5種血清學(xué)方法檢測(cè)梅毒螺旋體抗體的評(píng)價(jià)

寧云云

【摘要】 目的 評(píng)價(jià)分析5種血清學(xué)方法檢測(cè)梅毒螺旋體抗體的效果。方法 基于本次研究需求， 分別采取梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)（TPPA）、化學(xué)發(fā)光法（CLIA）、甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)（Trust）、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）以及免疫印跡法（WB）對(duì)120例標(biāo)本實(shí)施梅毒螺旋體抗體檢測(cè)， 對(duì)比分析5種檢測(cè)法陽性率， 將WB作為參照分析其他4種檢測(cè)法的總符合率、特異度以及敏感度。結(jié)果 經(jīng)分析， TPPA法、CLIA法、ELISA法以及Trust法和WB法陽性率對(duì)比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；將WB檢測(cè)法當(dāng)作確認(rèn)試驗(yàn)， TPPA法、CLIA法、ELISA法特異度、敏感度和總符合率均比較高。結(jié)論 經(jīng)研究結(jié)果分析可知， TPPA法、CLIA法、ELISA法不管是敏感度， 還是特異度均比較高， 實(shí)際應(yīng)用中可根據(jù)梅毒螺旋體抗體實(shí)際情況合理選用檢測(cè)法。

【關(guān)鍵詞】 血清學(xué)；梅毒螺旋體抗體；檢測(cè)

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.07.011

在臨床中梅毒作為常見性傳播疾病之一， 傳染性非常高， 目前在獻(xiàn)血員以及臨床患者輸血之前、各種創(chuàng)傷性檢驗(yàn)中梅毒血清學(xué)檢驗(yàn)已成為常規(guī)檢測(cè)中一項(xiàng)基本項(xiàng)目， 基于該形勢(shì)下， 選用快捷、靈敏度和特異度均比較高以及操作便捷的檢測(cè)法對(duì)于正確篩查與診斷梅毒也變得尤為重要[1， 2]。本次研究就5種血清學(xué)方法檢測(cè)梅毒螺旋體抗體的效果進(jìn)行評(píng)價(jià)?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 本次研究所用標(biāo)本來自2012年7月～2015年5月到本院診治患者120例， 全部標(biāo)本均實(shí)施梅毒螺旋體抗體檢測(cè)， 其中男50例， 女70例， 年齡32～56歲， 平均年齡（45.26±4.9）歲。

1. 2 方法 于空腹?fàn)顟B(tài)下采集3 ml靜脈血， 以3000 r/min進(jìn)行離心， 離心時(shí)間一般為10 min， 經(jīng)血清分離實(shí)施檢測(cè)。5種血清檢測(cè)法所用儀器如下：洗板機(jī)、水浴箱、Clem Clin化學(xué)發(fā)光免疫分析儀、振蕩器、Roto-2600c酶標(biāo)儀以及離心器等；所用試劑有CLIA試劑、ELISA試劑、TPPA試劑、WB試劑以及Trust試劑。分別采取TPPA法、WB法、CLIA法、ELISA法以及Trust法， 按照各試劑盒說明操作。將WB法所獲結(jié)果當(dāng)作確認(rèn)試驗(yàn)， 就印跡膜上有≥1條為15、45、17、47 kD特異性條帶的時(shí)候表示為陽性；若沒有顯色條帶或者僅有非特異性條帶則表示為陰性。CLIA法和ELISA法S/CO超過1表示陽性。本次研究所獲試驗(yàn)結(jié)果均為兩人及以上進(jìn)行判斷。

1. 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 TPPA法、CLIA法、ELISA法以及Trust法和WB法陽性率對(duì)比， 差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表1。

2. 2 將WB檢測(cè)法當(dāng)作確認(rèn)試驗(yàn)， TPPA法、CLIA法、ELISA法敏感度、特異度以及總符合率均比較高。見表2。

3 討論

在梅毒診斷中血清學(xué)實(shí)驗(yàn)作為重要的一種實(shí)驗(yàn)室檢查法， 一般情況下人在感染梅毒螺旋體后14 d能將抗體檢測(cè)出來， 但梅毒確診多以抗密螺旋體特異抗體的檢測(cè)為主[3]。本次研究采用的Trust法為非密螺旋體抗體， 經(jīng)檢測(cè)， 所獲陽性率和其他4種檢測(cè)法相比要低。究其原因可能是因Trust法所檢測(cè)的為非特異性抗體， 假陽性現(xiàn)象較為普遍， 對(duì)此， 該方法多用于梅毒療效的監(jiān)控以及梅毒再感染或者復(fù)發(fā)的評(píng)判?？姑苈菪w特異抗體試驗(yàn)主要包含有WB、ELISA、TPPA以及CLIA， 本次研究將WB作為確認(rèn)試驗(yàn)， 結(jié)果顯示， ELISA、TPPA以及CLIA的敏感度和特異度均比較高。ELISA法可用于梅毒大規(guī)模的篩查， 但要注意的是該方法也存在一定的假陽性， 要想獲得更為準(zhǔn)確的結(jié)果還需聯(lián)合其他實(shí)驗(yàn)一同進(jìn)行判斷。TPPA盡管敏感度是3種檢測(cè)法中最高的， 但是所使用試劑比較貴， 且操作復(fù)雜， 在大規(guī)模標(biāo)本篩查中一般不建議使用。CLIA在敏感度方面比ELISA好， 但容易出現(xiàn)假陽性。WB目前被認(rèn)為是確證梅毒螺旋體抗體的主要方法， 所具免疫活性較好。

綜上所述， ELISA法與CLIA法均適合在大規(guī)模梅毒螺旋體抗體篩選中使用， 但這兩種方法均存在假陽性問題， 臨床實(shí)踐中可聯(lián)合應(yīng)用TPPA實(shí)施檢測(cè)， 并且加強(qiáng)和臨床之間的溝通。若條件允許可應(yīng)用WB確證， 以期獲得更為準(zhǔn)確的檢測(cè)結(jié)果。

參考文獻(xiàn)

[1] 柳麗娟， 戴振賢， 卓傳尚， 等.梅毒螺旋體抗體化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)方法的建立及其臨床應(yīng)用.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床， 2013， 10（5）： 569-570.

[2] 呂志軍.不同檢測(cè)方法檢測(cè)梅毒螺旋抗體的效果比較分析.國際病理科學(xué)與臨床雜志， 2014， 34（6）：693-696.

[3] 郭偉， 孫靜.老年人抗梅毒螺旋抗體陽性的臨床分析及防治對(duì)策. 檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床， 2013， 10（3）：349-350.

[收稿日期：2015-10-10]