天津市奶牛結(jié)核病區(qū)域性凈化

文│劉瑩 孫濤 李潔 劉建文 任景江 張淼潔 付雯 王志成（天津市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心）

天津市奶牛結(jié)核病區(qū)域性凈化

文│劉瑩 孫濤 李潔 劉建文 任景江 張淼潔 付雯 王志成（天津市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心）

本項(xiàng)目通過(guò)引進(jìn)國(guó)外先進(jìn)的牛結(jié)核分枝桿菌γ-干擾素檢測(cè)技術(shù)，采用奶牛結(jié)核病區(qū)域性監(jiān)測(cè)、凈化的形式，完成包括監(jiān)測(cè)、檢疫、撲殺、消毒、無(wú)害化處理和生物安全管理等內(nèi)容的奶牛結(jié)核病凈化技術(shù)集成，在天津市進(jìn)行示范推廣。天津市奶牛結(jié)核病區(qū)域性凈化的目標(biāo)是在項(xiàng)目開(kāi)展三年內(nèi)，全市存欄奶牛全部達(dá)到農(nóng)業(yè)部規(guī)定的結(jié)核病凈化標(biāo)準(zhǔn)，并最終達(dá)到奶牛結(jié)核病凈化的目的。

一、背景

20世紀(jì)70～90年代，天津市奶牛結(jié)核病處在發(fā)病高峰期，陽(yáng)性率最高達(dá)到2.1%，同時(shí)人間結(jié)核病高發(fā)。隨后，人們逐漸意識(shí)到奶牛結(jié)核病凈化的重要性，開(kāi)始奶牛結(jié)核病的監(jiān)測(cè)工作。目前，奶牛養(yǎng)殖業(yè)已成為天津市農(nóng)業(yè)重要的支柱產(chǎn)業(yè)，奶牛結(jié)核病凈化工作更加重要。2010年，天津市奶牛養(yǎng)殖業(yè)產(chǎn)值為24.2億元，占畜牧業(yè)產(chǎn)值的27%。2010年天津市奶牛單產(chǎn)在全國(guó)位居第一。2014年年底天津市奶牛存欄13.9萬(wàn)頭，其中武清5.1萬(wàn)頭，全市奶牛單產(chǎn)平均7.31噸。

二、工作基礎(chǔ)

1.天津市各級(jí)政府領(lǐng)導(dǎo)高度重視奶牛結(jié)核病凈化工作，在人力、物力、財(cái)力方面得到有力保障。

2.天津市奶牛結(jié)核病流行率低，具備凈化的條件，2010年奶牛結(jié)核病檢出陽(yáng)性率在0.025%～0.037%，低于農(nóng)業(yè)部頒布的奶牛結(jié)核病陽(yáng)性率0.05%的凈化標(biāo)準(zhǔn)，許多區(qū)縣已多年無(wú)結(jié)核病陽(yáng)性奶牛報(bào)告。

3.天津市奶牛養(yǎng)殖規(guī)?；潭容^高，生物安全條件較好。

4.天津市奶牛結(jié)核病監(jiān)測(cè)技術(shù)水平過(guò)硬。

經(jīng)過(guò)多年奶牛結(jié)核病防治實(shí)踐，全市已掌握了成熟的防治技術(shù)，積累了豐富的管理經(jīng)驗(yàn)，為凈化工作提供了可靠的技術(shù)保障。

三、凈化原則

天津市奶牛結(jié)核病凈化工程的實(shí)施堅(jiān)持以下幾項(xiàng)原則：堅(jiān)持依法、科學(xué)、規(guī)范、統(tǒng)一原則；堅(jiān)持分類指導(dǎo)、分步實(shí)施原則；堅(jiān)持技術(shù)與行政相結(jié)合原則；堅(jiān)持內(nèi)防與外堵相結(jié)合原則；堅(jiān)持監(jiān)測(cè)凈化與健康檢測(cè)相結(jié)合的原則。

◎圖1 天津市奶牛結(jié)核病凈化檢測(cè)技術(shù)路線圖

◎圖2 天津市奶牛結(jié)核病凈化檢疫技術(shù)路線圖

四、凈化措施

1.實(shí)施區(qū)域性凈化管理。按照農(nóng)業(yè)部《牛結(jié)核病防治技術(shù)規(guī)范》，天津市奶牛結(jié)核病凈化工作采取以區(qū)縣為單位進(jìn)行區(qū)域性凈化管理。依據(jù)奶牛結(jié)核病陽(yáng)性率不同分為未控制區(qū)（陽(yáng)性率＞0.5%）、控制區(qū)（陽(yáng)性率＜0.5%）、穩(wěn)定控制區(qū)（陽(yáng)性率＜0.1%）和凈化區(qū)（陽(yáng)性率＜0.05%）四個(gè)區(qū)域。該市近年來(lái)奶牛結(jié)核病報(bào)告的陽(yáng)性率＜0.1%，凈化分區(qū)劃分為控制區(qū)、穩(wěn)定控制區(qū)和凈化區(qū)，并根據(jù)各區(qū)具體情況分步推進(jìn)（圖1）。

2.引進(jìn)、集成新技術(shù)。引進(jìn)了牛結(jié)核分枝桿菌γ-干擾素檢測(cè)技術(shù)，作為牛型結(jié)核分枝桿菌（PPD）變態(tài)反應(yīng)的平行試驗(yàn)技術(shù)。將尾根注射結(jié)核菌素法、電推剪毛法和數(shù)顯游標(biāo)卡尺測(cè)皮厚度法等新方法應(yīng)用到牛型結(jié)核分枝桿菌（PPD）變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)中，顯著提高了奶牛結(jié)核病監(jiān)測(cè)工作效率。

奶牛結(jié)核病凈化技術(shù)集成奶牛結(jié)核病的監(jiān)測(cè)、檢疫、撲殺、消毒、無(wú)害化處理和生物安全管理技術(shù)，在天津市進(jìn)行示范推廣。制定了6項(xiàng)技術(shù)規(guī)范。其中《奶牛結(jié)核病凈化技術(shù)規(guī)范》經(jīng)市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局立項(xiàng)、考核、驗(yàn)收，獲批天津市地方標(biāo)準(zhǔn)（DB12/T 527-2014）。

3.檢測(cè)與撲殺。奶牛結(jié)核病檢測(cè)主要采用牛型結(jié)核分枝桿菌PPD皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)，每半年全面檢測(cè)一次（犢牛在20日齡首檢，100～120日齡復(fù)檢）。第一年全市存欄奶牛100%檢測(cè)。第二年進(jìn)入穩(wěn)定控制區(qū)的區(qū)縣按50%比例隨機(jī)抽檢，未進(jìn)入穩(wěn)定控制區(qū)的區(qū)縣仍按100%比例檢測(cè)。第三年，擬進(jìn)入凈化區(qū)的區(qū)縣按50%比例抽檢，下半年按10%比例抽檢。已進(jìn)入凈化區(qū)的區(qū)縣按10%抽檢。PPD皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)檢測(cè)出的陽(yáng)性牛和可疑牛要立即隔離，使用γ-干擾素檢測(cè)技術(shù)復(fù)檢。復(fù)檢結(jié)果為陽(yáng)性的，則按陽(yáng)性牛處理；若仍為可疑，再?gòu)?fù)檢，結(jié)果仍為可疑者，視同陽(yáng)性牛處理。

4.檢疫監(jiān)管。加強(qiáng)外埠引進(jìn)奶牛及跨區(qū)調(diào)運(yùn)奶牛的隔離、檢疫和監(jiān)督管理，同時(shí)奶牛結(jié)核病凈化工作與生鮮乳銷售監(jiān)管工作相結(jié)合（圖2）。一方面，嚴(yán)格進(jìn)行奶牛調(diào)運(yùn)管理。外埠奶牛調(diào)運(yùn)，需在行政許可大廳申報(bào)，經(jīng)審批方可調(diào)入。經(jīng)過(guò)產(chǎn)地檢疫后，奶牛需通過(guò)天津市專用通道輸入，“簽證”后方可通過(guò)。調(diào)入的奶牛需進(jìn)行隔離飼養(yǎng)，確定無(wú)疫病后方可混群。同樣，天津市調(diào)出奶牛也需要嚴(yán)格的產(chǎn)地檢疫。另一方面，天津市每年都對(duì)奶牛場(chǎng)進(jìn)行6種疫病的監(jiān)測(cè)、評(píng)估，檢疫合格拿到奶牛健康證后，奶牛場(chǎng)才可以銷售生鮮乳。

通過(guò)實(shí)施一系列嚴(yán)格的檢疫、監(jiān)管措施，切斷一切奶牛結(jié)核病可能的傳播途徑，帶動(dòng)奶牛結(jié)核病凈化工作，保證奶牛結(jié)核病的凈化效果。

五、生物安全管理

為了保證和維護(hù)奶牛結(jié)核病的凈化成果，奶牛結(jié)核病凈化項(xiàng)目集成一整套與奶牛結(jié)核病凈化相關(guān)的生物安全措施。該項(xiàng)目重點(diǎn)加強(qiáng)選址、環(huán)境、設(shè)施設(shè)備、引種、消毒管理、疫病監(jiān)測(cè)、人員管理、廢棄物處理等內(nèi)容。要求奶牛場(chǎng)建立生物安全管理檔案，并制定“奶牛場(chǎng)生物安全管理規(guī)范”，詳細(xì)規(guī)定了奶牛場(chǎng)結(jié)構(gòu)布局、生物安全通道、衛(wèi)生消毒、人員管理、物流控制等方面的內(nèi)容。只有完善奶牛場(chǎng)生物安全規(guī)范化管理，才能為奶牛結(jié)核病凈化提供保障。

六、凈化成效

按照農(nóng)業(yè)部頒布的奶牛結(jié)核病凈化標(biāo)準(zhǔn)，由專家組對(duì)申請(qǐng)達(dá)標(biāo)區(qū)縣進(jìn)行考核驗(yàn)收。該項(xiàng)目創(chuàng)建奶牛結(jié)核病凈化示范模式，重點(diǎn)建立105個(gè)示范場(chǎng)戶，三年內(nèi)共示范奶牛13.8萬(wàn)頭，檢測(cè)奶牛結(jié)核病76.61余萬(wàn)頭次，檢出陽(yáng)性牛176頭，所有陽(yáng)性牛均按要求進(jìn)行了撲殺、焚燒、深埋等無(wú)害化處理，并向養(yǎng)殖場(chǎng)戶發(fā)放了撲殺補(bǔ)貼。全市所有奶牛養(yǎng)殖區(qū)縣均達(dá)到凈化標(biāo)準(zhǔn)并通過(guò)考核驗(yàn)收，區(qū)縣奶牛結(jié)核病凈化達(dá)標(biāo)率達(dá)到100%。市畜牧獸醫(yī)局向各區(qū)縣頒發(fā)了奶牛結(jié)核病凈化達(dá)標(biāo)證書(shū)和標(biāo)牌。

七、分析與討論

1.奶牛結(jié)核病區(qū)域性凈化。奶牛結(jié)核病區(qū)域性凈化符合農(nóng)業(yè)部《國(guó)家動(dòng)物疫病中長(zhǎng)期防治規(guī)劃（2012-2020年）》要求。動(dòng)物疫病區(qū)域化管理是各國(guó)控制動(dòng)物疫病、保護(hù)動(dòng)物衛(wèi)生水平、促進(jìn)動(dòng)物產(chǎn)品國(guó)際貿(mào)易的重要措施。世界上約有70%的國(guó)家采用區(qū)域化管理措施防控動(dòng)物疫病。區(qū)域性凈化與主場(chǎng)凈化相比較具有很大優(yōu)勢(shì)，區(qū)域性凈化是以面凈化，而主場(chǎng)凈化是以點(diǎn)凈化。如果只以分散的養(yǎng)殖場(chǎng)為單位，難以達(dá)到長(zhǎng)期凈化的目的。只有以面為單位，全面布局凈化工作，才能更好地維持凈化成果。

天津市奶牛結(jié)核病凈化在國(guó)內(nèi)率先采用區(qū)域性凈化模式。綜合考慮該市奶牛結(jié)核病的防控基礎(chǔ)，制定奶牛結(jié)核病區(qū)域性凈化措施及方案，以區(qū)縣為單位，根據(jù)奶牛結(jié)核病陽(yáng)性率不同，制定未控制區(qū)、控制區(qū)、穩(wěn)定控制區(qū)和凈化區(qū)四個(gè)區(qū)域標(biāo)準(zhǔn)。采取“一區(qū)一策”的凈化方案，根據(jù)各區(qū)縣的具體情況分步推進(jìn)凈化工作。經(jīng)過(guò)實(shí)施區(qū)域性凈化管理，該市奶牛結(jié)核病凈化工作取得顯著成效。

2.引進(jìn)奶牛結(jié)核病γ-干擾素檢測(cè)技術(shù)。該市奶牛結(jié)核病凈化工作中一直采用國(guó)標(biāo)牛型提純結(jié)核菌素（PPD）變態(tài)反應(yīng)進(jìn)行監(jiān)測(cè)，檢出的陽(yáng)性牛即按規(guī)定進(jìn)行撲殺和無(wú)害化處理。但是，近年來(lái)隨著檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展，發(fā)現(xiàn)牛型PPD變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)存在明顯不足。該方法除了操作煩瑣、費(fèi)時(shí)費(fèi)力外，出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果嚴(yán)重，一方面難以剔除禽型PPD陽(yáng)性牛及其他非致病性分枝桿菌感染引起的假陽(yáng)性反應(yīng)，另一方面不能排除結(jié)果判定中的人為因素干擾?？梢?jiàn)，單純依靠牛型PPD變態(tài)反應(yīng)檢疫的奶牛結(jié)核病凈化方法存在明顯弊端。

γ-干擾素檢測(cè)技術(shù)是近年來(lái)開(kāi)發(fā)的一種新型牛結(jié)核病檢測(cè)方法，該方法用于結(jié)核桿菌感染的體外檢測(cè)。在牛體外，通過(guò)單克隆抗體夾心ELISA技術(shù)檢測(cè)牛型PPD激發(fā)單核細(xì)胞產(chǎn)生的血清中γ-干擾素水平。γ-干擾素試驗(yàn)操作簡(jiǎn)便，省時(shí)省力，減少錯(cuò)誤撲殺造成的經(jīng)濟(jì)損失，因此γ-干擾素檢測(cè)技術(shù)在結(jié)核病控制項(xiàng)目中降低了撲殺成本，還顯著減少了潛伏性結(jié)核假陽(yáng)性病例的治療費(fèi)用。

國(guó)外大量臨床研究表明，γ-干擾素檢測(cè)技術(shù)具有較高的敏感性和特異性，可以降低假陽(yáng)性率，可以檢測(cè)結(jié)核病早期感染。另外，γ-干擾素試驗(yàn)有商品化試劑盒提供，容易實(shí)現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)化。該方法是目前最具有應(yīng)用前景的新型牛結(jié)核病監(jiān)測(cè)技術(shù)，目前在歐盟和美國(guó)等發(fā)達(dá)國(guó)家已經(jīng)得到了廣泛應(yīng)用，成為繼變態(tài)反應(yīng)之外的唯一法定活畜診斷技術(shù)。該技術(shù)成熟度高，目前已有進(jìn)口的商品化試劑盒供應(yīng)，但是尚未在國(guó)內(nèi)進(jìn)行示范推廣。

3.集成一整套奶牛結(jié)核病凈化技術(shù)規(guī)范。本項(xiàng)目在用PPD變態(tài)反應(yīng)進(jìn)行常規(guī)檢疫的基礎(chǔ)上，引進(jìn)牛結(jié)核分枝桿菌γ-干擾素檢測(cè)技術(shù)，并集成監(jiān)測(cè)、檢疫、撲殺、消毒、無(wú)害化處理和生物安全管理等一整套奶牛結(jié)核病凈化技術(shù)規(guī)范。單純的檢測(cè)凈化無(wú)法達(dá)到凈化目的，要想徹底凈化奶牛結(jié)核病必須是以一整套的技術(shù)集成為抓手，實(shí)施全面綜合防控措施，并以示范推廣的形式在全市范圍內(nèi)全面開(kāi)展奶牛結(jié)核病凈化工作，為全市達(dá)到奶牛結(jié)核病凈化標(biāo)準(zhǔn)創(chuàng)造了有利條件。

點(diǎn)評(píng)：現(xiàn)階段我國(guó)積極實(shí)施主要?jiǎng)游镆卟艋绾斡行ч_(kāi)展主要?jiǎng)游镆卟艋ぷ魇侵匾獑?wèn)題。天津市率先采用區(qū)域性凈化模式進(jìn)行奶牛結(jié)核病凈化，以區(qū)域凈化為基礎(chǔ)，場(chǎng)群凈化為主體，點(diǎn)面結(jié)合、分區(qū)施策、統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)、集成示范、嚴(yán)格考核，取得較好成效。該市奶牛結(jié)核病凈化為全國(guó)奶牛結(jié)核病凈化工作開(kāi)展提供了技術(shù)支撐和先進(jìn)經(jīng)驗(yàn)，值得學(xué)習(xí)借鑒。

天津市農(nóng)業(yè)科技示范推廣項(xiàng)目，項(xiàng)目編號(hào)：201301020

為了實(shí)現(xiàn)國(guó)人每人每天喝上一斤奶的夢(mèng)想，畜牧獸醫(yī)從業(yè)者進(jìn)行著堅(jiān)持不懈的努力。奶牛結(jié)核病作為一種慢性人畜共患病，影響著奶牛養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展，更威脅到人民群眾身體健康。為了實(shí)現(xiàn)國(guó)家和天津市動(dòng)物疫病中長(zhǎng)期防治規(guī)劃提出的2015年奶牛結(jié)核病達(dá)到凈化標(biāo)準(zhǔn)的目標(biāo)，天津市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心于2013年申請(qǐng)了市農(nóng)業(yè)科技成果轉(zhuǎn)化與推廣項(xiàng)目《奶牛結(jié)核病凈化集成技術(shù)示范推廣》。