氣相色譜法測(cè)定焙烤食品中脫氫乙酸

景　贊　劉　超

（樂(lè)山市食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心，四川樂(lè)山614000）

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氣相色譜法測(cè)定焙烤食品中脫氫乙酸

景贊劉超

（樂(lè)山市食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心，四川樂(lè)山614000）

摘要：本文優(yōu)化了現(xiàn)有國(guó)標(biāo)中測(cè)定脫氫乙酸的氣相色譜法，分別從方法回收率、精密度、檢出限和實(shí)際樣品測(cè)定四個(gè)方面驗(yàn)證方法的適用性。在0～2.5g/kg測(cè)定范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好，加標(biāo)回收率為91.7～98.4％，精密度為1.9～3.7％，檢出限為1.5mg/kg。通過(guò)優(yōu)化樣品提取過(guò)程，提高了方法的檢出限，減少了樣品中雜質(zhì)的干擾，定量更為準(zhǔn)確，擴(kuò)大了標(biāo)準(zhǔn)的適用范圍。

關(guān)鍵詞：脫氫乙酸；氣相色譜法；焙烤食品

近年來(lái)，無(wú)論是從新聞報(bào)道，還是各地食藥監(jiān)部門發(fā)布的不合格抽檢信息來(lái)看，超范圍、超限量使用食品添加劑的事件越來(lái)越頻繁。消費(fèi)者對(duì)其的關(guān)注程度也越來(lái)越高，甚至到了“聞添色變”的程度[1-3]，國(guó)家對(duì)于食品添加劑的使用是有嚴(yán)格要求的，正常使用不僅可以改善食品的色香味，延長(zhǎng)食品的保質(zhì)期，而且在一定程度上保持了食品的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。脫氫乙酸作為一種常見(jiàn)的防腐劑，廣泛應(yīng)用在熟肉制品、糕點(diǎn)、面包、蔬菜制品中[4]，其主要作用是防止霉菌、細(xì)菌的滋生，延長(zhǎng)了食品的保質(zhì)期。目前檢測(cè)脫氫乙酸的方法主要有氣相色譜法、液相色譜法[5-7]，國(guó)標(biāo)中氣相色譜法操作復(fù)雜，有機(jī)試劑消耗量大，增加了檢驗(yàn)成本和周期。在本文中，筆者結(jié)合自身在檢驗(yàn)過(guò)程中的經(jīng)驗(yàn)，優(yōu)化了氣相色譜法的提取步驟和儀器條件，同時(shí)擴(kuò)大了標(biāo)準(zhǔn)適用范圍，不再局限于果汁、腐乳和醬菜，為檢測(cè)機(jī)構(gòu)開(kāi)展焙烤食品中脫氫乙酸的測(cè)定提供了必要的參考數(shù)據(jù)。

1　材料與方法

1.1材料與試劑

20個(gè)樣品采購(gòu)自樂(lè)山市各零售網(wǎng)點(diǎn)（包括5個(gè)面包、3個(gè)綠豆糕、5個(gè)沙琪瑪、3個(gè)肉松餅、2個(gè)酥餅、2個(gè)鮮花餅，每個(gè)樣品均來(lái)自不同廠商）。脫氫乙酸標(biāo)準(zhǔn)品，含量98％，購(gòu)于百靈威科技有限公司；乙酸乙酯、正己烷，色譜純；鹽酸、氫氧化鈉，優(yōu)級(jí)純。

1.2儀器與設(shè)備

氣相色譜儀，GC2010-Plus，島津中國(guó)有限公司；

超聲波清洗器，KQ-700DE，昆山市超聲儀器有限公司；

高速冷凍離心機(jī)，TGL16M，長(zhǎng)沙湘智離心機(jī)儀器有限公司。

1.3標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

稱取適量脫氫乙酸標(biāo)準(zhǔn)品，用乙酸乙酯溶解并配制成1mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，分別準(zhǔn)確移取0、0.1、0.5、1.0、1.5、2mL上述溶液至10mL容量瓶中，用乙酸乙酯定容，得到0、10、50、100、150、200μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。采用氣相色譜法測(cè)定，以保留時(shí)間定性，濃度為橫坐標(biāo)，測(cè)得的峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.4樣品前處理

稱取2.0000g粉碎后的樣品于50mL容量瓶中，加入40mL氫氧化鈉溶液（20mmol/L），超聲提取20min后用水定容至刻度，混勻后將溶液轉(zhuǎn)移至50mL離心管中，10000r/min離心10min，移取10mL上清液于50mL比色管中，加5mL正己烷提取一次，棄去正己烷層，加入0.5mL鹽酸溶液，用10mL乙酸乙酯分兩次提取，合并兩次提取液氮吹至近干，用乙酸乙酯定容至5mL經(jīng)0.22μm有機(jī)濾膜過(guò)濾后備用。

1.5儀器條件設(shè)置

進(jìn)樣口溫度，230℃；分流比，10:1；色譜柱，RTX-5毛細(xì)管柱（30m×0.32mm，0.25μm）；升溫程序，100℃保持1min，以15℃/min升至230℃，保持10min。進(jìn)樣口壓力，100KPa。檢測(cè)器溫度，280℃；進(jìn)樣體積，1μL。

2　結(jié)果與分析

2.1標(biāo)準(zhǔn)溶液的線性關(guān)系和檢出限

分別將標(biāo)準(zhǔn)溶液按照儀器條件進(jìn)行測(cè)定，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，在所測(cè)定濃度范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1　線性范圍和檢出限

由表1可知，優(yōu)化后的氣相色譜法，其檢出限小于國(guó)標(biāo)方法GB/T 5009.121-2003（8mg/kg），方法的靈敏度提高。

2.2氣相檢測(cè)譜圖結(jié)果

標(biāo)準(zhǔn)溶液、加標(biāo)樣品色譜圖見(jiàn)圖1～2。

圖1　標(biāo)準(zhǔn)溶液氣相色譜圖

圖2　加標(biāo)樣品氣相色譜圖

2.3方法學(xué)考察

2.3.1加標(biāo)回收率

在空白樣品中加入脫氫乙酸標(biāo)準(zhǔn)溶液分別使其最終含量為0.25、0.50、1.00、2.00g/kg，4個(gè)水平，每個(gè)水平設(shè)定3個(gè)平行，按照上述樣品提取方法進(jìn)行處理，在儀器最優(yōu)條件下測(cè)定，計(jì)算回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2　加標(biāo)回收率及其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（n=3）

由表2可知，該方法加標(biāo)回收率均在91.7％～98.4％之間，說(shuō)明該方法回收率良好。

2.3.2精密度

將脫氫乙酸標(biāo)準(zhǔn)溶液10、50、100、200μg/mL 4個(gè)濃度，每個(gè)濃度設(shè)定6個(gè)平行，在儀器最優(yōu)條件下測(cè)定，計(jì)算方法精密度，結(jié)果見(jiàn)表3。

表3　精密度試驗(yàn)（n=6）

由表3可以看出，該方法精密度范圍為1.3％～2.6％，均小于國(guó)標(biāo)GB/T 5009.121-2003中對(duì)精密度10％的要求，精密度良好。

2.3.3重復(fù)性

將含有脫氫乙酸的樣品按照上述處理方法重復(fù)處理并測(cè)定6次，考察方法的重復(fù)性。結(jié)果見(jiàn)表4（見(jiàn)下頁(yè)）。

從表4可以看出，6次測(cè)定結(jié)果相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.1％，方法重復(fù)性良好。

表4　重復(fù)性試驗(yàn)（n=6）

2.4樣品檢測(cè)結(jié)果

表5　氣相色譜法測(cè)定結(jié)果

將樣品按照前處理方法凈化后上機(jī)分析，結(jié)果見(jiàn)表5。20個(gè)樣品測(cè)定結(jié)果均未超過(guò)GB2760-2014限量要求（500mg/kg），含量范圍為20～229mg/kg，說(shuō)明食品生產(chǎn)單位和銷售者嚴(yán)格執(zhí)行國(guó)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)和法律法規(guī)要求，不存在超限量使用脫氫乙酸的現(xiàn)象。

3　討論

作為監(jiān)督檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)，在檢測(cè)食品中脫氫乙酸時(shí)經(jīng)常要用到國(guó)標(biāo)方法GB/T5009.121-2003，該方法用到大量的乙醚試劑，乙醚極易揮發(fā)，不僅污染環(huán)境，而且屬于易制毒試劑，從廠商購(gòu)買周期較長(zhǎng)。本方法簡(jiǎn)化了操作流程，有機(jī)試劑消耗量遠(yuǎn)遠(yuǎn)少于國(guó)標(biāo)方法，節(jié)省了實(shí)驗(yàn)室經(jīng)費(fèi)開(kāi)支，原國(guó)標(biāo)方法適用范圍僅僅局限在果汁、腐乳、醬菜，本方法擴(kuò)大了標(biāo)準(zhǔn)的適用范圍至焙烤食品，也具有更低的檢出限，適合各檢測(cè)單位采用。

參考文獻(xiàn)：

[1]韋何靜,傅江平.濫用食品添加劑現(xiàn)象仍然存在[N].中國(guó)質(zhì)量報(bào),2014-09-25(5).

[2]段艷紅,文博,黃艷芹,等.食品添加劑與食品安全關(guān)系探討[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2015,43(5):238-240.

[3]廖愛(ài)玲.超七成食品安全事件系“人為”不規(guī)范使用添加劑最多[N].中國(guó)食品報(bào),2015-12-14(6).

[4]中華人民共和國(guó)國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì).GB 2760-2014食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)[S].北京:中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社,2015.

[5]中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部.GB/T 5009.121-2003食品中脫氫乙酸的測(cè)定[S].北京:中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社,2004.

[6]中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局.GB/T 23377-2009食品中脫氫乙酸的測(cè)定高效液相色譜法[S].北京:中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社,2009.

[7]謝柏艷,馮光,辜華勝.高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定食品中的苯甲酸、山梨酸、脫氫乙酸及糖精鈉[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志, 2012,22(1):49-53.

Determination of Dehydroacetic Acid in Bakery Food by Gas Chromatography

JING Zan LIU Chao
(Leshan Center for Food and Drug Control,Leshan 614000,China)

Abstract:Optimized the determination of dehydroacetic acid in baked food by gas chromatography,investigated the applicability of this method from the recovery,precision,detection limit and actual samples test respectively.This method had a great recovery in the concentration range of 0～2.5g/kg,the standard addition recoveries in bakery food were between 91.7％～98.4％,the relative standard deviations were in the range of 1.9％～3.7％,the detection limit was 1.5mg/kg.This method improved the detection limit by optimization of the extraction process,the character of the method was simple,rapid and accurate,expanded the use of the standard range simultaneously.

Key words:Dehydroacetic acid;gas chromatography;bakery food

作者簡(jiǎn)介：景贊（1985—），男，助理工程師，研究方向?yàn)槭称钒踩皺z測(cè)

收稿日期：2015-10-05

中圖分類號(hào)：TS207.3

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1008-1038(2016)02-0025-03