徐 巧 黃列平 李艷華 顧承萍
熱毒寧對不同病毒分型手足口病兒童臨床療效及免疫功能的影響
徐 巧 黃列平 李艷華 顧承萍
兒童;手足口??;病毒分型;熱毒寧;免疫功能
手足口病是由腸道病毒和柯薩奇病毒所致的急性傳染病,其臨床特征為手、足、口腔以及臀部出現水皰、皮疹或潰瘍等。近年來,手足口病在兒童中的發(fā)病率逐年上升,研究[1]顯示,患兒中重癥病例的發(fā)生率顯著升高,另部分患兒出現神經系統(tǒng)癥狀及心臟功能損傷。感染手足口病的病毒有20多種,其中最為常見的是腸道病毒71型(EV71)和柯薩奇病毒A16(CoxA16)[2]。研究[3]顯示,手足口病與機體免疫功能紊亂密切相關。目前,熱毒寧在治療手足口病上取得了一定的效果,但是熱毒寧對不同病毒分型手足口病的治療效果以及免疫功能的影響研究報道較少,現將結果報道如下。
1.1 一般資料 隨機選取2014年5月—2015年8月在我院住院的164例手足口病患兒作為研究對象,其中男98例,女66例,年齡11個月~7歲,平均(2.74±1.79)歲,病程2~9天,平均(4.73±2.83)天。所有研究對象根據病毒分型分為EV71型組43例、Cox 16型組50例及腸道病毒通用型組71例,三組患兒年齡、性別、病程等一般資料比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),具有可比性。見表1。
表1 三組患兒臨床資料比較[例(%)]
1.2 納入標準 (1)符合2010年版手足口病普通病例的診斷標準[4];(2)患兒臨床表現為急性起病、發(fā)熱,患兒的手、足或/及臀部出現皰疹,斑丘疹、周圍有炎性紅暈,同時出現流涕、咳嗽、食欲不振等;(3)口腔潰瘍出現的時間較手、足、臀部皰疹的時間早;(4)血象正?;蛘呗杂猩?;(5)RT-PCR檢測病毒分型為陽性;(6)征得患兒監(jiān)護人同意,并且簽訂知情同意書。
1.3 排除標準 (1)對熱毒寧、利巴韋林過敏的患兒;(2)合并有心、肺、腎等器官疾??;(3)伴有嚴重的細菌感染;(4)合并感染水痘、濕疹或者口蹄疫等疾病。
治療方法:采集所有手足口病患兒咽拭子標本,采用醫(yī)用專用棉簽輕拭患兒咽喉后壁以及兩側扁桃體部位,迅速將棉簽放入到裝有3mL生理鹽水的標本采樣管中,蓋緊管蓋密封,于-20℃低溫冷凍保存。各組患者均給予常規(guī)的手足口病治療,例如抗感染、補充電解質、補液以及氨基酸、脂肪酸等營養(yǎng)藥物的支持,抗病毒采用熱毒寧注射液加5%葡萄糖注射液或者生理鹽水100mL靜脈滴注,其中1~5歲,予0.5mL/kg;6~7歲,予10mL/kg每天,1天1次,治療5天為1個療程。在治療期間密切關注患兒的發(fā)熱消退時間、皰疹、斑丘疹消退時間、口腔潰瘍愈合時間以及住院時間,同時記錄不良反應發(fā)生情況。
觀察指標:(1)免疫功能指標:抽取各組患兒住院次日清晨以及治療5天后空腹靜脈血各4mL,其中2mL血液采用含有EDTA的抗凝管收集,采用流式細胞術(FACS Calibure流式細胞儀,美國BD公司)檢測T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+,另2mL血液標本收集于干燥管中,以1 5000r/min離心10min,取血清,免疫散射比濁法檢測免疫球蛋白及血清補體(全自動蛋白分析儀,德國BN ProSpec公司)。(2)各組患兒癥狀、體征消失時間及住院時間。
統(tǒng)計學方法:應用SPSS19.0統(tǒng)計軟件分析所得數據,計量資料以均數±標準差(±s)表示,兩組間采用獨立樣本t檢驗,多組間采用單因素方差分析(one-way ANOVA),計數資料采用χ2檢驗,P<0.05差異有統(tǒng)計學意義。
3.1 療效標準[4]顯效:治療3天內,患兒體溫恢復正常,手足皰疹、斑丘疹以及口腔潰瘍完全消退,飲食恢復正常,一般狀況正常。有效:治療3~5天內,患兒體溫降至正常,手足皰疹、斑丘疹以及口腔潰瘍基本消退,沒有散在新皮疹出現,飲食得到一定程度改善,一般狀況有所好轉。無效:治療5天后患兒仍然發(fā)熱,體溫下降<1℃,手足皰疹、斑丘疹以及口腔潰瘍未消退或者有所增加,有新的皮疹出現。
3.2 三組患兒臨床療效比較 Cox16型組顯效率顯著高于EV71型組、腸道病毒通用型組(χ2=4.39,P<0.05),而總有效率組間比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),見表2。
表2 各組患兒臨床療效比較(例)
3.3 三組患兒退熱時間、口腔潰瘍愈合時間、皰疹消退時間及住院時間比較 Cox16型組、腸道病毒通用型組患兒退熱時間、口腔潰瘍愈合時間、皰疹消退時間及住院時間顯著低于EV71型組(P<0.05);Cox 16型組退熱時間顯著低于腸道病毒通用型組和EV71型組(P<0.05)。見表3。
3.4 三組患兒治療前后免疫功能指標變化 與住院時比較,治療5天后,三組患兒CD3+、CD4+、CD4+/ CD8+、IgA均顯著升高,而CD8+、IgM和IgG均顯著降低(P<0.05)。治療5天后,與EV71型組比較,Cox16型組、腸道病毒通用型組CD3+、CD4+/CD8+升高明顯(P<0.05);Cox16型組IgM、CD8+顯著低于EV71型組和腸道病毒通用型組(P<0.05),IgA顯著高于EV71型組和腸道病毒通用型組(P<0.05)。見表4~5。
表3 三組患兒退熱時間、口腔潰瘍愈合時間、皰疹消退時間及住院時間比較(天±s)
表3 三組患兒退熱時間、口腔潰瘍愈合時間、皰疹消退時間及住院時間比較(天±s)
注:與EV71型組比較,*P<0.05;與Cox16型組比較,△P<0.05
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導致手足口病的腸道病毒有20多種,柯薩奇病毒EV71型組有4、5、9、10、16型,Cox16型組有2、5型以及EV71,其中常見CoxA16和EV71型。研究[5]表明,EV71型病毒所致的手足口病的臨床癥狀較重,與EV71型相比較,CoxA16型病毒導致的臨床癥狀較輕[6]。手足口病腸道病毒感染機體后,可以激活免疫系統(tǒng)中的免疫應答反應,從而導致機體出現多種復雜的免疫功能變化。IgG為人體呼吸系統(tǒng)黏膜分泌性的重要抗體,而IgG是病毒重要的致敏原,是機體中重要的保護性抗體,對外毒素、病毒具有很好的調理、吞噬作用,IgM是體液免疫反應早期階段表達的免疫球蛋白,其在機體中的濃度較為穩(wěn)定,當在病理狀態(tài)下,其濃度有所變化[7]。研究[8]表明,手足口病患兒在感染EV71型病毒時,機體內IgA水平顯著下降,IgM顯著升高,其主要原因為患兒呼吸系統(tǒng)黏膜防御機能下降,導致IgA水平下降,而體內免疫應答早期引起IgM升高。本研究顯示,不僅EV71型病毒IgA下降、IgM升高,CoxA16型病毒及通用型病毒亦是如此,這也是機體在外界病毒入侵時正常的免疫反應所致。研究[9]指出,T淋巴細胞在腸道感染后的免疫應答機制中發(fā)揮重要作用,T淋巴細胞可以釋放多種細胞因子,參與機體免疫應答反應。正常生理狀態(tài)下,T細胞亞群能夠相互作用,維持平衡機體免疫功能。CD4+能夠輔助性誘導T細胞亞群,引起B(yǎng)細胞產生更多的免疫球蛋白,同時其含量升高表示細胞免疫增強;CD8+是機體中的抑制性細胞,其含量升高則表示機體免疫應答受到抑制;CD4+/CD8+比值主要是反映機體Th細胞與Ts細胞之間的功能平衡關系,是反映機體內環(huán)境穩(wěn)定最重要的指標,其比值下降,則表示,患者免疫功能下降。
表4 三組患兒治療前后細胞免疫功能指標比較(%,±s)
表4 三組患兒治療前后細胞免疫功能指標比較(%,±s)
注:與住院時比較,△P<0.05;與EV71型組比較,*P<0.05;與Cox16型組比較,▲P<0.05
組別EV71型組Cox16型組50例數43腸道病毒通用型組時間點住院時治療5天后住院時治療5天后住院時治療5天后71 CD3+ 49.86±9.98 58.37±10.96△50.42±10.23 68.23±12.36△* 49.01±10.24 65.21±11.19△* CD4+ 37.51±4.65 41.95±5.64△36.21±3.69 44.61±5.89△35.37±3.71 43.29±5.55△CD8+ 26.59±5.67 21.45±4.31△▲25.63±5.47 15.39±4.10△* 26.69±6.11 18.37±4.09△CD4+/CD8+ 1.24±0.41 1.69±0.52△1.31±0.36 2.29±0.58△* 1.29±0.39 2.07±0.49△*
表5 三組患兒治療前后體液免疫功能指標比較(g/L,±s)
表5 三組患兒治療前后體液免疫功能指標比較(g/L,±s)
注:與住院時比較,△P<0.05;與EV71型組比較,*P<0.05;與Cox16型組比較,▲P<0.05
組別EV71型組Cox16型組50例數43腸道病毒通用型組時間點住院時治療5天后住院時治療5天后住院時治療5天后71 IgA 0.76±0.35 1.17±0.46△0.82±0.36 1.49±0.53△* 0.81±0.34 1.21±0.49△▲IgM 1.51±0.45 1.35±0.64△▲1.57±0.49 0.91±0.39△* 1.57±0.51 1.29±0.41△▲IgG 9.31±2.17 8.06±2.09△9.43±2.21 8.69±2.10 9.26±2.11 8.17±4.09△C3 1.17±0.31 1.25±0.32 1.21±0.29 1.28±0.31 1.23±0.32 1.24±0.28 C4 0.30±0.14 0.33±0.21 0.33±0.19 0.34±0.23 0.31±0.17 0.33±0.21
熱毒寧從青蒿、梔子、金銀花等中藥材中提取的有效成分,其含有的主要成分青蒿素、綠原酸、梔子苷等,具有疏風解表、清熱解毒的功效。藥理研究[10]證實,青蒿具有解暑、截瘧、抗病毒、殺菌的作用,同時具有免疫功能恢復的作用。金銀花對柯薩奇病毒具有一定的抑制作用。目前,臨床研究[11]證實,熱毒寧注射液治療手足口病患兒療效顯著,能迅速改善患兒癥狀及體征,促進患兒康復的效果。
本研究顯示,雖然三組患兒在總有效率差異無統(tǒng)計學意義,但Cox16型組患兒的顯效率顯著高于EV71型組、腸道病毒通用型組,此外Cox16型組患兒的退熱時間、口腔潰瘍愈合時間、皰疹消退時間等顯著短于EV71型組,其可能原因有以下幾點:(1)CoxA16型病毒所致的癥狀較輕,藥物干預后,患兒能更快改善癥狀,而EV71型所致癥狀較重,患兒恢復較慢。(2)熱毒寧注射液中所含成分能更加有效抑制CoxA16型病毒,已經證實金銀花具有顯著抑制柯薩奇病毒的作用,而對EV71型病毒的抑制作用相對較弱。通用型病毒可能有其他多種病毒分型,如柯薩奇病毒A10、A6型、B2型、5型等,這也是本研究中其病例多于EV71型組、Cox16型組的原因。各組患兒治療前CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、IgA均顯著降低,治療后其水平均顯著升高,說明熱毒寧有助于手足口病患兒免疫功能的恢復,進一步研究發(fā)現Cox16型組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、IgA升高水平高于EV71型組、腸道病毒通用型組,尤其是CD4+/CD8+、IgA升高水平顯著高于上述兩組,而IgM、CD8+則顯著下降,同EV71型組、腸道病毒通用型組比較有顯著性差異,表明熱毒寧能更快緩解CoxA16型病毒所致的細胞免疫應答抑制作用,機體更快恢復到正常水平。
本組結果顯示,熱毒寧治療CoxA16型病毒所致的手足口病的臨床效果以及改善患者免疫功能方面優(yōu)于EV71型病毒、通用型病毒所致感染。
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(收稿:2016-03-28 修回:2016-05-20)
浙江省舟山市醫(yī)藥衛(wèi)生科技計劃項目(No.2013A07)
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