薄層技術(shù)在蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測中的應用

沈海斌 樊曉青 （上海市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣服務中心 201103）

趙 哲 （上海市金山區(qū)農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全中心 201600）

徐 剛 （上海市青浦區(qū)蔬菜技術(shù)推廣站 201700）

張大銘 （上海瑞鑫科技儀器有限公司，上海市普陀區(qū) 200331）

薄層技術(shù)在蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測中的應用

沈海斌 樊曉青 （上海市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣服務中心 201103）

趙 哲 （上海市金山區(qū)農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全中心 201600）

徐 剛 （上海市青浦區(qū)蔬菜技術(shù)推廣站 201700）

張大銘 （上海瑞鑫科技儀器有限公司，上海市普陀區(qū) 200331）

研究實踐表明，薄層色譜快速檢測技術(shù)可同時檢測11種蔬菜菊酯類農(nóng)藥殘留，能對樣品中的菊酯類殘留農(nóng)藥進行定性和半定量檢測，且檢測時間短（70 min內(nèi)）、一次可同時完成8個樣品的檢測。該技術(shù)具有檢測成本低、操作技術(shù)易于掌握、在簡易實驗室就能進行檢測等優(yōu)點，填補了國內(nèi)蔬菜菊酯類農(nóng)藥殘留快速檢測的空白。

薄層技術(shù)；菊酯類農(nóng)藥殘留；速測；應對措施；蔬菜

近幾年，上海在全市范圍內(nèi)建立了蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測四級網(wǎng)絡，分別為市和10個區(qū)（縣）級的管理部門，100多個鄉(xiāng)鎮(zhèn)級的檢測點，200多個村級的檢測點，200多個合作社、園藝場、配送中心等企業(yè)級的檢測點。每年快速檢測樣本總量在130萬個左右，成為本市蔬菜安全監(jiān)管工作有力抓手[1]。但隨著全國甲胺磷、呋喃丹等高毒、高殘留農(nóng)藥的禁用和上海補貼農(nóng)藥的全覆蓋，有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥已基本不再使用，而菊酯類農(nóng)藥因高效和價廉，部分菜農(nóng)還在使用。目前快速檢測的農(nóng)藥種類與生產(chǎn)實際中農(nóng)藥使用情況已不相配套，農(nóng)藥殘留速測不能起到應有的作用，政府和市場急需一種能改變當前現(xiàn)狀的檢測儀器及配套的檢測方法來檢測菊酯類農(nóng)藥殘留。上海瑞鑫科技儀器有限公司與上海市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣服務中心通過3年的攻關(guān)研究，研制出蔬菜擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留速測儀及配套的快速檢測技術(shù)，填補了國內(nèi)蔬菜菊酯類農(nóng)藥殘留快速檢測的空白?，F(xiàn)將其相關(guān)研究成果與實踐情況介紹如下，以供參考。

1 基本原理

擬除蟲菊酯類農(nóng)藥速測儀是根據(jù)薄層色譜法的原理設計，利用各種擬除蟲菊酯農(nóng)藥在同一吸附劑上吸附能力不同，當移動相（溶劑）流過固定相（吸附劑）時，連續(xù)不斷地產(chǎn)生吸附、解吸，在吸附、解吸過程中，達到各成分互相分離的目的，然后根據(jù)目標物與參照物用同一方法所得色譜斑點的比移值（Rf）進行定性分析，根據(jù)圖譜斑點的灰度進行定量分析。該方法用作蔬菜中擬除蟲菊酯等農(nóng)藥殘留的快速檢測具有使用簡單、成本低、分辨能力強等特點，普通基層單位有能力購買和使用，便于普及和推廣，能夠?qū)崿F(xiàn)對該類農(nóng)藥殘留量的田間快速檢測[2、3]。

2 檢測步驟

2.1 檢測前期準備

儀器為BC-D1高效多功能農(nóng)藥殘留速測儀（由濃縮儀、顯色儀、成像分析儀組成）。試劑為菊酯類農(nóng)藥檢測試劑。

2.2 樣品前處理（所需時間：40 min）

稱取10 g攪碎的樣品，加入20 mL提取劑和10 g脫水劑，震蕩提取3 min。然后吸取10 mL上清液，過固相萃取柱，用25 mL燒杯收集淋出液，棄掉燒杯中的淋出液。此時樣品中的菊酯類農(nóng)藥仍在固相萃取柱中，吸取4 mL洗脫劑加到固相萃取柱中，將柱中的菊酯類農(nóng)藥洗脫到25 mL燒杯中，用濃縮儀將燒杯中的洗脫液濃縮至干。

2.3 點樣展開（所需時間：15 min）

在層析缸中加入適量展開劑，向樣品燒杯中加入0.5 mL提取劑，輕搖將杯壁上的菊酯類農(nóng)藥溶入提取液中，用定量毛細管分別吸取標準溶液和樣品處理溶液，在層析板基線處的固定位置上點樣，然后將該薄層層析板放入層析缸中展開，當展開劑到達溶劑前沿線時，將薄層板取出并晾干。

2.4 顯色及成像分析（所需時間：15 min）

已研發(fā)形成薄層色譜成像分析儀及相應的處理軟件，能對顯色的薄層板進行識別及進一步定性、定量分析。將完成展開的薄層板放入顯色儀中，顯色10 min，以加深菊酯類農(nóng)藥斑點的灰度，取出顯色的薄層板，放入成像分析儀中，進行成像分析。通過儀器軟件的分析，得出樣品中菊酯類農(nóng)藥殘留的定性和定量檢測結(jié)果。

2.5 結(jié)果判定

菊酯類農(nóng)藥檢測軟件中已將GB 2763-2014食品中農(nóng)藥最大殘留限量錄入，軟件測出的檢測結(jié)果會自動與該樣品在國家標準限量中菊酯類農(nóng)藥的殘留限量進行比較。如超標，判斷檢測結(jié)果為陽性，反之判斷檢測結(jié)果為陰性。

3 影響檢測結(jié)果的因素及應對措施

3.1 濕度對實驗的影響及控制

濕度對薄層色譜法檢測菊酯類農(nóng)藥殘留結(jié)果準確性的影響非常明顯。為得到準確的檢測結(jié)果，上海瑞鑫科技儀器有限公司在層析用的薄層板出廠前，進行了烘干和密封處理，同時利用干燥劑穩(wěn)定層析展開缸內(nèi)的環(huán)境濕度。通過增加這些改進措施，在不同的環(huán)境濕度下都能得到準確又穩(wěn)定的檢測結(jié)果。

3.2 假陽性的影響及消除

因為薄層色譜法的分離距離較短，影響了分離效果，所以一些雜質(zhì)可能導致檢測結(jié)果的假陽性。采用兩種不同的展開劑對同一樣品的薄層板進行展開，根據(jù)參比標樣和樣品中各組分經(jīng)兩種展開劑處理后相對移動位置各不相同的特性，能進一步確定是否為真陽性，從而大大提高定性檢測的準確性。

3.3 不同樣品水分含量對檢測的影響及消除由于不同蔬菜樣品的含水量不同，導致提取劑對不同蔬菜樣品中菊酯類農(nóng)藥的提取效果差異較大。因此，提取時在樣品中加入脫水劑，減少其含水量，降低水溶性雜質(zhì)的影響，能使提取效率大大提高，且對檢測結(jié)果無較大影響。

[1] 沈海斌,侯喜林,郁樊敏,等.上海市蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測的十年回顧[J].長江蔬菜,2008,(16):72-75.

[2] 樊德方.農(nóng)藥殘留分析與檢測[M].上海:上?？萍汲霭嫔?1982.

[3] 默濤,陳鶴鑫,陸貽通,等.農(nóng)藥殘留量分析方法[M].上海:上?？茖W技術(shù)出版社,1992.

2016-01-06

上海市科技興農(nóng)項目“農(nóng)藥殘留薄層速測儀研發(fā)”[滬農(nóng)科攻字（2013）第3-5號]。