桑鳳梅,張士金,竇晨輝
(鄭州人民醫(yī)院中醫(yī)科,鄭州 450003)
柴芩承氣湯對重癥急性胰腺炎大鼠內毒素、白細胞介素-6的影響*
桑鳳梅,張士金,竇晨輝
(鄭州人民醫(yī)院中醫(yī)科,鄭州 450003)
目的:研究柴芩承氣湯對重癥急性胰腺炎大鼠內毒素、白細胞介素-6的影響。方法:選取36只SD大鼠,按隨機數(shù)字表法分為3組,觀察各組動物血漿、肺組織、回腸組織病理的變化,分別測定內毒素、白細胞介素-6在不同病理以及不同時間段治療的濃度變化。結果:治療后,SAP+柴芩承氣湯治療組大鼠內毒素濃度的變化(0.077±0.013)Eu/mL顯著低于模型組的濃度(3.31±0.698)Eu/mL,差異有統(tǒng)計學意義。治療后,SAP+柴芩承氣湯治療組大鼠白細胞介素-6濃度的變化(45.17±6.13)pg/ mL顯著低于模型組的濃度(87.31±5.98)pg/mL,差異有統(tǒng)計學意義。結論:柴芩承氣湯對重癥急性胰腺炎大鼠內毒素、白細胞介素-6具有一定的影響,值得廣泛推廣使用。
柴芩承氣湯;重癥急性胰腺炎;內毒素;白細胞介素-6
重癥急性胰腺炎(SAP)在發(fā)病過程中會釋放大量促炎因子,當失去促炎因子與抗炎因子之間的平衡時,炎性反應綜合癥便出現(xiàn),進而影響臟器功能衰竭[1]。SAP具有病情險惡、發(fā)病快、致死亡率高的特點[2]。為探討其治療重癥急性胰腺炎的可能機制,本實驗主要觀察柴芩承氣湯對重癥急性胰腺炎大鼠內毒素、白細胞介素-6的影響,現(xiàn)報道如下。
1.1 材料
1.1.1 試驗動物 選取36只SD大鼠,雌雄各半,體質量230 g~280 g之間,由四川大學實驗動物中心提供。
1.1.2 實驗藥品 柴芩承氣湯組成:蒲公英、金銀騰各25 g,黃芩、柴胡各12 g,金鈴子、陳皮、青香藤、大黃、芒硝各8 g,沖服[3]。注射用水于實驗前按照1 g生藥/mL配成。
1.1.3 試劑 采用ChAT進行試劑盒檢測,在進行實驗前結合生理鹽水配成3%的牛膽酸溶液,保存時應避免光的直射[4]。
1.1.4 實驗儀器 大學科技實業(yè)總公司提供GC-911r放射免疫計數(shù)器,日本SANYO公司提供超低溫冰箱,由海市醫(yī)學化驗所提供鱟試劑盒。
1.2 方法
1.2.1 制作SAP模型 喂養(yǎng)大鼠1周培養(yǎng)適應性,在進行試驗前半天禁止入食但不禁水。注射麻醉腹腔進行常規(guī)消毒之后,在腹部正中線切入長度約為3.5 cm的切口,撥開肝葉確鑿十二指腸,取出長度約為4.5 cm左右,翻動十二指腸之后發(fā)現(xiàn)片狀胰腺,淡黃色或者半透明乳白的為膽胰管[5]。十二指腸進行固定,伸直膽胰管,見十二指腸乳頭開口采用留置針刺破腸壁,當發(fā)現(xiàn)十二指腸稍微高于腸壁時將針尖抬高,進入到膽總管之后,沿其方向進針約為2.8 cm,針芯退出以后,黃色膽汁流出[6]。夾住接近肝端使用微型血管夾,泵入3%的牛膽酸溶液,微泵標準為0.1 mL/100 g,在5 min內泵完[7]。保留5 min留置針與微血管夾之后,將留置針拔出,微血管夾打開。在大鼠胰腺表現(xiàn)出血、壞死以及水腫等癥狀時,造模極為成功。
1.2.2 制作假手術模型 術前準備進入至腹腔操作,刺破腸壁后保持5 min的留置針,不需要藥物注射。
1.2.3 分組 按照隨機數(shù)表法分為假手術對照組、SAP模型組、SAP+柴芩承氣湯治療組3組各12只。假手術對照組在模型造模成功后注射生理鹽水共4 mL于皮下,每2 h 1次,其中應將0.4 mL/ 100 g的生理鹽水經(jīng)胃管注入,每1 h 1次,在5 h后取血經(jīng)腹腔靜脈并進行檢驗。SAP模型組在模型成功后,注射生理鹽水共4 mL于皮下,每2 h 1次,其中應將0.4 mL/100 g的生理鹽水經(jīng)胃管注入,每1 h 1次,在5 h后取血經(jīng)腹腔靜脈并進行檢驗。SAP +柴芩承氣湯治療組用配置好的柴芩承氣湯治療SAP大鼠,在制造模型成功后的12 h灌入配置好的柴芩承氣湯1 mL/100 g。
1.3 觀察指標
觀察各組間的生化指標、淀粉酶、丙氨酸轉氨酶、天冬氨酸轉氨酶和血清乳酸脫氫酶。觀察各組動物血漿、肺組織、回腸組織病理的變化,分別測定內毒素、白細胞介素-6在不同病理以及不同時間段治療的濃度變化。制作組織動物血漿、肺組織、回腸組織,加入 PBS緩沖液后采用勻漿器攪拌均勻,在低溫高速離心機中分離出上清液,并分裝置入小離心管在-75℃的冰箱中保存并檢測蛋白。內毒素水平的測定采取鱟試劑偶氮基質顯色方法,白細胞介素-6的測定采取放射免疫法。
1.4 統(tǒng)計學方法
采用SPSS 18.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析,以均數(shù)±標準差(±s)表示,計量資料比較采用t檢驗,P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
2.1 對照組、模型組、SAP+柴芩承氣湯治療組生化指標比較
表1顯示,模型組的淀粉酶、丙氨酸轉氨酶、天冬氨酸轉氨酶、血清乳酸脫氫酶均高于對照組和SAP+柴芩承氣湯治療組水平,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
表1 對照組、模型組、SAP+柴芩承氣湯治療組生化指標比較(±s)
表1 對照組、模型組、SAP+柴芩承氣湯治療組生化指標比較(±s)
鼠數(shù) 對照組 模型組 SAP+柴芩承氣湯治療組t淀 粉 酶 (AMY)(IU/L) 12 842.6±68.5 3097.6±1032.2 1132.1±87.3 75.1099丙氨酸轉氨酶(ALT)(IU/L) 12 67.6±11.4 169.9± 38.1 53.6± 9.8 23.9698天冬氨酸轉氨酶(AST)(IU/L) 12 171.4±10.9 992.4± 164.2 186.2±52.5 49.8331血清乳酸脫氫酶(LDH)(IU/L) 12 656.3±98.4 1412.1± 249.4 200.1±25.3 38.0762
2.2 對照組、模型組、SAP+柴芩承氣湯治療組內毒素檢測結果
表2顯示,模型組內毒素表達水平顯著高于對照組和SAP+柴芩承氣湯治療組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
表2 對照組、模型組、SAP+柴芩承氣湯治療組血漿、肺和回腸的內毒素濃度比較(±s,Eu/mL)
表2 對照組、模型組、SAP+柴芩承氣湯治療組血漿、肺和回腸的內毒素濃度比較(±s,Eu/mL)
組別 鼠數(shù) 血漿 肺組織 回腸組織對照 組12 0.059±0.007 2.51±0.18 2.58±0.32模 型 組 12 0.364±0.315 4.54±0.31 5.01±0.81 SAP+柴芩承氣湯治療組 12 0.101±0.019 2.16±0.41 2.89±0.61統(tǒng) 計 值 57.9768 6.4834 8.0492 P 0.0000 0.0391 0.0179
2.3 對照組、模型組、SAP+柴芩承氣湯治療組白細胞介素-6檢測結果
表3顯示,模型組白細胞介素-6的濃度表達水平顯著高于對照組和SAP+柴芩承氣湯治療組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
2.4 治療后不同時間段各組大鼠內毒素變化
表4顯示,治療后SAP+柴芩承氣湯治療組大鼠內毒素濃度的變化(0.077±0.013)Eu/mL顯著低于模型組濃度(3.31±0.698)Eu/mL,且較后時間段濃度變化均顯著低于前時段(1.467±0.058)Eu/ mL,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
表3 對照組、模型組2組、SAP+柴芩承氣湯治療組血漿、肺和回腸的白細胞介素-6濃度比較(±s,pg/mL)
表3 對照組、模型組2組、SAP+柴芩承氣湯治療組血漿、肺和回腸的白細胞介素-6濃度比較(±s,pg/mL)
別 鼠數(shù) 血漿 肺組織 回腸組織對照組組0.0000 0.0000 0.0000 12 6.49± 1.07 4.51±0.17 9.58±0.36模 型 組 12 115.36±16.31 34.54±1.31 43.01±1.61 SAP+柴芩承氣 湯治療組 12 68.41± 7.14 19.97±2.41 20.14±2.35統(tǒng) 計 值 45.9002 42.4461 25.5301 P
表4 治療后不同時間段各組大鼠內毒素的變化(±s,Eu/mL)
表4 治療后不同時間段各組大鼠內毒素的變化(±s,Eu/mL)
組別 鼠數(shù) 12 h 24 h 48 h對照組12 0.033±0.009 0.024±0.012 0.030±0.0 t P 08 0.3471模型組12 1.386±0.036 1.799±0.587 3.31±0.698 9.5359 0.0000 06 0.96 SAP+柴芩承 氣 湯 治 療 組 12 1.467±0.058 0.643±0.052 0.077±0.013 81.0091 0.0000
2.5 治療后不同時間段各組大鼠白細胞介素-6的變化
表5顯示,經(jīng)治療后SAP+柴芩承氣湯治療組大鼠白細胞介素-6濃度的變化(45.17±6.13)pg/ mL顯著低于模型組濃度(87.31±5.98)pg/mL,且較后時間段濃度變化均顯著低于前時段(68.67± 6.58)pg/mL,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
柴芩承氣湯具有大承氣湯與大柴胡湯的共同功效,大柴胡湯主要針對偏重陽明的患者,大承氣湯具有燥、實、痞滿、堅的特點,為此具備消除痞滿、通里攻下的功效以及活血涼血、清熱解毒的功能,此方法對于重癥急性胰腺炎的治療已經(jīng)逐漸在臨床中得到認可[8-9]。
表5 治療后不同時間段各組大鼠白細胞介素-6的變化(±s,pg/mL)
表5 治療后不同時間段各組大鼠白細胞介素-6的變化(±s,pg/mL)
組別 鼠數(shù) 12 h 24 h 48 h t P .9255模型組12 69.86±7.36 91.43±5.87 87.31±5.98 6.3743 0.0000對照組12 20.53±5.09 21.14±6.15 20.32±5.76 0.0946 0 SAP+柴芩承 氣 湯 治 療 組 12 68.67±6.58 60.43±3.52 45.17±6.13 9.0522 0.0000
相關研究表明,柴芩承氣湯具有排除腸胃積滯、去除腸道內毒素的功效,使腸道的免疫屏障得以保護[10-11]。在本次研究中發(fā)現(xiàn),經(jīng)柴芩承氣湯治療后大鼠的血漿(0.101±0.019)Eu/mL、肺組織(19.97 ±2.41)Eu/mL和回腸組織(2.89±0.61)Eu/mL的毒素濃度均得以明顯降低,與相關研究者的觀點一致。提示柴芩承氣湯可以很好地使內毒素的生產(chǎn)得以減少,進而吸收、快速滅活以及排泄的功能,有利于減輕由于內毒素導致的炎性反應綜合征和急性肺遭受損害[12]。
通過本次研究發(fā)現(xiàn),對重癥急性胰腺炎大鼠實施柴芩承氣湯治療后,其血漿(68.41±7.14)pg/ mL、肺組織(19.97±2.41)pg/mL和回腸(20.14± 2.35)pg/mL的白細胞介素-6濃度均有所下降。白細胞介素-6能夠快速反應炎癥,促炎因子會因此進而引發(fā)一系列甚至放大病理的炎癥反應,最終致全身出現(xiàn)炎癥反應綜合癥以及多器官功能受損。相關研究顯示,白細胞介素-6重癥急性胰腺炎在發(fā)病中起舉足輕重的作用,其白細胞介素-6升高,對重癥急性胰腺炎的發(fā)病機制危險越大,因此在發(fā)病后應該及時對白細胞介素-6的含量進行檢測,可以對重癥急性胰腺炎的嚴重程度進行有效評價[13~14]。
相關研究表明,柴芩承氣湯具有抑制多種細胞尤其是白細胞介素-6以及毒素的活性及產(chǎn)生,進一步緩解重癥急性胰腺炎由于炎癥帶來的發(fā)炎,降低組織器官受損的概率[15]。在本次研究中也發(fā)現(xiàn),柴芩承氣湯治療重癥急性胰腺炎大鼠,在不同時間段的毒素、白細胞介素-6的濃度均在不同程度呈現(xiàn)降低趨勢,表明柴芩承氣湯具有改善胰腺組織病理學變化的功能,逐漸緩解病情,符合相關研究者的觀點。
綜上所述,柴芩承氣湯對重癥急性胰腺炎大鼠內毒素、白細胞介素-6的具有一定的影響,值得廣泛推廣使用。
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Effects of Chaiqin Chengqi Decoction on Endotoxin and Interleukin-6 in Rats with Severe Acute Pancreatitis
SANG Feng-mei,ZHANG Shi-jin,DOU Chen-hui
(Zhengzhou People’s Hospital of Traditional Chinese Medicine,Zhengzhou 450003,China)
Objective:To study the Chaiqing Chengqi decoction influence toxin and interleukin-6 on rats with severe acute pancrentitis.Methods:36 SD rats,according to a random number table divided into three groups.Observed in plasma,lung tissue of animals in each group.Endotoxin,interleukin-6 concentrations were measured in different pathological changes and the different time periods of treatment.Results:After treatment,SAP + changes in toxin concentration in Chaiqin-Chengqi Treated rats(0.077 ±0.013)Eu/mL concentration was significantly lower than the model group(3.31 ±0.698)Eu/mL,the difference has statistically significance.After treatment,SAP +changes in interleukin-6 concentrations Chaiqingchengqi Treated rats(45.17 ±6.13)pg/mL concentration was significantly lower than the model group(87.31±5.98)pg/mL,the difference has statistically significance.Conclusion:Chaigin Chengqi Decoction decoction on rats with severe acute toxin within the interleukin-6 has a certain influence,which worth widely used.
Chaigin Chengqi Decoction;Severe acute pancreatitis;Endotoxin;Interleukin-6
R285.5
:B
:1006-3250(2016)03-0345-03
2015-07-19