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    淺析平基槭葉內(nèi)生物活性含量動(dòng)態(tài)變化

    2016-03-30 01:15:48董效文山西農(nóng)業(yè)大學(xué)山西030801
    天津農(nóng)林科技 2016年1期
    關(guān)鍵詞:葉綠素黃酮

    董效文(山西農(nóng)業(yè)大學(xué),山西 030801)

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    淺析平基槭葉內(nèi)生物活性含量動(dòng)態(tài)變化

    董效文
    (山西農(nóng)業(yè)大學(xué),山西 030801)

    摘要:本文以6年生平基槭苗木為試材,對(duì)其葉內(nèi)生物活性(黃酮、綠原酸、葉綠素、Vc)物質(zhì)含量進(jìn)行年動(dòng)態(tài)變化研究。結(jié)果表明:平基槭在年生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中,黃酮和葉綠素的含量變化呈“M”狀。黃酮含量變化分別出現(xiàn)在6月和8月,而8月達(dá)到全年最高值;葉綠素兩個(gè)高峰卻分別出現(xiàn)在6月和9月,6月為全年最高值。綠原酸、Vc含量變化分別是在6月和7月達(dá)到全年的最高值,都呈現(xiàn)先升后降的拋物線形。

    關(guān)鍵詞:平基槭;黃酮;綠原素;葉綠素;VC

    平基槭[1]是槭樹(shù)科槭樹(shù)屬的落葉喬木,在我國(guó)東北、黃河及長(zhǎng)江流域省區(qū)大量種植,它在綠化、天然林保護(hù)、防風(fēng)固沙等方面應(yīng)用廣泛。近年來(lái),由于它的葉內(nèi)含多種生物活性成分極具有食用、藥用價(jià)值,越來(lái)越受到人們的關(guān)注和重視。本試驗(yàn)通過(guò)對(duì)其葉內(nèi)黃酮、綠原酸、葉綠素、Vc含量進(jìn)行年動(dòng)態(tài)變化的研究,探索其各指標(biāo)含量的變化,為平基槭葉更好地開(kāi)發(fā)提供理論依據(jù)。

    1 材料和方法

    1.1試驗(yàn)材料

    選6年生平基槭苗木于2015年4—10月,在山西省榆次市林業(yè)局苗圃進(jìn)行取樣測(cè)定,每月取樣1次,摘取植株中上部葉片,用無(wú)離子水沖凈,濾紙吸干葉面水分后置冰箱待測(cè)。

    1.2測(cè)定方法

    1.2.1黃酮含量測(cè)定[1-3]

    取各處理5~8個(gè)葉片恒溫烘干,研碎過(guò)篩,稱(chēng)0.30 g,用70% C2H5OH 10 mL水浴(70~75 ℃)浸提6 h,70% C2H5OH定容,放1 mL于容量瓶,再加70% C2H5OH 4 mL,和0.3 mLNaNO2溶液混勻放置5 min,加0.3 mL Al(NO3)3溶液置6 min后,再加NaOH 2 mL搖勻,用70% C2H5OH定容置10 min,在500 nm條件下比色,標(biāo)準(zhǔn)曲線法得黃酮含量。

    1.2.2綠原酸含量測(cè)定[4]

    稱(chēng)樣品0.30 g,用95% C2H5OH 10 mL在水?。?0~75 ℃)浸提6 h,放入容量瓶,再用95% C2H5OH定容,放3 mL于容量瓶,再用C2H5OH(95%)定容,在324 nm條件下進(jìn)行比色測(cè)定,標(biāo)準(zhǔn)曲線得綠原酸含量。

    1.2.3葉綠素含量測(cè)定[5]

    取0.05 g葉片,研碎放具塞試管中,加95% C2H5OH 10 mL浸泡,避光至葉變白,取上清液在663 nm、645 nm條件下測(cè)吸光度。

    1.2.4Vc含量測(cè)定[6-7]

    (1) 取標(biāo)準(zhǔn)抗壞血酸溶液2 mL加8 mL 2%草酸,用DCIP(2,6-二氯吲哚酚鈉)溶液滴定至終點(diǎn),根據(jù)已知抗壞血酸和DCIP用量,計(jì)算滴定度即1 mL DCIP相當(dāng)于抗壞血酸的mg數(shù)。計(jì)算公式如下:

    W=(V-V1)×T×b×100/B×a

    W為100 g樣品中含抗壞血酸的mg數(shù);V1為滴定空白用DCIP mL數(shù);V為滴定樣品用DCIP mL數(shù);T為滴定度;B為測(cè)定用樣品液mL數(shù);b為樣品液V總;a為樣品g數(shù)。

    (2) 取切碎葉片0.5 g,加少許草酸研勻放入容量瓶,加ZnSO41 mL,再加1 mL K4[Fe(CN)6],最后用H2C2O4定容過(guò)濾。取10 mL過(guò)濾液放三角瓶中,用標(biāo)定好的DCIP鹽溶液滴定,至桃紅色15 s不褪色即可,記下用量。取H2C2O410 mL,用DCIP作空白滴定。

    2 結(jié)果與分析

    2.1平基槭葉內(nèi)生理指標(biāo)的年動(dòng)態(tài)變化

    2.1.1平基槭葉內(nèi)黃酮、綠原酸含量的變化

    圖1中顯示, 從4月10日到6月10日,黃酮含量增長(zhǎng)很快,達(dá)到第1個(gè)小高峰,為5.113%, 7月黃酮含量略有下降, 到8月10日達(dá)到第2個(gè)高峰,也是全年最高值,為5.998%,隨后至10月含量下降為3.893%,總體變化為“M”狀;而綠原酸含量變化不同于黃酮,它由生長(zhǎng)初期的2.197%,到6月達(dá)最高峰,綠原酸含量為4.402%,總體表現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì),到10月時(shí),綠原酸含量為2.336%,但還是比4月10日的高0.139個(gè)百分點(diǎn)。

    圖1 平基槭葉片內(nèi)黃酮、綠原酸含量年變化

    從表1可看出:6月和8月對(duì)黃酮含量影響最大,而4月影響最小。經(jīng)方差分析和多重比較,可知4月與5、6、7、8、9、10月;5月與6、7、8、9月存在極顯著差異,6、7月分別與8、9、10月存在極顯著差異,8月與9、10月存在極顯著差異。

    6月對(duì)綠原酸含量影響最大,9、10月分別與其它各時(shí)期間存在極顯著差異,而9月與10月之間不存在差異。所以從不同時(shí)期黃酮、綠原酸含量差異顯著性可知,它們和生長(zhǎng)時(shí)期有關(guān)。

    表1 不同月份平基槭葉內(nèi)黃酮、綠原酸的含量比較?。ǎィ?/p>

    2.1.2平基槭葉內(nèi)葉綠素、Vc含量的變化

    由圖2可知, 4—5月葉綠素含量增加緩慢,5—6月急劇上升達(dá)4.327 mg?g-1,6月后開(kāi)始下降,到8月又開(kāi)始上升,至9月達(dá)到第2次高峰達(dá)3.991 mg?g-1,之后又急速下降。由圖3可知,生長(zhǎng)前期從4月開(kāi)始Vc含量急劇上升,至7月達(dá)到全年最高,含量達(dá)最大值657.02 mg?(100 g)-1,之后開(kāi)始緩慢下降,10月至低谷103.56 mg?(100 g)-1。

    圖2 平基槭葉內(nèi)葉綠素含量年變化

    圖3 平基槭葉內(nèi)VC含量

    表4 不同月份平基槭葉內(nèi)葉綠素、Vc含量的比較

    由表4可知,6月與9月葉綠素含量影響最大,10月含量達(dá)到最低, 6月與4、5、7、8、10月存在極顯著差異,10月與5、6、7、9月存在極顯著差異,9 與10月存在極顯著差異;平基槭葉Vc含量6、7、8含量最高,6、7、8月分別與4、5、9、10月之間存極顯著差異,6、7、8月之間差異不顯著,4、5、9、10月之間差異也不顯著,由上表數(shù)據(jù)可以看出,平基槭葉內(nèi)的葉綠素和Vc含量與生長(zhǎng)時(shí)期有很大關(guān)系。

    3 討論與結(jié)論

    結(jié)果顯示:(1)黃酮和葉綠素的含量變化呈“M”狀,黃酮含量變化在6月達(dá)到一個(gè)小高峰,7月稍有下降,然后在8月達(dá)到全年最高值;而葉綠素兩個(gè)高峰卻分別出現(xiàn)在6月和9月。綠原酸含量變化在6月達(dá)到全年的最高值,Vc含量7月達(dá)到峰值,兩者都呈現(xiàn)先上升后下降的拋物線形。(2)在平基槭的整個(gè)生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中,6月和8月對(duì)其葉內(nèi)黃酮含量的影響最大,4月對(duì)黃酮含量的影響最小,且于8月達(dá)到最高,含量高達(dá)6.109%;而6月綠原酸含量達(dá)到最高,含量高達(dá)3.963%;葉綠素含量6月達(dá)到最大,含量高達(dá)4.327 mg?g-1;Vc含量7月達(dá)到全年最高,含量高達(dá)657.02mg?(100 g)-1。

    試驗(yàn)表明,不論是出現(xiàn)一個(gè)還是兩個(gè)峰值,可以認(rèn)為它們含量變化與生長(zhǎng)時(shí)期有密切關(guān)系,6—8月是速生期,葉片發(fā)育成熟,水分養(yǎng)分供應(yīng)充足,樹(shù)勢(shì)旺盛,生物合成的有效成分保持在較高水平;之后硬化期樹(shù)木生長(zhǎng)減緩,相應(yīng)合成有效成分的底物也在減少,所以8月以后黃酮、綠原酸、葉綠素和VC含量基本上呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。

    參 考 文 獻(xiàn)

    [1] 牛春山.陜西樹(shù)木志[M].北京:中國(guó)林業(yè)出版社,1990:728.

    [2] 莊向平,虞杏英,楊更生,等.銀杏葉中黃酮含量的測(cè)定和提取方法[J].中草藥,1992,23(3):122-124.

    [3] 關(guān)紅菱,劉先林,龔堅(jiān),等.不同季節(jié)銀杏葉中總黃酮的測(cè)定[J].中草藥,1995,26(8):445.

    [4] 陳秀珍.銀杏葉不同生長(zhǎng)期總黃酮的含量測(cè)定(簡(jiǎn)報(bào))[J].廣西植物,1988,8(4):363-364.

    [5] 王蘭珍,馬希漢,王姝清,等.元寶楓葉有效成分動(dòng)態(tài)變化的研究[J]. 西北林學(xué)院學(xué)報(bào),1997,12(4):68-71.

    [6] 李合生.植物生理生化實(shí)驗(yàn)原理和技術(shù)[M].北京:高等教育出版社,1999:134.

    [7] 喬富廉.植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)分析測(cè)定技術(shù)[M].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)技術(shù)出版社,2002:90-91.

    作者簡(jiǎn)介:董效文(1992-),男,內(nèi)蒙古自治區(qū)扎蘭屯市人,主要從事森林培育工作。E-mail:guoaihua@163.com

    收稿日期:2015-11-02

    文章編號(hào):1002-0659(2016)01-0004-03

    中圖分類(lèi)號(hào):S718.43

    文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A

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