昆蟲學(xué)證據(jù)在死亡時(shí)間推斷中的應(yīng)用

呂 宙，萬立華

（1. 西南政法大學(xué)刑事偵查學(xué)院法化教研室，重慶，401120；

2. 重慶醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院法醫(yī)學(xué)教研室，重慶，400016）

昆蟲學(xué)證據(jù)在死亡時(shí)間推斷中的應(yīng)用

呂 宙1，萬立華2,*

（1. 西南政法大學(xué)刑事偵查學(xué)院法化教研室，重慶，401120；

2. 重慶醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院法醫(yī)學(xué)教研室，重慶，400016）

法醫(yī)昆蟲學(xué)是一門既古老又新興的交叉學(xué)科，死亡時(shí)間（PMI）推斷是法醫(yī)昆蟲學(xué)最主要的實(shí)踐應(yīng)用之一。為闡明昆蟲學(xué)證據(jù)在PMI推斷中的應(yīng)用以及未來該領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)和難點(diǎn)，本文在闡述昆蟲個(gè)體發(fā)育、昆蟲群落演替、昆蟲代謝物質(zhì)以及時(shí)序基因等相關(guān)概念的基礎(chǔ)上，對(duì)近年來國(guó)內(nèi)外在利用法醫(yī)昆蟲學(xué)進(jìn)行PMI推斷領(lǐng)域的研究進(jìn)展進(jìn)行了綜述。此外，本文還總結(jié)了實(shí)踐中需要注意的問題如各種推斷方法的適用范圍、常見的誤區(qū)以及在現(xiàn)場(chǎng)中昆蟲學(xué)證據(jù)的采集技巧等，以期提高基層法醫(yī)工作者的昆蟲學(xué)證據(jù)采集有效性。

法醫(yī)昆蟲學(xué)；死亡時(shí)間推斷；昆蟲個(gè)體發(fā)育；昆蟲群落演替；昆蟲代謝物質(zhì)；時(shí)序基因

法醫(yī)昆蟲學(xué)（forensic entomology）是應(yīng)用昆蟲及其他相關(guān)節(jié)肢動(dòng)物證據(jù)來解決司法實(shí)踐中相關(guān)刑事與民事問題的一門學(xué)科，是一門既古老又新興的交叉學(xué)科。早在南宋時(shí)期，我國(guó)法醫(yī)學(xué)先驅(qū)宋慈就在其著作《洗冤集錄》中提及與昆蟲有關(guān)的法醫(yī)學(xué)知識(shí)和案例多達(dá)15處[1]。近年來，隨著現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，法醫(yī)昆蟲學(xué)迅速發(fā)展。國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)此做了許多相關(guān)研究，主要涉及與法律有關(guān)的節(jié)肢動(dòng)物形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)種屬鑒定，嗜尸性雙翅目與鞘翅目幼蟲生長(zhǎng)發(fā)育規(guī)律，尸體上昆蟲群落演替規(guī)律，環(huán)境對(duì)昆蟲的分布、生長(zhǎng)發(fā)育的影響，以及昆蟲與尸體轉(zhuǎn)移、死亡原因、死亡方式的關(guān)系等[2]。

死亡時(shí)間（time of death，也稱死后經(jīng)歷時(shí)間postmortem interval，PMI）是法醫(yī)學(xué)研究的核心問題之一。在腐敗早期，各種尸體現(xiàn)象以及體液化學(xué)成分變化通常是推斷PMI較為可靠的指標(biāo)。但隨著時(shí)間的推移，當(dāng)尸體高度腐敗后，上述方法往往難以使用[3]，這時(shí)就需要借助法醫(yī)昆蟲學(xué)知識(shí)和方法。PMI推斷是法醫(yī)昆蟲學(xué)的最主要也是最重要的應(yīng)用之一，然而目前我國(guó)還沒有形成統(tǒng)一的命案現(xiàn)場(chǎng)昆蟲學(xué)證據(jù)采集規(guī)程，因此基層法醫(yī)工作者常常因缺乏法醫(yī)昆蟲學(xué)基礎(chǔ)知識(shí)而錯(cuò)誤地采集昆蟲學(xué)證據(jù)或選用錯(cuò)誤的方法。在國(guó)內(nèi)第一部正式的《法醫(yī)昆蟲學(xué)》本科教材[4]出版之際，為闡明昆蟲學(xué)證據(jù)在PMI推斷中的應(yīng)用以及未來該領(lǐng)域研究的焦點(diǎn)和難點(diǎn)，本文在闡述昆蟲個(gè)體發(fā)育、昆蟲群落演替以及昆蟲代謝物質(zhì)、基因表達(dá)等相關(guān)概念的基礎(chǔ)上，對(duì)近年來國(guó)內(nèi)外在利用法醫(yī)昆蟲學(xué)進(jìn)行PMI推斷領(lǐng)域的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，并提出了一些在實(shí)踐中應(yīng)注意的問題。

1 昆蟲個(gè)體發(fā)育與PMI推斷

蠅蛆和甲蟲是動(dòng)物尸體腐敗的兩種重要參與因素，而這兩者之中又以蠅蛆更為重要[5]。由于蠅類在死亡發(fā)生后不久就在尸體上產(chǎn)卵，幼蟲孵出后直接攝食尸體組織，并在尸體上或尸體周圍完成胚后發(fā)育直至最終羽化為成蟲，故蠅類幼蟲的生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)間與實(shí)際死亡時(shí)間具有一定的平行關(guān)系[2]。此外，甲蟲會(huì)因蠅類幼蟲的出現(xiàn)或尸體干化等因素侵襲尸體，并產(chǎn)下捕食性或腐食性幼蟲。甲蟲的幼蟲生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)間雖然較實(shí)際死亡時(shí)間有一定的延遲，但周期卻較蠅類幼蟲更長(zhǎng)。根據(jù)這些昆蟲的個(gè)體發(fā)育規(guī)律，能推斷短至一天以內(nèi)、長(zhǎng)到一個(gè)月以上的PMI[6]。

1.1 根據(jù)未成熟蟲態(tài)發(fā)育形態(tài)學(xué)推斷PMI

絕大部分嗜尸性昆蟲的生長(zhǎng)發(fā)育是一個(gè)包括了卵、幼蟲和蛹三個(gè)階段的完全變態(tài)發(fā)育過程。由于昆蟲在特定的發(fā)育階段擁有一定的形態(tài)學(xué)特征如口器、氣門、棘突等，以及與蟲齡相對(duì)應(yīng)的形態(tài)學(xué)指標(biāo)如體長(zhǎng)、體圍和體重等，因此可以通過這些特征或指標(biāo)推算出相應(yīng)的PMI范圍。

美國(guó)學(xué)者Reiter最早提出利用嗜尸性蠅類幼蟲生長(zhǎng)發(fā)育規(guī)律來推斷PMI的方法[7?8]。他研究了不同恒定溫度下歐洲秋冬季節(jié)最常見的紅頭麗蠅Calliphora vicina幼蟲的生長(zhǎng)發(fā)育規(guī)律，結(jié)果顯示在一定溫度范圍內(nèi)，溫度越高，紅頭麗蠅幼蟲的生長(zhǎng)發(fā)育速度越快，但最大體長(zhǎng)卻會(huì)有所降低。當(dāng)溫度到達(dá)30 ℃以上時(shí)，三齡幼蟲無法化蛹；當(dāng)溫度低于16 ℃時(shí)，幼蟲則進(jìn)入休眠狀態(tài)。對(duì)其他幾種常見的嗜尸性蠅類如絲光綠蠅Lucilia sericata[9]、大頭金蠅Chrysomya megacephala[10]、巨尾阿麗蠅Aldrichina grahami[9]、肥須亞麻蠅Parasacrophaga crassipalpis[9]、伏蠅Phormia regina[11]、新陸原伏蠅Protophormia terraenovae[12]、古銅黑蠅Ophyra aenescens以及開普黑蠅Ophyra capensis[13]等的幼蟲在不同溫度下的生長(zhǎng)發(fā)育研究表明，各種嗜尸性蠅類幼蟲生長(zhǎng)發(fā)育均與Reiter的研究結(jié)果相似，只是不同種屬的生長(zhǎng)發(fā)育適宜溫度范圍存在差異。

上述研究結(jié)果也顯示，不同種屬蠅類的幼蟲體長(zhǎng)、體重等體型指標(biāo)間存在顯著差異。因此，不進(jìn)行種屬鑒定而直接用蠅蛆體長(zhǎng)、體重等指標(biāo)來推斷PMI可能出現(xiàn)極大的偏差，甚至誤導(dǎo)案件偵破方向[14]，而這一點(diǎn)也是廣大基層法醫(yī)工作者在應(yīng)用法醫(yī)昆蟲學(xué)時(shí)最易陷入的誤區(qū)之一。另外，在現(xiàn)場(chǎng)對(duì)蠅類幼蟲樣本處死固定時(shí)，不當(dāng)?shù)奶幚矸椒ㄒ矔?huì)對(duì)標(biāo)本的長(zhǎng)短大小造成影響，最好使用80 ℃左右溫開水燙死幼蟲并置于75 %的酒精中保存[15]。此外，處于進(jìn)食階段的蠅類幼蟲發(fā)育的體長(zhǎng)和體重會(huì)繼續(xù)增長(zhǎng)，但一旦離食準(zhǔn)備化蛹，則其體長(zhǎng)和體重反而有下降的趨勢(shì)，因此處于增長(zhǎng)階段的三齡幼蟲與離食期幼蟲容易相互混淆[16]，造成PMI推斷錯(cuò)誤，這一問題對(duì)于基層法醫(yī)工作者來說尤其需要注意。有鑒于此，部分學(xué)者對(duì)幼蟲期不同蟲齡的形態(tài)學(xué)特征進(jìn)行了進(jìn)一步研究，發(fā)現(xiàn)可根據(jù)幼蟲中腸前段空氣的有無來區(qū)分仍在取食的三齡幼蟲和離食期幼蟲[7]。美國(guó)學(xué)者Greenberg[17]對(duì)伏蠅蛹期進(jìn)行了觀察，發(fā)現(xiàn)蛹?xì)?nèi)的幼蟲也存在階段性體征變化。在此基礎(chǔ)上，我國(guó)學(xué)者王江峰提出使用發(fā)育形態(tài)學(xué)來對(duì)幼蟲期和蛹期進(jìn)行細(xì)化區(qū)分，并認(rèn)為主要可根據(jù)幼蟲口咽器與前后氣門裂的形態(tài)、消化道所占體腔比例以及蛹期幼蟲頭部形態(tài)學(xué)變化等來確定絲光綠蠅[16,18]、大頭金蠅[19?20]、家蠅Musca domestica[21]和巨尾阿麗蠅[22?23]的蟲齡，從而進(jìn)一步確定發(fā)育時(shí)間。近年來，隨著掃描電鏡技術(shù)的進(jìn)步與普及，一些學(xué)者也將其應(yīng)用到了嗜尸性蠅類幼蟲的發(fā)育形態(tài)鑒定上，使得蟲齡的鑒定更加細(xì)微化。泰國(guó)學(xué)者Sukontason等利用掃描電鏡對(duì)醬亞麻蠅Parasarcophaga dux[24]以及瘦葉帶綠蠅Hemipyrellia ligurriens[25]幼蟲的超微結(jié)構(gòu)進(jìn)行了研究。研究結(jié)果顯示，在超微水平上，前后氣門與口咽器的形態(tài)仍然是鑒定蟲齡的金指標(biāo)。

1.2 根據(jù) 幼蟲發(fā)育積溫和發(fā)育歷期推斷PMI

作為變溫動(dòng)物，昆蟲本身代謝產(chǎn)熱較低，其幼蟲需要從外界環(huán)境中獲取足夠熱量來完成生長(zhǎng)發(fā)育過程。所以，幼蟲生長(zhǎng)發(fā)育速度與積溫（thermal accumulation）緊密相關(guān)。積溫是指在規(guī)定時(shí)間內(nèi)，符合特定條件的各日平均溫度或有效溫度的總和[26?27]。對(duì)于嗜尸性昆蟲而言，要完成從幼蟲到蛹的發(fā)育形態(tài)轉(zhuǎn)變，除了需要充足的食物，還需要一定量的積溫，而積溫又與溫度以及發(fā)育歷期相關(guān)。因此，可根據(jù)尸體上某種蠅蛆的發(fā)育積溫以及發(fā)育歷期來推斷PMI[26]。

1.3 影響因素與局限性

作為法醫(yī)昆蟲學(xué)在死亡時(shí)間推斷中最常用方法，昆蟲個(gè)體發(fā)育法簡(jiǎn)單快捷，易于在基層法醫(yī)工作者中推廣。但是，這類方法也受到一些內(nèi)外因素的影響，存在一定的應(yīng)用局限性[2]。首先，目前對(duì)嗜尸性蠅類幼蟲生長(zhǎng)發(fā)育的相關(guān)研究大都是建立在溫度較為恒定的條件下，而與自然界白天溫度高、夜間溫度低的客觀規(guī)律不符[27]。在日均溫度相同的情況下，各種蠅類幼蟲在溫度波動(dòng)條件下生長(zhǎng)發(fā)育速度均較恒溫快[28]，尤其是亮綠蠅Lucilia illustris幼蟲在兩種條件下整個(gè)幼蟲期相差達(dá)30 d。此外，光周期也具有類似的影響。研究顯示，光周期在較低溫度下（20 ℃）會(huì)顯著影響伏蠅幼蟲生長(zhǎng)發(fā)育，而在稍高溫度時(shí)（25℃）影響不大[29]。上述兩種影響因素表明，在使用個(gè)體生態(tài)學(xué)方法推斷PMI時(shí)，需要注意不同季節(jié)的晝夜溫差、日照時(shí)長(zhǎng)差異，必要時(shí)可根據(jù)現(xiàn)有的法醫(yī)昆蟲學(xué)資料對(duì)推斷出的PMI進(jìn)行調(diào)整。其次，尸體所含的養(yǎng)分差異也可能影響蠅類幼蟲生長(zhǎng)發(fā)育，例如在動(dòng)物肝臟上取食的銅綠蠅Lucilia cuprina與螳麗蠅Calliphora augur幼蟲發(fā)育速度明顯較在肌肉組織和腦組織上取食的慢[30]，而在牛肉上飼養(yǎng)的大頭金蠅與惡臭金蠅Chrysomya putoria幼蟲三齡時(shí)體重明顯超過在魚類和動(dòng)物內(nèi)臟上飼養(yǎng)組[31]。因此，對(duì)于體型肥胖的尸體，在使用昆蟲個(gè)體生態(tài)學(xué)推斷PMI時(shí)需適當(dāng)延長(zhǎng)。此外，雖然每一個(gè)體的代謝產(chǎn)熱極少，但當(dāng)大量蠅蛆聚集在一起時(shí)，由于蛆群代謝產(chǎn)熱的積累以及相互摩擦生熱，蛆群內(nèi)部溫度可較環(huán)境溫度高出10 ℃以上[32]，這一現(xiàn)象稱之為蛆群效應(yīng)或蛆團(tuán)效應(yīng)（larval-mass effect）。筆者曾對(duì)野外動(dòng)物尸體上蛆群溫度進(jìn)行實(shí)測(cè)，當(dāng)氣溫僅22.1 ℃時(shí)，蛆群溫度可達(dá)37.7 ℃。因此在現(xiàn)場(chǎng)采集用于PMI推斷的蠅蛆樣本時(shí)，如果最老的幼蟲尚未爬離尸體化蛹，需對(duì)蛆群的數(shù)量進(jìn)行粗略的估算和記錄。最后需要注意的是，某些藥物和毒物也能影響蠅類幼蟲甚至蛹的發(fā)育[33?34]。在命案?jìng)善浦校绻_定死者生前服用過大劑量的某種藥（毒）物如安眠藥類、有機(jī)磷農(nóng)藥等時(shí)，應(yīng)將這些藥（毒）物對(duì)蠅蛆生長(zhǎng)發(fā)育的影響考慮在內(nèi)[35]。

2 昆蟲群落演替與PMI推斷

早在1894年，Mégnin就發(fā)現(xiàn)在暴露的人類尸體上先后存在8個(gè)明顯不同昆蟲群落[9]，Payne將這種現(xiàn)象稱為昆蟲群落演替（insect fauna succession），并根據(jù)不同腐敗程度將尸體腐敗分為6個(gè)階段：新鮮期、腫脹期、快速腐敗期、高度腐敗期、干化期以及白骨化期。研究顯示，由于不同的腐敗期尸體因細(xì)菌分解或昆蟲活動(dòng)釋放的氣味分子不同，其誘導(dǎo)而來的昆蟲群落組成也因此不斷發(fā)生變化，形成一種隨時(shí)間演變的食物鏈以及各種食性昆蟲的種群層疊[36]。因此，這種群落組成變化以及種群層疊存在一定的時(shí)序性規(guī)律，法醫(yī)工作者可借此規(guī)律來推斷PMI。借助昆蟲群落演替規(guī)律來推斷PMI主要用于高度腐敗的尸體，有時(shí)能用于推算死亡時(shí)間長(zhǎng)達(dá)一個(gè)月甚至數(shù)個(gè)月的干化尸體[2]。關(guān)于這種方法推斷PMI的研究及應(yīng)用，筆者已進(jìn)行過專門綜述[37]，故不在此贅述。

除上述嗜尸性昆蟲群落演替規(guī)律外，季節(jié)性的昆蟲群落組成有時(shí)也能輔助PMI推斷。不同的昆蟲生理構(gòu)造不同，因此生活習(xí)性也存在差異，繼而導(dǎo)致了它們活動(dòng)與活躍的季節(jié)也不同。通過對(duì)某一地區(qū)全年十二個(gè)月的昆蟲群落組成情況進(jìn)行調(diào)查，結(jié)合命案現(xiàn)場(chǎng)中尸體上出現(xiàn)的昆蟲種類，可以初步推斷死者死亡的月份[38]。這種方法雖然精確度略低，但仍可作為高度腐敗尸體PMI推斷的一種輔助手段。

3 昆蟲代謝物質(zhì)、基因表達(dá)與PMI推斷

在昆蟲生長(zhǎng)發(fā)育過程中，不僅僅是體表形態(tài)結(jié)構(gòu)在逐漸變化，其體內(nèi)的代謝物質(zhì)也會(huì)隨著蟲體的不斷成熟而改變。其中，昆蟲表皮碳?xì)浠衔铩⒀馨涂扇苄缘鞍滓约暗さ却x物質(zhì)的時(shí)間相關(guān)性比較高。早在上世紀(jì)70年代中期，Arnold與Regnier[39]就研究了麻蠅Sarcophaga bullata表皮碳?xì)浠衔镫S幼蟲發(fā)育而改變的趨勢(shì)，發(fā)現(xiàn)其表皮碳?xì)浠衔锏暮侩S著幼蟲的發(fā)育而不斷增加。Moore等[40]對(duì)絲光綠蠅幼蟲表皮碳?xì)浠衔镏鞒煞盅芯堪l(fā)現(xiàn)，其表皮碳?xì)浠衔锔鞣N組分在幼蟲不同齡存在顯著差異。我國(guó)學(xué)者朱光輝等[41]研究了大頭金蠅蛹?xì)け砥ぬ細(xì)浠衔镲L(fēng)化規(guī)律，其結(jié)果顯示，蛹?xì)け砥づc幼蟲表皮碳?xì)浠衔锏闹饕煞诸愃?，其中以n-C29和n-C23的差異性變化規(guī)律性最為顯著。除了昆蟲表皮碳?xì)浠衔锿猓ハx體內(nèi)的某些生化產(chǎn)物如血淋巴可溶性蛋白[42]、蝶啶[43]等的含量與蠅類幼蟲或成蟲發(fā)育時(shí)間也具有顯著的相關(guān)性。嗜尸性昆蟲在生長(zhǎng)發(fā)育過程中代謝物質(zhì)存在時(shí)序性變化，從分子層面而言，也就是DNA的表達(dá)產(chǎn)物發(fā)生了改變[44]。對(duì)于嗜尸性蠅類而言，卵期、幼蟲期和蛹期的時(shí)序基因（temporal gene）的差異性表達(dá)規(guī)律性最強(qiáng)[45-48]。并且，這種分子層面的時(shí)序性變化有時(shí)比未成熟期蟲體的體表形態(tài)變化更精確，尤其是離食階段的三齡幼蟲和蛹期，其幾丁質(zhì)合成酶、蛻皮激素受體、熱休克蛋白60、熱休克蛋白90、抗有機(jī)磷酸酯1、超氣門蛋白等物質(zhì)的基因差異性表達(dá)最為明顯[45]。值得注意的是，由于昆蟲代謝物質(zhì)和時(shí)序基因表達(dá)的種屬差異性較大，因此和昆蟲個(gè)體發(fā)育方法一樣需要預(yù)先對(duì)現(xiàn)場(chǎng)采集到的樣本進(jìn)行種屬鑒定。此外，由于目前該類方法大多適用于現(xiàn)場(chǎng)僅殘余蠅類蛹?xì)さ那闆r，因此尚未在實(shí)踐中普及應(yīng)用。

4 展望

近幾年來，涉足法醫(yī)昆蟲學(xué)領(lǐng)域的國(guó)內(nèi)學(xué)者越來越多，研究?jī)?nèi)容也越來越廣泛、深入。2014年6月在長(zhǎng)沙舉辦了我國(guó)首屆法醫(yī)昆蟲學(xué)高峰論壇，首次由全國(guó)法醫(yī)昆蟲學(xué)專家參與編寫的《法醫(yī)昆蟲學(xué)》人民衛(wèi)生出版社教材也剛剛出版[4]，昆蟲學(xué)證據(jù)也在國(guó)內(nèi)越來越多的現(xiàn)實(shí)案例中得到實(shí)踐與應(yīng)用。然而，在沒有規(guī)范統(tǒng)一的現(xiàn)場(chǎng)采樣流程和相應(yīng)知識(shí)與技術(shù)支持的情況下錯(cuò)用或?yàn)E用昆蟲學(xué)證據(jù)，只會(huì)造成極大的偏差，最終誤導(dǎo)案件偵查方向。因此，未來昆蟲學(xué)證據(jù)要在PMI推斷中得到更廣泛應(yīng)用，首先應(yīng)在基層法醫(yī)工作者中樹立良好的昆蟲學(xué)證據(jù)意識(shí)，推廣普及法醫(yī)昆蟲學(xué)知識(shí)；其次，應(yīng)注重基礎(chǔ)研究與實(shí)踐相結(jié)合，并建立規(guī)范化的現(xiàn)場(chǎng)采樣操作以及后續(xù)實(shí)驗(yàn)室分析流程，最終形成能夠?qū)嶋H應(yīng)用的統(tǒng)一規(guī)范；在基礎(chǔ)研究方面，還可結(jié)合尸體上的腐敗相關(guān)微生物群落演替、土壤化學(xué)物質(zhì)變化等情況進(jìn)行綜合研究。

［1］黃瑞亭，胡丙杰，陳玉川. 宋慈《洗冤集錄》與法醫(yī)昆蟲學(xué)［J］.法律與醫(yī)學(xué)雜志，2000,7(1): 17-19.

［2］ Byrd JH, Castner JL. Forensic entomology: the utility of arthropods in legal investigations［M］. Boca Raton: CRC Press, 2010.

［3］ Henssge C, Madea B. Estimation of the time since death in the early postmortem period［J］. Forensic Sci Int, 2004, 144(2-3):167-75.

［4］ 蔡繼峰. 法醫(yī)昆蟲學(xué)［M］. 北京：人民衛(wèi)生出版社，2015.

［5］ Rivers DB, Dahlem GA. The science of forensic entomology［M］. Oxford: Wiley-Blackwell, 2014.

［6］ Prado e Castro C, García MD, Martins da Silva P, et al. Coleoptera of forensic interest: a study of seasonal community composition and succession in Lisbon, Portugal［J］. Forensic Sci Int, 2013, 232(1-3): 73-83..

［7］ Reiter C. Growth behavior of the blue blowfl y Calliphora vicina maggots［J］. Z Rechtsmed, 1984, 91(4):295-308.

［8］Amendt J, Krettek R, Zehner R. Forensic entomology［J］. Naturwissenschaften, 2004, 91(2):51-65.

［9］ 胡萃，閔建雄. 法醫(yī)昆蟲學(xué)［M］. 重慶：重慶出版社，2000.

［10］ 王江峰，胡萃，陳玉川，等. 溫度對(duì)大頭金蠅 Chrysomya megacephala (Fabricius) 幼蟲體長(zhǎng)變化的影響［J］. 寄生蟲與醫(yī)學(xué)昆蟲學(xué)報(bào), 2002, 9(2): 100-105.

［11］ Byrd JH, Allen JC. The development of the black blowfl y, Phormia regina (Meigen)［J］. Forensic Sci Int, 2001, 120(1-2):79-88.

［12］ Grassberger M, Reiter C. Effect of temperature on development of the forensically important holarctic blowfly Protophormia terraenovae(Robineau-Desvoidy) (Diptera: Calliphoridae)［J］. Forensic Sci Int, 2002, 128(3), 177-182.

［13］ Lefebvre F, Pasquerault T. Temperature-dependent development of Ophyra aenescens(Wiedemann, 1830) and Ophyra capensis(Wiedemann, 1818) (Diptera, Muscidae)［J］. Forensic Sci Int, 2004, 139(1),75-79.

［14］ 劉耀, 叢斌, 侯一平. 實(shí)用法醫(yī)學(xué)（下冊(cè)）［M］. 北京：科學(xué)出版社, 2014: 1962.

［15］王江峰, 謝振鐵, 陳玉川,等. 法醫(yī)昆蟲學(xué)現(xiàn)場(chǎng)取樣方法研究［C］//中國(guó)法醫(yī)學(xué)最新科研與實(shí)踐（二）——全國(guó)第七次法醫(yī)學(xué)術(shù)交流會(huì)論文精選.北京: 中國(guó)人民公安大學(xué)出版社, 2004:281-251.

［16］ 王江峰，陳玉川，胡萃，等. 絲光綠蠅幼蟲發(fā)育形態(tài)學(xué)及其在死亡時(shí)間推斷中的應(yīng)用探討［J］. 中山大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版）,2000, 39(6A): 208-213.

［17］ Greenberg B. Flies as forensic indicators［J］. J Med Entomol, 1991, 28(5): 553-577.

［18］ 王江峰，陳玉川，胡萃，等. 絲光綠蠅蛹發(fā)育形態(tài)學(xué)用于死亡時(shí)間判斷的研究［J］. 中山大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2000, 39(6A): 250-254.

［19］ 王江峰，胡萃，陳玉川，等. 大頭金蠅Chrysomya megacephala 幼蟲發(fā)育形態(tài)學(xué)及其在死亡時(shí)間推斷中的應(yīng)用探討［J］. 寄生蟲與醫(yī)學(xué)昆蟲學(xué)報(bào)，2002, 9(1): 33-38.

［20］王江峰，胡萃，陳玉川，等. 大頭金蠅蛹發(fā)育形態(tài)學(xué)用于死亡時(shí)間判斷的基礎(chǔ)研究［J］. 寄生蟲與醫(yī)學(xué)昆蟲學(xué)報(bào)，2001, 8(4): 232-236.

［21］ 王江峰，陳玉川，胡萃，等. 家蠅幼蟲發(fā)育形態(tài)學(xué)用于死亡時(shí)間推斷的基礎(chǔ)研究［J］. 中國(guó)法醫(yī)學(xué)雜志，2002, 17(1): 30-31.

［22］ 王江峰，胡萃，陳玉川，等. 巨尾阿麗蠅幼蟲發(fā)育形態(tài)學(xué)及其在死者死亡時(shí)間推斷中的應(yīng)用［J］. 昆蟲學(xué)報(bào)，2002, 45(2): 265-270.

［23］ 王江峰，胡萃，陳玉川，等. 用巨尾阿麗蠅蛹期發(fā)育形態(tài)來推斷死者死亡時(shí)間［J］. 昆蟲學(xué)報(bào)，2002, 45(5): 696-699.

［24］ Sukontason K, Sukontason K, Piangjai S, et al. Larval ultrastructure of Parasarcophaga dux (Thomson)(Diptera: Sarcophagidae)［J］. Micron, 2003, 34(8): 359-364.

［25］ Sukontason KL, Sribanditmongkol P, Chaiwong T, et al. Morphology of immature stages of Hemipyrellia ligurriens(Wiedemann) (Diptera: Calliphoridae) for use in forensicentomology applications［J］. Parasitol Res, 2008, 103(4):877-887.

［26］ 陳祿仕. 利用積溫和昆蟲發(fā)育歷期推測(cè)死亡時(shí)間的研究［J］.中國(guó)法醫(yī)學(xué)雜志，2007, 22(4): 236-237.

［27］ Michaud JP, Moreau G. A statistical approach based on accumulateddegree-days to predict decomposition-relatedprocesses in forensic studies. J Forensic Sci, 2011, 56(1): 229-232.

［28］ Niederegger S, Pastuschek J, Mall G. Preliminary studies of the infl uence of fl uctuating temperatures on thedevelopment of various forensically relevant fl ies［J］. Forensic Sci Int, 2010, 199:72-78.

［29］ Nabity PD, Higley LG, Heng-Moss TM. Light-induced variability in development of forensically importantblow f ly Phormiaregina (Diptera: Calliphoridae)［J］. J Med Entomol,2007, 44(2): 351-358.

［30］ Day D, Wallman J. Influence of substrate tissue type on larvalgrowth in Calliphora augur and Lucilia cuprina(Diptera: Calliphoridae)［J］. J Forensic Sci, 2006, 51(3): 657-663.

［31］ Rabelo KCN, Thyssen PJ, Salgado RL, et al. Bionomics of two forensically important blowfl y species Chrysomya megacephala and Chrysomya putoria(Diptera:Calliphoridae)reared on four types of diet［J］. Forensic Sci Int, 2011, 210: 257-262.

［32］ Charabidze D, Bourel B, Gosset D. Larval mass effect: Characterisation of heat emission by necrophagous blowflies(Diptera:Calliphoridae)larval aggregates［J］. Forensic Sci Int, 2011, 211: 61-66.

［33］ 呂宙，李學(xué)博，莫耀南. 藥(毒)物對(duì)尸食性蠅類生長(zhǎng)發(fā)育影響的研究進(jìn)展［J］. 昆蟲學(xué)報(bào)，2010, 53(4): 464-469.

［34］呂宙，翟仙敦，周海梅，等. 氯胺酮對(duì)大頭金蠅生長(zhǎng)發(fā)育的影響［J］. 中國(guó)寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志，2012, 30(5): 361-366.

［35］ Aubernon C, Charabidzé D, Devigne C, et al. Experimental study of Luciliasericata (DipteraCalliphoridae) larval development on rat cadavers: Effects of climate and chemical contamination［J］. Forensic Sci Int, 2015, 253: 125-130.

［36］ Tomberlin JK, Mohr R, Benbow ME, et al. A roadmap for bridging basic and applied research in forensic entomology［J］. Annu Rev Entomol, 2011, 56: 401-421.

［37］ 呂宙，唐瑞，楊永強(qiáng)，等. 嗜尸性昆蟲群落演替及其法醫(yī)學(xué)應(yīng)用研究進(jìn)展［J］. 中國(guó)法醫(yī)學(xué)雜志，2015,30(2): 166-170.

［38］陳祿仕. 貴陽市郊嗜尸蠅類群落組成及生長(zhǎng)觀察［J］. 中國(guó)法醫(yī)學(xué)雜志，2011, 26(3):204-206.

［39］ Arnold MT, Regnier FE. A developmental study of the cuticular hydrocarbons of Sarcophaga bullata［J］. J Insect Physiol, 1975, 21: 1827-1833.

［40］ Moore HE, Adam CD, Drijfhout FP. Potential use of hydrocarbons for aging Lucilia sericata blowfly larvae to establish the postmortem interval［J］. J Forensic Sci. 2013, 58(2): 404-412.

［41］ Zhu G, Xu X, Xiao J, et al. Puparial case hydrocarbons of Chrysomya megacephala as an indicator of the postmortem interval［J］. Forensic Sci Int, 2007, 169(1): 1-5.

［42］ 朱光輝，葉恭銀，胡萃. 巨尾阿麗蠅幼期血淋巴可溶性蛋白組成的時(shí)間特征［J］. 浙江大學(xué)學(xué)報(bào)（農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版），2004, 30(1): 69-72.

［43］ Zhu GH, Ye GY, Li K, et al. Determining the age of adult fl esh flies, Boettcherisca peregrina, using pteridine fluorescence［J］. Med Vet Entomol, 2013, 27(1): 59-63.

［44］ Boehme P, Spahn P, Amendt J, et al. Differential gene expression during metamorphosis: a promising approach for age estimation of forensically important Calliphoravicinapupae (Diptera: Calliphoridae)［J］. Int J Legal Med, 2012, 127(1):243-249.

［45］ Tarone AM, Foran DR. Gene expression during blow fl y development: improving the precision of age estimates in forensic entomology［J］. J Forensic Sci, 2011, 56(Suppl 1): S112-S122.

［46］ Boehme P, Spahn P, Amendt J, et al. The analysis of temporal gene expression to estimate the age of forensically important blow fl y pupae: results from three blind studies［J］. Int J Legal Med, 2013, 128(3): 565-573.

［47］夏冰，劉玉銘，王啟燕，等. 大頭金蠅卵不同發(fā)育時(shí)間形態(tài)變化及基因表達(dá)差異研究［J］.中國(guó)寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志，2014, 32(4):295-298.

［48］王啟燕，周昊，梁芹，等. 巨尾阿麗蠅卵不同發(fā)育時(shí)間形態(tài)變化及基因表達(dá)［J］.中國(guó)公共衛(wèi)生，2015, 31(5):617-619.

Insect Evidence and Its Application in Postmortem Interval Estimation

Lü Zhou, WAN Lihua
(Department of Forensic Medicine and Chemistry, Criminal Investigation Law School, Southwest University of Political Science and Law, Chongqing 401120, China)

Forensic entomology, both time-honored and emerging, is an interdisciplinary science. Estimating the time of death (postmortem interval, PMI) is one of the major applications of forensic entomology. With the rapid progress of forensic entomology in recent years, the accuracy of estimation of the PMI has been greatly improved on the corpse decomposition into its later stage. However, there is no normal teaching material compiled for forensic entomology temporarily in China. Therefore, the forensic medical examiners are difficult to correctly apply insect evidence to PMI estimation. Aiming to illuminate the current applications and the future research hotspots, this article reviews the progress of estimating the postmortem interval with insect evidence based on the bionomics about insect at its immature stages, fauna succession, metabolite and temporal gene. The issues, necessary to pay attention, are also presented about managing the insect evidence in real cases such as its applicability, common misunderstanding and the technique of collecting specimens in the scene.

forensic entomology; postmortem interval estimation (PMI); bionomics; insect fauna succession; insect metabolite; temporal gene

DF795.1

A

1008-3650(2016)05-0352-05

2015-11-12

格式：呂宙，萬立華.昆蟲學(xué)證據(jù)在死亡時(shí)間推斷中的應(yīng)用[J]. 刑事技術(shù)，2016,41(5):352-356.

10.16467/j.1008-3650.2016.05.002

呂宙（1984—），男，湖北武漢人，博士，講師，研究方向?yàn)榉ㄡt(yī)昆蟲學(xué)與法醫(yī)現(xiàn)場(chǎng)學(xué)。E-mail：forensicluzhou@hotmail.com

* 通訊作者：萬立華（1950—），男，重慶人，學(xué)士，教授，研究方向?yàn)榉ㄡt(yī)現(xiàn)場(chǎng)學(xué)與法醫(yī)人類學(xué)。E-mail：forensicwanlihua@163.com