遵義地區(qū)不孕不育家庭男性精液質(zhì)量調(diào)查分析

姚觀平，楊智敏，張明哲，胡雪梅，刁　英，楊名慧，余麗梅

(1.遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院 生殖醫(yī)學(xué)中心，貴州 遵義　563099；2.貴州省細胞工程重點實驗室，貴州 遵義　563099)

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調(diào)查報告

遵義地區(qū)不孕不育家庭男性精液質(zhì)量調(diào)查分析

姚觀平1，楊智敏1，張明哲1，胡雪梅1，刁英1，楊名慧1，余麗梅2

(1.遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院 生殖醫(yī)學(xué)中心，貴州 遵義563099；2.貴州省細胞工程重點實驗室，貴州 遵義563099)

[摘要]目的 了解遵義地區(qū)不育男性精液質(zhì)量現(xiàn)狀，比較兩個時期遵義地區(qū)男性精液質(zhì)量的變化趨勢。方法 采用計算機輔助精液分析系統(tǒng)對2013年11月至2015年11月于遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院進行精液檢查的9 258例(B組)男性的精液質(zhì)量進行分析，并和2004年11 月至2006年11月期間4 083例(A組)男性精液質(zhì)量進行比較。結(jié)果 B組與A組比較，正?；颊叩谋壤?5.92%減少到13.39，少精癥患者的比例由0.81%增加到1.19%，少弱精癥患者的比例由3.28%增加到5.42%，畸精癥患者的比例由27.58%增加到31.99%，少弱畸精癥患者由7.98%增加到11.23%，其中畸精癥患者所占的比率超過弱精癥患者。結(jié)論 上述結(jié)果提示遵義地區(qū)男性不育人群數(shù)量在不斷增加，精液質(zhì)量呈下降趨勢，畸精癥和弱精癥的比率較大，少精癥、少弱精癥、少弱畸精癥患者的比例也有增加。

[關(guān)鍵詞]少精癥；弱精癥；少弱精癥；畸精癥；少弱畸精癥；不育

近幾年，不孕不育引起社會的廣泛關(guān)注。據(jù)報道，中國10%~15%的育齡夫婦受到不育不孕困擾，其中由男方原因所致不育約占50%[1,3]。經(jīng)濟發(fā)展、生活方式、環(huán)境污染、食品安全、藥物濫用及工作壓力等因素，使人群整體的精液質(zhì)量情勢不容樂觀，不孕不育的發(fā)病率逐年呈上升趨勢，而男性不育癥的臨床診治中精液質(zhì)量的優(yōu)劣具有重要參考價值，精子活力減弱、數(shù)量減少及精子畸形率上升是造成男性精液質(zhì)量下降的主要原因。國內(nèi)外研究表明，近幾年全球男性精液質(zhì)量以每年1%速度在下降，而中國精液質(zhì)量報道不一。本文以遵義地區(qū)唯一的生殖醫(yī)學(xué)中心2004年11月至2006年11月和2013年11月至2015年11月兩個時期所做精液質(zhì)量分析的男性為研究對象，通過比較兩個時期男性精液質(zhì)量分析結(jié)果，了解遵義地區(qū)不育男性精液質(zhì)量的變化趨勢，以期為臨床診治男性不育癥提供有價值的參考依據(jù)。

1資料與方法

1.1研究對象分別選取2004年11月至2006年11月(A組，4 083例)和2013年11月至2015年11月(B組，9 258例)兩個時期遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院生殖中心精液質(zhì)量分析的男性患者作為研究對象，A組男性年齡20~56周歲，平均29.6±5.1歲；B組男性年齡20~55歲，平均(34.2±6.7)歲，均為婚后同居，性生活正常，未采取任何避孕措施1年以上而妻子未受孕者，取其完整精液標本進行檢測分析。

1.2精液收集檢查前禁欲2~7 d，按WHO標準手淫取精，收集全部精液于無菌干燥的取精廣口杯中，送遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)中心精液質(zhì)量分析室，置于37 ℃水浴箱內(nèi)，液化待檢。

1.3主要儀器設(shè)備全自動精子質(zhì)量分析系統(tǒng)為上海北昂醫(yī)療技術(shù)有限公司產(chǎn)品，以色列Sefi-medical Instruments公司進口精子計數(shù)板，Testsimplets染色玻片為德國進口產(chǎn)品，奧林巴斯光學(xué)顯微鏡為日本Olympus公司產(chǎn)品。

1.4精液常規(guī)質(zhì)量分析及精子形態(tài)學(xué)評估與分類方法采用計算機輔助精子分析系統(tǒng)，參照《WHO人類精液檢查與處理實驗室手冊》第5版標準規(guī)范進行精液質(zhì)量分析[2]。肉眼觀測精液標本體積、顏色、黏稠度及是否液化。待標本完全液化，檢測pH值。然后將精液充分混勻，移液槍吸取10 μL精液于預(yù)熱10 min以上的connting chamber Makler上，加蓋輕壓專用蓋片，光學(xué)顯微鏡下，采用CASA對精子活力(前向運動)、濃度及精子總數(shù)等參數(shù)進行分析，首次檢查應(yīng)連續(xù)進行兩次，間隔時間7 d～3周，若兩次結(jié)果差異大則再復(fù)檢1次，同時采用Testsimplets染色玻片進行精子形態(tài)分析。

1.5正常精液參考值標準[2]正常精液判斷標準如下：①精液量1.5~6.0 mL，pH 7.2~8.0；②精液于排精后60 min內(nèi)完全液化；③精子密度≥15×106個/mL或總精子數(shù)≥39×106個/每次射精；④精子活動度(%)a+b級≥32%或a+b+c級≥40%；⑤正常形態(tài)精子比率≥4%；⑥連續(xù)進行三次精液檢查分析：未發(fā)現(xiàn)精子為無精子癥。精液質(zhì)量異常的診斷標準如下：①精子密度低于20×106/mL者為少精子癥；②精子活動度(%)a+b級<32%或a+b+c級<40%者為弱精癥；③正常精子形態(tài)<4%者為畸精癥；④精子密度<15×106個/mL或總精子數(shù)<39×106個/每次射精，且精子活動度(%)a+b級<32%或a+b+c級<40%者為少弱精癥；⑤少弱畸精癥則是指精子密度<15×106個/mL或總精子數(shù)<39×106個/每次射精，同時精子活動度(%)a+b級<32%或a+b+c<級40%，且正常精子形態(tài)<4%者。

2結(jié)果

2.1男性精液質(zhì)量比較如表1、2所示，A組4 083例精液標本中，精液質(zhì)量正常者650例，占15.92%；精液質(zhì)量出現(xiàn)不同程度異常者3 433例，比例為84.08%，其中嚴重少精子者126例，占3.1%，無精子癥患者有302例，比例為7.40%；存在pH值和液化時間異常者分別為49例和821例，各占1.2%和20.1%；精液呈咖啡色者7例，其余檢測標本精液顏色無見明顯異常。B組9 258例精液標本中，精液質(zhì)量正常者1 240例，占13.39%；精液質(zhì)量異常者8 018例，占精液檢測總數(shù)86.61%，其中無精子者564例，占6.09%；單純少精癥111例，占1.19%；精子活力異常者2 839例，占30.67%；畸精癥2 962例，所占比例最大，為31.99%，并超過弱精癥比例；嚴重少弱精癥502例，占5.42%；嚴重畸精癥患者2 962例，占31.99%。

2.2兩個時期精液質(zhì)量變化趨勢B組精液正常者比例13.39%(1 240/9 258)明顯低于A組的15.92%(650/4083，χ2=14.87，P<0.01)。清液質(zhì)量異常者中主要表現(xiàn)為畸精癥者明顯增多，其余依次為精子活力(即前向運動精子(a+b)<32%)和存活率下降，精子密度和精液量減少，B組與A組比較，少精癥、畸精癥、少弱精癥、少弱畸精癥所占比率明顯增加(P<0.05或P<0.01)，而精液質(zhì)量正常、無精癥、弱精癥比率降低(P<0.01)，B組精子畸形率明顯高于A組(P<0.01，見表1、2)。

組別總體精液質(zhì)量例數(shù)構(gòu)成比(%)精液體積(mL)精子濃度(×106/mL)精子活力(a+b級,%)精子活率(%)畸形精子率(%)A組正常精液65015.92.6±0.864.2±43.256.2±4.268.9±6.772.6±7.5異常精液343384.12.2±1.456.4±40.833.4±13.953.8±15.578.8±11.2B組正常精液124013.42.5±0.887.1±50.451.4±9.754.9±10.290.5±5.5**異常精液801886.62.0±1.657.4±39.530.5±14.346.7±17.596.5±3.5**

與A組精液質(zhì)量比較，*P<0.05，**P<0.01。

表2兩個時期精液質(zhì)量變化趨勢分析比較

分類2004至2006年例數(shù)構(gòu)成比(%)2013至2015年例數(shù)構(gòu)成比(%)χ2P無精癥3027.405646.097.94 <0.01少精癥330.811111.194.05 <0.05弱精癥151237.03283930.6752.25<0.01畸精癥112627.58296231.9927.06<0.01少弱精癥1343.285025.4228.59<0.01少弱畸精癥3267.98104011.2332.55<0.01正常精液65015.92124013.3914.87<0.01合計4083100.009258100.00

3討論

由于生活方式、環(huán)境的改變、化學(xué)物質(zhì)接觸的增多、精神壓力與遺傳因素等諸多影響，男性不育的發(fā)生率呈現(xiàn)不斷上升趨勢，少、弱、畸精子成為不育癥的常見原因。參照WHO標準，男性不育癥是指夫婦婚后同居1年以上，未采取任何避孕指施，由于男方因素造成女方不孕者[4]。男性精液主要由精子(5%)和精漿(95%)組成，其中精漿主要是由凝固因子精囊腺液(70%)、液化因子前列腺液(25%)、尿道球腺液(3%)以及睪丸和附睪液(2%)組成。臨床上，精液質(zhì)量的優(yōu)劣是評價男性生育能力的重要依據(jù)，同時也是男性不育患者臨床診療的重要檢測指標[5]。引起畸形精子與活力異常的原因除遺傳因素外，與接觸有害環(huán)境、內(nèi)分泌失調(diào)及生殖道感染等有關(guān)，這些因素可損害睪丸生精功能，甚至導(dǎo)致生殖細胞染色體數(shù)目與結(jié)構(gòu)變化，引起精子形態(tài)改變和活動度下降，導(dǎo)致男性生育能力下降，患者病史中也印證上述因素，大部分精液異?；颊哂形鼰煛⑿锞?、肥胖、生殖道感染、久坐、長期電腦操作、長途司機或長期接觸化學(xué)品、農(nóng)藥等病史，這些因素可能嚴重危害人類生殖健康。

本文以2004年至2006年和2013年至2015年兩個不同時期遵義地區(qū)不孕不育家庭到生殖醫(yī)學(xué)中心就診男性精液質(zhì)量為分析研究對象，采用CASA與Testsimplets玻片形態(tài)染色相結(jié)合方法進行精液質(zhì)量分析[6]，不但克服了傳統(tǒng)手工精液分析帶來的主觀性高、費時、準確度差、信息量少等缺陷，還獲得了精子密度、總數(shù)及活動力及精子運動軌跡和運動速度的更加全面的質(zhì)量信息，有關(guān)反應(yīng)精子運動能力的參數(shù)還可作為判斷胚胎質(zhì)量及精子授精能力的重要補充[7]，可以更加精準客觀的反映精液質(zhì)量的真實情況。

分析結(jié)果顯示，2013至2015年較2004至2006年而言，遵義地區(qū)不孕不育就診男性中，精液質(zhì)量檢查正常者數(shù)量明顯降低，而精液質(zhì)量異常者比率顯著上升。不育的人群中，畸精癥、少精癥、少弱精癥和少弱畸精癥患者比率明顯增高，而弱精癥和無精癥略有下降的趨勢，表明本地區(qū)不育人群中出現(xiàn)精子形態(tài)異常、密度或總數(shù)下降，或二者均異

常，并伴有精子活動度降低改變已成為導(dǎo)致男性不育的主要因素，提示精子形態(tài)和數(shù)量的異?？赡艹蔀橛绊懽窳x地區(qū)男性生育能力的重要因素。

業(yè)已證明[8]，精子正常形態(tài)百分率與體內(nèi)受精存在一定關(guān)系，但并不意味精子正常形態(tài)百分率低就一定導(dǎo)致不育，而是精子正常形態(tài)總數(shù)可能比正常形態(tài)百分率更重要。若男性生育指數(shù)(fertility index，F(xiàn)I)超過28.8萬(精液體積下限×精液密度下限×精子活動度×正常形態(tài)精子比率=1.5×15×106×32%×4%)，最終可能會有若干“具有潛在受精能力的精子”到達卵細胞透明帶，受精的可能性較大。FI可以作為輔助生殖技術(shù)參考依據(jù)：FI在21.6~28.8萬，建議藥物治療；FI在14.4~21.6萬，考慮進行人工受精；FI在7.2~14.4萬，考慮做體外受精-胚胎移植，F(xiàn)I低于7.2萬，建議做卵細胞內(nèi)單精子注射。因此本研究中精液質(zhì)量分析信息，不但對于檢測本地區(qū)男性生育能力和明確不育原因有著重要作用，在解決不育男性生殖問題中，綜合應(yīng)用精液質(zhì)量分析各項指標，確定合理的治療策略[9]，也有著重要意義。

考慮遺傳因素對男性不育及上述精液檢查指標的影響，進一步應(yīng)用染色體核型、精子功能、基因檢測、睪丸穿刺組織病理、激素水平、抑制素B水平檢測等[10]，將實現(xiàn)男性不育特異性病因確診或排除遺傳因素致病的可能性，為通過改善生活方式和生活環(huán)境，提高精液質(zhì)量或避免損害性因素的影響提供依據(jù)，必要時則采用恰當?shù)娜祟愝o助生殖技術(shù)幫助不育男性實現(xiàn)生育愿望。

綜上所述，近年來遵義地區(qū)不育男性的精液質(zhì)量下降和存在的畸精癥、少精癥增高問題，應(yīng)當引起重視，提倡積極健康的生活方式，努力改善生活、工作環(huán)境，不斷提高診療技術(shù)，可能都將有助于提高育齡男性的精液質(zhì)量和生育能力。

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[收稿2015-11-23;修回2015-12-23]

(編輯：王福軍)

Investigation and analysis of semen quality for men of infertility family in the Zunyi area

YaoGuanping1，YangZhimin1，ZhangMingzhe1，HuXuemei1，DiaoYing1,YangMinghui1，YuLimei2

(1.Human Reproductive Medicine Center，The Affiliated Hospital of Zunyi Medical University ,Zunyi Guizhou 563099，China; 2.Key Laboratory of Cell Engineering in Guizhou Province，The Affiliated Hospital of Zunyi Medical University，Zunyi Guizhou 563099，China)

[Abstract]Objective To understand the semen quality of males in infertility family and compare the change trend on semen quality of Zunyi area in two-time periods. Methods The semen qualities of infertile 9 258 males (group B) were analyzed by computer-assisted sperm analysis system for examination of semen from 2013-11 to 2015-11 in the Affiliated Hospital of Zunyi Medical University.The semen quality of group B was compared with 4 083 infertile males (group A) from 2004-11 to 2006-11. Results Compared with A group, the rate of normal males was reduced from 15.92% to 13.39% in B group, but the rate of oligospermia patients increased from 0.81% to 1.19%, the rate of the oligoasthenotspermia patients increased from 3.28% to 5.42%, the rate of the teratozoospermia patients increased from 27.58% to 31.99%, the rate of the oligoasthenoterazoospermia patients increased from 7.98% to 11.23%. The rate of the teratozoospermic patients were more than asthenozoospermia patients in B group. Conclusion The results suggest that the population of infertile male was escalating in Zunyi area, but the semen quality of the male showed downtrend. The rates of teratozoospermia and asthenozoospermia were higher in infertile males. The proportion of oligospermia, oligoasthenotspermia, oligoasthenoterazoospermia males were increased as well.

[Key words]oligospermia; asthenozoospermia; oligoasthenotspermia; teratozoospermia; oligoasthenoterazoospermia; infertility

[中圖法分類號]R698.2

[文獻標志碼]E

[文章編號]1000-2715(2016)01-0089-03

[通信作者]余麗梅，女，博士，教授，碩士生導(dǎo)師，研究方向：生殖藥理與再生醫(yī)學(xué)研究，E-mail:ylm720@sina.com。

[基金項目]貴州省科學(xué)技術(shù)聯(lián)合基金資助項目(NO:黔科合LH字[2014 ]7569);遵義市重大科技項目培育及科技人才培養(yǎng)計劃[NO:遵科培字(2009)02]。