乙型肝炎肝硬化患者外周血補(bǔ)體和T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)的變化

柴艷云，李建國，金磊

·短篇論著·

乙型肝炎肝硬化患者外周血補(bǔ)體和T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)的變化

柴艷云，李建國，金磊

目的觀察乙型肝炎肝硬化患者外周血補(bǔ)體和T淋巴細(xì)胞亞群的變化特征，并探討其與細(xì)菌感染的關(guān)系。方法選取2014年1月～2015年12月我科門診及住院的56例乙型肝炎肝硬化患者和30例健康體檢者為研究對象，其中代償期乙型肝炎肝硬化20例，失代償期乙型肝炎肝硬化36例。使用FACSCantoll流式細(xì)胞儀檢測外周血T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)；采用免疫比濁法檢測血清補(bǔ)體。結(jié)果失代償期乙型肝炎肝硬化組細(xì)菌感染率為52.8%，明顯高于代償期乙型肝炎肝硬化組（10.0%，P＜0.01）；失代償期乙型肝炎肝硬化組外周血CD3+、CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)分別為（618.2±209.7）個(gè)/μL、（392.8±204.1）個(gè)/μL和（212.0± 126.7）個(gè)/μL，代償期乙型肝炎肝硬化組和健康對照組分別為【（1074.7±505.3）個(gè)/μL、（699.3±216.2）個(gè)/μL、（409.4±202.8）個(gè)/μL】和【（1621.5±381.1）個(gè)/μL、（942.1±209.6）個(gè)/μL、（682.9±176.9）個(gè)/μL，P＜0.05】；失代償期乙型肝炎肝硬化組血清補(bǔ)體C3和C4分別為（0.4±0.1）g/L和（0.1±0.1）g/L，明顯低于健康人【（0.8±0.3）g/L和（0.3±0.1）g/L，P＜0.05】或代償期乙型肝炎肝硬化組【分別為（0.7±0.2）g/L和（0.3±0.1）g/L，P＜0.05】。結(jié)論乙型肝炎肝硬化患者細(xì)胞免疫明顯受累，外周血補(bǔ)體及CD3+、CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)低者更容易繼發(fā)細(xì)菌感染。

肝硬化；T淋巴細(xì)胞亞群；補(bǔ)體

HBV感染人體后體液和細(xì)胞免疫均參與疾病的發(fā)生、發(fā)展。細(xì)胞免疫，尤其是T細(xì)胞數(shù)量及功能在HBV感染性肝臟損害中起主導(dǎo)作用[1-3]。T淋巴細(xì)胞亞群功能紊亂是導(dǎo)致人體不能清除HBV、使病情慢性化及造成肝細(xì)胞損害的主要原因[4-6]。機(jī)體免疫功能下降，極易并發(fā)各種機(jī)會性感染。本研究分析了代償期和失代償期乙型肝炎肝硬化患者繼發(fā)細(xì)菌感染情況及其對血清補(bǔ)體和外周血T淋巴細(xì)胞亞群的影響，為臨床上協(xié)助判斷疾病預(yù)后、早期防治感染提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 病例選擇2014年1月～2015年12月我科門診及住院的乙型肝炎肝硬化患者56例，男40例，女16例；年齡33～60歲，平均年齡（45.4±18.2）歲。乙型肝炎肝硬化的診斷符合2010年發(fā)布的慢性乙型肝炎防治指南的標(biāo)準(zhǔn)[1]，其中代償期乙型肝炎肝硬化患者20例，失代償期乙型肝炎肝硬化患者36例。另選擇健康體檢者30例，男性18例，女性12例；年齡36～60歲，平均年齡（44.2±15.4）歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：其他肝炎病毒感染所致肝硬化、酒精性肝硬化、脂肪性肝硬化、膽汁性肝硬化、肝癌、遺傳代謝性疾病、血管性疾病和3個(gè)月內(nèi)使用過免疫抑制劑者。繼發(fā)細(xì)菌感染的診斷標(biāo)準(zhǔn)：1.自發(fā)性細(xì)菌性腹膜炎：失代償期肝硬化病史合并腹水，有發(fā)熱、腹痛、腹部壓痛及反跳痛等癥狀、體征，腹水常規(guī)中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)升高，排除繼發(fā)性腹膜炎。2.泌尿系感染：中段清潔尿培養(yǎng)細(xì)菌菌落計(jì)數(shù)≥1×105CFU/ml。3.腸道感染：有消化道癥狀，糞便常規(guī)可見紅白細(xì)胞，血或便培養(yǎng)可見致病菌。4.呼吸道感染：有咳嗽、咳痰等呼吸道癥狀，胸部影像學(xué)檢查異常，痰培養(yǎng)或支氣管肺泡灌洗液培養(yǎng)陽性。5.敗血癥：有或無感染病灶，高熱、寒戰(zhàn)，中毒癥狀嚴(yán)重，有譫妄、昏迷、休克，肝脾腫大、皮膚黏膜瘀點(diǎn)，可有黃疸、貧血，白細(xì)胞總數(shù)及中性粒細(xì)胞、CRP、PCT明顯升高，血培養(yǎng)或骨髓培養(yǎng)陽性。

1.2 檢測使用美國BD公司生產(chǎn)的FACSCantoll流式細(xì)胞儀及配套熒光標(biāo)記單克隆抗體試劑盒檢測外周血T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)；采用免疫比濁法檢測血清補(bǔ)體C3、C4（美國貝克曼公司生產(chǎn)的IMMAGE800特定蛋白分析儀）。所有操作均嚴(yán)格按照說明書操作進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析應(yīng)用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料以±s表示，組間比較采用單因素方差分析。計(jì)數(shù)資料以率表示，組間比較采用x2檢驗(yàn)。P＜0.05被認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 三組繼發(fā)細(xì)菌感染例數(shù)分布

表2 各組血清補(bǔ)體和淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)（±s）的比較

表2 各組血清補(bǔ)體和淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)（±s）的比較

與健康人比，①P＜0.05；與代償期肝硬化組比，②P＜0.05

例數(shù)C3（g/L）C4（g/L）CD3（個(gè)/μL）CD4（個(gè)/μL）CD8（個(gè)/μL）健康人30 0.8±0.3 0.3±0.1 1621.5±381.1 942.1±209.6 682.9±176.9代償期肝硬化20 0.7±0.2 0.3±0.1 1074.7±505.3①699.3±216.2①409.4±202.8①失代償期肝硬化36 0.4±0.1①②0.1±0.1①②618.2±209.7①②392.8±204.1①②212.0±126.7①②

2 結(jié)果

2.1 各組細(xì)菌感染比較失代償期乙型肝炎肝硬化患者細(xì)菌感染率明顯高于代償期乙型肝炎肝硬化組或健康人，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01，表1）。

2.2 各組外周血補(bǔ)體和T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)的比較見表2。

3 討論

HBV感染人體后疾病的進(jìn)展及轉(zhuǎn)歸與宿主的免疫應(yīng)答有關(guān)，且主要與細(xì)胞免疫反應(yīng)有關(guān)[7]，尤其是T淋巴細(xì)胞在其中發(fā)揮了重要的作用。CD4+T淋巴細(xì)胞（輔助性/誘導(dǎo)性T細(xì)胞）與CD8+T淋巴細(xì)胞（抑制性/細(xì)胞毒T細(xì)胞）是T淋巴細(xì)胞的主要成份。在正常情況下，兩者處于動(dòng)態(tài)平衡。當(dāng)兩者數(shù)目發(fā)生變化時(shí)，引起免疫功能抑制或免疫失調(diào)，從而造成HBV在體內(nèi)持續(xù)復(fù)制、慢性化，病情進(jìn)展為肝硬化，甚至肝癌。補(bǔ)體存在于人體體液和細(xì)胞表面，經(jīng)活化后具有生物活性，可介導(dǎo)免疫和炎癥反應(yīng)。C3和C4主要在肝臟內(nèi)合成。有研究表明，補(bǔ)體C3和C4水平的下降程度與肝臟的損害程度呈正相關(guān)，且可作為評估病情和監(jiān)測預(yù)后的指標(biāo)[8]。

本研究表明，失代償期乙型肝炎肝硬化者繼發(fā)細(xì)菌感染的比例明顯高于代償期肝硬化患者，且補(bǔ)體C3和C4水平及CD3+、CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)明顯低于健康人，大多數(shù)研究結(jié)果也發(fā)現(xiàn)類似結(jié)果[19，10]。本研究發(fā)現(xiàn)失代償期乙型肝炎肝硬化患者血清補(bǔ)體C3和C4及CD3+、CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)明顯低于代償期乙型肝炎肝硬化患者，尚需擴(kuò)大研究對象進(jìn)一步明確。

肝炎肝硬化患者細(xì)胞免疫功能低下，血清補(bǔ)體C3、C4及外周血CD3+、CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)下降，容易繼發(fā)細(xì)菌感染，出現(xiàn)失代償期肝硬化時(shí)，容易出現(xiàn)各種并發(fā)癥，加重病情。在肝硬化患者的治療中，適當(dāng)應(yīng)用免疫調(diào)節(jié)藥物，調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能，以延緩疾病進(jìn)展[11]。

[1]中華醫(yī)學(xué)會肝病學(xué)分會和感染病學(xué)分會.慢性乙型肝炎防治指南（2010年版）.實(shí)用肝臟病雜志，2011，14（2）：81-89.

[2]王曉輝，楊堯，雷學(xué)忠，等.慢性乙型肝炎患者病情分度與外周血T淋巴細(xì)胞亞群的關(guān)系.四川醫(yī)學(xué)，2005，26（10）：1087.

[3]余永勝，湯正好，馮潔，等.慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴細(xì)胞CTLA4表達(dá)及意義.中國臨床醫(yī)學(xué)，2007，14（4）：493-495.

[4]Thio CL，Mosbruger TL，Kaslow RA，et al.Cytotoxic T-lymphocyte antigen 4 gene and recovery from hepatitis B virus infection.J Virol，2004，78:11258-11260.

[5]徐敏，陳志.乙型肝炎患者外周血T細(xì)胞免疫狀態(tài)的研究進(jìn)展.華北煤炭醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2006，8（1）：56-58.

[6]Grimbacher B，Hutlof A，Schlesier M，et al.Homozygous loss of ICOS is associated with adult onset common variable immunodeficiency.Nature Immunol，2003，4（3）:261-268.

[7]殷櫻，張盈華，張利朝.乙型肝炎病程發(fā)展中CD4/CD8、TNF-α、SIL-IR水平變化及意義.免疫學(xué)雜志，2001，18（1）：74-75.

[8]謝嬋，謝俊強(qiáng)，張宇鋒，等.抗病毒治療對慢性乙型肝炎患者免疫球蛋白及補(bǔ)體的影響.中華傳染病雜志，2012，30（2）：100-104.

[9]莫紅梅，李蕾.慢性乙型肝炎病毒感染與免疫球蛋白、T淋巴細(xì)胞關(guān)系的探討.臨床檢驗(yàn)研究，2011，32（2）：194-195.

[10]張建春，翁錫定，陳孫云，等.乙型肝炎患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群的變化.實(shí)用肝臟病雜志，2013，16（4）：356-357.

[11]唐宗生，郝友華，楊東亮.HBV持續(xù)性感染中T淋巴細(xì)胞功能耗竭的機(jī)制研究進(jìn)展.中華肝臟病雜志，2012，20（11）：871-873.

（收稿：2016-07-12）

（本文編輯：陳宗炳）

Changes of peripheral blood com p lem ents and T-lym phocyte subsets am ong patients w ith hepatitis B-related liver cirrhosis

Chai Yanyun，Li Jianguo，Jin Lei.
Department of Infectious Diseases，General Hospital，Jincheng Coal Group，Jincheng 048006，Shanxi Province，China.E-mail:yanyunchai@163.com

Liver cirrhosis;T-lymphocyte subsets;Complements

10.3969/j.issn.1672-5069.2016.06.023

048006山西省晉城市晉城煤業(yè)集團(tuán)總醫(yī)院感染病科

柴艷云，女，33歲，碩士研究生，主治醫(yī)師。主要從事感染性疾病及肝病的診治研究。E-mail:yanyunchai@163.com