雞禽流感的診斷及防控措施

1 禽流感病毒的病原學(xué)概況

禽流感(avian influenza.AI)是正粘病毒科A型流感病毒中的一些血清亞型毒株引起的家禽及野生鳥類的全身性或呼吸系統(tǒng)綜合征的傳染病。該病毒的核酸由8個(gè)獨(dú)立的負(fù)股單鏈RNA組成，即NS、PB1、HA、NA PB2、M、PA、NP。根據(jù)毒力和致病力可以將禽流感病毒分為高致病性禽流感病毒、低致病性禽流感病毒以及無(wú)致病性禽流感病毒三種。

禽流感病毒的變異性極強(qiáng)。該病毒主要是依賴其表面糖蛋白HA和NA的抗原性的變異，其中變異率最高的是HA基因，每個(gè)核苷酸在每個(gè)復(fù)制周期中的變異率可以達(dá)到2.0‰。HA1基因變異性最大，能使病毒逃避宿主的免疫反應(yīng)；HA2基因相對(duì)保守，并且存在能誘導(dǎo)產(chǎn)生交叉反應(yīng)抗體的抗原表位。

2 禽流感病毒的流行病學(xué)

AIV普遍存在于全球范圍內(nèi)的許多家禽和野禽中。1961年首先在南非的燕鷗體內(nèi)分離到AIV，之后從野生禽類中分離到AIV的報(bào)道就越來(lái)越多，現(xiàn)在世界上絕大多數(shù)野禽體內(nèi)都已分離出了AIV。根據(jù)最新的流行病學(xué)研究統(tǒng)計(jì)，有超過(guò)26個(gè)科共 105種野禽攜帶有 AIV。水禽是流感病毒的自然宿主，對(duì)A型流感病毒有很好的適應(yīng)性，一般不表現(xiàn)出臨床癥狀，水禽中保存著己知A型流感病毒中的大部分亞型。禽流感病毒主要存在于病禽和感染禽的消化道、呼吸道以及其他臟器組織中，主要通過(guò)糞及口途徑感染，健康的禽類通過(guò)呼吸道和消化道與病毒接觸后發(fā)生感染。禽流感病毒能夠隨同禽類的糞便以及眼、鼻、口腔分泌物等排出體外，任何物品與病禽的分泌物、糞便、死禽尸體等接觸后均有污染的可能性，并成為傳播媒介，空氣、飲水、飼料、雞舍、籠具、運(yùn)輸工具、昆蟲以及各種攜帶病毒的各種鳥類的遷徙等都會(huì)發(fā)生機(jī)械性傳播，因此禽流感傳播途徑具有多樣性，禽流感病毒的控制和防治工作非常困難。

3 禽流感的臨床癥狀和病理變化

主要包括精神不振、體溫升高、飲食減少、消瘦等。母雞產(chǎn)蛋率也會(huì)降低，感染較輕者下降4%～5%，感染嚴(yán)重者下降可達(dá)到51%～82%，更嚴(yán)重的基本停止產(chǎn)蛋。當(dāng)雞被嚴(yán)重感染時(shí)的表現(xiàn)為體溫升高、精神沉郁、食欲減退或停食，較常見癥狀有噴嚏、咳嗽、氣管啰音等，嚴(yán)重者可出現(xiàn)呼吸困難等癥狀。其他癥狀如流淚、頭和顏面部水腫、身體蜷縮、羽毛松亂、雞冠和肉垂皮膚呈紅紫色、腳鱗出血、神經(jīng)癥狀（不能站立、角弓反張、頭頸震顫等）及腹瀉等也常見。

禽流感病理變化隨禽流感病毒的毒力不同而異。低致病性毒株（MPAI）感染后沒(méi)有明顯的病理變化，主要是呼吸道病變，尤其是竇的損害，以卡他性、膿性、纖維性或纖維膿性炎癥為特征。氣管有從漿液性到干酪性滲出，氣管黏膜水腫、充血甚至出血；眶下竇腫脹，有漿液性到漿液膿性滲出。高致病性禽流感（HPAI）感染時(shí)，最急性死亡迅速，可能病理變化不太明顯。剖檢時(shí)看到的病理變化，主要是內(nèi)臟器官和皮膚呈現(xiàn)各種水腫、出血和壞死。內(nèi)臟器官最恒定的是黏膜和漿膜面出血和實(shí)質(zhì)的壞死灶；出血最突出的是在心外膜、胸肌腺胃和肌胃的黏膜；皮下水腫表現(xiàn)為頭、顏面、上頸和腳的腫脹，并伴有點(diǎn)狀到斑塊狀出血，無(wú)毛處皮膚可看到壞死、出血和發(fā)紺；肺充血或出血并伴有水腫；有時(shí)可見腸道黏膜、泄殖腔黏膜有出血性炎癥。如有其他繼發(fā)感染時(shí)，病變則會(huì)更加復(fù)雜。

4 禽流感的診斷

臨床診斷和剖檢診斷主要參照上述禽流感臨床癥狀及病理癥狀即可進(jìn)行初診。實(shí)驗(yàn)室診斷主要根據(jù)禽流感病毒分離鑒定或血清學(xué)的試驗(yàn)結(jié)果，即可確診此病。實(shí)驗(yàn)室診斷的主要方法有：病原學(xué)檢測(cè)、血清學(xué)檢測(cè)（包括血凝和血凝抑制試驗(yàn)、瓊脂凝膠擴(kuò)散試驗(yàn)、神經(jīng)氨酸酶抑制試驗(yàn)、病毒中和試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、免疫熒光技術(shù)等）、分子生物學(xué)診斷技術(shù)（反轉(zhuǎn)錄——聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)、核酸探針技術(shù)、基因芯片技術(shù)等）。病毒分離時(shí)采用的是雞胚尿囊擴(kuò)增法和超速離心純化法，血凝和血凝抑制時(shí)用制備好的16種標(biāo)準(zhǔn)HA抗血清進(jìn)行HI抗原抑制試驗(yàn)確定亞型。瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)一般用于檢測(cè)A型流感共同抗原核蛋白（NP）及基質(zhì)蛋白（MP），一般采用的方法有雙向雙擴(kuò)散試驗(yàn)、免疫單輻射擴(kuò)散試驗(yàn)、對(duì)流免疫電泳等。瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)簡(jiǎn)單、方便、快速，不但可以定性，還可以定量。熒光抗體標(biāo)記、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)靈敏度高，可標(biāo)準(zhǔn)化操作，易于對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析。競(jìng)爭(zhēng)性ELISA法檢測(cè)禽流感的HA時(shí)，靈敏度可以達(dá)到100%；檢測(cè)HI時(shí)，靈敏度達(dá)到96.2%；瓊脂免疫擴(kuò)散法檢測(cè)HA時(shí)，靈敏度達(dá)到90%。以禽流感病毒重組核蛋白作為抗原采用間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)進(jìn)行檢測(cè)，其比率批內(nèi)和批間重復(fù)試驗(yàn)的變異系數(shù)一般在 2.9%~7.2%和3.4%～9.8%之間，與全病毒間接 ELISA、瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)、血凝抑制試驗(yàn)的檢測(cè)結(jié)果相對(duì)比符合率分別為 99.9%、97.1%、98.8%。反轉(zhuǎn)錄——聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)和核酸探針?lè)肿与s交技術(shù)、基因芯片技術(shù)可以對(duì)禽流感進(jìn)行準(zhǔn)確的診斷。

在臨床鑒別診斷時(shí)要特別注意與雞的新城疫、傳染性支氣管炎以及傳染性喉氣管炎的區(qū)別。

5 禽流感及新城疫的防控

5.1重視疫苗免疫，增強(qiáng)雞群的特異性免疫力

免疫接種是預(yù)防雞傳染病的有效手段。目前,國(guó)內(nèi)已批準(zhǔn)用于 H5N1亞型禽流感防疫的疫苗有，自然弱毒滅活疫苗、重組禽流感病毒滅活疫苗、基因重組活載體疫苗等。自然弱毒滅活疫苗主要有：禽流感滅活疫苗（H5亞型 N28株）、禽流感H5、H9亞型二價(jià)滅活疫苗（D96+F株）；重組禽流感病毒滅活疫苗主要有：重組禽流感病毒滅活疫苗 （H5N1亞型，Re-1株、Re4株、Re5株）、禽流感 （H5+H9）二價(jià)滅活疫苗（H5N1Re5+H9N2Re2株）以及重組禽流感H5亞型二價(jià)滅活疫苗（H5N1Re5+Re4株）；基因重組活載體疫苗主要有：禽流感重組新城疫病毒活載體雙價(jià)疫苗和禽流感重組雞痘病毒活疫苗?，F(xiàn)在禽流感疫苗研究的方向和熱點(diǎn)包括：核酸疫苗、禽流感HA亞單位疫苗、表達(dá)NP和M蛋白具有交叉保護(hù)作用的通用禽流感疫苗、改變NS1基因活的流感疫苗、表位疫苗、禽流感復(fù)制缺陷型疫苗、禽流感RNA復(fù)制子疫苗、禽流感冷適應(yīng)弱毒疫苗、轉(zhuǎn)基因植物疫苗、沙門氏菌為載體的禽流感DNA口服疫苗等，這些疫苗有望在不久的將來(lái)用于生產(chǎn)實(shí)踐。在免疫雞群時(shí)選用哪種疫苗、何時(shí)應(yīng)用、如何接種需取決于母源抗體水平、雞的日齡、當(dāng)?shù)匾卟〉牧餍星闆r等。在免疫接種后，必須定期對(duì)免疫效果進(jìn)行監(jiān)測(cè)和分析。由于在接種疫苗后，雞體內(nèi)與體液免疫有關(guān)的中和抗體、HI抗體、沉淀抗體等，與細(xì)胞免疫有關(guān)的各種因子以及與非特異性免疫有關(guān)的干擾素、補(bǔ)體和非特異性免疫效應(yīng)細(xì)胞等都會(huì)影響雞對(duì)疫病抵抗力的形成。因此目前依舊沒(méi)有一個(gè)行之有效的且能真實(shí)全面反映雞群免疫力水平的評(píng)價(jià)體系。HI試驗(yàn)操作簡(jiǎn)單，而且它能大體反映出體液免疫中抗體的出現(xiàn)和消長(zhǎng)的規(guī)律，有一定的代表性，所以通常多用 HI效價(jià)對(duì)免疫效果進(jìn)行監(jiān)測(cè)和評(píng)價(jià)，在尚未有其他更科學(xué)的評(píng)估體系出現(xiàn)之前，它依然是一種較為有效的評(píng)價(jià)抗體水平的方法。一般認(rèn)為，HI效價(jià)在61og2以上時(shí)可以大量的死亡損失就可以避免，超過(guò) 81og2基本上可以避免死亡損失，而 l01og2以上時(shí)，基本就可以避免產(chǎn)蛋量的急劇下降。條件較好的雞場(chǎng)最好根據(jù)抗體血凝抑制效價(jià)監(jiān)測(cè)結(jié)果來(lái)確定免疫的最佳時(shí)間和免疫程序。首免具體時(shí)間可根據(jù)以下公式進(jìn)行推算。雛雞出殼后，抽檢 0.5%的雛雞檢測(cè)血凝抑效價(jià)，并求其對(duì)數(shù)平均值，然后計(jì)算首免時(shí)間。計(jì)算公式：首免日齡=4.5x（1日齡血凝抑制抗體對(duì)數(shù)值-4）+5。平時(shí)應(yīng)待抗體效價(jià)降到 1∶64以下時(shí)進(jìn)行免疫后 10~14天抽檢，抗體效價(jià)比免疫前提高兩個(gè)滴度方可以認(rèn)為免疫成功，否則應(yīng)重新免疫。

5.2 雞禽流感免疫程序

蛋雞的禽流感免疫一般在 12～14日齡、45日齡及開產(chǎn)前三個(gè)階段進(jìn)行 3次；商品代肉雞免疫一般在 7～14日齡時(shí)免疫1次；種雞在 14～21日齡時(shí)首免，間隔 3～4周后加強(qiáng)免疫一次，以后根據(jù)免疫后抗體效價(jià)檢測(cè)結(jié)果每隔4～6個(gè)月免疫1次；產(chǎn)蛋雞則應(yīng)在每年的 10月 10日前進(jìn)行，而后每隔 75天免疫1次。如果H5N1和H9N2單苗的免疫應(yīng)分別進(jìn)行（最好間隔 10天）免疫效果會(huì)比使用聯(lián)苗免疫效果好。

5.3 加強(qiáng)衛(wèi)生管理，防止病原體侵入雞群

引種則必須從無(wú)本病的雞場(chǎng)引入，引種后一定要按規(guī)定進(jìn)行隔離觀察。為防止本病的水平傳播，場(chǎng)內(nèi)雞群應(yīng)隔離飼養(yǎng)，老弱病殘雞要及時(shí)淘汰。做好雞舍及周圍環(huán)境的清掃和消毒，家禽糞便應(yīng)堅(jiān)持及時(shí)清理。雞舍內(nèi)要確?？諝饬魍?，保證空氣質(zhì)量較好。加強(qiáng)雞群的日常飼養(yǎng)管理，提高雞群的免疫力和抵抗力。要按照雞各個(gè)階段的生長(zhǎng)需求對(duì)飼料進(jìn)行科學(xué)配置，公司喂?fàn)I養(yǎng)均衡的配合日糧，特別是保證必需氨基酸、維生素和微量元素的平衡。降低飼養(yǎng)密度，供應(yīng)清潔的飲水，對(duì)雞群進(jìn)行科學(xué)合理的管理。

5.4 相關(guān)疫病控制

雞的新城、傳染性支氣管炎、傳染性法氏囊以及傳染性喉氣管炎等病都會(huì)誘導(dǎo)禽流感的爆發(fā)，因此要控制好相關(guān)疾病的混合感染。藥物作為預(yù)防傳染病的有效手段應(yīng)根據(jù)養(yǎng)殖的具體情況，制定合理的預(yù)防用藥方案將防控結(jié)合起來(lái)，降低雞群發(fā)生其他細(xì)菌病毒傳染病的幾率。

6 結(jié)語(yǔ)

H5N1，H7NP禽流感病毒我國(guó)已例為一類傳染病，國(guó)家已經(jīng)對(duì)該病防控實(shí)行強(qiáng)制免疫，發(fā)生該病要按照重大動(dòng)物疫病防治處置規(guī)范進(jìn)行，隔離撲殺、建立隔離區(qū)、衛(wèi)生消毒等措施，對(duì)其它血清型根據(jù)當(dāng)?shù)卦摬×餍星闆r進(jìn)行免疫，確保無(wú)該病的發(fā)生，保證養(yǎng)雞業(yè)健康發(fā)展。

[1]奇峰,托婭.雞高致病性禽流感的防控[J].畜牧與飼料科學(xué),2011,(12).

[2]區(qū)坤明.高致病性禽流感血清學(xué)監(jiān)測(cè)淺析[J].畜牧獸醫(yī)科技信息,2011,(07).51.

雞禽流感的診斷及防控措施

謝青蘭
（重慶市巫山縣巫峽鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)服務(wù)中心，重慶404700）

雞禽流感病毒性傳染病嚴(yán)重影響?zhàn)B雞業(yè)的健康發(fā)展，其被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織列為A類疾病，每次雞禽流感的爆發(fā)都會(huì)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失，同時(shí)還會(huì)嚴(yán)重阻礙國(guó)內(nèi)、國(guó)際禽產(chǎn)品貿(mào)易，因此各國(guó)相繼把該病列入政府控制規(guī)劃的禽類疫病。

雞；禽流感；防控

S851.3

A

10.14025/j.cnki.jlny.2016.15.032

謝青蘭，大專學(xué)歷，重慶市巫山縣巫峽鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)服務(wù)中心，獸醫(yī)師，研究方向：畜牧技術(shù)推廣及服務(wù)。