CD2AP基因多態(tài)性與晚發(fā)性阿爾茨海默病相關(guān)性研究

楊 平丁艷萍

CD2AP基因多態(tài)性與晚發(fā)性阿爾茨海默病相關(guān)性研究

楊 平1丁艷萍2

目的分析寧夏漢族人群CD2AP的rs9296559位點(diǎn)多態(tài)性與晚發(fā)性阿爾茨海默病（LOAD）是否存在關(guān)聯(lián)。方法采用病例-對照研究，提取研究對象的外周血DNA，用ARRAY iPLEX行CD2AP基因的rs9296559位點(diǎn)單核苷酸多態(tài)性（SNP）的表達(dá)分布情況。結(jié)果LOAD組和對照組的C等位基因頻率分布比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．001，OR＝1．52，95%CI：1．18～1．97）。結(jié)論CD2AP基因與寧夏漢族人群 LOAD有相關(guān)性，其rs9296559 SNP位點(diǎn)C等位基因?yàn)槲ｋU(xiǎn)等位基因。

阿爾茨海默??；CD2AP基因；單核苷酸多態(tài)性

阿爾茨海默病是癡呆最常見的類型，晚發(fā)型AD（LOAD）占AD總數(shù)的95%以上，其病因并不十分清楚，被認(rèn)為是環(huán)境和基因因素共同作用所導(dǎo)致的復(fù)雜性疾病，其最主要的易感基因是載脂蛋白E（ApoE）。近年來國外學(xué)者大樣本量的高加索人群中對LOAD的全基因組關(guān)聯(lián)研究（GWAS）發(fā)現(xiàn)了多個(gè)與AD發(fā)病相關(guān)的候選基因研究，如CD2AP基因［1］。本研究通過對LOAD的患者CD2AP基因的rs9296559的多態(tài)位點(diǎn)進(jìn)行基因檢測，探討給該位點(diǎn)多態(tài)性與LOAD的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2012年1月～2016月10月在寧夏醫(yī)科大學(xué)附屬總醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科門診LOAD組患者389例，男178例，女211例，平均年齡（67.60±9.93）歲，正常對照組來自于上述就診患者的配偶以及社區(qū)LOAD流行病學(xué)調(diào)查的正常人群共379例。男226例，女153例，平均年齡（68.50±9.06）歲。兩組的一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

（1）納入標(biāo)準(zhǔn)：LOAD組入選患者均符合美國國立神經(jīng)病語言障礙卒中研究所和AD相關(guān)疾病協(xié)會（NINCDS-ADRDA）臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)確定為“可能AD”的標(biāo)準(zhǔn)；（2）對照組納入及排除標(biāo)準(zhǔn)：納入標(biāo)準(zhǔn)：日常生活能力良好、MMSE≥28分，性別和年齡與患者組完全匹配。排除標(biāo)準(zhǔn)：腦血管病、代謝性疾病，額顳葉及路易體癡呆等。

1.3 方法

所有研究對象均行葉酸、維生素B12及梅毒血清等檢查，所有患者行頭顱CT或MRI平掃。提取清晨取空腹靜脈血2 ml，血樣加EDTA抗凝劑后保存于-80 ℃冰箱中。PCR基因擴(kuò)增和分析CD2AP基因表達(dá)檢測和rs9296559位點(diǎn)基因多態(tài)性分析方法。采用ARRAY iPLEX行CD2AP基因的rs9296559位點(diǎn)SNP的表達(dá)分布情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

使用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，基因頻率采用基因計(jì)數(shù)法，組間基因頻率的比較采用χ2檢驗(yàn)，當(dāng)P＜0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

LOAD組的等位基因C頻率為0.166，高于對照組的0.116（P＜0.001，OR＝1.52，95%CI：1.18 ～ 1.97）。LOAD組的等位基因T頻率為0.833，對照組的等位基因T頻率為0.882，兩組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

3 討論

CD2AP基因是近年來國外學(xué)者對LOAD的GWAS發(fā)現(xiàn)與AD發(fā)病相關(guān)的候選基因，由于不同人口的遺傳背景及遺傳異質(zhì)性的差異［2］。我們當(dāng)前研究發(fā)現(xiàn)rs9296559的CD2AP與中國漢族人口有相關(guān)性。Naj等［3］通過一個(gè)三階段設(shè)計(jì)的AD GWAS首次研究發(fā)現(xiàn)CD2AP與AD發(fā)病有顯著相關(guān)性，隨后2階段的進(jìn)一步驗(yàn)證中，這些結(jié)果得到了證實(shí)，其中CD2AP上游rs9349407和LOAD 存在顯著的相關(guān)性（P＝8.6×10-9）。Holingworth等［4］通過meta分析的方法驗(yàn)證結(jié)果存在可靠性。本文研究（由于rs9349407和rs9296559完全連鎖）結(jié)果顯示rs9296559顯著的差異，提示CD2AP是AD的易感基因，并且C等位基因增加了LOAD的患病風(fēng)險(xiǎn)。CD2AP編碼的Cd2ap是一種銜接蛋白，主要功能對細(xì)胞骨架的調(diào)節(jié)作用及參與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路［5］。文獻(xiàn)報(bào)道CD2AP細(xì)胞突觸功能障礙及細(xì)胞膜的處理過程有關(guān)［6］。2012年一項(xiàng)CD2AP在AD患者腦中轉(zhuǎn)錄情況的研究推測CD2AP與神經(jīng)元突觸功能有關(guān)而參與AD發(fā)病［7］，在腦中CD2AP主要表達(dá)在毛細(xì)血管，然而它在中樞神經(jīng)系統(tǒng)及AD中的作用還不清楚［8］。

總之，研究結(jié)果顯示CD2AP的rs9296559的多態(tài)位點(diǎn)與中國漢族人口相關(guān)性，結(jié)果需要在大樣本及不同的人口中驗(yàn)證，潛在的蛋白功能需要近一步的探索。

［1］ Lee JH，Cheng R，Barral S，et al． Genome Wide Association Study in Late-onset Alzheimer'S Disease Among Caribbean Hispanics Supports Clu，Picalm，Bin1，And Cugbp2 And Identifies Novel Loci［J］． Alzheimers & Dementia，2010，6（4）：e13．

［2］ 孟大川，余自華，王道靜，等． 中國漢族兒童散發(fā)性激素耐藥型腎病綜合征CD2AP基因突變分析［J］． 臨床兒科雜志，2012，30（7）：641-645．

［3］ Naj AC，Jun G，Beecham GW，et al． Common variants at MS4A4/MS4A6E，CD2AP，CD33 and EPHA1 are associated with late-onset Alzheimer's disease［J］． Nature Genetics，2011，43（5）：436-441．

［4］ Hollingworth P，Harold D，Sims R，et al． Common variants at ABCA7，MS4A6A/MS4A4E，EPHA1，CD33 and CD2AP are associated with Alzheimer's disease［J］． Nature Genetics，2011，43（5）：429-435．

［5］ 毛建華，杜立中．CD2AP與腎小球足細(xì)胞裂孔隔膜功能損傷的分子機(jī)制［J］． 國外醫(yī)學(xué)：兒科學(xué)分冊，2005，32（1）：15-17．

［6］ Morgan K． The three new pathways leading to Alzheimer's disease［J］． Neuropathology and Applied Neurobiology，2011，37（4）：353-357．

［7］ Karch CM，Jeng AT，Nowotny P，et al． Expression of Novel Alzheimer’s Disease Risk Genes in Control and Alzheimer’s Disease Brains［J］． Plos One，2012，7（11）：e50976．

［8］ Schellenberg GD，Montine TJ． The genetics and neuropathology of Alzheimer's disease［J］． Acta Neuropathologica，2012，124（3）：305-323．

Association BetweenCD2APGene Polymorphism and Late-onset Alzheimer's Disease

YANG Ping1DING Yanping21 Department of Neurology，General Hospital of Ningxia Medical University，Yinchuan Ningxia 750004，China，2 Department of Gynaecology and Obstetrics，Ningxia Children's Hospital，Yinchuan Ningxia 750004，China

ObjectiveTo analyze the association betweenCD2APand rs9296559 polymorphisms of LOAD in Ningxia Han population．MethodsFor the casecontrol studies，all subjects’peripheral blood DNA was extracted，distribution of single nucleotide polymorphisms （SNP） in the rs9296559 locus ofCD2APgene by ARRAY iPLEX．ResultsThe frequency distribution of C allele in the LOAD group and the control group was statistically significant（P＜0．001，OR＝1．52，95%CI：1．18～1．97）．ConclusionCD2APgene is associated with LOAD in Ningxia Han population，the C allele of rs9296559 locus of SNP is a risk allele．

Alzheimer's disease，CD2APgene，Single nucleotide polymorphism

R749．1

A

1674-9316（2016）36-0029-03

10．3969/j．issn．1674-9316．2016．36．015

寧夏醫(yī)科大學(xué)校級重點(diǎn)課題（XZ2015022）

1 寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，寧夏 銀川 750004；2 寧夏兒童醫(yī)院婦產(chǎn)科，寧夏 銀川 750004