孕婦七項(xiàng)血液指標(biāo)診斷東南亞型α-地中海貧血的價(jià)值

譚冬梅，許芳梅，葉志權(quán)，吳普昭，鄔瑞霞

(廣州市番禺區(qū)中心醫(yī)院檢驗(yàn)科1、婦產(chǎn)科2，廣東 廣州 511400)

孕婦七項(xiàng)血液指標(biāo)診斷東南亞型α-地中海貧血的價(jià)值

譚冬梅1，許芳梅1，葉志權(quán)1，吳普昭1，鄔瑞霞2

(廣州市番禺區(qū)中心醫(yī)院檢驗(yàn)科1、婦產(chǎn)科2，廣東 廣州 511400)

目的 評(píng)價(jià)測(cè)定血紅蛋白A2(HbA2)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(RBC)、血紅蛋白(Hb)、平均紅細(xì)胞體積(MCV)、紅細(xì)胞分布寬度變異系數(shù)(RDW-CV)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)與血紅蛋白比值(RBC/Hb)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)平均紅細(xì)胞體積比值(RBC/MCV)七項(xiàng)指標(biāo)診斷東南亞型α-地中海貧血孕婦的價(jià)值。方法回顧性分析2010年6月23日至2014年11月10日期間于廣州市番禺區(qū)中心醫(yī)院進(jìn)行α-地中海貧血基因檢測(cè)且年齡段在18至30歲的女性資料共172例，所有受檢者根據(jù)檢測(cè)結(jié)果分為健康孕婦組(n=47)、--SEA/αα孕婦組(n=55)、--SEA/αα非孕婦組(n=34)及其他貧血孕婦組(n=36)四組，各組均數(shù)間的比較采用獨(dú)立樣本的t檢驗(yàn)，并采用ROC曲線(xiàn)對(duì)七項(xiàng)指標(biāo)的準(zhǔn)確性進(jìn)行評(píng)價(jià)。結(jié)果(1)--SEA/αα孕婦組與健康孕婦組的七項(xiàng)指標(biāo)比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；(2)MCV、RBC/Hb兩項(xiàng)指標(biāo)在--SEA/αα孕婦組與--SEA/αα非孕婦組間比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；(3)--SEA/αα孕婦組RBC、Hb、MCV、RBC/Hb、RBC/MCV五項(xiàng)指標(biāo)與其他貧血孕婦組比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；(4)HbA2、RBC、MCV、Hb、RDW-CV、RBC/Hb、RBC/MCV七項(xiàng)指標(biāo)的曲線(xiàn)下面積(AUC)分別為0.795、0.880、1.000、0.910、0.925、1.000、0.991；靈敏度分別為0.579、0.855、1.000、0.872、0.982、1.000、0.945；特異度分別為0.852、0.745、1.000、0.800、0.892、1.000、0.957；陽(yáng)性預(yù)測(cè)值分別為0.741、0.796、1.000、0.880、0.915、1.000、0.981；陰性預(yù)測(cè)值分別為0.733、0.813、1.000、0.788、0.916、0.959、0.938。結(jié)論根據(jù)不同群體選擇不同血液指標(biāo)可有效篩查出妊娠合并--SEA/αα患者，但HbA2在孕婦這個(gè)群體中的診斷價(jià)值不高，不能進(jìn)行有效診斷，應(yīng)避免單獨(dú)檢測(cè)。

東南亞型；α-地中海貧血；血紅蛋白；紅細(xì)胞；平均紅細(xì)胞體積；紅細(xì)胞分布寬度變異系數(shù)

α-地中海貧血是由于珠蛋白基因缺失或突變導(dǎo)致的α珠蛋白鏈減少或缺如所致的一種遺傳性溶血性貧血。東南亞型α-地中海貧血(以下簡(jiǎn)稱(chēng)“--SEA/αα”)是其中一種缺失2個(gè)α基因的輕型α-地貧，是最常見(jiàn)的一種輕型α-地貧[1]。夫婦雙方均為--SEA/αα基因攜帶者時(shí)可能出現(xiàn)由于基因缺失而導(dǎo)致的妊娠晚期死胎或新生兒死亡，因此孕婦--SEA/αα篩查的產(chǎn)前篩查顯得尤為重要[2]。對(duì)孕期夫婦的盡早明確生育地貧患兒的風(fēng)險(xiǎn)，是對(duì)地貧防控的最有效手段。本文通過(guò)回顧性分析--SEA/αα孕婦血紅蛋白A2(HbA2)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(RBC)、血紅蛋白(Hb)、平均紅細(xì)胞體積(MCV)、紅細(xì)胞分布寬度變異系數(shù)(RDW-CV)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)與血紅蛋白比值(RBC/Hb)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)平均紅細(xì)胞體積比值(RBC/MCV)，評(píng)價(jià)該七項(xiàng)血液指標(biāo)在篩查孕婦--SEA/αα貧血方面的價(jià)值，為臨床提供依據(jù)，提高孕婦中--SEA/α α貧血篩查的診斷準(zhǔn)確率。

1 資料與方法

1.1 一般資料 在番禺區(qū)中心醫(yī)院進(jìn)行α--地中海貧血基因篩查且年齡段在18～30歲共172例女性的檢測(cè)數(shù)據(jù)，根據(jù)檢測(cè)結(jié)果分為以下四組：(1)--SEA/αα孕婦55例，排除合并缺鐵性貧血；(2)健康孕婦47例，無(wú)貧血，無(wú)缺鐵，無(wú)地貧；(3)--SEA/αα非孕婦34例；(4)其他貧血孕婦36例，即血常規(guī)示貧血，地貧基因檢測(cè)未見(jiàn)異常的孕婦。收集各組HbA2、RBC、Hb等七項(xiàng)血液指標(biāo)數(shù)據(jù)。

1.2 主要儀器與試劑 Genen Amp System 9600 PCR基因擴(kuò)增儀、DYY-6C電泳儀、GELDOCXR+凝膠成像分析系統(tǒng)、深圳亞能生物技術(shù)有限公司提供的全血DNA快速提取試劑盒、α-地中海貧血基因檢測(cè)試劑盒、Capillarys sebia2血紅蛋白電泳儀，XS-5000血細(xì)胞分析儀。

1.3 α-地中海貧血基因檢測(cè)方法 抽取靜脈血3 ml加入含有抗凝劑的紫色血常規(guī)管中，用深圳亞能生物技術(shù)有限公司提供的全血DNA快速提取試劑盒提取人基因組DNA。應(yīng)用跨越斷裂點(diǎn)PCR(GAP-PCR)的技術(shù)原理進(jìn)行檢測(cè)，即在待檢的缺失基因片段引物進(jìn)行擴(kuò)增，再通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳，根據(jù)電泳片段大小判斷檢測(cè)樣品的基因型。

1.4 血紅蛋白分析 運(yùn)用毛細(xì)管血紅蛋白電泳的原理于法國(guó)sebia公司生產(chǎn)的Capillarys sebia2全自動(dòng)血紅蛋白電泳儀上檢測(cè)，檢測(cè)樣品中HbA2的含量。

1.5 血細(xì)胞分析 采用日本SYSMEX-XE-5000血細(xì)胞分析儀檢測(cè)樣品中RBC、Hb、MCV、RDW-CV、RBC/Hb比值、RBC/MCV比值等指標(biāo)。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以均值±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，各組均數(shù)間的比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，以P＜0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。以基因診斷結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，通過(guò)受試者工作曲線(xiàn)(ROC)評(píng)價(jià)七項(xiàng)指標(biāo)對(duì)孕婦東南亞型α-地中海貧血篩查的價(jià)值。

2 結(jié) 果

2.1 各組血細(xì)胞分析結(jié)果 --SEA/αα孕婦組與健康孕婦組相比，七項(xiàng)指標(biāo)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，--SEA/αα孕婦組與--SEA/αα非孕婦組相比，MCV、RBC/Hb兩項(xiàng)指標(biāo)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，而--SEA/ αα孕婦組與其他貧血孕婦組相比，RBC、Hb、MCV、RBC/Hb、RBC/MCV五項(xiàng)指標(biāo)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見(jiàn)表1。

2.2 ROC曲線(xiàn) 對(duì)--SEA/αα孕婦組和健康孕婦組測(cè)定結(jié)果進(jìn)行分析，以敏感性為縱坐標(biāo)，以(1-特異性)為橫坐標(biāo)，作圖繪成ROC曲線(xiàn)。各指標(biāo)的ROC曲線(xiàn)如圖1、圖2所示。

2.3 各項(xiàng)指標(biāo)診斷--SEA/αα的性能評(píng)價(jià) 根據(jù)圖1、圖2，我們將ROC曲線(xiàn)所得的各項(xiàng)評(píng)價(jià)指標(biāo)結(jié)果繪制成表格，見(jiàn)表2。曲線(xiàn)下面積RBC/Hb=MCV＞RBC/ MCV＞RDW-CV＞RBC＞HbA2；靈敏度：RBC/Hb=MCV＞RDW-CV＞RBC/MCV＞Hb＞RBC＞HbA2；特異度：RBC/ Hb=MCV＞RBC/MCV＞RDW-CV＞Hb＞HbA2＞RBC：陽(yáng)性預(yù)測(cè)值：RBC/Hb=MCV＞RBC/MCV＞RDW-CV＞Hb＞RBC＞HbA2；陰性預(yù)測(cè)值：MCV＞RBC/Hb＞RBC/MCV＞RDW-CV＞RBC＞Hb＞HbA2。

表1 各組血細(xì)胞分析結(jié)果(±s)

表1 各組血細(xì)胞分析結(jié)果(±s)

注：a表示--SEA/αα孕婦組與健康孕婦組相比較，P＜0.05；b表示--SEA/αα孕婦組與--SEA/αα非孕婦組相比較，P＜0.05；c表示--SEA/αα孕婦組與其他貧血孕婦組相比較，P＜0.05。

組別--SEA/αα孕婦組(n=55)健康孕婦組(n=47) --SEA/αα非孕婦組(n=34)其他貧血孕婦組(n=36) HbA2(%) 2.44±0.21a2.80±0.34 2.40±0.31 2.52±0.33 RBC(1012/L) 4.95±0.50ac4.21±0.38 5.17±0.72 4.07±0.47 Hb(g/L) 108.38±10.35ac126.91±9.67 109.47±16.61 99.36±11.05 MCV(fl) 69.11±3.23abc90.89±5.08 67.24±4.51 78.99±8.46 RDW-CV(%) 15.49±1.33a12.92±1.42 15.97±2.74 16.24±2.84 RBC/Hb(1012/g) 0.045±0.0016abc0.033±0.0021 0.047±0.0032 0.041±0.0055 RBC/MCV(10-3/L2) 0.082±0.005 0.047±0.0061 0.077±0.013 0.052±0.0017

圖1 HbA2、MCV、Hb的ROC曲線(xiàn)

圖2 RBC、RDW-CV、RBC/Hb、RBC/MCV的ROC曲線(xiàn)

表2 各項(xiàng)指標(biāo)診斷--SEA/αα的性能評(píng)價(jià)

3 討 論

--SEA/αα地中海貧血HbA2值多處于正常范圍的低值，一些在妊娠中常發(fā)生貧血的如缺鐵性貧血，HbA2值同樣處于正常范圍的低值，因此臨床上難以用HbA2值對(duì)兩者進(jìn)行鑒別。本文結(jié)果顯示：--SEA/αα孕婦組的HbA2低于健康孕婦組，在與--SEA/αα非孕婦組及其他貧血孕婦組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。另外根據(jù)以上統(tǒng)計(jì)結(jié)果，可知HbA2的曲線(xiàn)下面積為0.795，相比其余六項(xiàng)指標(biāo)，其靈敏度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值等均不高，證明其對(duì)于孕婦--SEA/αα的診斷價(jià)值相對(duì)其余六個(gè)指標(biāo)是最低的。有資料顯示，HbA2值對(duì)靜止型或標(biāo)準(zhǔn)型α-地中海貧血患者的檢出率低，陽(yáng)性率僅為35%[7]，這與本文統(tǒng)計(jì)結(jié)果相符。若按傳統(tǒng)的地中海貧血篩查只作血紅蛋白電泳HbA2值檢測(cè)，則極易漏診。因此，在篩查地中海貧血時(shí)，不能單靠HbA2值檢測(cè)[3]，要結(jié)合其他指標(biāo)，才能提高篩查準(zhǔn)確率。

--SEA/αα孕婦組分別與健康孕婦組、其他貧血孕婦組相比，RBC、MCV、Hb三項(xiàng)指標(biāo)差異最為明顯，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，組間差距基本上不存在重疊。這是由于--SEA/αα地中海貧血病血紅蛋白生成障礙，直接影響紅細(xì)胞數(shù)量和質(zhì)量，所以有關(guān)血紅蛋白及紅細(xì)胞檢查指標(biāo)改變較為明顯。通過(guò)比較各指標(biāo)的AUC、RBC、MCV、Hb三項(xiàng)指標(biāo)的的診斷價(jià)值均比較高，綜合比較，最好的是MCV(AUC=1.000)，其次是Hb (AUC=0.910)，再者是RBC(AUC=0.880)。因此，此三項(xiàng)指標(biāo)可作為孕婦--SEA/αα型地中海貧血篩查的重要指標(biāo)[5]。但在--SEA/αα孕婦組與--SEA/αα非孕組之間，上述三項(xiàng)指標(biāo)中只有MCV差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。--SEA/αα孕婦比--SEA/αα非孕婦MCV增大。就是說(shuō)--SEA/αα婦女懷孕后，MCV會(huì)增大，如果我們單采用MCV作為篩查標(biāo)準(zhǔn)，孕婦比非孕婦漏篩概率增大。故此，孕婦--SEA/αα地貧不能單靠HbA2值和MCV值，要結(jié)合其他指標(biāo)，減少漏檢[1]。--SEA/αα孕婦組的RBC、Hb兩項(xiàng)指標(biāo)均高于其他原因貧血孕婦組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說(shuō)明其他原因引起的貧血較--SEA/αα地貧引起的貧血的程度大。--SEA/αα孕婦組的MCV值低于其他原因貧血孕婦組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說(shuō)明--SEA/αα地貧的小細(xì)胞程度比其他原因引起的貧血大。這可能與其他原因引起的貧血組的種類(lèi)較多有關(guān)。

RDW-CV是反映紅細(xì)胞異質(zhì)性的重要指標(biāo)，表示紅細(xì)胞形態(tài)改變的程度，與健康孕婦組相比，--SEA/αα孕婦組的RDW-CV較大，而在--SEA/αα孕婦組與--SEA/αα非孕組之間，--SEA/αα孕婦組與其他貧血孕婦組之間，此指標(biāo)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這與其他文獻(xiàn)結(jié)論不符，這可能與本文所統(tǒng)計(jì)的孕婦其他原因貧血的種類(lèi)較多和本研究人群為孕婦有關(guān)。在ROC曲線(xiàn)圖上其曲線(xiàn)下面積達(dá)0.925，并且靈敏度、特異度等均大于0.9，可作為--SEA/αα孕婦組與健康孕婦組鑒別的一個(gè)重要指標(biāo)。

RBC/Hb是指單位血紅蛋白含量的紅細(xì)胞數(shù)，代表紅細(xì)胞反應(yīng)性增生的程度與細(xì)胞低色素程度的關(guān)系，而RBC/MCV是指單位平均紅細(xì)胞體積的紅細(xì)胞數(shù)，代表紅細(xì)胞反應(yīng)性增生的程度與小細(xì)胞程度的關(guān)系，將--SEA/αα孕婦組分別與健康孕婦組及其他貧血孕婦組相比，此兩項(xiàng)指標(biāo)均表現(xiàn)為增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說(shuō)明在孕婦發(fā)生--SEA/αα地中海貧血時(shí)，紅細(xì)胞反應(yīng)性增生程度大于細(xì)胞色素下降程度以及細(xì)胞平均體積減少程度。而與--SEA/αα非孕組相比，--SEA/αα孕婦組的RBC/Hb則表現(xiàn)為降低，可能是由于妊娠期間胎兒生長(zhǎng)發(fā)育、血容量增加，對(duì)營(yíng)養(yǎng)的攝取不足，RBC及Hb相對(duì)降低，--SEA/αα孕婦RBC下降程度較Hb下降程高所致。由于這兩項(xiàng)指標(biāo)的AUC值均大于0.9，診斷準(zhǔn)確性較高，因此可以作為--SEA/αα孕婦與--SEA/αα非孕婦之間優(yōu)良的篩查指標(biāo)。

綜上所述，結(jié)果顯示孕婦和非孕婦的血液學(xué)指標(biāo)存在明顯差異。通過(guò)--SEA/αα孕婦與健康孕婦、--SEA/αα非孕婦及其他原因貧血孕婦之間的比較，我們可以掌握不同群體間差異最顯著的指標(biāo)，重新為孕婦建立相關(guān)的血液學(xué)篩查指標(biāo)的標(biāo)準(zhǔn)。這有益于提高孕婦東南亞型α-地中海貧血篩查鑒別能力，且具備方便、快捷、成本低廉的特點(diǎn)，符合初篩指標(biāo)原則[6]。各實(shí)驗(yàn)室可自行建立本實(shí)驗(yàn)室的的鑒別指標(biāo)參考值，可更大的提高篩查的準(zhǔn)確性。

[1]喻晶,張戀.孕婦珠蛋白生成障礙性貧血的臨床血液學(xué)篩查指標(biāo)分析[J].現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2013,28(1):138-140.

[2]毛錦江.血細(xì)胞分析對(duì)妊娠合并地中海貧血篩查的價(jià)值[J].中國(guó)婦幼健康研究,2010,21(4):498-500.

[3]黃瑛,郭柳薇.東南亞缺失型地中海貧血的臨床血液學(xué)分析[J].實(shí)用性婦產(chǎn)科雜志,2009,25(8):504-505.

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Value of seven blood indicators for the diagnosis of pregnancy with Southeast Asian type α-thalassemia.

TAN Dong-mei1,XU Fang-mei1,YE Zhi-quan1,WU Pu-zhao1,WU Rui-xia2.Department of Clinical Laboratory1, Department of Obstetrics and Gynecology2,Guangzhou Panyu Central Hospital,Guangzhou 511400,Guangdong,CHINA

ObjectiveTo evaluate the clinical value of hemoglbbin A2(HbA2),red blood cell(RBC),hemoglbbin(Hb),mean corpuscular volume(MCV),red blood cell distribution width-coefficient of variation(RDW-CV), ratio of RBC to Hb,ratio of RBC to MCV in the screening of Southeast Asian type α-thalassemia during pregnancy.MethodsThe clinical data of 172 women(aged 18～30 years old)who received α-thalassemia gene detection in our hospital from June 23,2010 to November 10,2014 were retrospectively analyzed.According to test results,the subjects were divided into four groups:47 cases of healthy pregnant women(healthy pregnant group),55 cases of--SEA/αα pregnant women(--SEA/αα pregnant group),34 cases of--SEA/αα non-pregnant women(--SEA/αα non-pregnant group), and 36 cases of pregnant women with other types of anemia(anemia pregnant group).Each group were detected and analyzed by independent-samples t-test.ROC curves were used to evaluate the accuracy of the seven indicators.Results(1)--SEA/αα pregnant group and healthy pregnant group showed no statistically significant difference in the seven indicators(P＜0.05).(2)--SEA/αα pregnant group and--SEA/αα non-pregnant group showed statistically significant difference in MCV,RBC/Hb(P＜0.05).(3)--SEA/αα pregnant group and anemia pregnant group had statistically significant difference in RBC,Hb,MCV,RBC/Hb,RBC/MCV(P＜0.05).(4)The area under the curve(AUC)of HbA2,RBC,MCV, Hb,RDW-CV,RBC/Hb,RBC/MCV were 0.795,0.880,1.000,0.910,0.925,1.000,0.991.The sensitivity was 0.579, 0.855,1.000,0.872,0.982,1.000,0.945,and the specificity was 0.852,0.745,1.000,0.800,0.892,1.000,0.957,respectively.The positive predictive values were 0.741,0.796,1.000,0.880,0.915,1.000,0.981,and the negative predictive values were 0.733,0.813,1.000,0.788,0.916,0.959,0.938.ConclusionChoosing different blood parameters based on different groups can effectively screen out patients of pregnancy with--SEA/αα.The diagnostic value of HbA2in this group of pregnant women is not high,which can not diagnose effectively and should be avoided to be detected alone.

Southeast Asian type;α-thalassemia;Hemoglobin;Red blood cell;Mean corpuscular volume;Red idth-coefficient of variation

R556

A

1003—6350（2016）05—0760—04

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.05.025

2015-04-17)

譚冬梅。E-mail：tuutuu7868@163.com