全自動酶免儀不同洗板方式對結(jié)核抗體檢測結(jié)果的影響

張淑英 裴景亮 張玉芝 伊正君

全自動酶免儀不同洗板方式對結(jié)核抗體檢測結(jié)果的影響

張淑英 裴景亮 張玉芝 伊正君

目的評價不同的洗滌參數(shù)對全自動酶免儀檢測結(jié)核抗體的影響。方法120例結(jié)核患者采用全自動酶免儀,選擇4、5、6次不同洗滌次數(shù),10、30、60 s不同清洗震蕩時間,20、40、60 s不同浸泡時間,進(jìn)行結(jié)核抗體的酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測,觀察比較檢測結(jié)果。結(jié)果洗滌5次陽性似然比(PLR)、尤登指數(shù)(YI)高于洗滌4次的水平(P＜0.05)。振蕩30 s的方法在靈敏度、特異性、陽性預(yù)測值(PPV)、陰性預(yù)測值(NPV)、PLR、YI方面的診斷效能高于振蕩10 s的方法(P＜0.05)；在PPV和PLR的診斷效能方面高于振蕩60 s的方法(P＜0.05)。浸泡40 s的方法在靈敏度、NPV、PLR、陰性似然比(NLR)、YI方面的診斷效能高于浸泡20、60 s時(P＜0.05)。結(jié)論建立洗滌液系統(tǒng)的標(biāo)準(zhǔn)化程序可以提高檢測方法的靈敏度、特異性和準(zhǔn)確性。

高通量分析；酶聯(lián)免疫吸附試驗；標(biāo)準(zhǔn)化；結(jié)核抗體

本研究采用的試劑利用基因工程技術(shù)克隆表達(dá)致病性結(jié)核分枝桿菌7種結(jié)核特異性表位抗原［1,2］,研究高通量ELISA檢測系統(tǒng)檢測結(jié)核抗體試驗過程中洗滌方式對結(jié)核抗體檢測結(jié)果的影響?，F(xiàn)將研究結(jié)果報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取山東省濰坊市第二人民醫(yī)院2013年5月～2014年2月結(jié)核科門診及住院的120例結(jié)核患者,均符合2001年中華醫(yī)學(xué)會結(jié)核病學(xué)分會制定的肺結(jié)核診斷標(biāo)準(zhǔn)。

隨機(jī)選擇168例健康體檢人員。

1.2儀器與試劑 采用煙臺Addcare ELISA500全自動酶免儀,試劑采用榮盛公司結(jié)核抗體檢測試劑,批號: 20130824。

1.3血清標(biāo)本收集 清晨空腹肘靜脈血4 ml,3000 r/min離心10 min分離血清,血清分裝后-80℃保存,備用。

1.4研究方法 選擇4、5、6次不同洗滌次數(shù),10、30、60 s不同清洗震蕩時間,20、40、60 s不同浸泡時間［1］,進(jìn)行結(jié)核抗體的ELISA檢測,觀察對最終檢測結(jié)果的影響,評價不同因素對靈敏度、特異性、PPV、NPV、PLR、NLR、YI的影響。

1.5統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS21.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析。計數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1不同洗滌次數(shù)對結(jié)核抗體檢測的影響 洗滌5次時PLR和YI高于洗滌4次的水平(P＜0.05)；洗滌5次各項與洗滌6次比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。見表1。

2.2不同振蕩時間對結(jié)核抗體檢測的影響 振蕩30 s的方法在靈敏度、特異性、PPV、NPV、PLR、YI方面的診斷效能高于振蕩10 s的方法(P＜0.05)；在PPV和PLR方面的診斷效能高于振蕩60 s的方法(P＜0.05)。見表2。

2.3不同浸泡時間對結(jié)核抗體檢測的影響 浸泡40 s的方法在靈敏度、NPV、PLR、NLR、YI方面的診斷效能高于其他浸泡時間(P＜0.05)。見表3。

表1 不同洗滌次數(shù)對檢驗效能的影響

表2 不同振蕩時間對結(jié)核抗體檢測的影響

表3 不同浸泡時間對結(jié)核抗體檢測的影響

3 小結(jié)

有研究證實,結(jié)核分枝桿菌的特異性分泌蛋白的抗體檢測對結(jié)核病的診斷具有重要意義［2,3］,利用基因工程技術(shù)將結(jié)核分枝桿菌的多種分泌蛋白制成融合蛋白,利用ELISA技術(shù)檢測血清中對應(yīng)的抗體可用于不同類型結(jié)核病的診斷。

本文研究結(jié)果證實,建立的洗滌液系統(tǒng)的標(biāo)準(zhǔn)化程序可以提高檢測方法的靈敏度、特異性和準(zhǔn)確性。

［1］黃紹梅,邱薇,許柳清,等.蛋白芯片法檢測結(jié)核抗體在兒童結(jié)核病中的診斷價值.廣東醫(yī)學(xué),2012,33(16):2421-2422.

［2］黃勝,余繼英,趙春艷,等.膠體金法檢測結(jié)核抗體的臨床價值探討.臨床肺科雜志,2014,19(6):1058-1060.

［3］林偉靈.結(jié)核患者結(jié)核抗體、血沉以及C-反應(yīng)蛋白檢測的臨床分析.中國醫(yī)藥導(dǎo)報,2012,9(31):55-56.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2016.08.024

2015-06-18］

261041 山東省濰坊市第二人民醫(yī)院(張淑英)；山東省濰坊醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院(裴景亮 張玉芝伊正君)