禽類病料采集注意事項(xiàng)

丁 勇

（河北省懷安縣畜牧水產(chǎn)局，河北張家口076150）

禽類病料采集注意事項(xiàng)

丁 勇

（河北省懷安縣畜牧水產(chǎn)局，河北張家口076150）

隨著養(yǎng)殖規(guī)模不斷擴(kuò)大與集約化快速發(fā)展，動(dòng)物防疫水平不斷提升，疫病監(jiān)測(cè)在各級(jí)動(dòng)物防控部門實(shí)驗(yàn)室內(nèi)被啟動(dòng)，能夠準(zhǔn)確評(píng)判禽類的免疫水平與狀況的重要方法是實(shí)驗(yàn)室血清學(xué)檢測(cè)和檢測(cè)（包括組織器官、糞便及各種棉試子）樣品的實(shí)驗(yàn)研究方法。監(jiān)測(cè)就需要大量的血清和檢測(cè)樣品，采血是取血清的主要手段。采血是一項(xiàng)提前性的工作，采血質(zhì)量的好壞直接影響到能不能進(jìn)行監(jiān)測(cè)和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判定，樣品的采樣時(shí)間、處理方法、保存條件、運(yùn)送條件都關(guān)系著檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性、可靠性。

1 禽的采血技術(shù)

1.1 采血前的準(zhǔn)備工作采血前的準(zhǔn)備工作及采血用具的消毒均按常規(guī)操作來(lái)完成。采血部位按常規(guī)規(guī)程進(jìn)行剪毛、清洗與消毒。

采血過(guò)程要防止流散與傳染，殘余血液及所用的器具全部進(jìn)行消毒，如針頭、針管等；也可焚燒深埋。

抗凝劑的選用（指用全血的樣品），常用的抗凝劑有：①枸椽酸鈉，常用3.8%的溶液，適用于血鈣的測(cè)定和血測(cè)定時(shí)的抗凝；②肝素：肝素鈉1ml內(nèi)含1mg（0.1%）的水溶液，取0.1ml分裝于小試管或小玻璃管（5ml或10ml）在80℃下烤干后備用可使5～10ml血液不凝固，肝素對(duì)血中有機(jī)成分和無(wú)機(jī)成分測(cè)定均無(wú)影響；③雙草酸鹽抗凝劑，可用市售，也可自己制備草酸銨1.2g、草酸鉀0.6g、蒸餾水100ml溶解，適量加入供采血用的試管或小瓶中，一般0.5～1ml，置干燥箱內(nèi)，80～100℃烘干備用；④乙二胺四乙酸二鈉10mg可抗凝5ml全血，或亦可配成10%的溶液2～3滴可使5ml全血抗凝。

分離血清時(shí)，放置血液的試管、小玻璃瓶要傾斜成45℃角靜置，利于血清析出。

人員自我防護(hù)，要佩戴眼鏡、口罩、頭盔與穿防護(hù)服等。

1.2 血液的采集方法

1.2.1 禽冠采血法用針頭刺破禽冠吸取血液或在禽冠尖端剪開(kāi)一個(gè)小口子，吸取血液時(shí)需用手?jǐn)D壓禽冠一次可吸取50～60μl血，供作血涂片用。多用于需血量較小的采血，注意消毒工作，同時(shí)作好止血，可用碘酒涂抹傷口。

1.2.2 禽頸靜脈采血法右側(cè)頸靜采血，左手食指和中指夾住禽頭部，并使頭偏的一側(cè)、無(wú)名指、小指和手掌握住軀干，拇指壓靜脈心臟端以使靜脈充血舒張。右手持注射器、針頭由翼根部向翅膀方向沿靜脈平行刺入羽翼、傾斜45℃沿血管方向一側(cè)0.3～0.5cm挑破皮膚前行0.3～0.5cm刺入靜脈，再與血管平行進(jìn)針0.2～0.5cm抽取血液。完畢后壓迫針眼處止血。用碘酒或酒精棉球壓迫針刺處止血。適用于30日齡內(nèi)的禽類。

1.2.3 禽翅內(nèi)側(cè)靜脈采血法可采血10～20ml，①器械用具的準(zhǔn)備：棉球、小試管或細(xì)塑料管、試管架、鑷子、7＃針頭的一次注射器；②保定：手提保定。助手一手抓住兩條禽腿，一手抓禽翅根部，以拇指按壓靜脈；③部位選擇確定：注意術(shù)者左手大拇指捏住雞禽內(nèi)側(cè)，其余四指捏住禽翅外側(cè)展平禽翅，右手握針，沿血管方向刺入。

1.2.4 禽心臟采血法①禽左側(cè)向上橫臥保定、拔去胸上部羽毛，尋找由胸骨走向肩胛的皮下大靜脈，用酒精棉球消毒，后碘酊棉球標(biāo)記部7#針頭刺入時(shí)，避開(kāi)胸骨向里刺入，邊刺邊抽動(dòng)活塞，若刺入心臟，便有血液涌入注射器；②禽仰臥保定，禽頭部朝向術(shù)者，拔去胸上部少許羽毛，用手指在胸骨上一方、嗉囊下方摸得一凹窩，右手持7#針頭自持有血液涌入注射器，取血后做止血與消毒工作。

2 禽類的病料采集

2.1 采集病料樣品是診斷檢測(cè)中至關(guān)重要的，采集的樣品具有代表性、時(shí)效性、普遍性。病料采集應(yīng)符合以內(nèi)容：①典型性：選取癥狀最典型或病變最明顯，具有代表性、普遍性，最好未經(jīng)藥物治療過(guò)的病料；②合理病料采樣的比例性：根據(jù)診斷檢測(cè)規(guī)程的具體要求，要嚴(yán)格按照規(guī)程要求采集足夠數(shù)量的樣品，不同疫病的所需樣品不同，應(yīng)按疑似疫病的具體要求來(lái)采集病料；③適時(shí)性，根據(jù)檢測(cè)要求及檢測(cè)對(duì)象和檢驗(yàn)項(xiàng)目的不同，選適當(dāng)?shù)牟蓸訒r(shí)機(jī)，對(duì)檢測(cè)結(jié)果很重要，因此樣品采集有時(shí)間上要求，應(yīng)嚴(yán)格按規(guī)定的規(guī)程時(shí)間范圍取樣；④無(wú)菌操作采樣。采集檢驗(yàn)樣品，要供病理組織學(xué)檢驗(yàn)、病原學(xué)、血清學(xué)檢驗(yàn)使用，要無(wú)菌操作，對(duì)用具、容器需事先做好消毒滅菌工作，按具體規(guī)程來(lái)操作。特別是尸體剖檢時(shí)需先采集樣品，后剖檢，以免人為污染。病理組織學(xué)檢查可選用典型病的剖檢后的樣品。樣品數(shù)量要滿足診斷檢測(cè)的需要，并留有余地，以備必要時(shí)復(fù)檢使用；⑤保存。一個(gè)樣品一個(gè)容器，立即密封，作冷藏、冷凍或其他處理，供病毒學(xué)檢驗(yàn)的樣品，數(shù)小時(shí)內(nèi)要送到實(shí)驗(yàn)室，超時(shí)應(yīng)冷凍保存，裝樣品的容器應(yīng)貼上標(biāo)簽，標(biāo)簽要防止因凍結(jié)而脫落，寫明采集時(shí)間、地點(diǎn)、禽名稱、發(fā)病時(shí)間、死亡等具體相關(guān)信息；⑥人員安全與樣品包裝。首先采樣人自身安全按防護(hù)規(guī)程要求來(lái)做，同時(shí)防止病原擴(kuò)散，防止它本身被外部環(huán)境的污染，包裝樣品應(yīng)防止損壞、污染和外泄等。按規(guī)定的時(shí)間迅速送檢，以免延誤送檢時(shí)間而影響檢測(cè)質(zhì)量和結(jié)果的真實(shí)性與可靠性。

2.2 血液的采集

2.2.1 病毒學(xué)檢驗(yàn)血液樣品應(yīng)選擇動(dòng)物發(fā)病初體溫升高期時(shí)來(lái)采樣。全血樣品必須是脫纖維或抗血凝血，可選用肝素。而枸櫞酸鈉對(duì)病毒有輕微的毒性作用可殺死病毒，一般不宜采用。按常規(guī)操作規(guī)程準(zhǔn)備真空采血等或其他滅菌容器內(nèi)每ml血液樣品外加0.1%肝素1ml，加入血液應(yīng)搖均混合。用脫纖血時(shí)，先在容器內(nèi)加入適量小玻璃球，加入血液后，反復(fù)震蕩（亦可用震蕩器震蕩），以便脫云血液纖維，采得的血液經(jīng)密封后貼上標(biāo)簽，以冷藏狀態(tài)立即送實(shí)驗(yàn)室。必要時(shí)，可在血中按每毫升加入青霉素和鏈霉素各500～1000IU，以抑制血源性或采血中污染的細(xì)菌。

2.2.2 細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)樣品采血應(yīng)在發(fā)病初期或發(fā)病高峰期，最好為未經(jīng)抗生素藥物治療期間采集。血中應(yīng)同時(shí)加抗血凝劑，但要注意不加雙抗（青鏈霉素）或慶大或其它抗生素。血液密封貼標(biāo)簽送檢，置4℃冰箱備用，但存放時(shí)間不宜過(guò)久，以免發(fā)生溶血。

2.2.3 血清學(xué)檢驗(yàn)樣品用作血清學(xué)檢驗(yàn)的血液不加抗凝劑或脫纖處理。為保障血清質(zhì)量，一般情況下，空腹采血較好。采得的血貼上標(biāo)簽，室溫靜置待凝固后送實(shí)驗(yàn)室，并盡快將自然析出的血清或經(jīng)離心分離出的血清吸出，按需要分裝若干小瓶密封，再貼上標(biāo)簽冷藏保存?zhèn)錂z或冷藏送檢。

2.2.4 寄生蟲檢驗(yàn)因不同的血液寄生蟲在血液中出現(xiàn)的時(shí)機(jī)及部位各不相同，因此，需要根據(jù)各種血液寄生蟲的特點(diǎn)，取相應(yīng)時(shí)機(jī)及部位的血制成血涂片，送實(shí)驗(yàn)室。

2.3 組織樣品采集按常規(guī)要求采取內(nèi)臟，注意應(yīng)用PBS液即可。

2.4 糞便樣品的采集病毒學(xué)檢驗(yàn)樣品，用新鮮糞便滅菌的棉拭子從直腸深處或泄殖腔粘膜上蘸取糞便，并立即放入裝有PBS液的試管內(nèi)密封。細(xì)菌寄生蟲檢驗(yàn)樣品與之相似。

2.5 禽流感樣品采集及相關(guān)運(yùn)輸保存禽流感病毒主要在呼吸道粘膜細(xì)胞內(nèi)增殖，一般最少要求8只頻臨死亡的病禽采集樣品，泄殖腔拭子、器官拭子、肺與氣管混合樣、腸管及內(nèi)容物的混合樣，肝、脾、腎和腦、肺等組織混合樣各8個(gè)。

2.5.1 泄殖腔棉拭子將棉拭子插入肛門并旋轉(zhuǎn)，使糞便粘在棉拭子上，后放人PBS液的緩沖液中送檢運(yùn)輸。

2.5.2 氣管棉拭子：活禽采樣時(shí)，將置棉拭子插入活禽的氣管內(nèi)，輕輕擦拭氣管壁并放入緩沖液中。

2.5.3 糞便，采取瀕臨死亡禽的新鮮糞便，用棉拭子沾取糞便，并將采好的樣品放在PBS緩沖液中。

2.5.4 采集15只病禽血液樣本，采血樣為3～ 5ml，自然析出血清或離心均可，同時(shí)棉拭子為防止感染可用下列PBS液；pH值調(diào)為7.0～7.4的PBS值，加入3000IU/ml青霉素、鏈霉素3mg/ml、慶大霉素1萬(wàn)～2萬(wàn)IU/ml、制霉菌素（10000IU/ml），但糞便和泄殖腔拭子抗生素為1.5萬(wàn)IU/ml，制霉菌素（50000IU/ml），pH值應(yīng)調(diào)至7.4。

2.6 獸醫(yī)人員安全防護(hù)注意事項(xiàng)獸醫(yī)工作人員尤其是病料采集人員，由于頻繁接觸患病動(dòng)物，所以是人畜共患病的高危人群。鑒于上述原因，工作人員尤其是從事禽病的，在采集病料時(shí)應(yīng)該注意以下幾點(diǎn)：第一，注意飲食衛(wèi)生，禁止食用死亡的禽類；第二，如果條件允許，可以接種疫苗。接種疫苗的主要目的是降低感染傳染病的幾率；第三，工作人員在采集病料時(shí)更應(yīng)注意個(gè)人衛(wèi)生，工作時(shí)戴口罩、穿工作服（防護(hù)服）、戴手套，接觸患禽或其糞便等污染物后要勤洗手，并保持工作環(huán)境中空氣流通；第四，工作人員應(yīng)該對(duì)禽類糞便作及時(shí)處理，注意禽舍的消毒。

2016年蛋雞養(yǎng)殖行業(yè)前景分析：四化水平不斷提升

中國(guó)是目前國(guó)際上最大的雞蛋生產(chǎn)國(guó)，蛋雞養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)也是國(guó)內(nèi)畜牧業(yè)的主導(dǎo)產(chǎn)業(yè)之一。2015年是我國(guó)蛋雞行業(yè)快速調(diào)整的一年，持續(xù)的行情低迷在一定程度上加速了行業(yè)整合的速度。

2016年蛋雞養(yǎng)殖前景分析中國(guó)蛋雞業(yè)正在走標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)模化、產(chǎn)業(yè)化、生態(tài)化發(fā)展之路。產(chǎn)區(qū)分化，區(qū)域化、本地化繼續(xù)深化。商品蛋雞養(yǎng)殖格局也一直在發(fā)生變化，傳統(tǒng)主產(chǎn)區(qū)養(yǎng)殖總量在不斷減少的同時(shí)，規(guī)模有所提高；非傳統(tǒng)主產(chǎn)區(qū)總量和規(guī)模都在大幅提高。規(guī)模養(yǎng)殖量在50萬(wàn)只以上的養(yǎng)殖在全國(guó)各個(gè)區(qū)域均有出現(xiàn)。未來(lái)明顯的產(chǎn)銷區(qū)界限將不斷弱化，像東三省、河北、山東和河南等傳統(tǒng)主產(chǎn)區(qū)的供應(yīng)能力和半徑也將不斷地減少，傳統(tǒng)主產(chǎn)區(qū)、非主產(chǎn)區(qū)都將以本地化為主，將形成以京津冀、長(zhǎng)三角、珠三角三大主銷區(qū)為核心的養(yǎng)殖布局，銷區(qū)在整個(gè)雞蛋流通和價(jià)格上的風(fēng)向標(biāo)作用將會(huì)更明顯。

產(chǎn)業(yè)鏈競(jìng)爭(zhēng)的局面越來(lái)越明顯近年來(lái)，以前專業(yè)生產(chǎn)種雞的企業(yè)開(kāi)始往下延伸，打造自己的品牌蛋，通過(guò)多種方式拓展品牌雞蛋市場(chǎng)，而有些也開(kāi)始向上延伸，進(jìn)入種雞行業(yè)。北京德青源農(nóng)業(yè)科技公司提出的蛋雞云養(yǎng)殖模式，旨在打造蛋雞行業(yè)的公司加農(nóng)戶模式，同時(shí)內(nèi)部形成從祖代種雞養(yǎng)殖到生產(chǎn)資料提供、雞蛋回收的閉環(huán)模式。以前主要是做飼料銷售的北農(nóng)大集團(tuán)和北京偉嘉集團(tuán)也開(kāi)始介入雞蛋回收，將服務(wù)進(jìn)一步延伸。未來(lái)行業(yè)商品蛋雞的競(jìng)爭(zhēng)會(huì)是以集團(tuán)化為核心的整個(gè)產(chǎn)業(yè)鏈的競(jìng)爭(zhēng)。

金融資本將對(duì)行業(yè)發(fā)揮作用蛋雞保險(xiǎn)能夠?yàn)榈半u行業(yè)起到保駕護(hù)航的作用；融資租賃能夠提升設(shè)備的現(xiàn)代化;雞蛋期貨能幫助蛋雞企業(yè)規(guī)避一定的市場(chǎng)風(fēng)險(xiǎn)。

抗生素的使用越來(lái)越受到限制隨著食品安全檢測(cè)越來(lái)越嚴(yán)格，抗生素的危害為大眾所認(rèn)知，品牌雞蛋會(huì)受到更嚴(yán)格的監(jiān)控，抗生素的使用也會(huì)受到更嚴(yán)格的限制。

適度規(guī)?；l(fā)展將成為主流，“四化”水平將不斷提升現(xiàn)在，各大型種雞生產(chǎn)企業(yè)和商品代生產(chǎn)企業(yè)開(kāi)始在全國(guó)范圍內(nèi)布局，每個(gè)養(yǎng)殖點(diǎn)種雞的飼養(yǎng)量不會(huì)超過(guò)50萬(wàn)套，商品代的飼養(yǎng)量也保持在每個(gè)獨(dú)立場(chǎng)區(qū)在50萬(wàn)只左右，每個(gè)場(chǎng)與場(chǎng)之間至少保證10公里以上的安全距離，這樣即可以保證運(yùn)輸?shù)陌霃?，同時(shí)有利于疫病的防控和其他風(fēng)險(xiǎn)的控制，因此，未來(lái)這種分區(qū)域適度規(guī)模的生產(chǎn)模式將成為主流。未來(lái)5～10年我國(guó)蛋雞養(yǎng)殖存欄3萬(wàn)～5萬(wàn)只雞養(yǎng)雞場(chǎng)將成為未來(lái)雞蛋來(lái)源的主要提供者。

“人管機(jī)器，機(jī)器養(yǎng)雞”將越來(lái)越普遍，未來(lái)智能化必然成為行業(yè)的選擇。

S858.312.1

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1673-1085（2016）03-0040-03

2016-02-15