乙型肝炎病毒-DNA檢測(cè)在乙型肝炎中的診斷價(jià)值研究

葛曉衛(wèi)

（商丘市傳染病醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南 商丘 476100）

乙型肝炎病毒-DNA檢測(cè)在乙型肝炎中的診斷價(jià)值研究

葛曉衛(wèi)

（商丘市傳染病醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南 商丘 476100）

目的研究乙型肝炎病毒-DNA（HBV-DNA）檢測(cè)在乙型肝炎中的診斷價(jià)值。方法選擇商丘市傳染病醫(yī)院檢驗(yàn)科2014年11月-2016年11月收治的乙型肝炎患者60例為研究對(duì)象，檢測(cè)HBV血清標(biāo)志物乙型肝炎表面抗體（抗-HBs）、乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎核心抗體（抗-HBc）、乙型肝炎e抗體（抗-HBe）、乙型肝炎e抗原（HBeAg）分為五組，測(cè)定五組患者HBV-DNA水平及陽(yáng)性率。結(jié)果依HBV血清標(biāo)志物檢測(cè)結(jié)果可將研究對(duì)象分Ⅰ組18例（30.00%）、Ⅱ組26例（43.33%）、Ⅲ組8例（13.33%）、Ⅳ組6例（10.00%）、Ⅴ組2例（3.33%），Ⅱ組人數(shù)多于其余4組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；Ⅰ組患者HBV-DNA水平高于其他各組；其陽(yáng)性率明顯高于其他4組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論乙型肝炎病毒-DNA檢測(cè)輔以HBV血清標(biāo)志物檢測(cè)可提高乙型肝炎早期診斷的準(zhǔn)確率和靈敏度。

乙型肝炎；HBV-DNA；診斷價(jià)值

乙型肝炎屬臨床慢性傳染性疾病的一種，我國(guó)發(fā)病率居全球首位[1]。研究表明，乙型肝炎由機(jī)體感染HBV引發(fā)，根治較為困難，而其所致的肝硬化、肝衰竭等致死率極高[2]。因此，早期診斷從而給予積極干預(yù)措施在改善乙型肝炎患者預(yù)后、減輕家庭及社會(huì)壓力中具有重要意義[3]。本研究對(duì)定量檢測(cè)60例乙型肝炎患者的血清HBV-DNA水平，旨在為乙型肝炎的診斷提供臨床依據(jù)。具體信息如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇商丘市傳染病醫(yī)院檢驗(yàn)科2014年11月～2016年11月收治的乙型肝炎患者60例為研究對(duì)象，其中男36例，女24例；年齡17～76歲，平均（34.17±6.52）歲；病程3d～6年，平均（3.69±0.24）年。

1.2 方法

患者60例均于凌晨取空腹靜脈血6mL，經(jīng)離心處理后分為2管，3mL/管；采用ELISA法檢測(cè)HBV血清標(biāo)志物抗-HBs、HBsAg、抗-HBc、抗-HBe、HBeAg；HBV-DNA采用Option DNA Engine型PCR擴(kuò)增儀（美國(guó)MJ公司）以熒光定量法測(cè)定。相關(guān)試劑盒分別由中山生物有限公司、上?？迫A生物科技有限公司提供，所有操作嚴(yán)格依照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.3 評(píng)價(jià)指標(biāo)

依HBV血清標(biāo)志物檢測(cè)結(jié)果分為Ⅰ組（HBsAg、HBeAg、抗-HBc陽(yáng)性）；Ⅱ組（HBsAg、抗-HBc、抗-HBe陽(yáng)性）；Ⅲ組（抗-HBs、抗-HBc、抗-HBe陽(yáng)性）；Ⅳ組（HBsAg、抗-HBc陽(yáng)性）；Ⅴ組（抗-HBs陽(yáng)性），未有提及指標(biāo)則為陰性。以HBV-DNA＞500copy/mL為陽(yáng)性，≤500copy/mL則為陰性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，以例數(shù)（n）表示，計(jì)數(shù)資料以百分?jǐn)?shù)（%）表示，行x2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 血清標(biāo)志物

依HBV血清標(biāo)志物檢測(cè)結(jié)果可將研究對(duì)象分為5組，其中Ⅰ組18例（30.00%）、Ⅱ組26例（43.33%）、Ⅲ組8例（13.33%）、Ⅳ組6例（10.00%）、Ⅴ組2例（3.33%）。其中Ⅱ組人數(shù)多于其余4組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

2.2 HBV-DNA

Ⅰ組患者HBV-DNA水平高于其他各組；其陽(yáng)性率高達(dá)100%，明顯高于其他4組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1 HBV-DNA定量檢測(cè)結(jié)果

3 討 論

機(jī)體受肝炎病毒入侵后，可見(jiàn)肝細(xì)胞嚴(yán)重受損，目前我國(guó)HBV感染人口約為2億，對(duì)患者個(gè)人、家庭及社會(huì)均造成了嚴(yán)重的醫(yī)療衛(wèi)生負(fù)擔(dān)。研究表明，HBV早期感染患者并無(wú)典型臨床癥狀，多數(shù)患者初次就診即可見(jiàn)并發(fā)癥的發(fā)生，臨床治療難度大，患者預(yù)后較差[4]。

HBV-DNA無(wú)蛋白質(zhì)包裹，是HBV的遺傳信息所在，也是病毒復(fù)制、增殖的基本條件，能夠單獨(dú)完成對(duì)宿主的侵襲，侵襲完成后宿主體內(nèi)短期內(nèi)即可見(jiàn)完整的HBV顆粒。HBV-DNA檢測(cè)的目的主要在于對(duì)患者病毒載量進(jìn)行判定，是抗病毒用藥治療效果的重要指征之一，也可用于乙型肝炎的轉(zhuǎn)歸判斷[5-6]。本研究中，通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR對(duì)HBV-DNA進(jìn)行檢測(cè)，采取了閉管方式進(jìn)行擴(kuò)增和檢測(cè)，是臨床基因診斷的重要手段，可一定程度上避免以往PCR的污染問(wèn)題，檢測(cè)可信度更高。此外，熒光探針還可準(zhǔn)確定量檢測(cè)HBV水平，在一定程度上增強(qiáng)PCR檢測(cè)的特異性，定量范圍廣；實(shí)際操作過(guò)程中定量范圍極廣，陽(yáng)性梯度具有可設(shè)性。ELISA則是HBV感染臨床傳統(tǒng)檢測(cè)方法，與熒光定量PCR相比，其以人體對(duì)HBV的免疫反應(yīng)狀態(tài)為研究對(duì)象，屬于間接病毒感染檢測(cè)手段。本研究結(jié)果顯示，“小三陽(yáng)（HBsAg、抗-HBc、抗-HBe陽(yáng)性）”、“大三陽(yáng)（HBsAg、HBeAg、抗-HBc陽(yáng)性）”患者所占比例分別居于第一、二位，占比可達(dá)43.33%、30.00%，高于其他三組，提示目前乙型肝炎的患病率較高，但臨床檢查率不夠滿意；熒光定量PCR檢測(cè)顯示“大三陽(yáng)”患者HBV-DNA平均水平為5.09×107copy/mL，陽(yáng)性率為100%，明顯高于其余四組，表明HBV-DNA定量檢測(cè)可用于ELISA檢測(cè)的輔助手段，能夠較高反映HBV機(jī)體載量，從而為臨床治療及預(yù)后提供依據(jù)。

綜上所述，單一ELISA在乙型肝炎診斷中存在一定局限性，HBV-DNA定量檢測(cè)可在一定程度上改善乙型肝炎早期診斷的準(zhǔn)確率和靈敏度，臨床干預(yù)后檢測(cè)有助于療效及預(yù)后的判斷，值得臨床推廣應(yīng)用。

[1] 鄭 徽,王富珍,張國(guó)民,等.2011-2013年全國(guó)傳染病報(bào)告信息管理系統(tǒng)中乙型肝炎病例重復(fù)報(bào)告現(xiàn)狀分析[J].中華流行病學(xué)雜志,2016,37(09):1248-1252.

[2] 李振挺,李 芹,林 恢,等.FibroScan與慢性乙型肝炎肝組織炎癥及纖維化程度的相關(guān)性研究[J].中西醫(yī)結(jié)合肝病雜志,2016,26(05):270-271,274.

[3] 張 旭,王 煜,馬 娟,等.5種無(wú)創(chuàng)診斷技術(shù)單獨(dú)及聯(lián)合應(yīng)用對(duì)慢性乙型肝炎肝纖維化的診斷價(jià)值比較[J].臨床肝膽病雜志,2016,32(10):1888-1893.

[4] 陳華國(guó),莊育剛,周書(shū)琴,等.六項(xiàng)指標(biāo)的積分：早期診斷慢性乙型肝炎引起的慢加急性肝衰竭[J].中國(guó)基層醫(yī)藥,2015,22(17):2628-2631.

[5] 李向永,尤 旭,吳元?jiǎng)P,等.慢性HBV感染者經(jīng)長(zhǎng)期核苷(酸)類似物治療獲HBsAg陰轉(zhuǎn)停藥后的療效[J].中山大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)科學(xué)版),2016,37(03):408-412.

[6] 黃 金,尹春煜,諶翠容,等.Peg-IFNα序貫聯(lián)合NUCs治療高病毒載量e抗原陽(yáng)性乙型肝炎療效觀察[J].浙江臨床醫(yī)學(xué),2016,18(10):1817-1819.

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ISSN.2095-8803.2016.12.033.02