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豬水腫散的主要藥效學研究
毛成榮阿繼春(青海省大通縣遜讓鄉(xiāng)畜牧獸醫(yī)站810100)張 玉(青海省大通縣景陽鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站)
摘要為觀察豬水腫散對急慢性感染的影響,進行了豬體內體外抑菌試驗及抗炎試驗。結果表明:在體外,豬水腫散對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌有不同程度的抑制作用;在體內,豬水腫散在5.0g/kg·d劑量時對大腸桿菌感染引起的小鼠死亡有一定的保護作用;豬水腫散能顯著抑制二甲苯引起的小鼠皮膚毛細血管通透性的增高;能不同程度的提高正常小鼠網狀內皮系統(tǒng)的吞噬功能,對小鼠體液免疫功能無明顯作用。
關鍵詞豬水腫散抗炎抑菌藥效學
豬水腫散源自“五苓散”,是由豬苓、茯苓、澤瀉、肉桂、白術等組成,采用超微技術制備而成。該方對水濕內停、排尿不利、水腫、宿水停臍、泄瀉有明顯的療效,具有溫陽化氣、行濕利水的作用。為此,根據(jù)豬水腫散病的發(fā)病機制及該方的主治功效對該品進行了藥效學研究。
1.1藥物豬水腫散,由四川華西動物藥品研究所研制,四川華西動物藥業(yè)有限公司生產并提供(規(guī)格100g/袋,批號20130325)。慶大霉素、環(huán)丙沙星均由華西藥業(yè)提供,按“中國獸藥質量標準”檢驗系合格品。
1.2動物昆明種小白鼠,體重18~22g,購自成都生物制品研究所。
1.3試劑二甲苯、分析純,由北京益利精細化學品有限公司提供(批號980505)。生理鹽水、0.1%Na2CO3均為自配。
1.4細菌菌種大腸桿菌、金黃色葡萄球菌由四川華西動物藥業(yè)有限公司抗原中心提供。
2.1豬水腫散的抑菌作用
2.1.1體外抑菌作用用肉湯培養(yǎng)基將豬水腫散(100mg.ml-1)做1:2-1:64倍比稀釋后加至24孔細胞培養(yǎng)板上,每個稀釋度個設2孔,每孔加入藥液0.9ml,再加入每ml10000個菌的菌液0.1ml,于37℃溫箱中培養(yǎng)24h,觀察各孔中細菌生長情況。同時設細菌對照和陽性對照藥對照。結果表明培養(yǎng)24h后,細菌對照管均有細菌生長。豬水腫散對所試的2種菌株均有不同的抑制作用。
2.1.2對大腸桿菌致小鼠死亡的影響取小鼠60只,隨機分為6組,每組10只。試驗組分別給予豬水腫散5.0g、2.5g、1.25g/kg·d;慶大霉素組0.12g/kg·d;環(huán)丙沙星組0.143g/kg·d;細菌感染對照組給予同體積的蒸餾水。灌胃2次/d,0.5ml/次,連續(xù)3d,第4天,取已增菌18h的大腸桿菌(6×108/ml)菌液,作致死性攻擊,感染后再繼續(xù)給藥2d。攻擊后12、24、48、72h紀錄動物死亡數(shù),計算死亡率,并進行組間比較。結果見表1。
表1 豬水腫散對大腸桿菌致小鼠死亡的影響 (只、%)
2.2對小鼠皮膚毛細血管通透性增高的抑制作用
試驗方法:小鼠隨機分組后,一次灌胃給予不同劑量的受試藥物,1h后尾靜脈注射0.5%生理鹽水溶液1ml.10g-1,立即于去毛腹部上滴加二甲苯40μl,15min后處死動物,取腹部著色皮膚剪碎,放于生理鹽水-丙酮(3:7)溶液中,以吸收度值進行統(tǒng)計學處理。結果見表2。
表2 豬水腫散對小鼠皮膚毛細血管通透性的影響
2.3對小鼠網狀內皮系統(tǒng)吞噬功能的影響
表3 豬水腫散對正常小鼠血中碳粒清除速度的影響 (g/kg、%)
試驗方法:碳粒廓清法。小鼠按體重隨機分成4組,即正常對照組、豬水腫散3個劑量組,連續(xù)口服給藥7d,2次/d,第8天稱體重,尾靜脈注射印度墨汁稀釋液(1:1)0.1ml.10g-1體重,注射15min后用玻璃毛細血管吸管分別從眶后靜脈叢取血20μl,溶于3ml0.1%Na2CO3溶液中搖勻,用分光光度計在波長650nm下,測定吸光度值。最后將小鼠頸椎脫臼處死,分別稱取肝、脾重量。計算廓清指數(shù)a,進行組間t檢驗。結果見表3。
(1)豬水腫散是在經典處方的基礎上,結合現(xiàn)代中草藥制劑的提取與制備工藝,有效解決中草藥制劑的溶出速率、吸收性精制而成的預防和治療性藥品。通過大量的臨床試驗證實該藥具有療效確切、安全、用量小等特點。(2)本試驗表明,豬水腫散有明顯的抑菌、消炎等藥理作用,進一步證實了本品用于預防和治療仔豬水腫病的有效性,為進一步開發(fā)研制獸用新藥和臨床應用提供可靠依據(jù)。
參考文獻
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[2] 呂娟, 董虹等. 中藥復方對仔豬水腫病小鼠模型的療效試驗[J].中國獸醫(yī)雜志, 2010(2).
收稿日期:(2015–11–09)
中圖分類號:S853.76
文獻標識碼:A
文章編號:1007-1733(2016)02-0004-02