33 945例宮頸病變的篩查結(jié)果分析及DNA倍體定量分析技術(shù)的應(yīng)用價(jià)值▲

林志新 余彬彬 馬 剛 莫梅珍 何 春 歸慶華 林曉琰 尹潔斯 梁 夏 黃澤青

(廣西壯族自治區(qū)婦幼保健院1 婦產(chǎn)科，2 病理科，3 醫(yī)務(wù)部，南寧市 530003，E-mail：ellen0771@163.com)

論著·臨床研究

33 945例宮頸病變的篩查結(jié)果分析及DNA倍體定量分析技術(shù)的應(yīng)用價(jià)值▲

林志新1余彬彬2馬 剛1莫梅珍2何 春2歸慶華1林曉琰1尹潔斯2梁 夏1黃澤青3

(廣西壯族自治區(qū)婦幼保健院1 婦產(chǎn)科，2 病理科，3 醫(yī)務(wù)部，南寧市 530003，E-mail：ellen0771@163.com)

目的 分析33 945例宮頸病變的篩查結(jié)果，并探討DNA倍體定量分析技術(shù)在宮頸病變篩查中的應(yīng)用價(jià)值。方法 納入2012年至2015年該院行宮頸病變篩查的婦女33 945例，年齡18～74歲，取宮頸細(xì)胞標(biāo)本，同時(shí)進(jìn)行常規(guī)細(xì)胞學(xué)檢查診斷及DNA倍體定量分析，篩查結(jié)果陽(yáng)性者再進(jìn)一步行陰道鏡下宮頸活檢組織病理學(xué)診斷。結(jié)果 2012～2015年宮頸病變篩查陽(yáng)性率呈降低趨勢(shì)(P<0.05)。DNA倍體分析系統(tǒng)篩查宮頸病變的陽(yáng)性率為9.28%，高于常規(guī)細(xì)胞學(xué)的6.82%(P<0.05)。DNA倍體分析的活檢陽(yáng)性率為30.52%，高于常規(guī)細(xì)胞學(xué)的18.22%(P<0.05) ；DNA定量分析的宮頸癌陽(yáng)性檢出率為0.144%，也高于常規(guī)細(xì)胞學(xué)的0.076%(P<0.05)。結(jié)論 該院就診婦女宮頸病變檢出率有逐年下降趨勢(shì)。DNA定量分析法可提高宮頸癌及癌前病變的早期篩查率及活檢陽(yáng)性率。

宮頸病變；宮頸癌；篩查；脫氧核糖核酸定量分析；常規(guī)細(xì)胞學(xué)診斷

宮頸癌嚴(yán)重危害婦女健康，其發(fā)病率位居?jì)D科惡性腫瘤第二位，而85%的宮頸癌發(fā)生在發(fā)展中國(guó)家[1]。從宮頸上皮內(nèi)瘤變(cervical intraepithelial neoplasia，CIN)發(fā)展到浸潤(rùn)癌，一般需要近10年的時(shí)間。CIN是宮頸癌的癌前病變，部分CIN是可逆并且是可以治愈的，在此階段或之前發(fā)現(xiàn)并進(jìn)行相應(yīng)的臨床治療，能降低宮頸癌的患病率和死亡率。因此，宮頸癌的防治尤為重要，而應(yīng)用能檢測(cè)出癌前病變的有效可行方法是關(guān)鍵。我院門(mén)診及體檢中心于2012～2015年期間同時(shí)應(yīng)用常規(guī)細(xì)胞學(xué)檢查及DNA倍體定量分析檢查進(jìn)行宮頸癌篩查，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 選取2012年9月至2015年6月在我院婦科門(mén)診進(jìn)行宮頸癌篩查的婦女33 945例，年齡(35.68±2.35)歲。納入條件：18歲≤年齡≤74歲的婦女，排除宮頸系統(tǒng)外的惡性腫瘤患者。

1.2 取材及制片 患者取膀胱截石位在陰道窺器直視下用宮頸刷伸入宮頸管內(nèi)，抵觸在宮頸黏膜面，順時(shí)針或逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)3～5圈。取出宮頸刷，取下刷頭，并將其浸泡在細(xì)胞保存液內(nèi)，旋緊管蓋后震蕩搖晃，貼標(biāo)簽后送至細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室制片。將裝有細(xì)胞保存液和刷頭的標(biāo)本收集管振蕩1 h，將保存液轉(zhuǎn)入離心管，800 r/min離心5 min，棄上清液后清洗5 min×2次(800 r/min)，采用分散液懸浮細(xì)胞沉淀；按照合適的細(xì)胞懸液濃度制成細(xì)胞標(biāo)本片2張，其中1張行巴氏染色做常規(guī)細(xì)胞學(xué)診斷，另l張行Feulgen染色做細(xì)胞DNA定量測(cè)定。

1.3 常規(guī)細(xì)胞學(xué)診斷 根據(jù)《宮頸/陰道細(xì)胞學(xué)診斷報(bào)告》[2]，宮頸(陰道)細(xì)胞學(xué)診斷的分為6組：(1)未見(jiàn)上皮內(nèi)病變細(xì)胞或惡性細(xì)胞(negative for intraepithelial lesion or malignancy，NILM)；(2)意義不明確的非典型鱗狀上皮細(xì)胞(atypical squamous cells of undetermined significance，ASC-US)；(3)意義不明確的非典型鱗狀上皮細(xì)胞不除外高度鱗狀上皮內(nèi)病變(atypical squamous cells，can′t exclude high-grade squamous intraepithelial lesion，ASC-H)；(4)低度鱗狀上皮內(nèi)病變(low-grade squamous intraepithelial lesion，LSIL)；(5)高度鱗狀上皮內(nèi)病變(high-grade squamous intraepithelial lesion，HSIL)；(6)鱗狀細(xì)胞癌(squamous cell carcinoma，SCC)。其中NILM歸為陰性，其余類型均歸為陽(yáng)性。

1.4 DNA定量分析 Feulgen染色玻片用AcCell全自動(dòng)細(xì)胞圖像分析系統(tǒng)(麥克奧迪公司)進(jìn)行掃描處理。定量分析陰性即以正常2C細(xì)胞為主，未見(jiàn)異倍體細(xì)胞及異倍體細(xì)胞峰。定量分析陽(yáng)性有兩種情況：(1)少量異倍體細(xì)胞：包括可見(jiàn)少量(1～2個(gè))DNA指數(shù) (DNA index，DI)≥2.5的細(xì)胞和少量細(xì)胞增生(指DI為1～2的細(xì)胞數(shù)高于被檢測(cè)細(xì)胞總數(shù)的5%～10%)；(2)大量異倍體細(xì)胞：包括出現(xiàn)異倍體細(xì)胞峰或大量(≥3個(gè))DI≥2.5的細(xì)胞或細(xì)胞異常增生≥10% 。DI≥2.5的玻片要經(jīng)細(xì)胞診斷學(xué)專業(yè)的醫(yī)師在顯微鏡下再次核實(shí)，以排除系統(tǒng)將重疊、炎性細(xì)胞或片上的垃圾判定為癌細(xì)胞或異常細(xì)胞。

1.5 組織病理學(xué)檢查 對(duì)常規(guī)細(xì)胞學(xué)診斷和(或)DNA定量分析結(jié)果為陽(yáng)性的婦女在陰道鏡引導(dǎo)下行宮頸活組織檢查，在月經(jīng)干凈后3～7 d內(nèi)進(jìn)行，經(jīng)陰道鏡下定位，對(duì)宮頸可疑部位進(jìn)行 4 點(diǎn)以上的組織活檢。組織病理學(xué)檢查結(jié)果分為：正常或炎癥、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ和宮頸癌。CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ、宮頸癌為宮頸活組織檢查陽(yáng)性。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用SPSS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)數(shù)資料比較及趨勢(shì)分析均采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 2012～2015年宮頸病變檢出情況 33 945例進(jìn)行篩查的婦女中，DNA倍體定量分析及常規(guī)細(xì)胞學(xué)檢查共篩查出陽(yáng)性病例3 416例，總陽(yáng)性率10.06%。2012～2015年，宮頸病變篩查陽(yáng)性率呈逐年降低趨勢(shì)(χ2=1.093，P<0.001)，見(jiàn)表1。

表1 2012～2015 年宮頸病變篩查情況

2.2 DNA倍體定量分析系統(tǒng)與常規(guī)細(xì)胞學(xué)篩查陽(yáng)性率比較 33 945例婦女中，DNA定量分析的篩查陽(yáng)性率為9.28%(3149/33 945)，常規(guī)細(xì)胞學(xué)檢查的篩查陽(yáng)性率為6.82%(2316/33 945)，DNA定量分析系統(tǒng)篩查陽(yáng)性率高于常規(guī)細(xì)胞學(xué)診斷(χ2=1.382，P<0.001)。

2.3 DNA倍體定量分析系統(tǒng)與常規(guī)細(xì)胞學(xué)宮頸病變篩查結(jié)果比較 常規(guī)細(xì)胞學(xué)篩查中，活檢率為5.08%(1 723/33 945)，活檢陽(yáng)性率為18.22%(314/1 723)，宮頸癌檢出率為76/10萬(wàn)(26/33 945)。DNA定量分析篩查中，活檢率為6.06%(2 058/33 945)，活檢陽(yáng)性率為30.52%(628/2 058)，宮頸癌檢出率為144/10萬(wàn)(49/33 945)。DNA定量分析的活檢陽(yáng)性率、宮頸癌陽(yáng)性檢出率均高于常規(guī)細(xì)胞學(xué)(χ2=75.743，P<0.001；χ2=7.061，P<0.001)。見(jiàn)表2。

表2 DNA定量分析檢測(cè)與常規(guī)

3 討 論

隨著全球?qū)m頸癌發(fā)病年齡的提前和患病率的增加，宮頸癌篩查越來(lái)越普及，其手段也越來(lái)越完善。目前，臨床上常用的宮頸細(xì)胞學(xué)篩查方法主要有DNA定量分析系統(tǒng)和常規(guī)細(xì)胞學(xué)檢查兩種。由于常規(guī)細(xì)胞學(xué)作為細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢測(cè)，讀片工作量大、細(xì)胞病理學(xué)醫(yī)師判讀水平存在差異等，無(wú)法避免假陽(yáng)性和假陰性的出現(xiàn)。采用全自動(dòng)DNA定量分析系統(tǒng)進(jìn)行宮頸癌及癌前病變的診斷及預(yù)測(cè)在國(guó)內(nèi)外已有大量報(bào)道，尤其在北美及歐洲，DNA 定量分析已是常規(guī)的臨床檢測(cè)方法之一[3-5]，該方法利用全自動(dòng)細(xì)胞圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行掃描閱片，對(duì)細(xì)胞DNA進(jìn)行定量分析，根據(jù)細(xì)胞核DNA含量的改變而做出客觀的判斷，是一種有效的宮頸細(xì)胞學(xué)篩查手段。通過(guò)對(duì)細(xì)胞核內(nèi)DNA的測(cè)定，了解正常細(xì)胞(DNA二倍體、2C細(xì)胞)的周期變化及有無(wú)惡性增殖的腫瘤細(xì)胞，如有異倍體細(xì)胞的出現(xiàn)，則提示染色體結(jié)構(gòu)和數(shù)量出現(xiàn)異常變化，是細(xì)胞惡變的開(kāi)始[6-7]。

本研究結(jié)果顯示，DNA倍體分析檢測(cè)的篩查陽(yáng)性率(9.28%)高于常規(guī)細(xì)胞學(xué)檢查(6.82%)(P<0.05)，與國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道[3，8]相似。在細(xì)胞惡變過(guò)程中，DNA含量的改變?cè)缬谛螒B(tài)學(xué)改變，因此，DNA含量的檢測(cè)更能早期診斷癌前病變，從而有更多的早期子宮頸病變患者被發(fā)現(xiàn)。本研究對(duì)篩查的陽(yáng)性病例進(jìn)行組織學(xué)活檢，發(fā)現(xiàn)DNA倍體分析檢測(cè)出的陽(yáng)性病例的活檢陽(yáng)性率及宮頸癌陽(yáng)性檢出率均高于常規(guī)細(xì)胞學(xué)檢查(P<0.05)，提示單用DNA定量分析檢查法對(duì)宮頸病變具有較高的診斷價(jià)值，可提高宮頸癌的篩查陽(yáng)性及診斷率。

此外，本研究結(jié)果顯示，與2012年宮頸病變篩查陽(yáng)性率(13.85%)比較，2013～2015年篩查陽(yáng)性率逐年降低(P<0.05)，這可能是因?yàn)榻?年來(lái)廣西各地區(qū)在國(guó)家倡導(dǎo)下，積極開(kāi)展國(guó)家衛(wèi)生部農(nóng)村婦女宮頸癌檢查項(xiàng)目，并大力度地開(kāi)展宮頸癌的普查，醫(yī)療技術(shù)也不斷進(jìn)步，廣西地區(qū)婦女的宮頸癌發(fā)病率得到有效的遏制。

綜上所述，DNA倍體定量分析法彌補(bǔ)了液基細(xì)胞學(xué)診斷的不足，大量的臨床研究也表明，采用DNA倍體定量分析技術(shù)聯(lián)合細(xì)胞學(xué)診斷能夠?qū)m頸腫瘤的篩查和治療指導(dǎo)提供科學(xué)準(zhǔn)確的依據(jù)[8-9]。DNA倍體定量分析法在宮頸癌及癌前病變的早期篩查中具有非常高的臨床價(jià)值，該技術(shù)與液基薄層細(xì)胞學(xué)技術(shù)相結(jié)合，可用于宮頸癌及癌前病變的篩查與診斷，值得在臨床進(jìn)一步推廣應(yīng)用。

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Analysis on result of 33 945 cases of cervical diseases screening and application value of DNA quantitative cytology

LINZhi-xin1,YUBin-bin2,MAGang1,MOMei-zhen2,HEChun2,GUIQing-hua1,LINXiao-yan1,YINJie-si2,LIANGXia1,HUANGZe-qing3

(1DepartmentofGynaecology,2DepartmentofPathology,3MedicalDepartment,theMaternalandChildHealthHospitalofGuangxiZhuangAutonomousRegion,Nanning530003,China)

Objective To analyze the result of 33 945 cases of cervical diseases screening,and to explore the application value of DNA quantitative cytology.Methods A total of 33 945 women,aged 18 to 74 years,receiving cervical diseases screening from 2012 to 2015 were enrolled.The specimens of cervical cells were collected and assayed using and routine cytology examination and DNA quantitative cytology analysis.The patients with positive screening result received cervical biopsy under colposcope for histopathological diagnosis.Results The positive screening rate for cervical diseases from 2012 to 2015 tended to decrease(P<0.05).The positive rate of DNA quantitative cytology for cervical diseases screening was 9.28%,higher than that of routine cytology(6.82%,P<0.05).The biopsy positive rate of DNA quantitative cytology was 30.52%,higher than that of routine cytology(18.22%,P<0.05).The positive detection rate of DNA quantitative cytology for cervical cancer was 0.144%,higher than that of routine cytology(0.076%,P<0.05).Conclusion The detection rate of cervical disease shows a decreasing tendency year by year in this hospital.DNA quantitative cytology can improve early screening positive rate and biopsy positive rate of patients of both cervix cancer and precancerous lesions.

Cervical disease,Cervical cancer,Screening,DNA quantitative cytology,Routine cytology diagnosis

國(guó)家計(jì)劃生育委員會(huì)科研基金資助項(xiàng)目(W2011GI27)

林志新(1966～)，女，碩士，主任醫(yī)生，研究方向：婦科腫瘤、宮頸癌防治。通信作者：馬剛(1962～)，男，碩士，主任醫(yī)師，研究方向：宮頸癌、子宮內(nèi)膜癌、卵巢癌等婦科惡性腫瘤，E-mail：Magang133@126.com。

R 711.74

A

0253-4304(2016)12-1646-03

10.11675/j.issn.0253-4304.2016.12.05

2016-07-30

2016-10-19)