基質(zhì)金屬蛋白酶-2、CD147在腮腺多形性腺瘤中的表達(dá)研究

唐瑞平，伍愛民，鄭本強(qiáng)，李 敬，鄧 凌，何 紅（荊楚理工學(xué)院醫(yī)學(xué)院，湖北省荊門市第二人民醫(yī)院：口腔醫(yī)院，口腔科，湖北荊門448000）

基質(zhì)金屬蛋白酶-2、CD147在腮腺多形性腺瘤中的表達(dá)研究

唐瑞平1，伍愛民1，鄭本強(qiáng)2，李 敬3，鄧 凌1，何 紅1（1荊楚理工學(xué)院醫(yī)學(xué)院，湖北省荊門市第二人民醫(yī)院：2口腔醫(yī)院，3口腔科，湖北荊門448000）

目的：探討基質(zhì)金屬蛋白酶-2（MMP-2）以及CD147在腮腺多形性腺瘤患者中的臨床表達(dá)效果，為腮腺多形性腺瘤的預(yù)測(cè)、發(fā)生及轉(zhuǎn)歸提供意義參考.方法：選取1998－01/2011－01于湖北省荊門市第二人民醫(yī)院確診并接受治療的多形性腺瘤初發(fā)瘤患者30例，多形性腺瘤復(fù)發(fā)瘤患者30例作為觀察組，另外選取30例健康人的正常腮腺組織作為對(duì)照組.治療前對(duì)兩組患者的MMP-2以及CD147進(jìn)行檢測(cè)，比較兩組患者的陽(yáng)性率；觀察組患者進(jìn)行一定的治療干預(yù)，對(duì)兩組患者的MMP-2以及CD147含量進(jìn)行再次檢測(cè)，并比較兩組患者的陽(yáng)性率.結(jié)果：治療前，MMP-2和CD147在初發(fā)瘤和復(fù)發(fā)瘤患者體內(nèi)的陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；治療后，MMP-2和CD147在初發(fā)瘤和復(fù)發(fā)瘤患者體內(nèi)的陽(yáng)性表達(dá)率和對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）.結(jié)論：MMP-2和CD147與腮腺多形性腺瘤的發(fā)病有著直接關(guān)系，在臨床診斷時(shí)，其可作為有意義的腫瘤標(biāo)志物，為預(yù)測(cè)該病的發(fā)生及轉(zhuǎn)歸提供有效的臨床參考.

基質(zhì)金屬蛋白酶-2；CD147；腮腺多形性腺瘤

0 引言

多形性腺瘤（pleomorphic adenoma）又稱混合瘤（mixed tumor），是最常見的涎腺腫瘤，約占所有涎腺腫瘤的60%，約80%發(fā)生在腮腺，10%在下頜下腺.它是胞膜情況不定的、以鏡下結(jié)構(gòu)的多形性而不是細(xì)胞的多形性為特征的腫瘤，最常見的是上皮和變異肌上皮成分與粘液樣或軟骨樣成分的混合.目前尚不明確，但任何單一因素都不能成為其絕對(duì)致病原因，可能是多種內(nèi)在及外在因素相互作用下導(dǎo)致細(xì)胞基因突變的結(jié)果.該病任何年齡均可發(fā)生，以30～50歲多見，女性較男性多見［1－2］.通常表現(xiàn)為緩慢生長(zhǎng)的橢圓形或圓形腫塊，常無(wú)自覺癥狀，病史較長(zhǎng).腫瘤界限清楚，質(zhì)地中等，多數(shù)直徑在2～125 px；小的腫瘤通常形成光滑、可活動(dòng)的實(shí)性腫塊；較大者則傾向于隆起并影響表面皮膚或粘膜，捫診呈結(jié)節(jié)狀，高起處常較軟，可有囊性變，低凹處較硬，多為實(shí)質(zhì)性組織；多次復(fù)發(fā)者可形成固定的腫塊.臨床上以手術(shù)治療為常見方式，近年來雖在手術(shù)方法上作了改進(jìn)，由沿腫瘤包膜作單純的剜除術(shù)到在正常腺體組織內(nèi)的區(qū)段性切除，但仍有8%～13%的復(fù)發(fā)率.因此，在臨床中尋找多形性腺瘤的標(biāo)志物對(duì)疾病的治療、預(yù)防以及轉(zhuǎn)歸都有重要意義［3］.目前，越來越多的研究表明，基質(zhì)金屬蛋白酶-2（MMP-2）、CD147經(jīng)其他學(xué)者在其它生物學(xué)領(lǐng)域研究表明可能與腫瘤復(fù)發(fā)相關(guān).為了探討二者與多形性腺腫瘤之間的關(guān)系，提高臨床對(duì)該疾病的預(yù)防和治療能力，湖北省荊門市第二人民醫(yī)院于1998－01/2011－01嘗試對(duì)MMP-2、CD147與腫瘤之間的關(guān)系進(jìn)行探討，取得理想效果，現(xiàn)報(bào)道如下.

1 資料和方法

1.1 一般資料選取1998－01/2011－01于湖北省荊門市第二人民醫(yī)院進(jìn)行確診并接受治療的多形性腺瘤初發(fā)瘤患者30例，多形性腺瘤復(fù)發(fā)瘤患者30例作為觀察組，此外，根據(jù)相應(yīng)條件，選取30例健康人的正常腮腺組織作為對(duì)照組，其中在初發(fā)組，男13例，女17例，年齡28～70（平均46.51±3.74）歲；在復(fù)發(fā)組，男14例，女16例，年齡31～69（平均47.82±4.01）歲；而在健康人的對(duì)照組，男12例，女18例，年齡30～68（45.33±3.98）歲.所有患者在年齡、性別等一般性資料方面比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性.

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本處理 標(biāo)本均經(jīng)10%甲醛固定，石蠟包埋，制成3 μm厚切片，進(jìn)行HE及免疫組化染色.

1.2.2 免疫組化 采用SP染色法，抗體為羊抗人MMP-2多克隆抗體，羊抗人CD147多克隆抗體，SP試劑盒和DAB顯色試劑盒.常規(guī)免疫組化染色，DAB顯色.以PBS代替一抗做陰性對(duì)照，用已知CD147、MMP-2陽(yáng)性的肺癌組織切片做陽(yáng)性對(duì)照.

1.2.3 手術(shù)治療 多形性腺瘤的治療方法為手術(shù)切除，應(yīng)在腫瘤包膜外正常組織內(nèi)切除.位于腮腺淺葉的腫瘤應(yīng)行腫瘤及腮腺淺葉切除、面神經(jīng)解剖術(shù)；位于腮腺深葉的腫瘤需同時(shí)摘除深葉.在可能的情況下，術(shù)中保留腮腺咬肌筋膜、腮腺主導(dǎo)管及耳大神經(jīng)，可減少手術(shù)并發(fā)癥.

1.3 觀察指標(biāo)采用德國(guó)萊卡病理圖像分析儀（DMR＋Q550型）進(jìn)行免疫組化結(jié)果分析，全部切片均由2位不了解臨床資料的高年資病理醫(yī)師在光鏡下評(píng)價(jià).在200倍視野中陽(yáng)性瘤細(xì)胞占全部瘤細(xì)胞比例的平均值為陽(yáng)性率，CD147以細(xì)胞膜及胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性結(jié)果，MMP-2以細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性結(jié)果.當(dāng)結(jié)果＞10%時(shí)，即可記為陽(yáng)性（＋），結(jié)果判定根據(jù)陽(yáng)性染色深淺程度和陽(yáng)性細(xì)胞百分比綜合判斷評(píng)分［4］.

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料用%表示，行χ2檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.

2 結(jié)果

2.1 治療前各組患者CD147、MMP-2陽(yáng)性率比較治療前，CD147、MMP-2在初發(fā)組和復(fù)發(fā)組患者體內(nèi)的陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05，表1）.

表1 治療前各組患者CD147、MMP-2陽(yáng)性率比較（n＝30）

2.2 治療后各組患者CD147、MMP-2陽(yáng)性率比較治療后，CD147、MMP-2在初發(fā)組和復(fù)發(fā)組患者體內(nèi)的陽(yáng)性表達(dá)率與對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05，表2）

表2 治療后各組患者CD147、MMP-2陽(yáng)性率比較（n＝30）

3 討論

多形性腺瘤是腮腺最常見的腫瘤，占腮腺腫瘤的60%～70%，屬于交界性腫瘤，具有一定的侵襲性生長(zhǎng)特性，即使在手術(shù)完全成功的情況下仍然存在13%的復(fù)發(fā)率［5－6］.多次復(fù)發(fā)的多形性腺瘤具有惡變傾向，發(fā)生于小唾液腺的多形性腺瘤惡性程度較高.近年來雖在手術(shù)方法上作了改進(jìn)，由沿腫瘤包膜作單純的剜除術(shù)到在正常腺體組織內(nèi)的區(qū)段性切除，但仍有8%～13%的復(fù)發(fā)率.有研究［7－8］表明，復(fù)發(fā)瘤細(xì)胞具有較高的增殖活性.因此，如何對(duì)多形性腺瘤進(jìn)行有效的預(yù)防和治療是提高腫瘤患者治愈率的關(guān)鍵［9－10］.本研究從MMP-2、CD147在正常腮腺、腮腺初發(fā)多形性腺瘤、復(fù)發(fā)多形性腺瘤中的陽(yáng)性表達(dá)，判斷MMP-2、CD147在腮腺多形性腺瘤種植復(fù)發(fā)中的協(xié)同作用，從而為臨床判定腫瘤術(shù)后復(fù)發(fā)提供重要依據(jù)，從初步的實(shí)驗(yàn)結(jié)果來看，取得了理想的效果［5－7］.本研究顯示，MMP-2在初發(fā)組有14例呈現(xiàn)陽(yáng)性表達(dá)，在復(fù)發(fā)組有16例呈現(xiàn)陽(yáng)性表達(dá)，陽(yáng)性率分別占46.67%和53.33%，而對(duì)照組僅有2例出現(xiàn)陽(yáng)性狀況，由此來看，初發(fā)組和復(fù)發(fā)組MMP-2的陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組，而在CD147陽(yáng)性表達(dá)方面，初發(fā)組有17例患者呈陽(yáng)性癥狀，復(fù)發(fā)組有23例呈現(xiàn)陽(yáng)性狀況，分別占56.67%和76.67%，而對(duì)照組僅有10.00%的患者出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)，由此來看，初發(fā)組和復(fù)發(fā)組CD147的陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組.綜合分析可知，MMP-2、CD147在腮腺初發(fā)及復(fù)發(fā)多形性腺瘤中陽(yáng)性率較正常人明顯提高；之后，對(duì)初發(fā)組和復(fù)發(fā)組進(jìn)行一定的治療干預(yù)，再次對(duì)三組研究對(duì)象進(jìn)行MMP-2、CD147陽(yáng)性檢測(cè)表達(dá)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，治療后，MMP-2、CD147在三組患者的體內(nèi)的陽(yáng)性表達(dá)率均無(wú)明顯性差異，綜合治療前的陽(yáng)性率可以推斷，MMP-2、CD147可視為多形性腺瘤的標(biāo)志物，在一定條件下，可為多形性腺瘤早期診斷、治療以及預(yù)后提供有效參考［11－13］.

MMP-2作為基質(zhì)金屬蛋白酶的一種，主要由正常結(jié)締組織及腫瘤組織合成、分泌，可以破壞基質(zhì)的降解平衡，可以促使腫瘤細(xì)胞間脫粘附，促進(jìn)瘤細(xì)胞突破由基底膜和細(xì)胞外基質(zhì)構(gòu)成的組織學(xué)屏障，以達(dá)到侵襲周圍組織和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，從而直接影響調(diào)節(jié)著腫瘤細(xì)胞的基因表達(dá)；CD147是一類位于腫瘤細(xì)胞膜表面的跨膜糖蛋白，最早從肺癌細(xì)胞系LX-1中被分離出來，刺激成纖維細(xì)胞產(chǎn)生MMPs，促進(jìn)腫瘤血管的生成，其水解產(chǎn)物影響著腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移［8－11］.由此可知，MMP-2、CD147的陽(yáng)性表達(dá)率與腫瘤細(xì)胞有著直接的關(guān)系，其協(xié)同表達(dá)可以作為判定腫瘤的發(fā)病、術(shù)后復(fù)發(fā)傾向的重要指標(biāo)，為腮腺多形性腺瘤的預(yù)測(cè)、發(fā)生及轉(zhuǎn)歸提供有效的臨床參考.

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ExpressionstudyofMMP-2，CD147in parotid pleomorphic adenoma

TANG Rui-Ping1，WU Ai-Min1，ZHENG Ben-Qiang2，LI Jing3，DENG Ling1，HE Hong1

1Medical College，Jingchu University of Technology；Second People'sHospitalofJingmen：2Stomatologicalhospital，3Department of Stomatology，Jingmen 448000，China

AIM：To investigate the expression of MMP-2 and CD147 in patients with parotid pleomorphic adenoma so as to provide reference for prediction，occurrence and prognosis of parotid pleomorphic adenoma.METHODS：A total of 30 patients with incipient tumors of pleomorphic adenoma and 30 patients with recurrent tumor of pleomorphic adenoma admitted into Second People's Hospital of Jingmen from January 1998 to January 2011 were selected as the observation group，another 30 cases of normal parotid tissue from healthy people were selected as the control group.The content of MMP-2 and CD147 were detected before the treatment，and then the positive rates of two groups were compared；After the treatment，the positive rates of two groups were compared again.RESULTS：Before the treatment，the rates of MMP-2 and CD147 positive expression in patients with incipient tumors and recurrent tumors were obviously higher than those of control group，with statistically significant differences（P＜0.05）；After the treatment，there was no statistically significant difference between the rates of MMP-2 and CD147 positive expression in patients with incipient tumors and recurrent tumors（P＞0.05）.CONCLUSION：There is a direct relationship between MMP-2，CD147 and the incidence of parotid pleomorphic adenoma，which can be as tumor markers in the clinical diagnosis，so as to provide reference for prediction，occurrence and prognosis of parotid pleomorphic adenoma.

MMP-2；CD147；Parotid pleomorphic adenoma

R739.8

A

2095-6894（2016）12-22-03

2016－09－20；接受日期：2016－10－08

唐瑞平.副主任醫(yī)師，副教授.Tel：0724-2495100 E-mail：trptts＠163.com