不同微生物添加劑組合對(duì)甘蔗尾青貯品質(zhì)影響

■唐振華　王　波　鄒彩霞　夏中生　梁　辛　韋升菊　梁賢威

（1.廣西壯族自治區(qū)水牛研究所，廣西南寧530001；2.廣西大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，廣西南寧530005）

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不同微生物添加劑組合對(duì)甘蔗尾青貯品質(zhì)影響

■唐振華1，2王波1，2鄒彩霞1夏中生2梁辛1韋升菊1梁賢威1

（1.廣西壯族自治區(qū)水牛研究所，廣西南寧530001；2.廣西大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，廣西南寧530005）

摘要：為了研究黑曲霉（AN）單獨(dú)添加和組合熱帶假絲酵母(CT)、枯草芽孢桿菌(BS)、植物乳桿菌(LAP)以及布氏乳桿菌(LAB)對(duì)甘蔗尾青貯品質(zhì)影響，試驗(yàn)分12組。對(duì)照組（C）不添加添加劑；Ⅰ1、Ⅱ1、Ⅲ1、Ⅳ組分別添加20 ml/kg鮮重AN、AN+CT+BS、AN+CT+BS+LAP、AN+CT+BS+LAB菌液；Ⅰ2、Ⅱ2、Ⅲ2組分別在Ⅰ1、Ⅱ1、Ⅲ1組基礎(chǔ)上添加0.5%尿素；Ⅴ1、Ⅴ2、Ⅴ3組分別添加10、20、30 ml/kg鮮重AN+CT+BS+LAP+LAB菌液；Ⅴ4在Ⅴ2基礎(chǔ)上添加0.5%尿素。結(jié)果顯示：①單獨(dú)添加AN或者聯(lián)合其它菌對(duì)NDF、ADF含量影響不顯著；②與對(duì)照相比，Ⅳ組乙酸含量顯著升高(P<0.05),乳酸含量有所降低，而其他組乳酸含量顯著升高（P<0.05）。Ⅳ組有氧穩(wěn)定性為各組最高；③添加尿素使pH值上升，提高NDF和CP含量，評(píng)分有所降低。各微生物添加劑組合處理甘蔗尾青貯效果均達(dá)到1級(jí)水平，AN的添加對(duì)NDF和ADF降低效果有限，含LAB組合有氧穩(wěn)定性均有所升高。

關(guān)鍵詞：甘蔗尾青貯；微生物添加劑；尿素；青貯品質(zhì)

黑曲霉是一種公認(rèn)的安全真菌，能夠發(fā)酵產(chǎn)生豐富的酶系，如果膠酶、纖維素酶、木聚糖酶等，對(duì)提高青貯中粗蛋白(CP)、降低中性洗滌纖維(NDF)等具有重要作用。部分研究也認(rèn)為一些酵母、曲霉如果能夠合理應(yīng)用，對(duì)提高青貯中粗蛋白(CP)、降低中性洗滌纖維(NDF)等具有重要作用。唐嘉微（2012）研究表明黑曲霉產(chǎn)纖維素能力雖然不及綠色木霉等產(chǎn)霉菌，其安全性得到認(rèn)可并具有較高的糖化能力。部分研究也認(rèn)為一些酵母、曲霉如果能夠合理應(yīng)用，對(duì)提高青貯中粗蛋白(CP)、降低中性洗滌纖維(NDF)等具有重要作用。鄭曉玲報(bào)道，在甘蔗尾青貯中添加含乳酸菌、光合細(xì)菌、放線菌、酵母菌等復(fù)合微生物菌制劑（EM）能夠有效降低粗纖維（CF），提高粗脂肪、無(wú)氮浸出物、可溶性碳水化合物（WSC）含量。Reich研究表明，布氏乳桿菌40788（Lactobacillus buchneri 40788）聯(lián)合植物乳桿菌（Lactobacillus plantarum）、乳片球菌（Pediococ?cus acidilactici）等能夠提高玉米青貯乙酸和乙醇含量，其中布氏乳桿菌40788聯(lián)合植物乳桿菌能夠提高玉米青貯體外（in vitro）中性洗滌纖維（NDF消化率），布氏乳桿菌40788能夠有效提高玉米青貯有氧穩(wěn)定性。以上研究主要是研究EM菌制劑，不同類(lèi)型乳酸等對(duì)青貯品質(zhì)、消化率的影響，而關(guān)于不同發(fā)酵類(lèi)型乳酸菌聯(lián)合酵母、黑曲霉等菌類(lèi)對(duì)青貯品質(zhì)和有氧穩(wěn)定性綜合影響研究較少。因此，本試驗(yàn)以甘蔗尾為青貯材料，研究不同發(fā)酵類(lèi)型乳酸菌聯(lián)合熱帶假絲酵母、黑曲霉等對(duì)甘蔗尾青貯青貯品質(zhì)和有氧穩(wěn)定性的影響。

1　材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

青貯原料：新鮮甘蔗尾由廣西水牛研究所水牛種畜場(chǎng)提供，采集后進(jìn)行人工切斷，長(zhǎng)度為1～4 cm左右。

表1　甘蔗尾原材料營(yíng)養(yǎng)成分（風(fēng)干基礎(chǔ)）

添加劑：黑曲霉（Aspergillus niger，AN）；熱帶假絲酵母（Candida tropicalis,CT）；枯草芽孢桿菌（Bacil?lus subtilis,BS）；布氏乳桿菌（Lactobasillus buchneri, LAB）；植物乳桿菌（Lactobacillus plantarum,LAP）購(gòu)買(mǎi)自中國(guó)工業(yè)微生物菌種保藏管理中心。尿素為市購(gòu)。

培養(yǎng)基：5°Be′麥芽汁用于黑曲霉培養(yǎng)，MRS液體培養(yǎng)基：用于布氏乳桿菌、植物乳桿菌活化和菌液培養(yǎng)。MRS固體培養(yǎng)基：用于布氏乳桿菌、植物乳桿菌涂板計(jì)數(shù)。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1試驗(yàn)菌種活化及擴(kuò)培

安瓿管菌種→活化→5%添加量接入液體培養(yǎng)基，黑曲霉、酵母和枯草芽孢桿菌培養(yǎng)溫度為30℃，150 r/min搖床培養(yǎng)，布氏乳桿菌、植物乳桿菌培養(yǎng)溫度為37℃，靜態(tài)培養(yǎng)。

酵母、枯草芽孢桿菌、乳酸菌接種液計(jì)數(shù)：用涂板對(duì)接種液進(jìn)行計(jì)數(shù)；黑曲霉計(jì)數(shù)用所得菌液加入玻璃珠，用振蕩器震蕩，用紗布過(guò)濾獲得孢子懸浮液。在用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。

1.2.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)

對(duì)照組（C）不添加添加劑；Ⅰ1、Ⅱ1、Ⅲ1、Ⅳ組分別添加20 ml/kg鮮重AN、AN+CT+BS、AN+CT+BS+ LAP、AN+CT+BS+LAB菌液；Ⅰ2、Ⅱ2、Ⅲ2組分別在Ⅰ1、Ⅱ1、Ⅲ1組基礎(chǔ)上添加0.5%尿素；Ⅴ1、Ⅴ2、Ⅴ3組分別添加10、20、30 ml/kg鮮重AN+CT+BS+LAP+ LAB菌液；Ⅴ4在Ⅴ2基礎(chǔ)上添加0.5%尿素。

表2　各組微生物添加劑菌落單位和尿素含量

1.2.3青貯制作

將切好的甘蔗尾，每組按計(jì)量取菌液用生理鹽水稀釋至300 ml，均習(xí)噴灑到3 kg甘蔗尾，分裝到3個(gè)2.5 L玻璃封口瓶，密度為0.4 kg/l。對(duì)照組取等量生理鹽水。再用封口膜進(jìn)行密封，避光室內(nèi)青貯40 d。

1.3測(cè)定項(xiàng)目及方法

1.3.1常規(guī)項(xiàng)目評(píng)定

利用張英麗的常規(guī)法測(cè)定水分、粗蛋白質(zhì)（CP）、中性洗滌纖維（NDF）含量和酸性洗滌纖維（ADF）含量。

1.3.2pH值及品質(zhì)項(xiàng)目分析

①樣品預(yù)處理開(kāi)瓶后，去除上層部分，每瓶取35 g樣品，放入250 ml廣口瓶，添加150 ml超純水，置于4℃冰箱提取24 h。然后通過(guò)2層紗布進(jìn)行過(guò)濾，分裝濾液，用于pH值、乳酸、氨態(tài)氮、揮發(fā)性脂肪酸（VFA）測(cè)定。剩下的青貯甘蔗尾進(jìn)行烘干粉碎用于常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分以及可溶性碳水化合（WSC）測(cè)定。

②pH值用pH計(jì)進(jìn)行測(cè)定，型號(hào)為HANNA HI 8424。

③乳酸用試劑盒進(jìn)行測(cè)定，試劑盒廠家為南京建成，貨號(hào)A019-2。原理以NAD+為氫受體，LDH催化乳酸脫氫產(chǎn)生丙酮酸，使NAD+轉(zhuǎn)化為NADH。其中PMS遞氫使NBT還原為紫色呈色物，呈色物的吸光度在530 nm時(shí)與乳酸含量呈線性關(guān)系。

④氨態(tài)氮（NH3-N）采用比色法測(cè)定NH3-N采用苯份-次氯酸鈉比色法測(cè)定（Broderick等，1980）。①取得的濾液5 ml，3 500 r/min離心10 min取上清。用(NH4)2SO4做標(biāo)準(zhǔn)品，采用美國(guó)生產(chǎn)的紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（PE Lambda 35型),在波長(zhǎng)560 nm下比色，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線和光密度值計(jì)算出NH3-N的濃度。

⑤揮發(fā)性脂肪酸（VFA）測(cè)定：取0.5 ml①中所得的濾液，加入等體積8.2%偏磷酸，1 3000 r/min下離心10 min，取上清加入內(nèi)標(biāo)巴豆酸后，使用Agilent 7890A型氣相色譜儀,HP-INNOWAX(19091N-133)毛細(xì)管柱,毛細(xì)管柱的規(guī)格為30 m×0.25 mm×0.25 μm，分析測(cè)定上清液中丙酸、乙酸及丁酸的含量。

⑥可溶性碳水化合物（WSC）測(cè)定：蒽酮-硫酸比色法測(cè)定。在濃硫酸溶液中可溶性糖先脫水為糖醛或經(jīng)基糖醛,后與蒽酮反應(yīng)成藍(lán)綠色化合物。其顏色與含糖量成正比,吸收波長(zhǎng)640 nm。

⑦干物質(zhì)回收率（DMR）：

DMR=（開(kāi)封時(shí)青貯原料質(zhì)量×青貯干物質(zhì)率）/填裝時(shí)裝入原料質(zhì)量×原料干物質(zhì)率

1.3.3有氧穩(wěn)定性的測(cè)定

每組混合取樣200 g置于封口袋中，用牙簽扎數(shù)個(gè)小孔，再套上一個(gè)寬松不封口的塑料袋，防止交叉污染和減少水分損失，用溫度計(jì)測(cè)定溫度變化。樣品置于陰暗處，溫度變化每8 h記錄1次，當(dāng)青貯物料的溫度超過(guò)環(huán)境溫度2℃時(shí)為止。

1.4數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)先用EXCEL軟件處理，再用SPSS 17.0軟件中的ANOVA過(guò)程進(jìn)行單因子方差分析，差異顯著性以P<0.05為判斷標(biāo)準(zhǔn)，數(shù)據(jù)均采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差來(lái)表示。

2　結(jié)果與分析

2.1不同微生物添加劑組合對(duì)甘蔗尾青貯pH值、乳酸的影響

表3　不同添加劑對(duì)甘蔗尾青貯發(fā)酵品質(zhì)的影響

由表3可以看出，各試驗(yàn)組與對(duì)照組相比，pH值都有所增加。其中添加尿素組Ⅰ2、Ⅱ2、Ⅲ2和Ⅴ4 pH值顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。Ⅰ1、Ⅱ1和Ⅲ1、Ⅲ2與對(duì)照組相比青貯中乳酸含量顯著增加（P<0.05）。Ⅳ、Ⅴ3乳酸含量顯著低于對(duì)照組（P<0.05），Ⅴ2、Ⅴ4乳酸含量顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。添加尿素組與未添加尿素組相比，乳酸含量均有所降低，其中Ⅰ2乳酸含量顯著低于Ⅰ1（P<0.05），Ⅱ2乳酸含量顯著低于Ⅱ1（P<0.05），Ⅲ2乳酸含量顯著低于Ⅲ1（P<0.05）。AN+CT+BS+LAP +LAB處理組隨著微生物添加劑組合濃度升高，乳酸含量下降，其中Ⅴ3顯著低于Ⅴ1。

2.2不同微生物添加劑組合對(duì)甘蔗尾青貯有機(jī)酸、氨態(tài)氮（NH3-N）的影響

由表3可知，AN處理組與對(duì)照組相比，黑曲霉（AN）和尿素對(duì)青貯中乙酸含量沒(méi)有影響。AN+CT+ BS處理組使青貯中乙酸含量有所降低，而隨著尿素的添加，乙酸含量升高，顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。由AN+CT+BS+LAP處理組可以看出，LAP的添加對(duì)青貯乙酸影響不大。而在AN+CT+BS+LAB處理組，隨著LAB的添加，青貯中乙酸含量顯著高于對(duì)照組(P< 0.05)。AN+CT+BS+LP +LAB處理組乙酸含量均高于對(duì)照組，其中Ⅴ2顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。尿素添加使Ⅴ4組含量顯著高于Ⅴ1、Ⅴ3。在對(duì)照組中未檢測(cè)出丙酸含量，添加尿素的組合Ⅰ2、Ⅱ2、Ⅲ2和Ⅴ4檢測(cè)到丙酸存在。對(duì)照組中能檢測(cè)到丁酸含量，含有LAP、LAB且不添加尿素組未能檢測(cè)出丁酸含量。添加尿素組Ⅰ2、Ⅱ2、Ⅲ2和Ⅴ4丁酸含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。

添加尿素組Ⅰ2、Ⅱ2、Ⅲ2和Ⅴ4，NH3-N含量顯著高于對(duì)照組與其他試驗(yàn)組（P<0.05），其中Ⅲ2中NH3-N含量最高，依次為Ⅰ2、Ⅱ2、Ⅴ4。其他各試驗(yàn)組NH3-N含量也均較對(duì)照組高。Ⅳ、Ⅴ組NH3-N濃度顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。

2.3微生物添加劑對(duì)甘蔗尾青貯營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的影響

表4　不同添加劑對(duì)青貯營(yíng)養(yǎng)成分的影響

由表4可以看出，添加AN和AN+尿素組與對(duì)照組相比，對(duì)青貯干物質(zhì)回收率（DMR）影響不大。而AN+CT+BS處理組中Ⅱ2 DMR與對(duì)照組相比有所降低。Ⅲ1、Ⅲ2組隨著LAP的添加，DMR有所降低，特別是Ⅲ2+尿素組DMR顯著低于對(duì)照組。Ⅳ組DMR與對(duì)照組相比也有所降低，差異不顯著（P>0.05）。

Ⅰ1、Ⅱ1、Ⅲ1比對(duì)照組NDF含量低，其中Ⅲ1 NDF含量最低，而Ⅳ組NDF含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。含尿素組Ⅰ2、Ⅱ2、Ⅲ2 NDF含量顯著高于對(duì)照組。添加尿素組合Ⅱ2、Ⅲ2、Ⅴ4可溶性碳水化合物（WSC）含量均比對(duì)照組高。其中Ⅰ2 WSC含量顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。Ⅲ1 WSC含量較對(duì)照組低，差異不顯著（P> 0.05）。Ⅳ組WSC含量較對(duì)照組高，顯著高于Ⅲ1（P< 0.05）。Ⅴ1、Ⅴ2、Ⅴ3、Ⅴ4組WSC含量均較Ⅲ1高。各試驗(yàn)組中，添加尿素組Ⅰ2、Ⅱ2、Ⅲ2、Ⅴ4 CP含量顯著高于對(duì)照組（P<0.05），未添加尿素組中，Ⅲ1組高于對(duì)照組，其它組均較對(duì)照組低，差異不顯著（P>0.05）。

2.4不同添加劑對(duì)甘蔗尾青貯有氧穩(wěn)定性的影響

表5　不同添加劑對(duì)甘蔗尾青貯有氧穩(wěn)定性的影響

由表5可以看出與對(duì)照組相比，Ⅱ1、Ⅱ2組有氧穩(wěn)定性有所降低，Ⅰ1組不受添加劑的影響。Ⅲ1、Ⅲ2組有氧穩(wěn)定性均低于對(duì)照組。Ⅳ組有氧穩(wěn)定性最高，其中Ⅱ2有氧穩(wěn)定性是所有組中最低的。Ⅴ1Ⅴ2、Ⅴ3、Ⅴ4組有氧穩(wěn)定低于Ⅳ組，但Ⅴ2、Ⅴ3均高于對(duì)照組。

2.5甘蔗尾青貯質(zhì)量評(píng)定

感官評(píng)定根據(jù)我國(guó)農(nóng)業(yè)部1996年發(fā)布的《青貯飼料質(zhì)量評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)（試行）》以色澤、質(zhì)地、氣味以及霉變情況進(jìn)行評(píng)定，再根據(jù)Kaiser等提出的以乙酸和丁酸含量評(píng)價(jià)青貯飼料品質(zhì)的評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行品質(zhì)等級(jí)評(píng)定。根據(jù)實(shí)際開(kāi)罐情況和表6可知，添加尿素組上層發(fā)生霉變嚴(yán)重，因此從氣味、色澤上評(píng)定效果不好。從表7得出的評(píng)定來(lái)看，尿素組所得分值也相對(duì)較低，其他各組均達(dá)到1級(jí)水平。

表6　甘蔗尾青貯感官評(píng)定

表7　以乙酸和丁酸含量評(píng)價(jià)青貯飼料品質(zhì)

3　討論

3.1黑曲霉組合其他微生物添加劑對(duì)甘蔗尾青貯營(yíng)養(yǎng)成分的影響

植物中大部分碳水化合物以纖維聚合物組成細(xì)胞壁存在且不能被乳酸菌發(fā)酵，因此許多研究在青貯中添加酶制劑來(lái)降低青貯中纖維含量。但Wein?berg表明單獨(dú)添加纖維素酶使沒(méi)有效果的。Deh?ghani利用組合酶（纖維素酶、半纖維素酶、果膠酶）處理玉米秸稈和苜蓿青貯，結(jié)果表明組合酶能夠降低玉米秸稈NDF含量，而苜蓿NDF卻沒(méi)有受到影響，Kozelov也得出同樣結(jié)論。而黑曲霉是美國(guó)FDA和我國(guó)農(nóng)業(yè)部認(rèn)證的安全菌，能產(chǎn)生高活性纖維素酶、酸性蛋白酶、果膠酶、糖化酶、木聚糖酶等胞外酶?？莶菅挎邨U菌是我國(guó)農(nóng)業(yè)部允許作為飼料添加劑的兩種芽孢桿菌之一。熱帶假絲酵母是優(yōu)良的好氧型飼料酵母，能利用農(nóng)副產(chǎn)品制成的培養(yǎng)基中的單糖、游離氨基酸等大量合成蛋白質(zhì)。任付平利用黑曲霉、綠色木霉、枯草芽孢桿菌等對(duì)青貯玉米進(jìn)行處理，發(fā)酵周期為30 d，結(jié)果表明與對(duì)照組相比，干物質(zhì)、粗蛋白都有所增加，NDF和ADF含量分別降低13.81%和12.67%。而孫文研究表明，啤酒酵母、枯草芽孢桿菌和乳酸菌組合對(duì)玉米秸稈青貯營(yíng)養(yǎng)成分影響不大，結(jié)果與本試驗(yàn)一致。

本試驗(yàn)中黑曲霉或黑曲霉組合其他菌種對(duì)NDF含量降低與對(duì)照組相比影響不大，這也許是因?yàn)楹谇固砑恿坎粔颍a(chǎn)生酶活不夠，還可能是因?yàn)榍噘A環(huán)境不適宜黑曲霉活動(dòng)。鄔敏辰的研究中，黑曲霉突變株DM-1在31℃，自然pH值產(chǎn)酶效果良好。唐嘉徽研究認(rèn)為黑曲霉在溫度28℃，pH值為4.5時(shí)產(chǎn)酶效果良好。而試驗(yàn)室溫環(huán)境低于20℃，因此發(fā)酵前期黑曲霉繁殖活動(dòng)受到很大限制。

3.2不同微生物添加劑對(duì)甘蔗尾青貯發(fā)酵產(chǎn)物的影響

本試驗(yàn)隨著尿素的添加，在發(fā)酵初始階段，pH值接近中性，一些酶類(lèi)如微生物酶和脲酶能夠降解尿素而產(chǎn)生氨，pH值和氨態(tài)氮（NH3-N）與對(duì)照組相比顯著升高。而榮輝等研究認(rèn)為，尿素的添加降低乳酸，主要是因?yàn)槟蛩靥砑邮筽H值升高，為其他雜菌活動(dòng)提供了條件，與乳酸菌競(jìng)爭(zhēng)WSC，如果WSC充足，則乳酸產(chǎn)生不受影響。而V組受尿素添加影響很小，原因可能是布氏乳桿菌（LAB）產(chǎn)生乙酸抑制其它菌活動(dòng)，乳酸菌更有效利用WSC產(chǎn)生乳酸。

本試驗(yàn)中單獨(dú)添加AN以及AN+CT+BS組合，與對(duì)照組相比乳酸含量均顯著升高（P<0.5），原因可能是這些菌類(lèi)在發(fā)酵初期快速消耗青貯中殘存的氧氣，使自身附植的乳酸菌快速代謝產(chǎn)生乳酸，降低pH值，這與鄭曉靈、孫文結(jié)果一致。而添加AN+CT+BS+LAP組合，乳酸含含量顯著升高（P<0.05），添加AN+CT+ BS+LAB組合乳酸含量低于對(duì)照組，這主要是因?yàn)橹参锶闂U菌（LAP）為同型發(fā)酵乳酸菌，發(fā)酵后期成為主導(dǎo)菌群，產(chǎn)生更多的乳酸，而布氏乳桿菌（LAB）為異型發(fā)酵乳桿菌，發(fā)酵后期成為主導(dǎo)菌群，在產(chǎn)生乳酸同時(shí)，還要生成等摩爾（mol）的乙酸，因此含布氏乳桿菌（LAB）的組合乙酸含量都有所升高。而AN+CT+ BS+LAB+LAP組合，在提高乳酸含量的同時(shí)，還提高了乙酸含量，這說(shuō)明布氏乳桿菌（LAB）與植物乳桿菌（LAP）能夠共同起作用。但是當(dāng)添加菌種組合濃度升高時(shí)，乳酸含量明顯降低，這也許是因?yàn)楦收嵛沧陨硭街娜樗峋鸀橥桶l(fā)酵乳酸菌，當(dāng)菌種組合濃度升高時(shí)，布氏乳桿菌（LAB）作用就越來(lái)越明顯，產(chǎn)生更多異型發(fā)酵。

3.3不同添加劑對(duì)甘蔗尾青貯有氧穩(wěn)定性的影響

試驗(yàn)中無(wú)論單獨(dú)添加布氏乳桿菌（LAB）還是聯(lián)合其他菌種，都能提高甘蔗尾青貯有氧穩(wěn)定性，Holzer等早時(shí)期研究異型發(fā)酵乳桿菌代謝過(guò)程產(chǎn)生的物質(zhì)對(duì)青貯有氧穩(wěn)定性的作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)乙酸是影響有氧穩(wěn)定性的唯一參數(shù)。因此，許多研究都表明布氏乳桿菌（LAB）對(duì)青貯有穩(wěn)定性有改善作用。但是，Tabac?co的研究中，各處理乙酸含量差異不顯著，而有氧穩(wěn)定性卻有差異，因此Tabacco認(rèn)為青貯有氧穩(wěn)定性不僅與乙酸含量相關(guān)，還與DM、pH值等負(fù)相關(guān)。

3.4甘蔗尾青貯質(zhì)量評(píng)定研究

感官評(píng)定的參照標(biāo)準(zhǔn)是以我國(guó)農(nóng)業(yè)部1996年發(fā)布的《青貯飼料質(zhì)量評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)（試行）》中玉米秸稈的標(biāo)準(zhǔn)為參考，因此該參考有很大的局限性，因?yàn)楦收嵛睬噘A在氣味、色澤、質(zhì)地等方面與玉米秸稈具有一定的差異性。而Kaiser等提出的以乙酸和丁酸含量評(píng)價(jià)青貯飼料品質(zhì)的評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)，不考慮氨態(tài)氮、pH值以及乳酸，因?yàn)榘睉B(tài)氮、pH值不僅與青貯發(fā)酵過(guò)程有關(guān)，還與青貯牧草種類(lèi)、及化學(xué)成分有關(guān)。而乳酸含量與乳酸菌發(fā)酵類(lèi)型相關(guān)，同型發(fā)酵乳酸菌能產(chǎn)生更多乳酸，但有氧穩(wěn)定性低，異型發(fā)酵乳酸菌產(chǎn)生乳酸含量低，雖然造成營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)損失較高，但有氧穩(wěn)定性高。

試驗(yàn)中尿素添加使青貯感官評(píng)定較差，上層發(fā)霉明顯，原因可能是尿素使甘蔗尾青貯緩沖度上升，pH值升高，梭菌等有害菌活動(dòng)加強(qiáng)，造成青貯丁酸含量上升，降低青貯品質(zhì)。這與榮輝等研究尿素對(duì)象草青貯發(fā)酵品質(zhì)影響的結(jié)果一致。而Yunus就曾表明，發(fā)酵初期，pH值接近中性，微生物酶、植酸酶和脲酶分解尿素成氨，提高緩沖能值。因此試驗(yàn)中添加尿素組pH值在5.0以上，為脲酶活動(dòng)提供了有利條件。在此pH值下，非常利于梭菌活動(dòng)，使青貯丁酸含量上升，降低青貯品質(zhì)。

4　結(jié)論

①與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組黑曲霉單獨(dú)或混合其他菌種添處理甘蔗尾青貯對(duì)NDF降解效果不顯著，其中尿素以及布氏乳桿菌的添加反而使NDF含量較對(duì)照組高。

②添加尿素雖然增加青貯CP含量，但是青貯品質(zhì)有所降低，感官評(píng)定和青貯等級(jí)有所下降。

參考文獻(xiàn)（21篇，刊略，需者可函索）

（編輯：王芳，xfang2005@163.com）

Effect of microbial inoculants on quality of sugarcane tops silage

Tang Zhenhua, Wang Bo, Zou Caixia, Xia Zhongsheng, Liang Xin, Wei Shengju, Liang Xianwei

Abstract：This trial were conducted to investigate the effects of Aspergillus niger or combine with Can?dida tropicalis, Bacillus subtilis, Lactobasillus buchneri, Lactobacillus plantarum on quality of sugar?cane tops silage. The 12 additive treatments were: Silages with no additives served as control；GroupⅠ1,Ⅱ1,Ⅲ1,Ⅳwere treated with AN, AN+CT+BS, AN+CT+BS+LAP, AN+CT+BS+LAB at 20 ml/kg re?spectively; GroupⅠ2,Ⅱ2,Ⅲ2 were treated with 0.5% urea at the basic ofⅠ1,Ⅱ1,Ⅲ1 respectively; GroupⅤ1,Ⅴ2,Ⅴ3 were treated with 10, 20, 30 ml/kg AN+CT+BS+LAP+LAB respectively,Ⅴ4 were treated with 0.5% urea at the basic ofⅤ2.①There are no effect of AN or combine with other inocu?lant on levels of NDF and ADF applying to sugarcane tops silage;②Compare to control, the concentra?tion of acetic acid increased significantly(P<0.05), the concentration of lactic acid decreased significant?ly(P<0.05) while others groups increased significantly(P<0.05);③Treated with 0.5% urea had signifi?cantly higher levels of pH, DNF, CP. The grade of evalution for the quality of silage were grade 1 in all groups, and there are no effect of AN on levels of NDF and ADF applying to sugarcane tops silage, the aerobic stability of sugarcane tops silage were improved treated with microbial inoculants contain LAB.

Key words：sugarcane tops silage；microbial inoculants；urea；quality

基金項(xiàng)目：廣西自然科學(xué)基金[2015GXNSFAA139065]和廣西水產(chǎn)畜牧獸醫(yī)局科研計(jì)劃項(xiàng)目[桂漁牧科1304514]

收稿日期：2015-10-03

通訊作者：鄒彩霞，研究員，碩士生導(dǎo)師。

作者簡(jiǎn)介：唐振華，碩士，主要從事反芻動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究。

中圖分類(lèi)號(hào)：S816.32

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1001-991X（2016）01-0032-06

doi:10.13302/j.cnki.fi.2016.01.007