蛇足石杉及石杉堿甲的研究進(jìn)展

查 沖, 杜亞填,2, 劉 姣

(1.吉首大學(xué) 林產(chǎn)化工工程湖南省重點實驗室， 湖南 張家界 427000;2.湖南省植物功能成分利用協(xié)同創(chuàng)新中心， 湖南 張家界 427000)

蛇足石杉及石杉堿甲的研究進(jìn)展

查 沖1, 杜亞填1,2, 劉 姣1

(1.吉首大學(xué) 林產(chǎn)化工工程湖南省重點實驗室， 湖南 張家界 427000;2.湖南省植物功能成分利用協(xié)同創(chuàng)新中心， 湖南 張家界 427000)

對蛇足石杉資源及其中的藥用活性成分石杉堿甲的相關(guān)研究進(jìn)展進(jìn)行了綜述，指出蛇足石杉及石杉堿甲高含量天然植物資源的大規(guī)模、高效再生增殖，是目前解決石杉堿甲生產(chǎn)原材料來源最有效、最快捷的有效途徑。

蛇足石杉； 石杉堿甲； 內(nèi)生菌； 合成

蛇足石杉(Huperziaserrata(Thunb.)Trev.)，又名千層塔，為石杉科(Huperiaceae)、石杉屬(HuperziaBernh.)、石杉組(Sect serrate ea (Rothm.)Holub)多年生生蕨類植物。全草可供藥用，民間用于治療肌肉痙攣、瘀血腫痛、跌打損傷、神經(jīng)性頭痛、坐骨神經(jīng)痛、膽結(jié)石引起的劇痛。同屬種下有2個變型即長柄蛇足石杉(H.serrataf.longipetiolata)和小葉蛇足石杉(H.serrata)。來源于蛇足石杉的石杉堿甲是一種高效乙酰膽堿酯酶抑制劑，對老年性癡呆的治療非常有效。因而蛇足石杉與石杉堿甲均受到國內(nèi)外的廣泛關(guān)注，1972年國內(nèi)首次報道蛇足石杉中的生物堿石杉堿甲(Huperzine A，Hup A)在動物試驗上有橫紋肌松弛作用，之后證明具有抑制乙酰膽堿酯酶(AChE)活性，是一種低毒、高效、可逆和高選擇性的Ach E抑制劑，并進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)其具有提高記憶效率的功能，可用于治療老年性癡呆癥、小兒麻痹癥和重癥肌無力，在提高青春期學(xué)生記憶力和學(xué)習(xí)成績等方面有顯著功效[1]。但蛇足石杉是一種小型蕨類植物，植株矮小、生長極為緩慢、生物量小，自然狀態(tài)下通過孢子繁殖，自然繁殖能力差，多分布在空氣濕度較高的中高海拔山林下，可供利用的野生資源極其有限，到目前為止，還沒有關(guān)于其人工繁殖、栽培獲得成功的報道。本文對蛇足石杉資源及其中的藥用活性成分石杉堿甲的研究進(jìn)展進(jìn)行了綜述。

1 蛇足石杉

1.1生物學(xué)特性

王德立[2-3]等通過研究發(fā)現(xiàn)蛇足石杉成株株齡為芽托層數(shù)+3，且其主要分布于長江以南各省，東北地區(qū)有零星分布。周毅[4]等發(fā)現(xiàn)蛇足石杉形態(tài)解剖學(xué)上的差異性或可塑性是其賴以適應(yīng)環(huán)境和生存的基礎(chǔ)。魯潤龍[5]等首次較系統(tǒng)地研究了蛇足石杉的生物學(xué)特性，包括其內(nèi)部結(jié)構(gòu)、外部形態(tài)、菌根、生活史、孢子囊和孢子形態(tài)、生長特性、生態(tài)學(xué)、地理分布和群落學(xué)特性等。發(fā)現(xiàn)其菌根為不定根，生于莖的基部，共生菌為真菌，共生真菌的菌絲只侵入根的皮層細(xì)胞間隙, 不侵入細(xì)胞內(nèi), 為外生菌根。營孢子繁殖，生活史包括孢子萌發(fā)、配子體形成等階段，即孢子萌發(fā)形成配子體，由配子體再產(chǎn)生精子和卵，在有水的環(huán)境下，精子游向卵使其受精，受精卵發(fā)育成胚, 幼胚暫時寄生在配子體上，長大后配子體死亡, 孢子體即行獨立生活，幼孢子體的頂端先長出一片幼葉, 隨著幼苗的長大, 相繼長出新葉, 等到幼苗長到2～3 cm 時, 就出現(xiàn)二叉分枝。其植株小型, 為叢生的草本植物, 土生或生于苔蘚層中，通過三種方式成苗, 一是孢子繁殖成新苗；二是芽胞繁殖成新苗；三是分株繁殖成新苗。黃驥[6]等則發(fā)現(xiàn)決定蛇足石杉分布和居群擴大的關(guān)鍵因素是特化的生態(tài)位。但其繁殖、孢子萌發(fā)等除與必要的濕度條件相關(guān)外，是否還與其他如土壤微生物條件有關(guān)還有待進(jìn)一步研究，特別是石杉堿甲的生物合成對蛇足石杉的生物學(xué)意義更需要研究探討。

1.2生態(tài)學(xué)特性

蛇足石杉群落多生于海拔400～1600 m中低山陰濕的山頂巖石上、山地針闊葉混交密林下或溝谷陰濕地。全國均有分布，且廣范分布于亞洲其他地區(qū)，大洋洲，以及中美洲的墨西哥、古巴等地也有分布。多叢生，直立，葉披針型，邊緣具鋸齒，葉緣是否呈波狀是區(qū)別該屬種類的主要形態(tài)特征，且具有2個種下變型，即長柄蛇足石杉和小葉蛇足石杉。群落上層喬木樹種主要有毛竹(Phyllostachysheterocycla)、三尖杉(Cephalotaxusfortunei)等，灌木樹種有紅檵木(Loropetalumchinense)、金銀花(Lonicerajaponica)、映山紅(Rhododendronmariesii)、紫金牛(Maesajaponica)、格藥柃(Euryamuricata)等, 草本植物有蕨、多花黃精(Polygonatumcyrtonema)、三脈紫菀(Asterageratoides)、澤蘭(Eupatoriumjaponicum)及浙皖粗筒苣苔(Briggsiachienii)等，蛇足石杉伴生植物有金發(fā)蘚(Polytrichumcommune)及暖地大葉蘚(Rhodobryumgiganteum)等蘚類[5]。李沛玲[7]等在研究蛇足石杉優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)栽培過程中發(fā)現(xiàn)，磐安產(chǎn)種群的環(huán)境特點是電導(dǎo)率以及pH值相對較低，郁閉度高，年均降水量，空氣相對濕度偏大，對Ca、Mg等元素利用率較高，且土壤中Al的含量較高等。吳葒等[8]通過調(diào)查研究進(jìn)一步闡述了中國蛇足石杉的變異類型和分布區(qū)域，主要有長柄蛇足石杉和小葉蛇足石杉等類型，主要分布在亞洲，大洋洲，美洲熱帶亞熱帶及溫帶地區(qū)，尤其在東亞的中國東部和東南部形成了該種種下變異和多度中心等區(qū)域。這些研究雖報道了蛇足石杉生境特性及其分布基本規(guī)律，但影響其分布與生長的關(guān)鍵生態(tài)因子仍需進(jìn)行更加深入的研究，以為蛇足石杉人工大規(guī)模繁殖栽培提供基礎(chǔ)。

1.3蛇足石杉的人工栽培及人工繁殖

石杉堿甲的藥理作用被發(fā)現(xiàn)之后，野生蛇足石杉立即遭到過度采挖，導(dǎo)致資源迅速瀕臨枯竭。因此，如何解決蛇足石杉的資源危機問題，便成了國內(nèi)外研究的熱點。石松科植物的繁殖培養(yǎng)主要包括組織培養(yǎng)、孢子繁殖、扦插繁殖等[9]。龍華[10]等利用蛇足石杉帶莖尖插條和芽胞進(jìn)行野外半人工輔助繁殖時發(fā)現(xiàn)，蛇足石杉孢子萌發(fā)困難、配子體受精存在障礙。但相關(guān)研究報道較少，且不夠深入。所以，有關(guān)蛇足石杉配子體形成和受精的生物學(xué)機制等還有待進(jìn)一步研究。

1.4蛇足石杉組織細(xì)胞培養(yǎng)

蛇足石杉分布零散，資源更新周期較長，可供采取的天然資源非常有限，直接采收天然資源不可行[8]。必須通過人工繁育手段解決蛇足石杉資源匱乏問題，組織細(xì)胞培養(yǎng)被認(rèn)為是解決蛇足石杉資源可持續(xù)開發(fā)利用問題最為有效的途徑之一。周穎[11]等對蛇足石杉的組織培養(yǎng)進(jìn)行了初步探討，在培養(yǎng)過程中遇到了初代培養(yǎng)污染問題，如愈傷組織污染、莖尖滅菌難等問題，通過研究發(fā)現(xiàn)，采用0.1%升汞液多次消毒，無菌水沖洗5次，使滅菌難問題得到了初步解決。楊雪飛[12]等也取得了較好的滅菌效果，可獲得52%無菌外植體，為蛇足石杉體胚或愈傷發(fā)生提供了誘導(dǎo)可能。馬華升[13]等進(jìn)行蛇足石杉組織培養(yǎng)工程研究時選用孢子囊作為外植體，但遇到了孢子萌發(fā)難的問題，且很難誘導(dǎo)出愈傷組織。孫玉強[14]等經(jīng)過初培養(yǎng)和3至4輪繼代培養(yǎng)，從未污染的蛇足石杉莖尖中，獲得了約5%的愈傷組織。沈曉霞[15]等在莖尖組織培養(yǎng)過程中，也誘導(dǎo)出了愈傷組織。但這些研究均沒有建立起蛇足石杉組織培養(yǎng)快繁體系。李曉君[16]等研究蛇足石杉莖尖組織培養(yǎng)時發(fā)現(xiàn)，蛇足石杉莖尖在無生長調(diào)節(jié)劑的MS基本培養(yǎng)基上可以通過兩種途徑再生植株：一是由莖尖直接誘導(dǎo)發(fā)生叢生芽，再誘導(dǎo)叢生芽生根再生植株；二是先誘導(dǎo)莖尖發(fā)生形成綠色小體(green globular body，GGB)，再誘導(dǎo)GGB產(chǎn)生叢生芽，最后誘導(dǎo)叢生芽生根再生植株，初步建立了蛇足石杉的組織快繁體系。但相關(guān)研究成果能否進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)應(yīng)用，還未見有相關(guān)報道。

1.5蛇足石杉內(nèi)生菌

龔玉霞[17]等發(fā)現(xiàn)在蛇足石杉不同部位中可分離到的內(nèi)生真菌菌株數(shù)不同。其中數(shù)目最多的是莖部，有100株。其次是葉部，有73株。根部只有7株。經(jīng)初步鑒定，這180株菌分屬于13屬，即交鏈孢屬(Alternaria)、球座菌屬(Guignardia)、青霉屬(Penicillium)、頭孢霉屬(Cephalosporium)、間座殼屬(Diaporthe)、莖點霉屬(Phoma)、鐮刀菌屬(Fusarium)、曲霉屬(Aspergillus)、組絲核菌屬(Phacodium)、輪枝孢屬(Verticilliun)、木霉屬(Trichoderma)、瓶梗青霉屬(Paecilomyces)、刺盤孢屬(Colletotrichum)。張琳[18]等從蛇足石杉植物體中分離出7種內(nèi)生菌，除了上面提到的，還有半知菌亞門叢梗孢目暗梗孢科磚隔孢亞科的鑲孢霉屬(異孢迭球孢霉)，真子囊菌亞門盤菌目盤菌科的盤霉屬，真子囊菌亞門多腔菌目沙卡氏菌科的沙卡氏屬。俞超[19]等從蛇足石杉莖中分離出4株內(nèi)生真菌菌株，分別屬于頭孢霉屬、束梗孢霉屬、酵母屬和頂孢霉屬，從葉中分離出2株內(nèi)生真菌菌株，分別屬于頭孢霉屬和青霉屬。李娜[20]等則證明了蛇足石杉孢子體世代體內(nèi)也有真菌存在。鞠鏨[21]等首次從柳杉葉馬尾杉(Phlegmariuruscryptomerianus(Maxim.) Ching ex L.B. Zhang et H.S.Kung)中分離出能產(chǎn)生石杉堿甲的內(nèi)生真菌，其分屬不同種類的芽胞菌屬(BlastomycesCost. exRoll.)和葡萄孢屬(BotrytisPers. ex Fr.)。從以上可以看出，蛇足石杉內(nèi)生真菌具有多樣性。黎萬奎[22]等進(jìn)行了蛇足石杉內(nèi)生真菌2F09P03B 產(chǎn)石杉堿甲單株發(fā)酵條件的研究，石杉堿甲產(chǎn)量為8.32 μg/L。汪涯[23-24]等發(fā)現(xiàn)黃曲霉(Aspergillus flavusLF40)菌株里石杉堿甲含量高達(dá)80.1 μg/g (dcw)，并具有體外乙酰膽堿酯酶抑制活性，而且還發(fā)現(xiàn)15個屬的39株內(nèi)生真菌顯示出乙酰膽堿酯酶抑制活性，且11株有顯著的抑制活性，其中7株來源于葉中。承曦[25]等發(fā)現(xiàn)蛇足石杉內(nèi)生真菌xg,g8,g5發(fā)酵醇提物能夠較為顯著地抑制乙酰膽堿酯酶。根據(jù)上述學(xué)者的研究，蛇足石杉內(nèi)生真菌在植物體內(nèi)的種類豐富度分布為莖>葉>根，種類具有生物多樣性，且多數(shù)內(nèi)生真菌具有乙酰膽堿酶抑制活性，少數(shù)菌株石杉堿甲的含量與蛇足石杉植物含量很接近。但是，可能因為內(nèi)生真菌長期生活在宿主植物體，與宿主植物形成了互利共生關(guān)系，一旦脫離植物體提供的穩(wěn)定環(huán)境，其生物學(xué)特性、代謝特性等的穩(wěn)定性可能會受到影響，導(dǎo)致內(nèi)生真菌菌株在連續(xù)繼代后易出現(xiàn)菌種退化現(xiàn)象，影響石杉堿甲的積累[22]。且有關(guān)內(nèi)生真菌產(chǎn)石杉堿甲的機理尚不清楚[23]，故還未見有利用內(nèi)生真菌純發(fā)酵來工業(yè)化生產(chǎn)石杉堿甲的成功報道。

1.6蛇足石杉的分子生物學(xué)

隨著蛇足石杉活性成分藥理學(xué)研究的深入開展，該植物的藥用價值日益凸顯。因此，利用分子生物學(xué)、生物信息學(xué)、生物化學(xué)等的研究手段和技術(shù)進(jìn)行蛇足石杉活性成分生物合成機制研究具有重要的科學(xué)意義[26]。姬生國[27]等首次利用葉綠體matK基因序列對10種石杉屬植物分子系統(tǒng)關(guān)系及分子鑒定進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)小杉蘭組和蛇足石杉組植物分別聚成一枝，構(gòu)成姊妹群，其靴帶支持率分別為98%和99%。長柄石杉與蛇足石杉分別聚在2個不同進(jìn)化枝，二者間有19個堿基差異,遺傳距離為1.21%，建議應(yīng)將長柄石杉單獨列為一個種。羅紅梅[26]等在國內(nèi)外首次獲得蛇足石杉 HsCAS1 基因的編碼區(qū)序列，為進(jìn)一步研究 HsCAS1 在石杉科植物甾醇合成途徑中的功能及鑒定酶活性位點奠定了基礎(chǔ)。黃驥[28]等采用AFLP分子標(biāo)記對武陵山區(qū)蛇足石杉4個居群進(jìn)行遺傳多樣性的研究，認(rèn)為遺傳多樣性與遺傳結(jié)構(gòu)主要決定于居群歷史，較少干擾而穩(wěn)定的居群偏向克隆生殖，遺傳多樣性較低，而新建居群的遺傳多樣性則較高，克隆生長、生態(tài)位選擇、異交，以及有效的孢子風(fēng)媒傳播等可能是其維持較高遺傳多樣性水平的因素，而過度采挖等人類活動和生境片斷化是導(dǎo)致蛇足石杉瀕危的主要因素。國外，孫杰因[29]等首次報道了從原先石松屬植物中的一個CAO酶(酮氨氧化酶)的克隆和表征。相關(guān)基礎(chǔ)研究均取得了較大進(jìn)展，但石杉堿甲生物合成的分子生物學(xué)機制尚處在研究之中，石杉堿甲生物合成異源表達(dá)、相關(guān)工程菌的構(gòu)建及蛇足石杉分子生物學(xué)育種、基因調(diào)控等均還依賴相關(guān)分子生物學(xué)基礎(chǔ)研究的未來進(jìn)展。

2 產(chǎn)石杉堿甲的其他植物

已有研究發(fā)現(xiàn)，除蛇足石杉外，還有多種近緣植物如伏貼石杉(H.appressa(Desv.)L?ve et D.L?ve)、亮葉石杉(H.lucida(Michx.) Trev)、皺邊石杉(H.crispata(Ching exH. S. Kung) Ching)、四川石杉(H.sutchueniana(Herter) Ching)、金絲條馬尾杉(Phlegmariurusfargesii(Herter) Ching)、閩浙馬尾杉(P.minchegensisChing)、柳杉葉馬尾杉(P.cryptomerianus(M axim. )Ching comb. Nov)、華南馬尾杉(Phlegmariurusfordii(Baker)Ching)、藤石松(Lycopodiastrumcasuauinoides(Spring)Holub)、小接筋草(Lycopodiumselago L)等也產(chǎn)石杉堿甲。邵浩[30]等對比了蛇足石杉、皺邊石杉、亮葉石杉以及柳杉葉馬尾杉的石杉堿甲含量，發(fā)現(xiàn)柳杉葉馬尾杉中石杉堿甲含量較高，達(dá)1981.27 μg/g。王俊[31]等對蛇足石杉、皺邊石杉、四川石杉、金絲條馬尾杉、閩浙馬尾杉、柳杉葉馬尾杉6種石杉植物中石杉堿甲的含量也進(jìn)行了分析比較，發(fā)現(xiàn)也是柳杉葉馬尾杉植物中含量最高，可達(dá)1.96‰，與邵浩等的研究結(jié)果基本一致，而閩浙馬尾杉含量最低，只有十萬分之6.1。但柳杉葉馬尾杉是否可作為蛇足石杉的替代資源，其相對蛇足石杉是否存在資源優(yōu)勢等，均未見有相關(guān)的進(jìn)一步研究報道。

3 石杉堿甲

3.1提取制備

張馨[32]等以10倍量pH=1的硫酸浸提12 h，超聲30 min，酸化2次，再用NaOH堿化調(diào)pH=9，經(jīng)硅膠柱色譜法分離出石杉堿甲。查圣華[33]等采用微波輔助提取法，與傳統(tǒng)的回流提取工藝相比，大大的縮短了提取時間，并且提高了回收率。沈生榮[34]等用變換pH值法去除雜質(zhì)，用重結(jié)晶法實現(xiàn)了石杉堿甲產(chǎn)品的純化。劉建廷[35]等采用1∶10料液比浸泡10 h，酸解3次，每次45 min，酸解pH為3.0，酸解溫度為55 ℃，堿化pH為9.0，純化過程中用相當(dāng)于石杉堿甲溶液體積15%的活性炭在pH為3.0條件下除雜，最后用甲醇重結(jié)晶得到了90%以上純度的石杉堿甲。張洪超[36]等則研究開發(fā)了快且成本低的提取純化方法，即采用制備高效液相色譜儀和三氟乙酸試劑從蛇足石杉中分離和純化Hup A和Hup B，其中Hup A純化率可達(dá)99.1%。

3.2合成

A.P.Kozikowski課題組(1989年)實現(xiàn)了首例外消旋Hup A的全合成，Kozikowski(2001年)等[37]成功地通過羰基α — 位芳基化構(gòu)建了石杉堿甲橋環(huán)骨架，但此種橋環(huán)合成的途徑僅在專利中描述，未見公開文獻(xiàn)報道，因而反應(yīng)的真實性有待實踐檢驗。Yang小組(2002年)[38]報道了一種構(gòu)建石杉堿甲橋環(huán)骨架的新途徑，但該反應(yīng)的區(qū)域選擇性并不理想。Caprio小組(2006年)[39]報道了另外一種通過自由基環(huán)合構(gòu)建石杉堿甲橋環(huán)骨架的方法，但該反應(yīng)生成較多的副產(chǎn)物使該方法的實用性大大降低。隨后，Caprio小組[40]在另外一條合成途徑中優(yōu)化了這個方法，但產(chǎn)率仍然很低。Fukuyama小組(2009年)[41]報道了一種新的手性合成石杉堿甲的途徑，其關(guān)鍵步驟為酸誘導(dǎo)的烯烴離子化成環(huán)反應(yīng)構(gòu)建三碳橋環(huán)。孫炳峰和林國強小組(2012年)[42]報道了一條高效的全合成路線，其中一個關(guān)鍵反應(yīng)也是通過Heck反應(yīng)構(gòu)建三環(huán)骨架，此路線共10步合成步驟，總收率達(dá)到 17%，相對以往路線，有了很大改進(jìn)。美國 White小組(2013年)[43]報道了一條新穎的合成路線，其特色在于兩次用到環(huán)丁烷裂解反應(yīng)，但在大量制備時沒有優(yōu)勢[44]。但合成產(chǎn)物的醫(yī)學(xué)評價及其工業(yè)化生產(chǎn)應(yīng)用方面均未見相關(guān)的進(jìn)一步報道。

4 具有相同或類似活性的化合物

何煦昌[45-49]等人設(shè)計合成了有乙酰膽堿酯酶抑制活性的光學(xué)活性石杉堿甲類似物：(-) — 1 — 甲基石杉堿甲，H(±) — 失二碳石杉堿甲類似物，(±) — 8,15 — 二氫 — 去 — 11,15 — 二甲基 — 8 — 羥基石杉堿甲，(-) — 14 — 去甲基石杉堿甲，其抑制活性是石杉堿甲的1/8，這些類似物的抑制活性均小于石杉堿甲，且發(fā)現(xiàn)能與乙酰膽堿酶形成氫鍵的基團是提高其乙酰膽堿酶抑制活性的重要基團。陳凱先[50]等人用兩種方法合成了(±) — 14 — 氟石杉堿甲(6)，其乙酰膽堿酶抑制活性是石杉堿甲的1/62。

5 研究展望

石杉堿甲作為一種有潛力的治療老年癡呆藥物，其相關(guān)研究越來越被關(guān)注。然而，石杉堿甲在植物中含量有限，且與成分復(fù)雜、結(jié)構(gòu)類似的共生生物堿共存于植物體中，所以運用常規(guī)方法想獲得大量的天然石杉堿甲相當(dāng)困難，因而促使人們從多個方面研究獲取的途徑。自1985年以來，國內(nèi)外已經(jīng)提出了多種化學(xué)合成石杉堿甲的方法，但化學(xué)合成存在難以克服的局限性，很難取得純光學(xué)活性的合成物，且實驗證明石杉堿甲的手性對其生物活性至關(guān)重要，(-) — 石杉堿甲抑制乙酰膽堿酯酶活性的能力幾乎是其外消旋混合物的2倍，是(+) — 石杉堿甲的33倍[51]。所以，生物合成石杉堿甲可持續(xù)生產(chǎn)是最值得期待的生產(chǎn)途徑。已有研究結(jié)果基本證明，蛇足石杉天然資源及其再生能力非常有限，因此組織細(xì)胞培養(yǎng)、產(chǎn)石杉堿甲內(nèi)生菌篩選、產(chǎn)石杉堿甲植物資源人工快繁和栽培均是值得深入研究開發(fā)的有效途徑。而石杉堿甲生物合成機理的研究則是相關(guān)最關(guān)鍵的基礎(chǔ)，其研究進(jìn)展將關(guān)系到從分子生物學(xué)水平進(jìn)行相關(guān)調(diào)控、育種、石杉堿甲生物合成異源表達(dá)工程菌的構(gòu)建、石杉堿甲有機合成關(guān)鍵步驟生物轉(zhuǎn)化的結(jié)合等，但目前最快捷、有效的途徑仍然是如何通過各種方法實現(xiàn)蛇足石杉或其它高產(chǎn)石杉堿甲植物的快速、大量再生增殖。

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ResearchprogressinHuperziaserrataandHuperzineA

ZHA Chong1, DU Yatian1,2, LIU Jiao1

(1.Key Laboratory of Hunan Forest Products and Chemical Industry Engineering，JishouUniversity, Zhangjiajie 427000, China；2.Hunan Co-Innovation Center for Utilization of Botanical Functional Ingredients， Zhangjiajie 427000, China)

This review mainly summarized research progress inHuperziaserrataand its medicinal active components Huperzine A, and the most effective and convenient approach to solve the source of raw materials to produce Huperzine A is large-scale, efficient regeneration proliferation ofH.serrataand natural plant resources there are higher content of Huperzine A in the recent.

Huperziaserrata; Huperzine A; endophytes;synthesis

2016-01-13

查 沖(1992-)，女，陜西省西安市人，在讀碩士，研究方向為林產(chǎn)資源工程。

杜亞填(1962-)，男，湖南省龍山縣人，碩士生導(dǎo)師，副教授，研究方向為植物細(xì)胞培養(yǎng)工程。 E-mail：duyatian 6688@163.com。

R 282

A

1003 — 5710(2016)02 — 0126 — 06

10. 3969/j. issn. 1003 — 5710. 2016. 02. 024

(文字編校：楊 駿)