新發(fā)腦膠質(zhì)瘤患者細(xì)胞免疫功能與腫瘤WHO分級的關(guān)系

鄧騰莫立根陳海南曾先捷

作者單位：530021 南寧 廣西醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院1骨軟組織神經(jīng)外科，2頭頸外科

臨床研究

新發(fā)腦膠質(zhì)瘤患者細(xì)胞免疫功能與腫瘤WHO分級的關(guān)系

鄧騰1莫立根1陳海南1曾先捷2

作者單位：530021 南寧 廣西醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院1骨軟組織神經(jīng)外科，2頭頸外科

目的探討新發(fā)腦膠質(zhì)瘤患者外周血細(xì)胞免疫功能與腫瘤WHO分級的關(guān)系，為腦膠質(zhì)瘤的綜合治療提供依據(jù)。方法應(yīng)用流式細(xì)胞技術(shù)檢測92例新發(fā)腦膠質(zhì)瘤患者術(shù)前外周血細(xì)胞免疫功能，用Spearman等級相關(guān)分析細(xì)胞免疫功能與術(shù)后病理分級的相關(guān)關(guān)系。結(jié)果腦膠質(zhì)瘤WHO分級不同組間CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、CD16+CD56+及CD19+的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），各項(xiàng)指標(biāo)與腫瘤WHO分級無等級相關(guān)關(guān)系。結(jié)論新發(fā)腦膠質(zhì)瘤患者外周血細(xì)胞免疫功能與腫瘤WHO分級無等級相關(guān)關(guān)系，尚不能用于術(shù)前區(qū)分低級別與高級別膠質(zhì)瘤。

腦膠質(zhì)瘤；細(xì)胞免疫；WHO腫瘤分級

腦膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)最常見的原發(fā)性腫瘤，目前根據(jù)WHO神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤分級將腦膠質(zhì)瘤劃分為低級別腦膠質(zhì)瘤（I～Ⅱ級）和高級別腦膠質(zhì)瘤（Ⅲ～Ⅳ級）［1］。對于腦膠質(zhì)瘤發(fā)生和發(fā)展的具體機(jī)制目前仍不明確。有研究表明［2］，腦膠質(zhì)瘤惡性程度越高，細(xì)胞免疫功能越低，提示免疫功能異常是腦膠質(zhì)瘤進(jìn)展的原因之一。然而，目前國內(nèi)外相關(guān)研究較少，免疫功能異常是否與腦膠質(zhì)瘤發(fā)展密切相關(guān)仍需進(jìn)一步研究［3］。本研究通過檢測新發(fā)腦膠質(zhì)瘤患者外周血細(xì)胞免疫功能，探討細(xì)胞免疫功能與腦膠質(zhì)瘤WHO分級的關(guān)系。

1 材料和方法

1.1 臨床資料

回顧性分析2010年8月至2016年7月廣西醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院神經(jīng)外科手術(shù)治療的新發(fā)腦膠質(zhì)瘤患者92例。其中男性60例，女性32例，年齡11～78歲，平均年齡44.9歲。按WHO分級標(biāo)準(zhǔn)低級別腦膠質(zhì)瘤36例，其中I級2例（病理類型為毛細(xì)胞型星形細(xì)胞瘤），Ⅱ級34例（病理類型為彌漫性星形細(xì)胞瘤，室管膜瘤，少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤）；高級別腦膠質(zhì)瘤56例，其中Ⅲ級32例（病理類型為間變型星形細(xì)胞瘤，間變型少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤，間變型室管膜瘤），Ⅳ級24例（病理類型為膠質(zhì)母細(xì)胞瘤），見表1。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）術(shù)后病理明確為腦膠質(zhì)瘤病變；（2）無長期營養(yǎng)不良、無結(jié)核、無惡性腫瘤手術(shù)、未行放化療、無器官移植，無重大創(chuàng)傷及燒傷病史；（3）手術(shù)前進(jìn)行細(xì)胞免疫功能檢測；（4）采血前均未使用抗癲癇藥物及激素。入院后第二天清晨采集2 mL肝素抗凝外周血液，采血前未使用靜脈輸液及口服藥物。

表1 92例腦膠質(zhì)瘤患者的臨床資料

1.2 儀器和試劑

流式細(xì)胞儀（BD influx）、免疫熒光抗體試劑盒均購自Becton Dickinson公司。

1.3 方法

采用流式細(xì)胞術(shù)檢測患者外周血液中的總T淋巴細(xì)胞（CD3+）、輔助性淋巴細(xì)胞（CD4+）、抑制性淋巴細(xì)胞（CD8+）、Th/Ts（CD4+/CD8+）、自然殺傷細(xì)胞（CD16+CD56+）及B淋巴細(xì)胞（CD19+）等指標(biāo)。按操作程序上機(jī)檢測。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（s）表示，腦膠質(zhì)瘤WHO分級不同組間細(xì)胞免疫功能的比較采用方差分析；用Spearman等級相關(guān)分析細(xì)胞免疫功能與腦膠質(zhì)瘤WHO分級的相關(guān)關(guān)系。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

不同腦膠質(zhì)瘤WHO分級組間CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、CD16+CD56+及CD19+的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表2。腦膠質(zhì)瘤患者細(xì)胞免疫功能與腫瘤WHO分級的關(guān)系經(jīng)Spearman等級相關(guān)檢驗(yàn)，結(jié)果顯示CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、CD16+CD56+及CD19+與腫瘤WHO分級無等級相關(guān)關(guān)系，見表3。

表2 不同WHO分級腦膠質(zhì)瘤患者細(xì)胞免疫功能檢測結(jié)果（s）

表2 不同WHO分級腦膠質(zhì)瘤患者細(xì)胞免疫功能檢測結(jié)果（s）

不同WHO分級組間比較：P＜0.05

WHO分級 CD3+（%） CD4+（%） CD8+（%） CD4+/CD8+CD16+CD56+（%） CD19+（%）Ⅰ級 66.25±18.46 42.70±12.59 18.40±0.28 2.30±0.71 19.40±0.71 7.55±6.72Ⅱ級 67.04±10.37 36.00±8.65 24.18±7.21 1.62±0.55 13.70±6.96 11.898±5.90Ⅲ級 63.26±13.58 34.25±11.23 22.78±8.83 1.71±0.78 12.71±7.43 14.02±8.91Ⅳ級 65.82±9.77 36.47±12.39 21.88±11.46 2.22±1.55 11.82±6.08 13.68±6.91 F 0.61 0.53 0.50 2.07 0.95 0.89 P 0.612 0.661 0.684 0.109 0.422 0.448

表3 細(xì)胞免疫功能與腫瘤WHO分級的Spearman等級相關(guān)分析結(jié)果

（續(xù)表）

3 討論

腦膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)最常見的原發(fā)性腫瘤,預(yù)后較差。盡管采用了手術(shù)切除、放療及化療等綜合治療，但高級別腦膠質(zhì)瘤患者的中位生存期仍少于15個(gè)月［4-5］。有研究［6-9］發(fā)現(xiàn)腦膠質(zhì)瘤患者免疫功能明顯減低，提示免疫治療可能是改善其預(yù)后的手段之一。Gousias等［2］研究顯示，WHO分級升高與外周血CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+下降明顯相關(guān)，提示外周血細(xì)胞免疫功能監(jiān)測可反映患者病情嚴(yán)重程度，高級別腦膠質(zhì)瘤患者免疫功能損害更加嚴(yán)重。然而，本組研究卻發(fā)現(xiàn)新發(fā)腦膠質(zhì)瘤患者腫瘤WHO分級不同組間CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、CD16+CD56+及CD19+的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，相關(guān)分析提示新發(fā)腦膠質(zhì)瘤患者外周血細(xì)胞免疫功能與腫瘤分級無等級相關(guān)關(guān)系。出現(xiàn)與上述研究結(jié)果不一致的原因可能有：（1）兩個(gè)研究中的研究對象來源于不同種族，不排除不同種族的患者其免疫功能狀態(tài)存在差異的可能；（2）外周血細(xì)胞免疫功能容易受到各種因素的影響，如營養(yǎng)不良、感染、使用免疫抑制劑、放療、手術(shù)、創(chuàng)傷、燒傷和脾切除等。

本研究結(jié)果提示腦膠質(zhì)瘤患者外周血細(xì)胞免疫功能與WHO等級無關(guān)，其中可能的原因有如下幾點(diǎn)：（1）本研究納入的研究對象為新發(fā)腦膠質(zhì)瘤患者，大部分患者發(fā)病時(shí)間較短，可能腫瘤生長尚未形成對血腦屏障的嚴(yán)重破壞，腫瘤抗原未能進(jìn)入淋巴循環(huán)誘導(dǎo)免疫應(yīng)答，這可能是其主要原因。（2）外周血免疫功能尚不能真實(shí)反映腫瘤微環(huán)境中的機(jī)體免疫功能狀態(tài)。Nimmerjahn等［10］研究發(fā)現(xiàn)在腦膠質(zhì)瘤發(fā)展的初期，小膠質(zhì)細(xì)胞可獲取腦膠質(zhì)瘤相關(guān)抗原。雖然活化的小膠質(zhì)細(xì)胞在感染性疾病或損傷時(shí)具有較強(qiáng)的免疫功能，但在腦膠質(zhì)瘤的微環(huán)境中卻難以啟動(dòng)抗腫瘤免疫應(yīng)答。Heimberger等［11］研究發(fā)現(xiàn)高級別腦膠質(zhì)瘤微環(huán)境中存在大量免疫抑制性調(diào)節(jié)性T細(xì)胞，腦膠質(zhì)瘤中調(diào)節(jié)性T細(xì)胞浸潤程度與腫瘤來源、病理分級密切相關(guān)，調(diào)節(jié)性T細(xì)胞是引起腫瘤免疫逃逸的重要原因。因此研究腫瘤微環(huán)境中各種免疫細(xì)胞功能狀況，可能能夠如實(shí)反映患者抗腫瘤免疫功能情［12-13］。（3）納入研究的樣本例數(shù)較少。本研究顯示的一些免疫功能指標(biāo)，比如CD16+CD56+，其隨著WHO腫瘤分級升高而出現(xiàn)降低趨勢，如果納入更多研究對象，則可能會(huì)得到有意義的結(jié)果。（4）本研究納入的研究例數(shù)，特別是某些級別的患者例數(shù)較少，可能存在偏倚。新發(fā)腦膠質(zhì)瘤患者進(jìn)行術(shù)前免疫功能檢測尚不能幫助區(qū)別低級別及高級別腦膠質(zhì)瘤，但這仍需要今后納入更大樣本的研究加以證實(shí)。

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［2016-08-26收稿］［2016-11-21修回］［編輯 江德吉］

Correlation between cellular immunity and WHO classification of newly diagnosed glioma

Deng Teng1，Mo Ligen1，Chen Hainan1，Zeng Xianjie2（1Department of neurosurgery，2Department of Head and Neck Surgery，Affiliated Tumor Hospital of Guangxi Medical University，Nanning 530021，P.R.China）

Zeng Xianjie.E-mail：zengxianjie@gxmu.edu.cn

ObjectiveTo investigate the cellular immunity status of glioma patients and their correlation with the WHO classification of gliomas.MethodsThe clinical data of 92 patients with newly diagnosed patients analyzed retrospectively.Preoperative cellular immunity was measured by flow cytometry and WHO classification of gliomas were confirmed by postoperative pathology.The correlation between cellular immunity and WHO classification of glioma was analyzed by Spearman's rank correlation coefficient.ResultsNo statistically significant differences were observed concerning CD3+，CD4+，CD8+，CD4+/CD8+，CD16+CD56+or CD19+（P＜0.05）.No significant correlation between cellular immunity and WHO classification of gliomas were observed by Spearman's rank correlation coefficient（P＜0.05）.Conclusions There is no significant correlation between patient's cellular immunity and WHO classification of gliomas.Preoperative cellular immunity test can not differentiate low grade glioma from high grade glioma.

Glioma；Cellular immunity；WHO classification

R739.41

A

1674-5671（2016）06-04

10.3969/j.issn.1674-5671.2016.06.07

廣西自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目（2015GXNSFAA139160）

曾先捷。E-mail：zengxianjie@gxmu.edu.cn