人源性卵巢癌異體移植模型的研究進(jìn)展

吳建發(fā)，易曉芳

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人源性卵巢癌異體移植模型的研究進(jìn)展

吳建發(fā)，易曉芳△

【摘要】卵巢癌是致死率最高的女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤，至今其復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移機(jī)制不明，預(yù)后未獲改善。構(gòu)建理想的臨床前模型有助于開展腫瘤復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移相關(guān)機(jī)制的研究。人源性異體移植模型的出現(xiàn)，提供了一種高保真性的研究用臨床前模型，目前已初步應(yīng)用于乳腺癌、肺癌、結(jié)腸癌等相關(guān)研究，取得了良好實(shí)驗(yàn)結(jié)果。在卵巢癌方面，該模型的研究剛剛起步。通過對(duì)已有文獻(xiàn)的檢索發(fā)現(xiàn)，該模型可以較好地復(fù)制原發(fā)腫瘤的生物學(xué)特點(diǎn)，保留原發(fā)腫瘤的異質(zhì)性。但是，在應(yīng)用中仍存在一定問題亟需解決，如成瘤率不一致、組織來源有限以及缺乏有效的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)等問題。現(xiàn)就其研究及應(yīng)用現(xiàn)狀作一綜述。

【關(guān)鍵詞】卵巢腫瘤；模型，動(dòng)物；動(dòng)物實(shí)驗(yàn)；腫瘤移植；移植，異種

作者單位：200011上海，復(fù)旦大學(xué)附屬婦產(chǎn)科醫(yī)院

△審校者

（J Int Obstet Gynecol，2016，43：140-144）

卵巢癌是女性生殖器官最常見的惡性腫瘤之一，病死率居高不下。盡管隨著高通量基因檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展，腫瘤的治療進(jìn)入了新的生物治療的階段，各種靶向治療的藥物層出不窮，如針對(duì)表皮生長(zhǎng)因子受體（EGFR）酪氨酸激酶的拉帕替尼，針對(duì)Bcr-Abl融合蛋白、SRC激酶家族，以及酪氨酸蛋白激酶（c-KIT）和血小板衍生生長(zhǎng)因子受體β（PDGFRβ）等多種激酶的伊馬替尼和達(dá)沙替尼，針對(duì)RAF及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2（VEGFR-2）、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子3（VEGF-3）、血小板衍生生長(zhǎng)因子β（PDGF-β）等多種生長(zhǎng)因子的索拉非尼，針對(duì)哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）的坦西莫斯，針對(duì)蛋白激酶C（PKC）的Enzastaurin等，但是相關(guān)靶向藥物的Ⅱ期臨床試驗(yàn)并沒有取得預(yù)期效果［1］。分析原因，一方面，與腫瘤的異質(zhì)性有關(guān)。研究表明，在高級(jí)別漿液性卵巢癌中有超過30種生長(zhǎng)相關(guān)基因的過表達(dá)，因而針對(duì)單一或幾種生長(zhǎng)因子的靶向治療藥物難免效果不佳。另一方面，與缺乏理想的研究模型有關(guān)［2］。近年來，人源性異體移植（patient derived xenograft，PDX）構(gòu)建的腫瘤模型，通過應(yīng)用新鮮的人腫瘤組織或細(xì)胞進(jìn)行異體移植，可以極大程度上保留原腫瘤細(xì)胞的組織學(xué)及分子細(xì)胞學(xué)特征，PDX的出現(xiàn)開創(chuàng)了人類腫瘤研究的新時(shí)代。

1　PDX模型的發(fā)展史

PDX模型經(jīng)歷了非人源性腫瘤細(xì)胞異體移植、人源性腫瘤細(xì)胞異體移植，到PDX的演變歷程。五十多年前，為研究白血病的免疫反應(yīng)問題，Adams［3］通過將AKR小鼠的白血病細(xì)胞移植到倉鼠頰囊內(nèi)構(gòu)建了第一個(gè)非人源性腫瘤細(xì)胞異體移植模型。隨著研究技術(shù)的不斷成熟，1966年Goldenberg等［4］通過將人的結(jié)腸癌細(xì)胞GW-39肌內(nèi)注射到倉鼠后肢，成功地構(gòu)建了第1個(gè)異體移植模型，促進(jìn)了異體移植模型研究的發(fā)展。但是由于用于異體移植的細(xì)胞系通常經(jīng)過長(zhǎng)時(shí)間的體外培養(yǎng)，已經(jīng)喪失了腫瘤的異質(zhì)性及原始腫瘤的某些特性，在組織病理學(xué)及分子遺傳學(xué)方面缺乏代表性，從而降低了其在轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)中的作用。Domcke等［5］通過對(duì)目前研究中常用的47個(gè)卵巢癌細(xì)胞系的分子圖譜進(jìn)行比對(duì)發(fā)現(xiàn)，大部分卵巢癌細(xì)胞系在基因拷貝數(shù)、基因突變及mRNA的表達(dá)圖譜上與原發(fā)腫瘤有很大差別，因此，基于細(xì)胞系的異體移植模型并不能很好地代表原發(fā)腫瘤的特點(diǎn)。

1980年Shorthouse等［6］通過將人支氣管腫瘤移植到免疫抑制的小鼠皮下，形成了第1個(gè)人源性異體腫瘤移植模型。該模型克服了細(xì)胞系異體移植模型的缺點(diǎn)，可以更好地復(fù)制原始腫瘤細(xì)胞的組織病理學(xué)及分子細(xì)胞學(xué)特征。PDX模型的建立，是通過直接從患者的手術(shù)標(biāo)本中獲取組織，經(jīng)過人工切割的方法形成小的組織塊，或通過直接獲取脫落細(xì)胞，再通過外科手術(shù)或注射的方法移植到免疫缺陷動(dòng)物的體內(nèi)。由于移植組織內(nèi)腫瘤細(xì)胞并非孤立存在，間質(zhì)連接并未割裂，可以形成一個(gè)與原始腫瘤細(xì)胞在形態(tài)上高度相似的新的腫瘤［7］，且具有跟原發(fā)腫瘤一致的生物學(xué)特點(diǎn)、基因異質(zhì)性及藥物反應(yīng)性［8-9］。近年來該模型已廣泛應(yīng)用于各種腫瘤的研究，如胰腺癌、乳腺癌、神經(jīng)管細(xì)胞瘤、宮頸癌以及肺癌等［10-14］，其研究?jī)?nèi)容涉及原發(fā)瘤與轉(zhuǎn)移瘤特性比較［15-16］，以及腫瘤的耐藥性等［17-18］。研究發(fā)現(xiàn)PDX模型成瘤率較高（41.7%～52.3%），并且經(jīng)過多達(dá)11代的傳代后仍能保持跟原發(fā)瘤一致的基因、蛋白表型及組織病理特點(diǎn)。PDX模型提供了一個(gè)研究腫瘤發(fā)生、腫瘤轉(zhuǎn)移及腫瘤耐藥的工具，有利于尋找新的藥物作用靶點(diǎn)，開發(fā)新的靶向治療藥物。

2　卵巢癌PDX模型的應(yīng)用現(xiàn)狀

傳統(tǒng)的卵巢癌研究模型，如細(xì)胞系模型及異體移植模型，極少具有乳腺癌易感基因（BRCA）1/2等突變，不能很好地反映原發(fā)腫瘤的異質(zhì)性，不能精確反映卵巢癌，尤其是高危型卵巢癌的特征［19］。而自發(fā)性卵巢癌動(dòng)物模型，雖然可以一定程度上復(fù)制腫瘤的異質(zhì)性，但由于培養(yǎng)周期長(zhǎng)，不適宜大規(guī)模生產(chǎn)。至于轉(zhuǎn)基因卵巢癌模型，雖然可以較好地模擬人類腫瘤的發(fā)生、發(fā)展特點(diǎn)，但建立所需技術(shù)高，性價(jià)比低，且仍然不能很好地復(fù)制腫瘤的異質(zhì)性。

卵巢癌PDX模型，作為近些年出現(xiàn)的一種新型的卵巢癌研究模型，Dobbin等［20］研究發(fā)現(xiàn)，無論是在病理形態(tài)上，還是對(duì)藥物的反應(yīng)上，甚至癌基因的表達(dá)上，均可以較好地復(fù)制卵巢癌的特點(diǎn)。其中在癌基因的表達(dá)上，作者通過對(duì)84個(gè)經(jīng)典的癌相關(guān)基因進(jìn)行基于基因芯片的比較基因組檢測(cè)（cGCH），發(fā)現(xiàn)在6對(duì)原發(fā)腫瘤與PDX模型中，一致性基因有79個(gè)，一致性較高（R2=0.744 1），且不同的接種部位間仍具有高度的一致性（R2=0.889 5）。不一致的5個(gè)基因主要包括VEGFR1/2/3及PDGFRA/B，因其啟動(dòng)子為人特異性的，故表達(dá)下調(diào)。Ricci等［21］進(jìn)一步通過對(duì)34個(gè)卵巢癌PDX樣本及其對(duì)應(yīng)的23個(gè)原發(fā)腫瘤進(jìn)行癌相關(guān)基因檢測(cè)，分析PDX模型中系列基因如AT豐富結(jié)合域1A基因（ARID1A）、B-raf原癌基因絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶基因（BRAF）、β連環(huán)蛋白基因（CTNNB1）、Kirsten大鼠肉瘤致死性癌基因同源物（KRAS）、磷脂酰肌醇3激酶催化亞單位α （PI3KCA）、蛋白磷酸酶2調(diào)節(jié)亞單位α（PPP2R1A）及TP53等的突變情況，結(jié)果提示突變一致性達(dá)78%（18/23）。此外，作者通過9個(gè)原發(fā)腫瘤樣本及其對(duì)應(yīng)的29個(gè)PDX樣本（1～13代）進(jìn)行全基因組檢測(cè)，結(jié)果在50 599個(gè)檢測(cè)基因中，不同表達(dá)基因1 042個(gè)，Pearson相關(guān)系數(shù)0.84～0.99。進(jìn)一步癌基因拷貝數(shù)結(jié)果提示c-Met，c-Myc，PI3Kα，磷酸酶張力蛋白同源物（PTEN），成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1（FGFR1），erb-b2受體酪氨酸激酶2（ERBB2），視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤基因1（RB1）及Ⅰ型神經(jīng)纖維瘤病基因（NF1）等與原發(fā)腫瘤相比略有升高，具有較高的一致性，進(jìn)一步驗(yàn)證了卵巢癌PDX模型可以較好地保留原發(fā)腫瘤的生物學(xué)特性，復(fù)制原發(fā)腫瘤的異質(zhì)性。并且建立的PDX模型可以通過不斷傳代進(jìn)行保存和擴(kuò)增標(biāo)本，多項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，通過PDX進(jìn)行傳代的腫瘤細(xì)胞，雖然某些基因的表達(dá)可能減少，但是在病理形態(tài)、腫瘤結(jié)構(gòu)以及藥物反應(yīng)上仍可較好地復(fù)制原發(fā)腫瘤的特點(diǎn)。

近年來，PDX模型逐漸應(yīng)用于腫瘤的藥物治療［9］、腫瘤的耐藥［22］及卵巢腫瘤的起源［23］等方面研究，并取得了初步成果。其中，藥物研究方面，相關(guān)報(bào)道較多，一項(xiàng)關(guān)于ADP核糖聚合酶（PARP）抑制劑的研究發(fā)現(xiàn)，相對(duì)于細(xì)胞系，通過PDX模型可以較好地復(fù)制原發(fā)腫瘤的基因突變特點(diǎn)（如BRCA2突變），模擬腫瘤的發(fā)生環(huán)境，是藥物篩選的理想模型［24］。腫瘤耐藥研究方面，目前已有學(xué)者成功構(gòu)建了卵巢癌的耐藥PDX模型。耐藥PDX模型的構(gòu)建方法目前報(bào)道的主要有兩種：一是通過臨床上切除的耐藥的腫瘤細(xì)胞異體移植構(gòu)建，另一種是通過體內(nèi)誘導(dǎo)的方式。前者的構(gòu)建過程與一般的PDX模型的構(gòu)建過程相同，構(gòu)建后進(jìn)行耐藥性評(píng)價(jià)。Ricci等［21］通過不同組織亞型的標(biāo)本構(gòu)建提示成功率為5.07%（7/138），構(gòu)建周期1～15個(gè)月。后者主要通過一定濃度梯度的化療藥物不斷進(jìn)行誘導(dǎo)，對(duì)誘導(dǎo)后復(fù)發(fā)的腫瘤細(xì)胞再次取材構(gòu)建PDX模型，進(jìn)行更高濃度的同種化療藥物的誘導(dǎo)過程，經(jīng)過反復(fù)5次誘導(dǎo)，從而形成耐藥細(xì)胞［22］。目前兩種方法構(gòu)建成功率均不高，但是耐藥的PDX模型成功構(gòu)建，為研究腫瘤耐藥提供了一個(gè)有力的平臺(tái)。腫瘤的起源方面，利用PDX模型的高保真性，Stewart等［23］構(gòu)建了皮下、乳房脂肪墊下、腹腔、卵巢包膜下等不同部位的卵巢癌PDX模型，研究發(fā)現(xiàn)所有的卵巢癌原發(fā)腫瘤及轉(zhuǎn)移腫瘤中均有腫瘤起始細(xì)胞（tumor-initiating cells，TICs），TICs在腫瘤中比例平均1/40 000（1/1 400～1/911 000），腹水細(xì)胞中相對(duì)較高，平均1/10 000（1/700～1/118 000），兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。此外，不同的宿主之間TICs比例不同，相對(duì)于非肥胖糖尿病重度聯(lián)合免疫缺陷（NOD/SCID）小鼠，非肥胖糖尿病重度聯(lián)合免疫缺陷聯(lián)合白細(xì)胞介素2重鏈γ缺失（NOD/ SCID/IL2Rγnull）小鼠TICs比例更高。此外，通過單因素及多因素分析發(fā)現(xiàn)，TICs的多少與患者的年齡、腫瘤分期、手術(shù)情況、無進(jìn)展生存期及總生存期等無關(guān)，原發(fā)腫瘤及復(fù)發(fā)腫瘤間TICs比例差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。該研究提示卵巢癌PDX模型可以作為一個(gè)腫瘤干細(xì)胞研究模型，但是因?yàn)椴⒉皇撬械腡ICs均呈現(xiàn)CD133陽性，且在傳代過程中，CD133可能發(fā)生變化，應(yīng)用過程中對(duì)結(jié)果的分析需進(jìn)行綜合考慮。此外，也有學(xué)者通過治療前后乙醛脫氫酶基因超家族成員ALDH1A1、CD133、CD44等TICs標(biāo)記物檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，卵巢癌化療可以增加TICs密度，導(dǎo)致處于休眠狀態(tài)的細(xì)胞增多，從而導(dǎo)致腫瘤耐藥［22］。

3　卵巢癌PDX模型的現(xiàn)存問題

雖然目前卵巢癌PDX模型取得了較大的進(jìn)展，但仍面臨許多問題。

首先，關(guān)于卵巢癌PDX模型成瘤率，目前各項(xiàng)研究結(jié)果差別較大（25%～100%）［21-22］。卵巢癌PDX模型的成瘤率與多種因素有關(guān)，如原發(fā)腫瘤的組織類型、病理分期、取材部位、移植部位、移植方法、取材方法及宿主的選擇等。目前用于卵巢癌PDX模型的原發(fā)腫瘤包括漿液性卵巢癌、黏液性卵巢癌、透明細(xì)胞癌、內(nèi)膜樣卵巢癌、未分化卵巢癌等所有上皮性卵巢癌類型，其中以漿液性卵巢癌多見。大部分研究認(rèn)為，不同的組織病理亞型、分子表型及細(xì)胞分化程度對(duì)建模成功率有明顯影響，例如：中、低級(jí)別的卵巢上皮性癌進(jìn)行皮下移植或腹膜下移植成功率低，而高級(jí)別卵巢上皮性癌相對(duì)成功率高［7］。但是也有學(xué)者認(rèn)為，PDX模型的成瘤率與原發(fā)腫瘤的組織類型無關(guān)，與腫瘤的播散情況也不相關(guān)［21］。而從取材部位看，目前的卵巢癌PDX模型有的來源于卵巢表面的腫瘤組織，有的來源于腹水中的腫瘤細(xì)胞，還有的來源于腹膜或網(wǎng)膜上的轉(zhuǎn)移腫瘤組織［20］。不同的取材部位，PDX模型的建模成功率不同［7，25］。有學(xué)者認(rèn)為，腹膜或網(wǎng)膜上血管豐富，位于該處的轉(zhuǎn)移瘤壞死組織少，更具有侵蝕性，且由于網(wǎng)膜或腹膜局部的微環(huán)境有促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)的特性，原位移植后更適合腫瘤生長(zhǎng)［26］，更適合用來建立PDX模型［19］。而從移植部位看，目前關(guān)于各種方法的建模成功率，臨床上報(bào)道差別較大。一項(xiàng)涉及41例漿液性卵巢癌患者的研究發(fā)現(xiàn)，乳房脂肪墊下移植、腎包膜下移植、腹腔移植與卵巢移植相比，建模成功率分別為95%、73%、100% 和83%，乳房脂肪墊下移植及腹腔移植的成功率高于其他兩者［23］。而另一項(xiàng)涉及到34例漿液性卵巢癌患者的研究則提示，皮下移植成功率最高（85.3%），其次是乳房脂肪墊下移植（63.64%），而腹腔移植僅有22.2%，腎包膜下移植更低（8.3%）［20］。但腹膜內(nèi)移植及卵巢移植，由于能很好地模擬原發(fā)腫瘤的微環(huán)境，更能代表原發(fā)腫瘤的生物學(xué)特性。此外，從移植方法看，目前主要包括顯微注射與手術(shù)縫合兩種建模方法。Dobbin等［20］認(rèn)為，建模成功率主要與移植的部位有關(guān)，而與移植的手術(shù)方式無關(guān)。關(guān)于移植物大小與建模成功率的關(guān)系，有學(xué)者發(fā)現(xiàn)小于106個(gè)移植細(xì)胞成瘤率低，甚至不成瘤［23］。目前研究中一般依據(jù)移植的部位采用不同大小的移植物，如卵巢移植需1 mm3組織塊或1×106個(gè)細(xì)胞，腹膜內(nèi)移植需5 mm2組織塊或10×106～20×106個(gè)細(xì)胞，腎包膜下移植需3mm2組織塊或1×106個(gè)細(xì)胞［20］。從宿主選擇看，目前裸鼠、重度聯(lián)合免疫缺陷（severecombinedimmunedeficency，SCID）小鼠、NOD/SCID小鼠以及NOD/SCID/IL2Rγnull小鼠均有應(yīng)用，但以后兩者為主，研究發(fā)現(xiàn)隨著宿主免疫功能缺陷的加重，PDX模型的成瘤率有增加趨勢(shì)［27］，有學(xué)者報(bào)道使用NOD/SCID/IL2Rγnull小鼠成瘤率可達(dá)95%～100%［28］。

其次，卵巢癌PDX模型建立具有高代價(jià)性，需要臨床醫(yī)生、病理醫(yī)生、研究人員通力合作，從組織標(biāo)本的獲取、處理、宿主的選擇及預(yù)處理，到組織標(biāo)本的異體移植、宿主的監(jiān)測(cè)管理，再到異體移植腫瘤的評(píng)估、收獲、傳代，以及進(jìn)一步的基因、分子分析或藥物試驗(yàn)，是一項(xiàng)龐大的工程，各個(gè)研究機(jī)構(gòu)的構(gòu)建方法并不相同，缺乏統(tǒng)一的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)和相關(guān)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)［20-21，23］。

再次，PDX模型的組織來源有限，且具有滯后性。相對(duì)于其他方法的模型建立，如病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)基因腫瘤模型需8周左右［29］，條件控制的轉(zhuǎn)基因卵巢癌模型的建立僅需7周，PDX模型的建立周期更長(zhǎng)［30］，從組織取材到異位瘤體生長(zhǎng)成熟，平均需要2～6個(gè)月時(shí)間，而進(jìn)一步的基因分子檢測(cè)及藥物反應(yīng)分析需要更長(zhǎng)的時(shí)間，因而很大程度上造成了PDX模型的滯后性。

第四，由于宿主免疫功能的缺乏，無法應(yīng)用PDX模型進(jìn)行腫瘤發(fā)生、發(fā)展的免疫機(jī)制研究，或開發(fā)免疫調(diào)節(jié)相關(guān)藥物［31-32］。最近，雖然有學(xué)者提出可以通過移植人的CD34+臍血干細(xì)胞在小鼠體內(nèi)重建人的免疫系統(tǒng)解決這一問題，但需行組織相容性檢查，技術(shù)要求高，其有效性及可行性尚需進(jìn)一步驗(yàn)證。

第五，人源性腫瘤間質(zhì)的丟失問題。Hylander等［33］研究發(fā)現(xiàn)，異位生長(zhǎng)的瘤體組織在移植后3～9周開始出現(xiàn)人源性間質(zhì)及血管的丟失，到15～25周時(shí)已經(jīng)完全由鼠源性的間質(zhì)及血管代替。雖然近期有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，通過使用未經(jīng)處理的腫瘤組織塊或應(yīng)用NOD-SCID IL2Rγnull小鼠作為宿主進(jìn)行移植，可以在一定程度上保留人源性的組織間質(zhì)［34］，但這一方法的可靠性尚需進(jìn)一步驗(yàn)證。因此，在應(yīng)用卵巢癌PDX模型進(jìn)行針對(duì)腫瘤間質(zhì)的靶向藥物評(píng)估時(shí)，必須慎重。

最后，目前卵巢癌PDX模型研究中尚存在其他一些問題。如：缺乏對(duì)PDX模型的組織亞型、分子表型的注釋；缺乏與腫瘤個(gè)性化治療相關(guān)的數(shù)據(jù)資料等。

4　展望

雖然卵巢癌PDX模型目前仍存在許多不足，但其提供了一個(gè)易于操作的平臺(tái)，可用于腫瘤的分子表達(dá)譜分析，進(jìn)而尋找潛在的特異性的腫瘤靶向標(biāo)記物；也可作為一個(gè)藥物篩選的平臺(tái)，為人體實(shí)驗(yàn)提供安全證據(jù)［2］。此外，還可以對(duì)PDX模型的生物學(xué)特性及人原發(fā)腫瘤的預(yù)后進(jìn)行相關(guān)性研究，一方面可以作為一個(gè)卵巢癌預(yù)后評(píng)估的工具，另一方面可以幫助細(xì)化卵巢癌的分子分期，以便為卵巢癌的臨床治療提供依據(jù)。

卵巢癌PDX模型可以作為轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)的一個(gè)工具，架起腫瘤基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床醫(yī)學(xué)之間的橋梁。未來，我們可以通過建立規(guī)范化的操作流程，不斷優(yōu)化PDX模型的建模、保存及傳代過程，構(gòu)建卵巢癌PDX庫，實(shí)現(xiàn)卵巢癌的個(gè)性化治療。并且我們可以通過進(jìn)一步聯(lián)合轉(zhuǎn)基因技術(shù)，通過Cre/LoxP系統(tǒng)等實(shí)現(xiàn)卵巢癌PDX模型表達(dá)的時(shí)間與空間特異性，實(shí)現(xiàn)腫瘤的可控性表達(dá)，通過免疫熒光技術(shù)實(shí)現(xiàn)卵巢癌特定基因表達(dá)的可視性，從而更好地為卵巢癌的研究和治療服務(wù)。

參考文獻(xiàn)

［1］Siwak DR，C arey M，Hennessy BT，et al. Targeting the epidermal growth factor receptor in epithelial ovarian cancer：current knowledge and future challenges［J］. J Oncol，2010，2010：568938.

［2］Tentler JJ，Tan AC，Weekes CD，et al. Patient -derived tumour xenografts as models for oncology drug development［J］. Nat Rev Clin Oncol，2012，9（6）：338-350.

［3］Adams RA. Heightened immunity and susceptibility toward cheek pouch heterografts of a mouse leukemia in syrian hamsters［J］. Cancer Res，1963，23：1834-1840.

［4］Goldenberg DM，Witte S，Elster K. GW -39：a new human tumor seriallytransplantableinthegoldenhamster［J］.Transplantation，1966，4（6）：760-763.

［5］Domcke S，Sinha R，Levine DA，et al. Evaluating cell lines as tumour models by comparison of genomic profiles［J］. Nat Commun，2013，4：2126.

［6］Shorthouse AJ，Peckham MJ，Smyth JF，et al. The therapeutic response of bronchial carcinoma xenografts：a direct patient -xenograft comparison［J］. Br J Cancer Suppl，1980，4：142-145.

［7］Weroha SJ，Becker MA，Enderica-Gonzalez S，et al. Tumorgrafts as in vivo surrogates for women with ovarian cancer［J］. Clin Cancer Res，2014，20（5）：1288-1297.

［8］Scott CL，Becker MA，Haluska P，et al. Patient -derived xenograft models to improve targeted therapy in epithelial ovarian cancer treatment［J］. Front Oncol，2013，3：295.

［9］Topp MD，Hartley L，Cook M，et al. Molecular correlates of platinum response in human high-grade serous ovarian cancer patient-derived xenografts［J］. Mol Oncol，2014，8（3）：656-668.

［10］Giuliano M，Herrera S，Christiny P，et al. Circulating and disseminated tumor cells from breast cancer patient-derived xenograft -bearing mice as a novel model to study metastasis［J］. Breast Cancer Res，2015，17：3.

［11］Amendt C，Staub E，F(xiàn)riese-Hamim M，et al. Association of EGFRexpression level and cetuximab activity in patient-derived xenograft models of human non-small cell lung cancer［J］. Clin Cancer Res，2014，20（17）：4478-4487.

［12］Walters DM，Stokes JB，Adair SJ，et al. Clinical，molecular and genetic validation of a murine orthotopic xenograft model of pancreatic adenocarcinoma using fresh human specimens［J］. PLoS One，2013，8（10）：e77065.

［13］Zhao X，Liu Z，Yu L，et al. Global gene expression profiling confirms the molecular fidelity of primary tumor-based orthotopic xenograft mouse models of medulloblastoma［J］. Neurol Oncol，2012，14（5）：574-583.

［14］王康，王長(zhǎng)奇，巫文勛，等. HPV16陽性人宮頸鱗狀細(xì)胞癌裸鼠動(dòng)物模型的建立［J］.中華勞動(dòng)衛(wèi)生職業(yè)病雜志，2014，32（6）：441-443.

［15］Pan W，Huang S，Zhang J，et al. Heterogeneity -related anticancer therapy response differences in metastatic colon carcinoma：new hints to tumor-site-based personalized cancer therapy［J］. Hepatogastroenterology，2013，60（128）：1927-1934.

［16］Kabos P，F(xiàn)inlay -Schultz J，Li C，et al. Patient -derived luminal breast cancer xenografts retain hormone receptor heterogeneity and help define unique estrogen-dependent gene signatures［J］. Breast Cancer Res Treat，2012，135（2）：415-432.

［17］Yang M，Shan B，Li Q，et al. Overcoming erlotinib resistance with tailored treatment regimen in patient-derived xenografts from na?ve Asian NSCLC patients［J］. Int J Cancer，2013，132（2）：E74-E84.

［18］Kim MP，Truty MJ，Choi W，et al. Molecular profiling of direct xenograft tumors established from human pancreatic adenocarcinoma after neoadjuvant therapy［J］. Ann Surg Oncol，2012，19（Suppl 3）：S395-S403.

［19］Stordal B，Timms K，F(xiàn)arrelly A，et al. BRCA1/2 mutation analysis in 41 ovarian cell lines reveals only one function - ally deleterious BRCA1 mutation［J］. Mol Oncol，2013，7（3）：567-579.

［20］Dobbin ZC，Katre AA，Steg AD，et al. Using heterogeneity of the patient -derived xenograft model to identify the chemoresistant population in ovarian cancer［J］. Oncotarget，2014，5（18）：8750-8764.

［21］Ricci F，Bizzaro F，Cesca M，et al. Patient -derived ovarian tumor xenografts recapitulate human clinicopathology and genetic alterations［J］. Cancer Res，2014，74（23）：6980-6990.

［22］Vidal A，Mu?oz C，Guillén MJ，et al. Lurbinectedin（PM01183），a new DNA minor groove binder，inhibits growth of orthotopic primary graft of cisplatin-resistant epithelial ovarian cancer［J］. Clin Cancer Res，2012，18（19）：5399-5411.

［23］Stewart JM，Shaw PA，Gedye C，et al. Phenotypic heterogeneity and instability of human ovarian tumor-initiating cells［J］. Proc Natl Acad Sci U S A，2011，108（16）：6468-7643.

［24］Shah MM，Dobbin ZC，Nowsheen S，et al. An ex vivo assay of XRT-induced Rad51 foci formation predicts response to PARP-inhibition in ovarian cancer［J］. Gynecol Oncol，2014，134（2）：331-337.

［25］Siolas D，Hannon GJ. Patient-derived tumor xenografts：transforming clinical samples into mouse models［J］. Cancer Res，2013，73（17）：5315-5319.

［26］Nieman KM，Kenny HA，Penicka CV，et al. Adipocytes promote ovarian cancer metastasis and provide energy for rapid tumor growth ［J］. Nat Med，2011，17（11）：1498-1503.

［27］Groeneweg JW，DiGloria CM，Yuan J，et al. Inhibition of notch signaling in combination with Paclitaxel reduces platinum-resistant ovarian tumor growth［J］. Front Oncol，2014，4：171.

［28］Shultz LD，Lyons BL，Burzenski LM，et al. Human lymphoid and myeloid cell development in NOD/LtSz-scid IL2R gamma null mice engrafted with mobilized human hemopoietic stem cells［J］. J Immunol，2005，174（10）：6477-6489.

［29］Orsulic S，Li Y，Soslow RA，et al. Induction of ovarian cancer by defined multiple genetic changes in a mouse model system［J］. Cancer Cell，2002，1（1）：53-62.

［30］Dinulescu DM，Ince TA，Quade BJ，et al. Role of K-ras and Pten in the development of mouse models of endometriosis and endometrioid ovarian cancer［J］. Nat Med，2005，11（1）：63-70.

［31］Williams SA，Anderson WC，Santaguida MT，et al. Patient-derived xenografts，the cancer stem cell paradigm，and cancer pathobiology in the 21st century［J］. Lab Invest，2013，93（9）：970-982.

［32］Kopetz S，Lemos R，Powis G. The promise of patient -derived xenografts：the best laid plans of mice and men［J］. Clin Cancer Res，2012，18（19）：5160-5162.

［33］Hylander BL，Punt N，Tang H，et al. Origin of the vasculature supporting growth of primary patient tumor xenografts［J］. J Transl Med，2013，11：110.

［34］Bankert RB，Balu-Iyer SV，Odunsi K，et al. Humanized mouse model of ovarian cancer recapitulates patient solid tumor progression，ascites formation，and metastasis［J］. PLoS One，2011，6（9）：e24420.

［本文編輯王琳］

Updates of Patient Derived Xenografts Model in Ovarian Tumors

WU Jian-fa，YI Xiao-fang. Obstetrics and Gynecology Hospital，F(xiàn)udan University，Shanghai 200011，China

【Abstract】Ovarian cancer has the highest motality among the female reproductive malignancies. The underling mechanism is still unknown，and the prognosis has not been improved significantly. To establish an ideal preclinical model is in favor of the study of recurrence and metastasis in ovarian cancer. Recently，the development of patient derived xenografts model gives us a new platform for preclinical study. Gradually it has been used in the study of breast cancer，lung cancer and colon cancer，where it is proved to be useful. Much less studies on the use of patient derived xenografts model in ovarian cancer has been reported and data was shown promising. Based on the existing literature retrieval，this model could better copy the biological characteristics of the primary tumor and keep the heterogeneity of primary tumor. But there were still some problems need to be solved in the application of it，such as the different tumor take rate，the limited tumor resources and the lack of effective quality control standards. Here this review aims to address the application status，existing problems and application prospects of this model.

【Keywords】Ovarian neoplasms；Models，animal；Animal experimentation；Neoplasm transplantation；Transplantation，heterologous

基金項(xiàng)目：上海市科學(xué)技術(shù)委員會(huì)科研計(jì)劃項(xiàng)目（14411965700）

通信作者：吳建發(fā)，E-mail：longkouafa22@163. com

Corresponding author：WU Jian-fa，E-mail：longkouafa22@163.com

收稿日期：（2015-09-27）