口服益生菌促進(jìn)兒童早期齲損再礦化臨床研究

肖梅

（西安邊防學(xué)院門(mén)診部，陜西西安710108）

口服益生菌促進(jìn)兒童早期齲損再礦化臨床研究

肖梅

（西安邊防學(xué)院門(mén)診部，陜西西安710108）

目的探討口服益生菌促進(jìn)兒童早期齲齒再礦化的作用。方法將2013年12月至2015年1月在我院就診的早期齲損病變患兒49例按隨機(jī)數(shù)字表法分為試驗(yàn)組24例和對(duì)照組25例，兩組均采用含氟牙膏刷牙，試驗(yàn)組和對(duì)照組分別口服三聯(lián)活菌膠囊和安慰劑，3次/d，療程12周，分別在治療前及治療后采用定量光導(dǎo)熒光技術(shù)(QLF)觀(guān)察熒光輻射率(F)和病損面積(A)。結(jié)果治療前試驗(yàn)組和對(duì)照組患兒的F值和A值分別為(7.71±1.92)%、(7.94±2.33)mm2和(0.29±0.38)%、(0.26±0.41)mm2，組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；治療后試驗(yàn)組和對(duì)照組患兒的F值分別下降(-0.81±1.52)和(0.05±0.32)，試驗(yàn)組優(yōu)于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，而A值下降相近，組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。結(jié)論口服益生菌有利于早期齲損部位再礦化，但與安慰劑比較暫未見(jiàn)明顯優(yōu)勢(shì)，益生菌種類(lèi)和療程需要進(jìn)一步探索。

益生菌；變異鏈球菌；齲齒；再礦化

齲齒(Dental caries)是牙釉質(zhì)在持續(xù)酸性條件下脫礦和再礦化交替進(jìn)行的化學(xué)動(dòng)力過(guò)程，研究證實(shí)早期齲變能夠通過(guò)脫礦組織的再礦化達(dá)到不同程度的“愈合”[1]，因此再礦化成為齲病研究的熱點(diǎn)，目前最主要和最有效的途徑是局部氟化物使用。Hillman等[2]在2007首次提出采用益生菌改變和維持宿主口腔的微生物菌落平衡能有效預(yù)防和治療齲齒，后續(xù)國(guó)外眾多研究證實(shí)益生菌療法對(duì)學(xué)齡前兒童齲齒預(yù)防和老年人根部齲變都有肯定的效果，為齲齒等口腔疾病防治提供了新的思路[3-4]，而國(guó)內(nèi)在這方面開(kāi)展的工作較少。本研究嘗試定量光導(dǎo)熒光技術(shù)(Quantitative Light induced Fluorescence，QLF)評(píng)價(jià)口服益生菌對(duì)早期齲變的再礦化效果，為臨床決策提供更充分的依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料招募2013年12月至2015年1月在我院口腔科門(mén)診就診的患兒49例，入選標(biāo)準(zhǔn)：①年齡10～17歲，性別不限；②切牙、尖牙或前磨牙牙釉質(zhì)表面可見(jiàn)早期齲損病變；③患兒監(jiān)護(hù)人了解研究?jī)?nèi)容，愿意配合隨訪(fǎng)并簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)常食用含有乳酸桿菌的食品或飲料；②需要定期服用藥物的慢性病患兒；③有煙酒嗜好；④近一周內(nèi)服用過(guò)抗生素。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核并通過(guò)，符合標(biāo)準(zhǔn)的患者按隨機(jī)數(shù)表法分為試驗(yàn)組24例和對(duì)照組25例。

1.2 治療藥物試驗(yàn)藥為雙歧桿菌、嗜酸乳桿菌、腸球菌三聯(lián)活菌膠囊(商品名：培菲康，0.21 g/粒，國(guó)藥準(zhǔn)字S10950032，上海信誼藥廠(chǎng)有限公司)，0.21 g/片；對(duì)照藥為安慰劑，外形、氣味、口感與培菲康一致，但不含有活性成分，由江蘇美通制藥有限公司惠贈(zèng)。試驗(yàn)期間所有患兒均采用成人含氟牙膏刷牙，早晚各一次，刷牙后半小時(shí)服用藥物，3次/d，治療12周，試驗(yàn)期間不允許使用其他含氟的藥物或用品。

1.3 效果評(píng)價(jià)QLF系統(tǒng)(Inspektor公司，荷蘭)，使用QLF儀器的探頭分別對(duì)患齒的待檢測(cè)區(qū)域進(jìn)行掃描，拍攝所需的圖像并存儲(chǔ)，盲態(tài)下由專(zhuān)人使用專(zhuān)用的QLF2.00g分析軟件對(duì)病損區(qū)進(jìn)行評(píng)價(jià)，得出每次檢查的F(熒光輻射率)、A(病損面積)，在治療前和治療12周后分別評(píng)價(jià)。

1.4 依從性評(píng)價(jià)患兒入組時(shí)均發(fā)放168粒試驗(yàn)藥物，試驗(yàn)結(jié)束時(shí)將剩余藥物帶回，根據(jù)剩下藥物的15%、25%或50%量評(píng)定為“好”、“中”、“差”，同時(shí)患兒及其監(jiān)護(hù)人可以隨時(shí)與研究者聯(lián)系報(bào)告不良反應(yīng)發(fā)生情況。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。計(jì)量資料使用“K-S”檢驗(yàn)作正態(tài)性檢驗(yàn)，符合正態(tài)分布的數(shù)據(jù)以均值±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；非正態(tài)性分布數(shù)據(jù)以中位數(shù)(四分位間距)表示，組間比較采用Kruskal-Wallis檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以百分率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，均以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般情況試驗(yàn)過(guò)程中試驗(yàn)組和對(duì)照組分別有1例和2例患者未按時(shí)復(fù)診，2例和1例患者QLF圖片質(zhì)量較差，無(wú)法讀取結(jié)果，數(shù)據(jù)均不納入分析。兩組患兒的年齡、性別等人口學(xué)資料和病情、依從性等組間比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，見(jiàn)表1。

表1 兩組人口學(xué)及病情資料比較（例）

2.2 治療效果治療前兩組患兒的F值和A值比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，治療后試驗(yàn)組F值明顯下降，前后差值大于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，而A值治療后組間比較則差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，見(jiàn)表2。

表2 兩組治療前后QLF評(píng)價(jià)(±s)

表2 兩組治療前后QLF評(píng)價(jià)(±s)

組別F值(%)A值(mm2)治療前治療后差值治療前治療后差值試驗(yàn)組對(duì)照組t值P值7.71±1.92 7.94±2.33 6.79±2.54 7.88±2.63 0.87 0.42 -0.81±1.52 0.05±0.32 4.94 0.02 0.29±0.38 0.26±0.41 0.22±0.47 0.23±0.35 1.03 0.38 0.05±0.82 0.01±0.39 2.48 0.13

3 討論

某些致病微生物在口腔中的過(guò)度生長(zhǎng)往往會(huì)導(dǎo)致口腔疾病如齲齒、牙周炎和口臭的發(fā)生，其中變異鏈球菌是目前公認(rèn)的主要致齲菌，該菌不僅具有較強(qiáng)的產(chǎn)酸耐酸性，而且能夠利用蔗糖產(chǎn)生不溶性胞外多糖，進(jìn)而促進(jìn)菌落在牙齒表面聚集，形成牙菌斑生物膜，最終導(dǎo)致齲變[5]。隨著益生菌療法在治療胃腸道感染疾病方面的優(yōu)勢(shì)越來(lái)越明顯，這種治療方式也逐漸應(yīng)用到口腔醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，Caglar等[6]研究表明，在3周內(nèi)連續(xù)飲用含有羅伊氏乳桿菌的水或口服羅伊氏乳桿菌片劑均能夠有效地減少試驗(yàn)對(duì)象唾液中的齲齒致病菌變異鏈球菌的數(shù)量，進(jìn)而降低齲病的風(fēng)險(xiǎn)。Campus等[7]的研究也表明，對(duì)齲齒高風(fēng)險(xiǎn)的學(xué)齡前兒童連續(xù)6周服用短乳酸桿菌能減少菌斑的產(chǎn)酸能力和唾液變異鏈球菌的計(jì)數(shù)，目前證據(jù)均支持益生菌可以抑制齲病致病菌的繁殖，從而達(dá)到防治齲齒的目的。

早期齲損可出現(xiàn)在牙釉質(zhì)的表層，肉眼觀(guān)察與正常釉質(zhì)無(wú)明顯差異，而且由于早期齲損尚未空洞化，無(wú)法進(jìn)行材料充填，最理想的治療方法是促使組織再礦化[8]。齲損部位再礦化是指已經(jīng)脫礦的組織內(nèi)礦物質(zhì)的重新沉淀并且結(jié)晶化，氟離子(F-)能幫助牙釉質(zhì)羥基磷灰石(HAP)結(jié)晶的沉積和生長(zhǎng)，提高HAP熱力學(xué)穩(wěn)定性，起到促進(jìn)礦化和再礦化的效果，而準(zhǔn)確和簡(jiǎn)便的檢測(cè)手段是早期處理的基礎(chǔ)。QLF可以通過(guò)探測(cè)釉質(zhì)脫鈣來(lái)診斷初期齲，是一種評(píng)價(jià)未成空洞改變的牙釉質(zhì)礦物質(zhì)輕微改變的可靠方法[9]，由于該技術(shù)能檢測(cè)到亞臨床的改變，有助于縮短研究間期和減少病例樣本量，因此研究費(fèi)用相應(yīng)降低。

本研究嘗試性地探索益生菌的補(bǔ)充能否影響牙釉質(zhì)的礦物質(zhì)含量，結(jié)果表明3個(gè)月的益生菌療法有利于促進(jìn)早期牙釉質(zhì)齲損部位的再礦化進(jìn)程，熒光輻射率的改變較安慰劑明顯增加，但病變面積的改變并不顯著，可能與治療時(shí)間偏短有關(guān)，隨著時(shí)間的推移病變面積的大小應(yīng)會(huì)出現(xiàn)變化[10]；也可能與本研究檢驗(yàn)效能可能不足有關(guān)，由于早期招募患者比較困難，本研究樣本量較少，而且兩組均有部分患兒未能按時(shí)復(fù)診或檢查結(jié)果無(wú)法讀數(shù)，都可能對(duì)研究結(jié)論產(chǎn)生影響。益生菌在口腔的起效原理目前尚未完全明晰，一般認(rèn)為其通過(guò)細(xì)菌素沉淀和競(jìng)爭(zhēng)性抑制起作用[11]。益生菌的補(bǔ)充有利于控制口腔生物膜的酸性環(huán)境，在一定程度上抵消齲齒形成過(guò)程中嗜酸菌的過(guò)度生長(zhǎng)，促進(jìn)齲齒損傷的牙釉質(zhì)表面再次礦物質(zhì)化，同時(shí)益生菌對(duì)全身的免疫功能調(diào)節(jié)作用也值得重視，其細(xì)胞壁的主要成分是多糖、脂磷壁酸和肽聚糖，是益生菌對(duì)宿主發(fā)揮其免疫調(diào)節(jié)作用的物質(zhì)基礎(chǔ)[12-13]。

益生菌預(yù)防和治療齲齒目前尚處于起步階段，還有很多不足之處或疑問(wèn)同樣值得重視：①合適的益生菌種目前尚未達(dá)成共識(shí)：合適的益生菌不僅要能夠抑制變異鏈球菌等菌種的生長(zhǎng)，還需要具有一定的合成胞外多糖的能力，有助于口腔益生菌的自聚集或與其他微生物聚集，此外對(duì)其耐受溶菌酶、過(guò)氧化氫和殘留抗生素的能力有一定要求。因此部分學(xué)者們傾向于從人體自身篩選出益生菌。Simark-Mattsson等[14]從健康人的口腔中篩選出23株能抑制變形鏈球菌生長(zhǎng)的乳桿菌，并指出其中干酪乳桿菌(Lactobacillus casei)、植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)、鼠李糖乳桿菌(Lactobacillus rhamnosus)的抑菌效果最好。我國(guó)學(xué)者楊娟等[15]自行研究分離出Y29發(fā)酵乳桿菌菌株，該菌能夠抑制變異鏈球菌的生長(zhǎng)，并有自聚集和與其他口腔微生物共聚集形成生物膜的能力，還可以耐受1.0 mg/ml溶菌酶和140 μg/g過(guò)氧化氫，具有很好的應(yīng)用前景。②如何選擇合適的益生菌載體：在治療口腔疾病中，不僅乳酸菌菌種的選擇很重要，不同類(lèi)型的治療方法也同樣重要，因?yàn)橹挥惺褂煤?jiǎn)單而實(shí)用的治療方法才能更好地預(yù)防和治療口腔疾病，如漱口水就是一種較好的選擇，此外牙膏、口香糖等介質(zhì)為也是目前研究的方向。③盡管益生菌治療齲齒的作用已經(jīng)得到很多研究證實(shí)，但到目前為止美國(guó)、歐盟等國(guó)仍未對(duì)上述作用給予證實(shí)批準(zhǔn)，臨床上不可將益生菌療法作為齲齒主要或唯一的治療手段，以致延誤病情。

綜上所述，口服益生菌有利于早期齲損部位再礦化，但與安慰劑比較暫未見(jiàn)明顯優(yōu)勢(shì)，益生菌種類(lèi)和療程需要進(jìn)一步的研究探索。

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R781.1

B

1003—6350（2016）02—0310—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.02.049

2015-08-25)

軍隊(duì)齲病防治研究全軍“十五”重點(diǎn)課題2000-2005年（編號(hào)：012089）

肖梅。E-mail：xiaomqa@163.com