固有淋巴樣細胞2與特應性皮炎的研究進展

俞穎哲 鄭敏

·綜述·

固有淋巴樣細胞2與特應性皮炎的研究進展

俞穎哲 鄭敏

特應性皮炎是一種慢性炎癥性疾病，在兒童中多見，且多有哮喘、過敏性鼻炎等疾病的家族史。該病的發(fā)病機制尚不明確，與皮膚屏障缺損、遺傳易感性、環(huán)境危險因素及免疫調節(jié)異常等多個因素相關。研究發(fā)現(xiàn)，特應性皮炎與固有淋巴樣細胞所介導的免疫反應相關，特別是2型固有淋巴樣細胞，與該型細胞相關的白介素4、5和13等一系列細胞因子在特應性皮炎的發(fā)病過程中發(fā)揮重要作用，這一進展可為特應性皮炎提供新的治療靶點。

皮炎，特應性；淋巴細胞；白細胞介素4；白細胞介素5；白細胞介素13

特應性皮炎是一種慢性炎癥性皮膚病，在兒童中的發(fā)病率約為20%，成人發(fā)病率為3%［1］。發(fā)病人群多有哮喘、過敏性鼻炎家族史，且易被檢測到血清IgE水平增高。其發(fā)病機制較為復雜，與皮膚屏障缺損、皮膚炎癥反應、遺傳易感性、環(huán)境危險因素及免疫調節(jié)異常等多個因素相關［2］。固有淋巴樣細胞（innate lymphoid cells，ILC）為一類具有免疫功能的淋巴樣細胞，目前認為可能與特應性皮炎的發(fā)病相關。

1 ILC

傳統(tǒng)的免疫細胞包括B細胞、T細胞、吞噬細胞及自然殺傷細胞（NK細胞）等。隨著研究的深入，人們發(fā)現(xiàn)，NK細胞雖來源于淋巴樣祖細胞，但發(fā)揮作用的方式與其他淋巴細胞不同，且不攜帶特異性抗原識別受體，此后，NK細胞因其特性被歸入了一個新的細胞群體，即 ILC［3］。

作者單位：310009杭州，浙江大學醫(yī)學院附屬第二醫(yī)院皮膚性病科

ILC是一類特殊的免疫細胞，具有淋巴細胞的形態(tài)特征，但表面缺失特異性抗原受體，同時能夠產生一系列特效細胞因子［4］。根據(jù)細胞所分泌的特異性細胞因子及發(fā)生過程中所需的轉錄因子種類不同，ILC分為3個亞型：1型ILC（ILC1）分泌干擾素（IFN）γ，同時依賴于Tbet進行轉錄，NK細胞即屬于此類；2型ILC（ILC2）分泌2類細胞因子，如IL-5、IL-13，其轉錄需依賴 GATA3；3 型 ILC（ILC3）包括淋巴組織誘導細胞，分泌IL-17、IL22，同時依賴于 Rorγ［5］。

目前研究顯示，ILC通過自身細胞因子，加之與輔助T細胞亞類的交互影響，在淋巴器官發(fā)生、組織重塑、抗菌免疫、防御屏障等多個方面發(fā)揮作用。一旦不受抑制的激活及增殖，將引發(fā)炎癥性自身免疫性疾病。

2 ILC2

ILC2作為一類對IL-25敏感且能分泌2類細胞因子的非B非T細胞，最早發(fā)現(xiàn)于Rag1-/-小鼠體內［6］。其在骨髓中發(fā)生，主要分布于肺部、皮膚、鼻腔、腸道等富含黏膜的部位［7-8］。

ILC2前體在IL-33、IL-25、胸腺基質淋巴細胞生成素（TSLP）的誘導下，依賴于Rorα轉變?yōu)镮LC2。ILC2 能夠分泌 IL-2、IL-5、IL-13 及少量 IL-4、IL-9，并進一步激活下游通路中的肥大細胞及嗜酸性粒細胞，從而發(fā)揮類似于Th2的作用［9-11］。現(xiàn)已證明，ILC2與過敏性哮喘、鼻竇炎、特應性皮炎等疾病相關［12-14］。

3 ILC2與特應性皮炎的發(fā)病機制

特應性皮炎的發(fā)病機制較為復雜，可分為免疫反應、皮膚屏障功能及微生物作用三方面。其中前兩者與ILC2關系密切。本病在生理病理上主要表現(xiàn)為2類細胞因子反應，即IL-4、IL-5、IL-13的產生，并進一步誘導IgE產生及顆粒細胞的募集，這與ILC2相關的細胞因子相符。目前的一系列研究表明，ILC2可能參與了特應性皮炎等疾病的病理過程［15-16］。

3.1 ILC2通過細胞因子介導的免疫反應影響特應性皮炎的發(fā)?。貉芯咳藛T通過流式細胞測定的方式檢測Lin-CD25+IL-33R+ILC2。結果顯示，無論是小鼠還是人類，特應性皮炎皮損區(qū)域的ILC2數(shù)量均顯著高于健康皮膚。研究者使用TSLP-TSLP受體，而非傳統(tǒng)意義上ILC2的誘導因子IL-33、IL-25，探討TSLP依賴的ILC2通路。研究顯示，TSLP可誘導ILC2產生類似Th2類細胞因子，并進一步引發(fā)與特應性皮炎相似的皮膚炎癥反應［17］。

在另一項研究中，研究人員以角蛋白14啟動子使轉基因小鼠表達IL-33基因，并提高其在皮膚的含量。在將小鼠置于無病原體環(huán)境中6～8周后，小鼠自發(fā)出現(xiàn)類似于特應性皮炎的改變，包括出現(xiàn)類似形態(tài)的皮損，嗜酸性粒細胞及肥大細胞在皮損區(qū)的浸潤表現(xiàn)，以及外周血中組胺及IgE的水平升高。同時對比于野生型，轉基因小鼠皮損區(qū)、外周血及局部淋巴結的ILC2及 IL-5、IL-13水平均顯著增高［18］，提示ILC2及其誘導因子IL-33在特應性皮炎形成中的起作用。

2014年，一項研究發(fā)現(xiàn)，嗜堿性粒細胞及ILC2在炎癥性皮損部位大量聚集，采用流式細胞檢測的方法，在野生型小鼠的皮膚ILC2中檢測到IL-4Rα，并比較得出IL-4-/-小鼠的ILC2反應顯著低于野生型小鼠。為證實其作用，研究人員分別提取IL-4-/-小鼠與野生型小鼠的嗜堿性粒細胞，注入裸鼠體內。被注入IL-4-/-嗜堿性粒細胞的裸鼠的ILC2反應仍顯著低于注入野生型嗜堿性粒細胞的裸鼠。研究人員進一步比較了IL-4-/-小鼠與野生型小鼠的皮膚ILC2的增殖情況，明確IL-4對于ILC2反應的誘導、ILC2的增殖以及特應性皮炎樣的皮損改變的形成都是必需因素［19］。

由此可見，ILC2在特應性皮炎中的免疫作用與TSLP、IL-33、IL-5、IL-13 及 IL-4 等多種細胞因子相關。同時，細胞間關系以及皮膚ILC2游走模式的研究表明，ILC2與細胞定植的肥大細胞相關，可通過IL-13等細胞因子調節(jié)皮膚肥大細胞的反應［20］。相信以后在相關領域能有更多突破性的進展。

3.2 ILC2影響皮膚屏障功能介導特應性皮炎的發(fā)?。篒LC2的作用機制除了細胞因子的免疫作用外，還有與皮膚屏障功能改變的交互作用。上皮屏障的缺陷已被證實是本病形成過程中一個重要的致病因素，在遺傳層面可由角質纖絲聚集蛋白相關基因突變引起［21］。在上皮組織受損后，能夠釋放IL-33、IL-25等細胞因子。而ILC2能夠對IL-33、IL25作出特異性應答，分泌下游的細胞因子，從而引發(fā)一系列炎癥反應［22］。

另外，有研究表明，ILC2能夠分泌KLRG1，其與E鈣黏連蛋白協(xié)同具有下調ILC2功能的作用。在特應性皮炎的樣本中，ILC2表達KLRG1的水平顯著高于對照組，且IL-33及TSLP均可上調其表達。這一負向反饋機制能夠有效限制ILC2引發(fā)過度的炎癥反應［23］。由于E鈣黏連蛋白主要存在于角質形成細胞中，而特應性皮炎患者的皮損區(qū)，角質形成細胞受損并導致E鈣黏連蛋白水平下調［24］。因此，在患者上皮屏障缺陷的情況下，ILC2的負向反饋機制削弱，加快炎癥性疾病的進程。

4 ILC2與特應性皮炎的治療

拮抗IL-4及IL-13的單克隆抗體藥物dupilumab已被證實在哮喘及高嗜酸性粒細胞患者中有一定的療效［25］。在一臨床試驗中，研究人員篩選未使用糖皮質激素或鈣調神經(jīng)磷酸酶抑制劑規(guī)范治療的中重度特應性皮炎患者，對dupilumab進行隨機、雙盲、對照試驗。通過皮疹范圍及嚴重度評分、瘙癢情況、生物標記物水平等指標評估疾病轉歸。試驗結果表明，試驗組患者的癥狀、體征及相關生物學指標，包括TARC及K16均有顯著下降［26］。從側面證實了特應性皮炎發(fā)病機制過程中，IL-4和IL-13這類ILC2所分泌的細胞因子的作用。

5 結語

ILC2能在表皮及黏膜屏障引發(fā)類似于2型細胞因子反應，同時，特應性皮炎皮損區(qū)域所發(fā)現(xiàn)ILC2獨特的聚集現(xiàn)象以及相關細胞因子的變化，均表明其與特應性皮炎的發(fā)病相關。然而，現(xiàn)有研究所限，ILC2在免疫系統(tǒng)中所占地位，其引發(fā)炎癥反應的具體分子機制、調節(jié)通路尚待進一步研究。

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Type 2 innate lymphoid cells and atopic dermatitis

Yu Yingzhe,ZhengMin.Department of Dermatovenereology,Second Affiliated Hospital of Zhejiang University School of Medicine,Hangzhou 310009,China

Atopic dermatitis （AD） is a common chronic inflammatory skin disease,usually occurs in children who often have a personal or family history of asthma or allergic rhinitis.The pathogenesis of AD remains unclear,and may be related to impaired skin barrier,genetic susceptibility,environmental risk factors,aberrant immune regulation,etc.Recent studies have indicated that AD is associated with immune responses mediated by innate lymphoid cells （ILCs）,especially type 2 ILCs.It has been reported that type 2 ILC-related cytokines such as interleukin （IL）-4,IL-5 and IL-13 play important roles in the development of AD,which may offer new targets for the treatment of AD.

Dermatitis,atopic;Lymphocytes;Interleukin-4;Interleukin-5;Interleukin-13

Zheng Min,Email:minz@zju.edu.cn

浙江省自然科學基金（LQ13H110001）

Fund program:Natural Science Foundation ofZhejiangProvince ofChina（LQ13H110001）

10.3760/cma.j.issn.1673-4173.2016.04.011

鄭敏，Email:minz@zju.edu.cn

2015-06-29）