對(duì)幽門(mén)螺桿菌進(jìn)行臨床檢測(cè)的方法

張俊英

（河南省新鄉(xiāng)市第四人民醫(yī)院檢測(cè)科 河南 新鄉(xiāng) 453000）

感染幽門(mén)螺桿菌（簡(jiǎn)稱Hp）是引起消化性潰瘍、胃癌、慢性活動(dòng)性胃炎、黏膜相關(guān)性淋巴癌等疾病的重要原因。相關(guān)的調(diào)查結(jié)果顯示，幽門(mén)螺桿菌患者的人數(shù)占正常人群的30%～50%[1]。有研究表明，對(duì)幽門(mén)螺桿菌感染患者進(jìn)行早期治療，可起到很好的臨床效果，否則其極易發(fā)生反復(fù)感染的情況。因此，對(duì)幽門(mén)螺桿菌感染患者應(yīng)進(jìn)行早期診斷，以提高其治療的效果，改善其預(yù)后。為了進(jìn)一步探討對(duì)幽門(mén)螺桿菌感染患者進(jìn)行早期診斷的最佳方法，我院對(duì)收治的50例此病患者均使用快速尿素酶法、嗜銀染色法及聯(lián)合檢測(cè)法進(jìn)行幽門(mén)螺桿菌檢測(cè)，結(jié)果顯示使用聯(lián)合檢測(cè)法進(jìn)行感染幽門(mén)螺桿菌檢測(cè)的陽(yáng)性檢出率最高。現(xiàn)將此情況報(bào)告如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

本次研究的對(duì)象為2012年3月～2014年3月期間我院收治的50例幽門(mén)螺桿菌感染患者。在參加本次研究前，這50例患者均未使用抗生素與抑酸類(lèi)藥物進(jìn)行治療。在這50例患者中，有男性28例，女性22例。他們的年齡在22歲～82歲之間，平均年齡為51.4±1.2歲。

1.2 研究方法

對(duì)這50例患者均使用快速尿素酶法、嗜銀染色法及快速尿素酶法聯(lián)合嗜銀染色法進(jìn)行幽門(mén)螺桿菌檢測(cè)。具體方法為：（1）標(biāo)本采集：將患者胃竇部的黏膜組織作為活檢標(biāo)本。（2）快速尿素酶檢測(cè)法的操作方法為：采用標(biāo)準(zhǔn)試劑盒對(duì)標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)。將底物酶標(biāo)記好后，使用適量酶促反應(yīng)液對(duì)標(biāo)本進(jìn)行處理，待到藥膜溶解完成后，將標(biāo)本放在10℃～30℃的環(huán)境下孵育5min，在孵育完后對(duì)標(biāo)本進(jìn)行觀察檢測(cè)。（3）嗜銀染色檢測(cè)法的操作方法為：①將標(biāo)本用甲醛和石蠟進(jìn)行固定后對(duì)其進(jìn)行切片。②待切片完成后，對(duì)標(biāo)本進(jìn)行脫蠟處理，然后將其放置在43℃的濃度為1%的硝酸銀溶液內(nèi)浸潤(rùn)30min。③將顯影液滴入到切片中保持1～2min，先用溫度為56℃的水對(duì)標(biāo)本進(jìn)行快速?zèng)_洗，再使用蒸餾水對(duì)標(biāo)本進(jìn)行沖洗。④對(duì)標(biāo)本進(jìn)行脫水處理。⑤對(duì)標(biāo)本進(jìn)行觀察檢測(cè)。（3）聯(lián)合檢測(cè)法：將使用快速尿素酶法的檢測(cè)結(jié)果與使用聯(lián)合嗜銀染色法進(jìn)行檢測(cè)的結(jié)果相疊加，得出聯(lián)合檢測(cè)法的檢測(cè)結(jié)果。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

我們使用SPSS17.0軟件包對(duì)本次實(shí)驗(yàn)中的數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，計(jì)量資料以均數(shù)正負(fù)標(biāo)準(zhǔn)差（`x±s）表示，采用t檢測(cè)，計(jì)數(shù)資料用n(%)表示，采用x2檢測(cè)，用P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

使用快速尿素酶法對(duì)這50例患者進(jìn)行幽門(mén)螺桿菌檢測(cè)的結(jié)果為，有36例患者的檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，其陽(yáng)性檢出率為72%。使用嗜銀染色法對(duì)這50例患者進(jìn)行幽門(mén)螺桿菌檢測(cè)的結(jié)果為，有32例患者的檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，其陽(yáng)性檢出率為64%。使用快速尿素酶法聯(lián)合嗜銀染色法對(duì)這50例患者進(jìn)行幽門(mén)螺桿菌檢測(cè)的結(jié)果為，這50例患者的檢測(cè)結(jié)果均為陽(yáng)性，其陽(yáng)性檢出率為100%。

3 討論

大量的臨床實(shí)踐證實(shí)，使用細(xì)菌培養(yǎng)法進(jìn)行幽門(mén)螺桿菌檢測(cè)的特異性為100%[2]。但是進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)的耗時(shí)長(zhǎng)、對(duì)檢測(cè)條件的要求高，不利于在臨床檢測(cè)中普遍應(yīng)用。隨著醫(yī)療科技的發(fā)展，各種方便快捷的檢測(cè)方法在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用?？焖倌蛩孛概c嗜銀染色方法均是臨床上檢測(cè)幽門(mén)螺桿菌的常用方法?？焖倌蛩孛笝z測(cè)法的原理是通過(guò)PH值的顏色變化來(lái)判斷幽門(mén)螺桿菌的，即幽門(mén)螺桿菌在尿素酶的條件下，可分解為二氧化碳與氨氣，其中的氨氣可使PH值增高。嗜銀染色檢測(cè)法是臨床上常用的切片組織染色法。使用此檢測(cè)方法進(jìn)行幽門(mén)螺桿菌檢測(cè)的同時(shí)，還可對(duì)患者胃部的病變類(lèi)型作出準(zhǔn)確的判斷。有研究表明，使用快速尿素酶法聯(lián)合嗜銀染色法進(jìn)行幽門(mén)螺桿菌檢測(cè)的準(zhǔn)確率為96%，且具有很高的特異性及敏感性。本次研究結(jié)果顯示，用快速尿素酶法進(jìn)行幽門(mén)螺桿菌檢測(cè)的陽(yáng)性檢出率為72%，用嗜銀染色法進(jìn)行幽門(mén)螺桿菌檢測(cè)的陽(yáng)性檢出率為64%，而用聯(lián)合檢測(cè)法進(jìn)行幽門(mén)螺桿菌檢測(cè)的陽(yáng)性檢出率則為100%，此研究結(jié)果與王艷冬等人[3]的研究結(jié)果相符。

綜上所述，用快速尿素酶法聯(lián)合嗜銀染色法進(jìn)行幽門(mén)螺桿菌檢測(cè)的準(zhǔn)確性高，是對(duì)幽門(mén)螺桿菌感染患者進(jìn)行早期診斷的最佳方法。此檢測(cè)方法值得在臨床上推廣應(yīng)用。

[1] 蘇秀麗.幽門(mén)螺桿菌糞便抗原用于幽門(mén)螺桿菌感染檢測(cè)觀察[J].中國(guó)基層醫(yī)藥 ,2013,20(23)：3543-3544.

[2] 楊旭,高永俊,李繼來(lái)等.細(xì)胞毒素相關(guān)蛋白A陽(yáng)性的幽門(mén)螺桿菌感染與缺血性腦卒中及其亞型的關(guān)系的Meta分析[J].臨床神經(jīng)病學(xué)雜志,2012,25(2)：96-100.

[3] 王艷冬,宮雅楠,肖迪等.幽門(mén)螺桿菌CagⅤ蛋白的克隆表達(dá)及初步分析[J].中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào),2013,29(10)：955-958,964.