of Microbiology&Biotechnology,2012,28(4):1451-1458.

    [9]李明達(dá),陳霞,韓丹,等.鹽脅迫條件下釀酒酵母的代謝通量分析[J].吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(理學(xué)版),2010,48(4): 699-703.

    [10]FENG Y,YU C,SU G,et al.Evaluation of aroma differences between high-salt liquid-state fermentation and low-salt solid-state fermentation soy sauces from China[J].Food Chemistry,2014,145(145C):126-134.

    [11]李學(xué)偉,陳強(qiáng),朱新貴.添加生香酵母改善醬油風(fēng)味的研究[J].中國(guó)釀造,2014,33(3):121-124.

    [12]XIAO Z B,SUN Z Y,F(xiàn)ENG T,et al.Comparison of Volatile Flavor Components in Four Kinds of Chinese Fermented Black Soybeans(Glycine max(L.)Merrill)by HSSPME-GC/MS and Chemometrics[J].Food Science&Technology Research,2011,17(4):319-326.

    [13]SONG Y R,JEONG D Y,BAIK S H.Effects of indigenous yeasts on physicochemical and microbial properties of Korean soy sauce prepared by low-salt fermentation[J].Food Microbiology,2015(51):171-178.

    [14]STEINHAUS P,SCHIEBERLE P.Characterization of the key aroma compounds in soy sauce using approaches of molecular sensory science[J].Journal of Agricultural&Food Chemistry,2007,55(15):6262-6269.

    [15]張艷芳,陶文沂.兩種發(fā)酵醬油風(fēng)味物質(zhì)的分析研究[J].精細(xì)化工,2008,25(5):486-490.

    [16]劉勝輝,孫偉生,陸新華,等.6個(gè)菠蘿品種成熟果實(shí)香氣成分分析[J].熱帶作物學(xué)報(bào),2015,36(06):1179-1185.

    [17]陳玲,楊文彬,李劍政.海南西番蓮果實(shí)香氣成分研究[J].香料香精化妝品,2001(5):1-4.

    [18]ARYUMAN P,LERTSIRI S,VISESSANGUAN W,et al.Glutaminase-producing Meyerozyma(Pichia)guilliermondii isolated from Thai soy sauce fermentation[J].International Journal of Food Microbiology,2015(192):7-12.

    (編輯:莫婕)

    Molecular identification and analysis of volatile aroma components of a halotolerant yeast,Meyerozyma guilliermondii isolated from soy mash

    YANG Yang,DENG Yue,LIU Yanxi,LIU Rongmei,JIN Yulan,YANG Zhirong,SUN Qun
    (Sichuan Key Laboratory of Resource Microbiological and Biotechnology,College of Life Sciences,Sichuan University,Chengdu 610065,China)

    In order to screening microorganisms which have the potential for further application in soy sauce production from the natural sun-brewed fermentation to promote the combination of traditional and modern industry.In this study,a halotolerant aroma-producing strain 3-J15 was isolated from the soy mash of the 3rdyear fermented by natural sun-brewed manufacturing,which was identified as Meyerozyma guilliermondii.The metabolites of 3-J15 in a given growing environment with or without salt stress were further analyzed by solid-phase micro-extraction coupled with gas chromatography/mass spectrometry (SPME-GC/MS).A general volatile profile of 10 characteristic aromatic substances including aldehyde,ketone,alcohol,organic acid and ester was obtained.Among them,the major volatile compounds were 3-methyl-1-butanol and 2-phenylethanol.Combined with the previous studies,these aromatic substances were deemed contributive to have a positive impact on the characteristic flavor of soy sauce.Therefore,this strain of Meyerozyma guilliermondii has the potential for further application in soy sauce production.

    Meyerozyma guilliermondii;soy sauce;aroma components;SPME-GC/MS

    A

    1674-5124(2016)11-0055-05

    10.11857/j.issn.1674-5124.2016.11.012

    2016-06-09;

    2016-08-01

    川大-瀘州科技合作項(xiàng)目(2014CDLZ-S09)

    楊陽(yáng)(1992-),女,四川自貢市人,碩士研究生,專(zhuān)業(yè)方向?yàn)楣I(yè)微生物。

    孫群(1967-),女,教授,博士,研究方向?yàn)槲⑸锛夹g(shù)與食品安全。

    猜你喜歡
    醬油揮發(fā)性香氣
    鈰基催化劑在揮發(fā)性有機(jī)物催化燃燒治理中的研究進(jìn)展
    分子催化(2022年1期)2022-11-02 07:11:20
    揮發(fā)性有機(jī)物污染環(huán)保治理新思路的探討
    春日香氣
    買(mǎi)醬油
    香氣鎖定狙擊心中的他
    Coco薇(2017年8期)2017-08-03 20:46:09
    買(mǎi)醬油
    故事大王(2016年10期)2016-11-07 15:30:12
    與生活自然為伍的夏日香氣
    Coco薇(2016年8期)2016-10-09 02:08:33
    買(mǎi)醬油
    吹掃捕集-氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用測(cè)定水中18種揮發(fā)性有機(jī)物
    我把醬油打回來(lái)啦
    国产一区二区在线观看日韩| 九草在线视频观看| 午夜精品在线福利| 国模一区二区三区四区视频| 国产免费视频播放在线视频 | 日韩成人av中文字幕在线观看| www.色视频.com| 精品久久久久久久久av| 午夜福利视频1000在线观看| 久久久久久久久久久丰满| 欧美日韩国产亚洲二区| 国产精品一区二区性色av| 精品久久久久久久久亚洲| 舔av片在线| 乱系列少妇在线播放| 99热这里只有是精品50| 亚洲欧美精品自产自拍| 最近最新中文字幕免费大全7| 99国产精品一区二区蜜桃av| 高清毛片免费看| 伊人久久精品亚洲午夜| 国产真实伦视频高清在线观看| 丰满人妻一区二区三区视频av| 久久这里只有精品中国| 91aial.com中文字幕在线观看| 国产精品综合久久久久久久免费| 久久久亚洲精品成人影院| 国产av在哪里看| 97人妻精品一区二区三区麻豆| eeuss影院久久| 久久久久久久久久黄片| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 欧美人与善性xxx| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 国内精品一区二区在线观看| 亚洲精品亚洲一区二区| 久久亚洲精品不卡| 精品久久久久久久久av| 国产精华一区二区三区| 欧美成人免费av一区二区三区| 国产精品野战在线观看| 亚洲成色77777| 国产精品99久久久久久久久| 国产男人的电影天堂91| 日本与韩国留学比较| 色噜噜av男人的天堂激情| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 99九九线精品视频在线观看视频| 91久久精品国产一区二区成人| 成人无遮挡网站| 男女视频在线观看网站免费| 好男人在线观看高清免费视频| 中文字幕制服av| 免费人成在线观看视频色| 日韩欧美国产在线观看| 欧美97在线视频| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 国产老妇女一区| av播播在线观看一区| 一边亲一边摸免费视频| 国产精华一区二区三区| 一级av片app| av专区在线播放| 色5月婷婷丁香| 日韩av在线免费看完整版不卡| 日韩中字成人| 麻豆国产97在线/欧美| 一本久久精品| 欧美另类亚洲清纯唯美| 成人欧美大片| 一区二区三区高清视频在线| 爱豆传媒免费全集在线观看| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 成人二区视频| 国产精品不卡视频一区二区| 久久热精品热| 婷婷六月久久综合丁香| 两个人视频免费观看高清| 国产成人aa在线观看| 成人美女网站在线观看视频| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 国产精品一区www在线观看| 久热久热在线精品观看| 啦啦啦韩国在线观看视频| 亚洲欧美日韩东京热| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 一级毛片电影观看 | 亚洲在线自拍视频| 欧美激情久久久久久爽电影| 国产爱豆传媒在线观看| 亚洲av成人精品一二三区| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 国产精华一区二区三区| 久久久久久久国产电影| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 欧美潮喷喷水| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 久久99热6这里只有精品| 高清毛片免费看| 国产精品乱码一区二三区的特点| 波多野结衣高清无吗| 婷婷六月久久综合丁香| 国产男人的电影天堂91| 日本av手机在线免费观看| 亚洲国产欧美人成| 久久久久九九精品影院| 久久精品久久精品一区二区三区| 成年免费大片在线观看| 国产成人精品一,二区| 亚洲欧美成人精品一区二区| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 神马国产精品三级电影在线观看| 免费电影在线观看免费观看| 69av精品久久久久久| videossex国产| 国产精品伦人一区二区| 联通29元200g的流量卡| 内射极品少妇av片p| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 国产精品三级大全| 日韩亚洲欧美综合| av在线老鸭窝| 看十八女毛片水多多多| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 久久久精品大字幕| 国产av码专区亚洲av| 99久久精品热视频| 69av精品久久久久久| 桃色一区二区三区在线观看| 中文字幕亚洲精品专区| 波多野结衣巨乳人妻| 永久免费av网站大全| 国产成人精品婷婷| 99久久精品国产国产毛片| 99热这里只有是精品50| 日本-黄色视频高清免费观看| 欧美另类亚洲清纯唯美| 国产精品伦人一区二区| 日本一本二区三区精品| 日本黄大片高清| 国产成人91sexporn| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 国产成人福利小说| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 中文字幕亚洲精品专区| 国产探花极品一区二区| 日本五十路高清| a级毛片免费高清观看在线播放| 校园人妻丝袜中文字幕| 国产亚洲精品久久久com| 久久久久九九精品影院| 亚洲欧美日韩高清专用| 精品久久久久久久久久久久久| 中文字幕久久专区| 一个人看视频在线观看www免费| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 日韩制服骚丝袜av| 最近最新中文字幕免费大全7| 最近手机中文字幕大全| 亚洲人成网站高清观看| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 免费av毛片视频| 99国产精品一区二区蜜桃av| 久久草成人影院| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 欧美人与善性xxx| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 久久精品影院6| 日韩欧美精品免费久久| 男人狂女人下面高潮的视频| 免费一级毛片在线播放高清视频| 九草在线视频观看| av免费观看日本| 狠狠狠狠99中文字幕| 久热久热在线精品观看| 亚洲成av人片在线播放无| 免费观看在线日韩| 国产成人免费观看mmmm| 男女视频在线观看网站免费| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 国产精品乱码一区二三区的特点| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| or卡值多少钱| 久久久国产成人免费| 欧美另类亚洲清纯唯美| 一个人看的www免费观看视频| 寂寞人妻少妇视频99o| 婷婷色综合大香蕉| 免费大片18禁| 国产69精品久久久久777片| 免费一级毛片在线播放高清视频| 国产免费一级a男人的天堂| 亚洲自偷自拍三级| 成人无遮挡网站| 亚洲人成网站在线播| 波野结衣二区三区在线| 日本wwww免费看| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 欧美区成人在线视频| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 国产精华一区二区三区| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 国产伦一二天堂av在线观看| 午夜福利成人在线免费观看| 国内精品一区二区在线观看| 亚洲伊人久久精品综合 | 久久久国产成人精品二区| 久久久久免费精品人妻一区二区| 哪个播放器可以免费观看大片| 亚洲五月天丁香| 日本一本二区三区精品| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 桃色一区二区三区在线观看| 精品酒店卫生间| 国产成人91sexporn| 毛片女人毛片| 啦啦啦韩国在线观看视频| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 麻豆国产97在线/欧美| 久久人人爽人人片av| 亚洲人成网站在线观看播放| av福利片在线观看| 婷婷六月久久综合丁香| 内地一区二区视频在线| 亚洲成人av在线免费| 高清日韩中文字幕在线| 亚洲高清免费不卡视频| 精品久久久久久成人av| 国产精品一区二区性色av| 91在线精品国自产拍蜜月| 亚洲三级黄色毛片| 亚洲av成人精品一二三区| 少妇人妻精品综合一区二区| 亚洲中文字幕日韩| 偷拍熟女少妇极品色| 成人美女网站在线观看视频| 久久精品国产自在天天线| 国产成人aa在线观看| av天堂中文字幕网| 两个人视频免费观看高清| 国产一区有黄有色的免费视频 | 亚洲在线观看片| 日本黄色视频三级网站网址| 欧美性猛交黑人性爽| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 特级一级黄色大片| 3wmmmm亚洲av在线观看| 丝袜美腿在线中文| 成人鲁丝片一二三区免费| 国产精品人妻久久久久久| 男的添女的下面高潮视频| 亚洲精品国产成人久久av| 午夜激情欧美在线| 波多野结衣巨乳人妻| 久久99蜜桃精品久久| 免费搜索国产男女视频| 97超碰精品成人国产| 亚洲自偷自拍三级| 中文在线观看免费www的网站| 国产一区二区三区av在线| av女优亚洲男人天堂| 色综合色国产| 国产视频首页在线观看| 精品国内亚洲2022精品成人| 丰满人妻一区二区三区视频av| 如何舔出高潮| 日韩欧美精品v在线| 在线免费十八禁| 一个人看的www免费观看视频| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 黄色欧美视频在线观看| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 免费看日本二区| 欧美一区二区精品小视频在线| 日韩欧美精品免费久久| 不卡视频在线观看欧美| 欧美精品国产亚洲| 国产v大片淫在线免费观看| 永久网站在线| 欧美日韩精品成人综合77777| 欧美三级亚洲精品| 97超视频在线观看视频| 1024手机看黄色片| 97超碰精品成人国产| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 毛片一级片免费看久久久久| 亚洲国产成人一精品久久久| h日本视频在线播放| 中文字幕av成人在线电影| 国产伦一二天堂av在线观看| 欧美一区二区精品小视频在线| 国产精品精品国产色婷婷| 超碰97精品在线观看| 色综合色国产| 国产精品,欧美在线| 日韩亚洲欧美综合| 中文字幕av在线有码专区| 亚洲精品久久久久久婷婷小说 | 一二三四中文在线观看免费高清| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 麻豆久久精品国产亚洲av| 麻豆国产97在线/欧美| 最近2019中文字幕mv第一页| 麻豆成人av视频| www日本黄色视频网| 欧美成人a在线观看| av黄色大香蕉| 亚洲欧美精品自产自拍| 男女国产视频网站| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 最近中文字幕2019免费版| 欧美性感艳星| 国产伦在线观看视频一区| 男女边吃奶边做爰视频| 啦啦啦韩国在线观看视频| 日韩欧美三级三区| 超碰97精品在线观看| 国产精品久久久久久久电影| 麻豆国产97在线/欧美| 午夜爱爱视频在线播放| 日韩欧美在线乱码| 午夜福利在线在线| 嫩草影院新地址| 丝袜喷水一区| 久久热精品热| 一夜夜www| 97在线视频观看| 久久精品久久精品一区二区三区| 日韩欧美国产在线观看| 精品酒店卫生间| 99在线人妻在线中文字幕| 最近手机中文字幕大全| 日本av手机在线免费观看| 亚洲国产精品国产精品| 亚洲成av人片在线播放无| 热99在线观看视频| 亚洲国产色片| 久久亚洲国产成人精品v| eeuss影院久久| 亚洲国产色片| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 男人舔女人下体高潮全视频| 毛片女人毛片| 日韩成人伦理影院| av免费在线看不卡| 国产精品国产三级国产专区5o | 久久精品综合一区二区三区| 亚洲国产精品久久男人天堂| 亚洲av日韩在线播放| 淫秽高清视频在线观看| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 日韩 亚洲 欧美在线| 国产精品野战在线观看| 国产成人福利小说| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 亚洲最大成人av| 国产激情偷乱视频一区二区| 久久精品综合一区二区三区| 日本一本二区三区精品| 亚洲精品自拍成人| 乱系列少妇在线播放| 男的添女的下面高潮视频| 十八禁国产超污无遮挡网站| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 免费电影在线观看免费观看| 一级爰片在线观看| 精品久久久久久久久av| 国产精品人妻久久久久久| 亚洲最大成人av| 91精品一卡2卡3卡4卡| 久久久久久大精品| 欧美+日韩+精品| 偷拍熟女少妇极品色| 亚洲,欧美,日韩| 欧美一区二区亚洲| www.av在线官网国产| av在线天堂中文字幕| 国产伦在线观看视频一区| 免费观看人在逋| 搞女人的毛片| 99久久无色码亚洲精品果冻| 熟女电影av网| 精品欧美国产一区二区三| 国产成人精品久久久久久| 一本一本综合久久| 男的添女的下面高潮视频| 亚洲欧美一区二区三区国产| 人人妻人人澡欧美一区二区| 久久草成人影院| 国产一区二区在线观看日韩| 国产乱人偷精品视频| 日韩大片免费观看网站 | 看非洲黑人一级黄片| 成年av动漫网址| 国产精品av视频在线免费观看| 欧美成人午夜免费资源| 最近最新中文字幕免费大全7| 男女那种视频在线观看| 国产亚洲91精品色在线| 国产又色又爽无遮挡免| 天美传媒精品一区二区| 国产精品一区二区在线观看99 | 一级黄片播放器| 国产av在哪里看| 免费看日本二区| 男女下面进入的视频免费午夜| 久久精品国产亚洲av天美| av免费在线看不卡| 国产精品野战在线观看| 免费大片18禁| 一个人看的www免费观看视频| 亚洲国产最新在线播放| 午夜福利网站1000一区二区三区| 99热全是精品| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 国产精品不卡视频一区二区| 搡女人真爽免费视频火全软件| 国产真实乱freesex| 亚洲中文字幕日韩| 综合色丁香网| 久久这里有精品视频免费| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 国产精品一区二区性色av| 国产精品久久视频播放| 亚洲性久久影院| 成人特级av手机在线观看| 乱码一卡2卡4卡精品| 成人三级黄色视频| 亚洲欧美一区二区三区国产| 国产老妇女一区| 国产精品精品国产色婷婷| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 久久亚洲精品不卡| 欧美3d第一页| 波野结衣二区三区在线| 美女黄网站色视频| 亚洲国产色片| 亚洲成av人片在线播放无| 永久网站在线| 欧美性猛交黑人性爽| 国产精品国产三级国产专区5o | 高清日韩中文字幕在线| 插阴视频在线观看视频| 深夜a级毛片| 国国产精品蜜臀av免费| 亚洲三级黄色毛片| 国产一区亚洲一区在线观看| 乱码一卡2卡4卡精品| 最新中文字幕久久久久| 女人被狂操c到高潮| 午夜日本视频在线| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 国产爱豆传媒在线观看| 又爽又黄无遮挡网站| 久久久久精品久久久久真实原创| videos熟女内射| 床上黄色一级片| 国产伦精品一区二区三区四那| 久久综合国产亚洲精品| av福利片在线观看| 国产人妻一区二区三区在| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 中文字幕亚洲精品专区| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 国产成人午夜福利电影在线观看| 日日摸夜夜添夜夜爱| 亚洲中文字幕日韩| 欧美xxxx性猛交bbbb| 中文欧美无线码| 亚洲图色成人| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 赤兔流量卡办理| 日韩成人av中文字幕在线观看| 欧美最新免费一区二区三区| 午夜爱爱视频在线播放| 哪个播放器可以免费观看大片| 高清在线视频一区二区三区 | 国产av一区在线观看免费| 亚洲自偷自拍三级| 欧美日韩国产亚洲二区| 91精品伊人久久大香线蕉| 免费观看在线日韩| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 白带黄色成豆腐渣| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 亚洲综合精品二区| 中文天堂在线官网| av女优亚洲男人天堂| 亚洲精品aⅴ在线观看| 精品久久国产蜜桃| 毛片一级片免费看久久久久| 国产探花在线观看一区二区| 亚洲欧美成人综合另类久久久 | 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 国产精华一区二区三区| 三级国产精品欧美在线观看| 久久久国产成人免费| 久久热精品热| 秋霞在线观看毛片| 日韩欧美精品v在线| 中文字幕亚洲精品专区| 免费播放大片免费观看视频在线观看 | 一区二区三区四区激情视频| 久久鲁丝午夜福利片| 国产高清有码在线观看视频| 亚洲最大成人中文| 精品免费久久久久久久清纯| 99久久精品一区二区三区| 久久精品影院6| 国产欧美日韩精品一区二区| 深爱激情五月婷婷| 18+在线观看网站| 亚洲最大成人av| 尾随美女入室| 青春草亚洲视频在线观看| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品 | 国产三级在线视频| 亚洲国产精品久久男人天堂| 成年女人永久免费观看视频| 女人久久www免费人成看片 | 日韩欧美精品v在线| 老女人水多毛片| 青春草亚洲视频在线观看| 在线a可以看的网站| 亚洲成人久久爱视频| 色噜噜av男人的天堂激情| 联通29元200g的流量卡| av在线播放精品| 麻豆久久精品国产亚洲av| 嘟嘟电影网在线观看| 国产高清视频在线观看网站| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 男人的好看免费观看在线视频| 日韩av不卡免费在线播放| 精品久久久久久成人av| 国产精品日韩av在线免费观看| 久久久久久久久久久免费av| 日韩 亚洲 欧美在线| 婷婷六月久久综合丁香| 日韩欧美在线乱码| 最后的刺客免费高清国语| 国产av在哪里看| 国产 一区 欧美 日韩| 最近视频中文字幕2019在线8| 亚洲成色77777| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 亚洲av成人精品一二三区| 午夜视频国产福利| 久久午夜福利片| 神马国产精品三级电影在线观看| 午夜久久久久精精品| 成人漫画全彩无遮挡| 国产精品久久久久久久电影| 男人狂女人下面高潮的视频| 国产av不卡久久| 女人久久www免费人成看片 | 最新中文字幕久久久久| 午夜视频国产福利| 一区二区三区乱码不卡18| av播播在线观看一区| 99热这里只有是精品50| 最近中文字幕高清免费大全6| 纵有疾风起免费观看全集完整版 | 欧美一级a爱片免费观看看| 日日干狠狠操夜夜爽| 国产爱豆传媒在线观看| 久久久久久久久久久丰满| a级毛片免费高清观看在线播放| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 97超视频在线观看视频| 久久鲁丝午夜福利片| 水蜜桃什么品种好| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 免费av毛片视频| 黄片wwwwww| 久久99热6这里只有精品| 免费看a级黄色片| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 国产高清有码在线观看视频| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 中国国产av一级| 国产成人一区二区在线| 日日摸夜夜添夜夜爱| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 亚洲自偷自拍三级| 欧美日韩国产亚洲二区| 精品久久久久久久末码| 免费观看在线日韩| 最近的中文字幕免费完整| 国产不卡一卡二| 国产成人精品一,二区| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 免费无遮挡裸体视频| 一本一本综合久久| 在线观看av片永久免费下载| 成人鲁丝片一二三区免费| 在线观看一区二区三区| 欧美97在线视频| 久久99热这里只频精品6学生 | 蜜臀久久99精品久久宅男| 久久精品国产亚洲av天美| 色综合亚洲欧美另类图片| 青春草视频在线免费观看| 久久综合国产亚洲精品| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 亚洲美女视频黄频| 啦啦啦韩国在线观看视频|