間歇低氧對小鼠肝腎組織MDA含量及SOD活力的影響

李文娟 李明華

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間歇低氧對小鼠肝腎組織MDA含量及SOD活力的影響

李文娟 李明華

【摘要】目的 探討間歇低氧對小鼠肝腎組織MDA及SOD活力的影響。方法 將24只C57BL/6J雄性小鼠隨機(jī)分為對照組和間歇低氧組,間歇低氧組置于自制的低氧艙中,艙內(nèi)循環(huán)充入氮?dú)夂蛪嚎s空氣,艙內(nèi)氧濃度最高為（21±0.5）%、最低為（5±0.5）%,每次循環(huán)90 s,每天低氧8 h；對照組置于與間斷低氧艙相似的艙內(nèi),艙內(nèi)循環(huán)充入潔凈壓縮空氣。12周后將小鼠處死,快速取出其肝腎組織并檢測MDA的含量及SOD活力。結(jié)果 肝組織中MDA含量的變化：低氧組比對照組高50.62%（P＜0.01）；腎組織中MDA含量的變化：低氧組比對照組高37.5%（P＜0.01）。肝組織中SOD活力的變化：低氧組比對照組低14.44%（P＜0.01）；腎組織中SOD活力的變化：低氧組比對照組低22.21%（P＜0.01）。結(jié)論 間歇低氧小鼠體內(nèi)存在著氧化應(yīng)激狀態(tài)。

【關(guān)鍵詞】間歇低氧；睡眠呼吸暫停綜合征；MDA；SOD；氧化應(yīng)激

睡眠呼吸暫停綜合征（sleep apnea syndrome， SAS）是一種常見的與睡眠相關(guān)的呼吸障礙性疾病。這種病理狀態(tài)不僅有睡眠打鼾和日間極度嗜睡，還由于低通氣或呼吸暫停引起反復(fù)發(fā)作的低氧血癥和高碳酸血癥可致神經(jīng)功能失調(diào)、兒茶酚胺及腎素-血管緊張素系統(tǒng)激活、內(nèi)分泌功能紊亂及血液動力學(xué)改變，累及多系統(tǒng)并造成多器官損害，甚至發(fā)生猝死。國外流行病學(xué)調(diào)查顯示，SAS在成年人中的患病率高達(dá)5%～20%，是高血壓、冠心病、心律失常、腦卒中等多種疾病的獨(dú)立危險因素[1-2]。不僅如此，SAS還常與多種疾病并存加速其發(fā)病進(jìn)程，兩者之間相互影響相互促進(jìn)，形成惡性循環(huán)，嚴(yán)重影響人們的生活質(zhì)量和身心健康。本實(shí)驗(yàn)采用間歇性低氧的方式模擬SAS反復(fù)快速低氧-復(fù)氧的病理生理學(xué)特點(diǎn)建立SAS小鼠模型，并對其肝腎組織內(nèi)MDA含量和SOD活力進(jìn)行檢測，觀察暴露于間歇低氧環(huán)境中的小鼠體內(nèi)是否存在氧化應(yīng)激損傷。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動物

實(shí)驗(yàn)動物取自溫州醫(yī)科大學(xué)動物中心，8周齡的雄性C57BL/6J小鼠24只，體重18～22 g，隨機(jī)分為對照組和間歇低氧組各12只。

1.2 模型建立

間歇低氧組12只置于低氧艙中，艙內(nèi)循環(huán)充入氮?dú)夂蛪嚎s空氣，艙內(nèi)氧濃度最高為（21±0.5）%、最低為（5±0.5）%，每次循環(huán)90 s，每天8小時，持續(xù)12周；對照組12只置于與間斷低氧艙相似的艙內(nèi)，艙內(nèi)循環(huán)充入潔凈壓縮空氣。其他飼養(yǎng)條件兩組均相同。

1.3 指標(biāo)檢測

采用硫代巴比妥酸法（TBA法）測定肝、腎組織勻漿中脂質(zhì)過氧化物丙二醛（MDA）的含量；采用化學(xué)比色法測定肝、腎組織勻漿中超氧化物歧化酶（SOD）的活力。具體步驟參照試劑盒說明書。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

肝組織中MDA（nmol/mg）含量的變化：低氧組（7.26±0.46）比對照組（4.82±0.36）高50.62%（P＜0.01）；腎組織中MDA （nmol/mg）含量的變化：低氧組（1.98±0.37）比對照組（1.44±0.44）高37.5%（P＜0.01）。肝組織中SOD（U/mg）活力的變化：低氧組（247.8±11.24）比對照組（289.6±15.65）低14.44%（P＜0.01）；腎組織中SOD（U/mg）活力的變化：低氧組（104.7±14.67）比對照組（134.6±13.31）低22.21%（P＜0.01）。

3 討論

SAS實(shí)際上就是一種氧化應(yīng)激性疾病，多項(xiàng)研究證明SAS存在氧化應(yīng)激狀態(tài)。氧化應(yīng)激是指機(jī)體在遭受各種有害刺激時，體內(nèi)高活性分子產(chǎn)生過多，氧化程度超出氧化物的清除，氧化系統(tǒng)和抗氧化系統(tǒng)失衡，從而導(dǎo)致組織損傷。研究發(fā)現(xiàn)，用間歇低氧模擬睡眠呼吸暫停綜合征嚙齒類動物體內(nèi)的ROS濃度明顯升高[3-5]。正常條件下，ROS的產(chǎn)生和清除維持在平衡水平，但一旦產(chǎn)生的ROS的量超出抗氧化劑清除能力的時候，導(dǎo)致生物體內(nèi)ROS水平增高，進(jìn)而進(jìn)入氧化應(yīng)激狀態(tài)，引起氧化損傷。而MDA的含量常?？煞从硻C(jī)體內(nèi)脂質(zhì)過氧化程度， 是體內(nèi)重要的氧化產(chǎn)物，它可以間接反映出細(xì)胞損傷的程度。SOD是存在于細(xì)胞內(nèi)的天然抗氧化劑，對機(jī)體的氧化和抗氧化平衡起著至關(guān)重要的作用，SOD活力的高低間接反映了機(jī)體清除氧自由基的能力。

本實(shí)驗(yàn)采用間歇低氧的方式模擬SAS的病理生理學(xué)特點(diǎn)建立小鼠模型，并對肝、腎組織勻漿中的MDA含量和SOD活力進(jìn)行測定，來判斷暴露于間歇低氧環(huán)境中的小鼠體內(nèi)是否存在氧化應(yīng)激狀態(tài)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，間歇低氧12周后小鼠肝腎組織內(nèi)MDA水平高于對照組，而SOD活力低于對照組。說明了睡眠呼吸暫停小鼠體內(nèi)存在著氧化應(yīng)激狀態(tài)。由此我們推測，睡眠呼吸暫停綜合征由于反復(fù)出現(xiàn)的低氧-復(fù)氧合作用，使機(jī)體體內(nèi)產(chǎn)生過多的活性氧簇（ROS），引起的氧化損傷有可能參與了機(jī)體各項(xiàng)器官損傷的過程。

參考文獻(xiàn)

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·論著·

The Effects of Intermittent Hypoxia on MDA Content and SOD Activity in Liver and Kidney of Mice

LI Wenjuan LI Minghua, Luohe Medical College, Luohe 462002, China

[Abstract]Objective To study the effects of intermittent hypoxic on sperm number and activity in mice. Methods twenty-four male C57BL/6J mice were randomly divided into two groups, namely the control group and intermittent hypoxic group. intermittent hypoxic group were housed in homemade low oxygen chambers which circle filled with N2 and compressed air （ the lower oxygen concentration is （5±0.5）% and the upper （21±0.5）%, 90s for each circle）8h each day. The control group was placed four similar cabins which circle filled with compressed air. 12 weeks later, the mice were sacrificed for determine the content of malondialdehyde （MDA） and the activity of superoxide dismutase （SOD）in liver and kidney. Results The changes of MDA content in liver and kidney tissue of intermittent hypoxi group were higher than control group by 50.62% （P ＜0.01 ） and 37.5% （P ＜ 0.01 ）, respectively. The liver tissue SOD activity of intermittent hypoxi group were 14.44% （P＜0.01） lower than control group, Changes of the activity of SOD in renal tissue: intermittent hypoxi group were lower 22.21% （P＜0.01） than the control groups. Conclusion There is oxidative stress state in mice which exposed Intermittent hypoxia.

[Key words]Intermittent hypoxic, Sleep apnea syndrome, MDA, SOD, Oxidative stress

doi：10.3969/j.issn.1674-9308.2016.01.045

【文章編號】1674-9308（2016）01-0066-02

【中圖分類號】R332

【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A

作者單位：462002 河南省漯河市漯河醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校