結(jié)球甘藍與油菜雜交胚挽救及其后代倍性鑒定

趙艷艷，蔣武生，原玉香，王志勇，姚秋菊，魏小春，張 強，張曉偉(河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 園藝研究所，河南 鄭州 450002)

結(jié)球甘藍與油菜雜交胚挽救及其后代倍性鑒定

趙艷艷，蔣武生，原玉香，王志勇，姚秋菊，魏小春，張 強，張曉偉*
(河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 園藝研究所，河南 鄭州 450002)

為將油菜中根腫病抗性基因CRR導(dǎo)入到甘藍從而獲得抗根腫病的結(jié)球甘藍材料，以二倍體結(jié)球甘藍與四倍體人工合成油菜為親本進行正反雜交，采用MS和B5培養(yǎng)基對雜交子房和胚珠進行胚挽救試驗，研究不同取樣時期、培養(yǎng)基、基因型以及暗處理對胚珠萌發(fā)率的影響，并采用流式細(xì)胞儀法對雜交后代幼苗倍性進行初步鑒定。結(jié)果表明：胚珠培養(yǎng)優(yōu)于子房培養(yǎng)。以人工合成油菜為母本的雜交組合獲得的雜種苗數(shù)(57株)遠(yuǎn)多于反交組合(僅獲得7株雜種苗)。子房培養(yǎng)取材時間以蕾期授粉后第10天為宜，以B1(B5+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L+水解酪蛋白0.5%+活性炭0.5%)培養(yǎng)基最好(萌發(fā)數(shù)6株)；胚珠培養(yǎng)適宜取材時間為蕾期授粉后第11天，以M1(MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+水解酪蛋白0.5%+活性炭0.5%)培養(yǎng)基最佳(萌發(fā)率13.55%)。胚珠經(jīng)過暗處理(24 h)后萌發(fā)率明顯提高。倍性鑒定結(jié)果顯示，胚挽救獲得的64株幼苗中有57株為三倍體植株(89.06%)。

結(jié)球甘藍； 人工合成油菜； 遠(yuǎn)緣雜交； 胚挽救； 倍性鑒定

結(jié)球甘藍(BrassscaoleraceaL.var.capitata,2n=2x=18,CC)又名包菜、洋白菜、卷心菜、包心菜等，是十字花科蕓薹屬的植物，具有適應(yīng)性廣、耐寒和耐熱性較強、病害少、產(chǎn)量高、營養(yǎng)豐富、抗癌、抗誘變、耐貯運等特點[1-2]，是我國的一種重要蔬菜。其種植面積以每年約90萬hm2的速度遞增[3]。隨著其種植面積的不斷擴大，十字花科根腫病也不斷蔓延，培育抗根腫病的甘藍新品種是解決根腫病危害最有效的方法。而種間雜交是創(chuàng)造作物新種質(zhì)的有效途徑，研究人員通常利用胚挽救技術(shù)克服遠(yuǎn)緣雜交中幼胚死亡或敗育的問題[4]。在十字花科蔬菜育種過程中胚挽救技術(shù)得到很好的應(yīng)用并取得了明顯的成績，如利用胚珠培養(yǎng)在改良式H培養(yǎng)基上獲得蘿卜×大白菜屬間雜種9株，但子房培養(yǎng)未得到雜種[5]；利用子房培養(yǎng)在添加6-BA 和NAA的B5培養(yǎng)基上得到甘藍型油菜×羽衣甘藍雜種3株[6]；用蘿卜雄性不育系與甘藍雜交，通過幼胚培養(yǎng)得到胞質(zhì)雄性不育雜種[7]；劉忠松等[8]先用芥菜型油菜與甘藍型油菜雜交，再用甘藍型油菜回交，在回交后代中獲得了高油酸含量的甘藍型油菜材料；扈新民等[9]以甘藍顯性雄性不育系 C08-11為母本，以蘿卜自交系Q07-12為父本進行屬間雜交，通過胚珠培養(yǎng)獲得 29株雜交苗，子房培養(yǎng)僅獲得 3株雜交苗；祝朋芳等[10]通過胚挽救，獲得了大白菜與羽衣甘藍雜交后代39株等。利用遠(yuǎn)緣雜交手段，可以實現(xiàn)抗病性從一個物種轉(zhuǎn)移到另一個物種。如Snowdon等[11]將抗黑脛病基因從白芥轉(zhuǎn)移到了甘藍型油菜；2004年國外研究人員應(yīng)用胚挽救培養(yǎng)甘藍品種與芥菜型油菜 A19182抗黑腐病的種間雜種[12]，通過胚挽救技術(shù)將芥菜的白粉病抗性轉(zhuǎn)移到甘藍中獲得成功[13]。十字花科根腫病是一種重要的世界性植物土傳真菌性病害，嚴(yán)重影響結(jié)球甘藍的可持續(xù)生產(chǎn)，而甘藍型油菜人工合成種(BrassicanapusL.)遺傳多樣性十分豐富[14]。鑒于此，本研究采用含根腫病抗性基因CRR的人工合成油菜(異源四倍體)與不含抗性基因的結(jié)球甘藍材料(二倍體)人工雜交，由于雜交后代為三倍體，不結(jié)實，需要對雜交后代進行胚挽救，以期將根腫病抗性基因CRR導(dǎo)入到結(jié)球甘藍材料中培育出抗根腫病的甘藍新材料。

1 材料和方法

1.1 試驗材料

甘藍材料C308、C318、C315、C365由河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院園藝研究所蔬菜研究室提供；人工合成油菜 (BrassicanapusL.,2n=36,RR)W01、W02、W03、W04由加拿大曼尼托巴大學(xué)栗根義教授惠贈，抗根腫病。

1.2 試驗方法

試驗于2013年4月在河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院現(xiàn)代化農(nóng)業(yè)基地內(nèi)進行，將甘藍與人工合成油菜分別與其他作物隔離種植，常規(guī)栽培管理。分別以結(jié)球甘藍、人工合成油菜作母本，在初花期于雜交前2～3 d摘除母本花序上已開放的花朵，套袋隔離。于套袋父本開花當(dāng)天取花藥，同時對母本植株上3 mm左右的花蕾進行剝蕾授粉。授粉后套袋隔離，嚴(yán)格控制父本以外的花粉污染。分別于雜交后9、10、11、12、13、14 d取子房和胚珠進行離體培養(yǎng)。試驗設(shè)計MS和B5基本成分添加不同濃度的激素、水解酪蛋白(CH)、活性炭(AC)等共10種培養(yǎng)基。

1.2.1 培養(yǎng)基成分對子房培養(yǎng)的影響 分別剪取W01×C308、W01×C318蕾期授粉后10 d的子房，用70%乙醇浸泡30 s，再用10%HgCl2消毒6 min，然后用無菌水沖洗4次，每次5 min，最后在無菌條件下分別接種至B0、B1、B2、B3、B4培養(yǎng)基上(表1)培養(yǎng)，每個處理15個子房，共計150個子房。培養(yǎng)基在高溫滅菌前pH值調(diào)至5.8，121 ℃高壓滅菌20 min后備用。接種子房的培養(yǎng)皿置于溫度(24±2)℃、光照強度1 500 lx、光照 12 h/d的環(huán)境中培養(yǎng)。接種36 d后剝出幼胚繼續(xù)培養(yǎng)，最后統(tǒng)計出苗情況。

表1 培養(yǎng)基成分

1.2.2 培養(yǎng)基成分對胚珠培養(yǎng)的影響 取W01×C308蕾期授粉后11 d的胚珠，采用與1.2.1中子房培養(yǎng)相同的消毒方法，在無菌條件下將角果放于無菌濾紙上剝出幼胚接種至固體培養(yǎng)基B0、B1、B2、B3、B4、M0、M1、M2、M3、M4上(表1)培養(yǎng)，培養(yǎng)基在高溫滅菌前pH值調(diào)至5.8，121 ℃高壓滅菌20 min后備用。培養(yǎng)條件同子房培養(yǎng)。接種10 d后調(diào)查胚珠萌發(fā)情況。

1.2.3 取材時期對子房培養(yǎng)的影響 取W01×C308蕾期授粉后9、10、11、12、13、14 d的子房接種至B1培養(yǎng)基上培養(yǎng)，接種36 d后剝出幼胚繼續(xù)培養(yǎng)，最后統(tǒng)計出苗情況。

1.2.4 取材時期對胚珠培養(yǎng)的影響 取W01×C308蕾期授粉后9、10、11、12、13、14 d的胚珠接種至M1培養(yǎng)基上培養(yǎng)，接種10 d后調(diào)查胚珠萌發(fā)情況。

1.2.5 不同基因型及正反交之間的胚珠萌發(fā)情況比較 取W01與C308、W02與C318、W03與C315、W03與C315、W04與C365正反交蕾期授粉后11 d的胚珠，接種至M1培養(yǎng)基上培養(yǎng)，接種10 d后統(tǒng)計胚珠萌發(fā)情況。

1.2.6 暗處理對胚珠培養(yǎng)萌發(fā)率的影響 取W01×C308蕾期授粉后11 d的胚珠接種至M1培養(yǎng)基上，分別在光照強度1 500 lx(正常處理)和24 h暗培養(yǎng)后于光照強度1 500 lx(暗處理24 h)條件下繼續(xù)培養(yǎng)，接種10 d后統(tǒng)計胚珠萌發(fā)情況。

1.2.7 利用流式細(xì)胞儀對胚挽救雜種后代組培苗進行倍性鑒定 為了確認(rèn)胚挽救成株材料是否為雜合體，取胚挽救雜種后代組培苗的幼嫩葉片，用德國PARTEC公司生產(chǎn)的流式細(xì)胞儀(CyFlowRCube 8)檢測植株倍性，本試驗選用四倍體人工合成油菜做為模板，調(diào)整電壓為523 V，根據(jù)峰值出現(xiàn)的位置判斷植株的倍性[15-16]。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同培養(yǎng)基成分對子房培養(yǎng)和胚珠培養(yǎng)萌發(fā)的影響

2.1.1 子房培養(yǎng) 從表2可以看出，W01×C308、W01×C318子房培養(yǎng)在所有供試處理中僅有7個萌發(fā)，培養(yǎng)基以B5培養(yǎng)基添加適當(dāng)?shù)纳L調(diào)節(jié)劑、水解酪蛋白和活性炭更有利于子房生長發(fā)育，其中以B1(6-BA 1.5 mg/L +NAA 0.2 mg/L+CH 0.5%+CA 0.5%)培養(yǎng)基中的子房出胚最好，共計萌發(fā)6個，最終發(fā)育成株。未添加水解酪蛋白、活性炭以及生長調(diào)節(jié)劑的培養(yǎng)基上，子房逐漸萎縮，甚至停止生長，有愈傷組織形成；而在添加水解酪蛋白、活性炭以及生長調(diào)節(jié)劑的培養(yǎng)基上，子房都能伸長、膨大(圖1)，但并不是都能萌發(fā)。在B1培養(yǎng)基上培養(yǎng)的W01×C308比W01×C318多2株萌發(fā)苗，說明基因型不同也影響子房萌發(fā)情況。

表2 不同基因型子房在不同培養(yǎng)基上的萌發(fā)情況

A.添加生長調(diào)節(jié)劑的培養(yǎng)基; B.未添加生長調(diào)節(jié)劑的培養(yǎng)基圖1 生長調(diào)節(jié)劑對結(jié)球甘藍×人工合成油菜離體子房培養(yǎng)的影響

2.1.2 胚珠培養(yǎng) 從表3可以看出，胚珠培養(yǎng)以MS基本培養(yǎng)基添加適當(dāng)?shù)纳L調(diào)節(jié)劑、水解酪蛋白和活性炭更有利于胚珠萌發(fā)，高濃度生長調(diào)節(jié)劑影響胚的正常發(fā)育。以M1培養(yǎng)基(6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+CH 0.5%+CA 0.5%)中的胚珠萌發(fā)最好，萌發(fā)率為7.74%，其次為M2 和B1，萌發(fā)率分別為3.33%和3.23%，M4萌發(fā)率為2.25%。添加高濃度生長調(diào)節(jié)劑的MS培養(yǎng)基和B5培養(yǎng)基萌發(fā)率均較低，分別為0.89%(M3)和0.61%(B3)?？偟膩砜?，雜交胚珠離體培養(yǎng)在萌發(fā)率上明顯優(yōu)于子房培養(yǎng)，且雜交胚的生長情況較好(圖2)。所有處理共計獲得38株苗，按一個子房里面有20個胚珠計算，同等條件下子房培養(yǎng)才獲得7株苗(表2)。

表3 W01×C308胚珠在不同培養(yǎng)基上的萌發(fā)情況

圖2 結(jié)球甘藍×人工合成油菜雜交胚珠生長情況

2.2 不同取材時期對子房培養(yǎng)和胚珠培養(yǎng)萌發(fā)情況的影響

2.2.1 子房培養(yǎng) 取W01×C308蕾期授粉后9、10、11、12、13、14 d的子房接種至B1培養(yǎng)基上培養(yǎng)。從表4可以看出，子房培養(yǎng)取材時間以授粉后第10天為宜，萌發(fā)率達到10.00%；取材時間為授粉后第9、11、12天的萌發(fā)率分別為3.33%、6.67%、3.33%，第13、14天未出胚，可能是由于雜種胚已逐漸敗育所致，從子房中無法獲得營養(yǎng)。

表4 不同取材時期W01×C308的子房在B1培養(yǎng)基上的萌發(fā)情況

2.2.2 胚珠培養(yǎng) 取材時間對胚珠培養(yǎng)非常重要，必須在胚珠發(fā)育到一定時期但未開始退化前取樣，才能得到較好的萌發(fā)率。從表5可以看出，不同發(fā)育時期的胚珠在 M1培養(yǎng)基上培養(yǎng)10 d后，成活胚珠數(shù)有明顯差別。胚珠培養(yǎng)取材時間以授粉后第11天為宜，萌發(fā)率高達13.55%；取材時間為授粉后第9、10、12、14天的萌發(fā)率分別為4.17%、8.25%、10.83%、7.00%、5.36%。授粉后第9天萌發(fā)率為4.17%，這可能是由于胚珠過小，過于依賴母體提供營養(yǎng)而難以離體培養(yǎng)；授粉后第14天僅有1個胚珠成活，萌發(fā)率為5.36%，這是由于隨著受精后時間的延長，雜種胚已逐漸敗育所致。因此，授粉后11 d是胚珠培養(yǎng)的適宜取材時間。胚珠培養(yǎng)出苗49株，子房培養(yǎng)出苗7株，按照每個子房25個胚珠計算，胚珠培養(yǎng)明顯優(yōu)于子房培養(yǎng)。

表5 不同取材時期W01×C308的胚珠在M1培養(yǎng)基上的萌發(fā)情況

2.3 不同基因型及正反交胚珠培養(yǎng)的萌發(fā)情況

從表6可以看出，在W01與C308、W02與C318、W03與C315、W04與C365等8個正反交組合中，除C365×W04外7個組合最終出胚成苗，共計出胚成苗64株，其中以人工合成油菜為母本的雜交組合獲得的雜種苗數(shù)(57株)遠(yuǎn)多于反交組合(僅獲得7株雜種苗)。對于本研究材料來說，不同基因型雜交組合的萌發(fā)率有顯著差異。W01×C308萌發(fā)率最高，為16.0%，W02×C318、W03×C315、W04×C365的萌發(fā)率依次為 4.0%、5.5%、3.0%。C308×W01、C318×W02、C315×W03的萌發(fā)率依次為1.0%、1.0%、1.5%，C365×W04沒有出胚。C308作父本萌發(fā)率僅為1%，而其作母本時達16.0%，因此為獲得高萌發(fā)率，可考慮將C308作父本、人工合成油菜作母本。

表6 各雜交組合后代胚珠培養(yǎng)的萌發(fā)情況

2.4 暗處理對胚珠培養(yǎng)萌發(fā)率的影響

從表7可見，W01×C308胚珠培養(yǎng)條件以暗處理24 h后再轉(zhuǎn)入光照下培養(yǎng)效果較好，經(jīng)過暗處理的萌發(fā)率達到17.5%，較未經(jīng)暗處理的材料萌發(fā)率(12.0%)有明顯提高。

表7 W01×C308的胚珠在正常處理和暗處理后的萌發(fā)情況

2.5 胚挽救雜種后代組培苗的倍性鑒定結(jié)果

由圖 3、4可見，二倍體結(jié)球甘藍的熒光強度高峰出現(xiàn)在 100 位置，四倍體人工合成油菜的熒光強度高峰出現(xiàn)在200位置，而三倍體雜合體的對應(yīng)值應(yīng)該是2個親本平均值，位置在150。通過流式細(xì)胞儀對培養(yǎng)獲得的雜交植株進行倍性分析，64株胚挽救幼苗中有57株是三倍體真雜株，雜合率為89.06%，經(jīng)過鑒定的植株需經(jīng)過生根后移栽到大田進行進一步的生物性狀鑒定和分子鑒定。

A為結(jié)球甘藍;B為人工合成油菜圖3 結(jié)球甘藍、人工合成油菜DNA 相對含量的流式細(xì)胞分析圖

A為雜合體；B為嵌合體圖4 結(jié)球甘藍×人工合成油菜部分雜交后代DNA相對含量的流式細(xì)胞分析圖

3 結(jié)論與討論

胚挽救包括胚珠培養(yǎng)、子房培養(yǎng)和幼胚培養(yǎng)，是克服受精之后遠(yuǎn)緣雜交不親和性的有效方法[15]。程雨貴等[17]利用幼胚培養(yǎng)的方法獲得了蘿卜與甘藍之間的雜種；胡大有等[18]通過子房培養(yǎng)獲得了黑芥與諸葛菜的屬間雜種；吳紅美等[16]經(jīng)胚挽救獲得甘藍型油菜與甘藍種間雜種19株，經(jīng)流式細(xì)胞儀鑒定11株真雜株；喬海云[15]利用胚珠培養(yǎng)獲得了大白菜與紫甘藍雜交后代，利用胚珠培養(yǎng)菜薹與芥藍雜交獲得雜交后代。本研究中將結(jié)球甘藍與含根腫病抗性基因CRR的人工合成油菜雜交，采用子房培養(yǎng)和胚珠培養(yǎng)獲得雜交后代，其中胚珠培養(yǎng)獲得雜種的概率明顯高于子房培養(yǎng)，這與前人研究結(jié)果[5，7，9，15]相符。

不同材料進行種間雜交，正反交的萌發(fā)結(jié)果有差異。喬海云[15]以菜薹為母本能獲得少量種子，以芥藍為母本未得到雜交株，以菜薹為母本的正交組合獲得了 69 株幼苗；胡大有等[18]以黑芥為母本、諸葛菜為父本的正交組合獲得了1株真雜種，而以諸葛菜為母本、黑芥為父本的反交組合未獲得雜種；李俊等[19]以白菜和芥藍進行正反雜交，研究結(jié)果顯示，白菜×芥藍的平均雜種獲得率(2.32%)明顯高于芥藍×白菜的雜種獲得率(1.16%);富貴等[20]將青海大黃油菜與甘藍雜交，大黃油菜為母本的多個雜交組合獲得 69株雜種苗，反交組合均未得到正常發(fā)育的胚[15-20]。文雁成等[21]對甘藍型油菜與白菜型油菜進行種間雜交，結(jié)果顯示，以甘藍型油菜為母本的雜交結(jié)角率和親和指數(shù)明顯高于其反交組合。本研究表明，人工合成油菜作母本的萌發(fā)率高于作父本。W01作父本萌發(fā)率僅為1.0%，而其作母本時雜種胚萌發(fā)率高達16.0%，與前人[15-21]的研究結(jié)果一致。

本研究結(jié)果表明，結(jié)球甘藍×人工合成油菜胚珠培養(yǎng)適宜取材時間為花期授粉后第11天，培養(yǎng)基以MS基本培養(yǎng)基添加適當(dāng)?shù)纳L調(diào)節(jié)劑、水解酪蛋白和活性炭更有利于胚珠萌發(fā)，其中以M1培養(yǎng)基(MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+水解酪蛋白0.5%+活性炭0.5%)中的胚珠萌發(fā)最好；子房培養(yǎng)取材時間以授粉后第10天為宜，培養(yǎng)基以B5培養(yǎng)基添加適當(dāng)?shù)纳L調(diào)節(jié)劑、水解酪蛋白和活性炭更有利于子房生長發(fā)育，以B1(B5+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L+水解酪蛋白0.5%+活性炭0.5%)培養(yǎng)基中的子房出苗最好，但是不同材料之間雜交胚珠的萌發(fā)率有明顯差異。胚珠經(jīng)過暗處理(24 h)的萌發(fā)率較未經(jīng)過暗處理的材料明顯提高。

喬海云[15]、吳紅美等[16]、王玉書等[22]利用流式細(xì)胞儀分別對十字花科雜種胚和羽衣甘藍小孢子再生植株的DNA相對含量進行測定，同時采用細(xì)胞學(xué)方法對染色體數(shù)目進行鑒定，所得的結(jié)果一致，證明用流式細(xì)胞儀測雜種胚的結(jié)果是可信的。本研究中通過流式細(xì)胞儀對胚挽救獲得的64株幼苗進行初步鑒定，確定57株為真雜株。

Harberd[23]采用離體胚培養(yǎng)獲得甘藍×白菜雜種，發(fā)現(xiàn)影響雜交胚珠培養(yǎng)的因素是多方面的，其中胚齡的大小對胚珠培養(yǎng)影響較大，一般來說胚齡越小，胚珠培養(yǎng)條件越復(fù)雜。胚挽救材料及其處理方式、培養(yǎng)基種類及培養(yǎng)條件、培養(yǎng)基滲透壓和添加劑及胚齡等因素的變化均會直接影響到植物幼胚離體培養(yǎng)挽救的成功與否[4,24]。本研究結(jié)果也表明，胚齡是萌發(fā)率高低的關(guān)鍵，同時基因型、培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件等對萌發(fā)率也有一定的影響[25]，這幾個方面缺一不可。用胚挽救技術(shù)提高雜種后代成活率的研究具有重要的現(xiàn)實意義，獲得的胚挽救植株經(jīng)過生根后移栽到大田需進一步進行生物性狀鑒定和分子鑒定，期望能夠獲得抗根腫的結(jié)球甘藍材料。

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Embryo Rescue ofBrassicaoleraceaL.var.capitata×BrassicanapusL.and Their Ploidy Identification

ZHAO Yanyan,JIANG Wusheng,YUAN Yuxiang,WANG Zhiyong,YAO Qiuju,WEI Xiaochun,ZHANG Qiang,ZHANG Xiaowei*
(Horticultural Institute,Henan Academy of Agricultural Sciences,Zhengzhou 450002,China)

For getting the cabbage materials which carried theCRRgene and was resistant to clubroot,the hybird ovary and ovules from the reciprocal crosses between diploidBrassscaoleraceaL.var.capitataand tetraploidBrassicanapusL.were cultured on the MS and B5 medium.Meanwhile,the effects of different sampling time,medium type,genotype and dark treatment on the germination rate of embryo were investigated.Furthermore,the ploidy of these hybirds was preliminarily determined by flow cytometer.The results showed that ovule culture was obviously better than ovary culture,57 embryos were produced inBrassicanapusL.×BrassscaoleraceaL.var.capitatcrosses,but 7 embryos was produced from the reciprocal crosses through embyro rescue.The best seedling from ovary culture on B1 (B5+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L+CH 0.5%+CA 0.5%) medium was obtained when inoculation was done 10 d after bud pollination.The highest embyro surviving rate (13.55%) by ovule culture on M1 (MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+CH 0.5%+CA 0.5%) medium was obtained when inoculation was done 11 d after bud pollination.The surviving rate of the embryo was significantly increased after dark treatment for 24 h than that under normal culture.The identification results of cell ploidy showed that 57 seedlings from 64 seedlings rescued from this cross were triploid,accounting for 89.06%.

cabbage； synthetic rape； distant hybridization； embryo rescue； identification of ploidy

2016-03-18

國家大宗蔬菜產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系項目(CARS-25-G-27)；農(nóng)業(yè)部重點實驗室(站)項目(10205020)；河南省科技攻關(guān)項目(142102110065)；河南省專項資金項目(20157805)；河南省2016年財政預(yù)算項目(20167907)；河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院自主創(chuàng)新專項基金項目(2016ZC25)

趙艷艷(1981-)，女，河南臨潁人，助理研究員，碩士，主要從事蔬菜育種研究。E-mail:zhaoyanyan9621@126.com

*通訊作者：張曉偉(1965-)，男，河南平輿人，研究員，主要從事蔬菜育種研究。E-mail:xiaoweizhang5737@163.com

S565.2

A

1004-3268(2016)09-0088-06