大顆粒淋巴細胞白血病發(fā)病機制的研究進展

車艷麗

山東省肥城市人民醫(yī)院，山東泰安271600

大顆粒淋巴細胞白血病發(fā)病機制的研究進展

車艷麗

山東省肥城市人民醫(yī)院，山東泰安271600

大顆粒淋巴細胞(Large granular lymphocyto，LGL)是一類胞質(zhì)內(nèi)含嗜天青顆粒的大、中型淋巴細胞。形態(tài)上類似于小淋巴細胞，大小介于小淋巴細胞和單核細胞之間，直徑約12～15 μm，胞質(zhì)較豐富，含許多大小不等的嗜天青顆粒。散在的深酶體。血液中LGL約占正常外周血單個核細胞的10%～15%，包括占85%的CD3-LGL(NK細胞)和占15%的CD3+LGL(T細胞)兩個細胞群。大顆粒淋巴細胞白血病是一種以循環(huán)血中大顆粒淋巴細胞增多為臨床特征的疾病，根據(jù)細胞起源不同分為NK-LGLL和T-LGLL。該文主要綜述了大顆粒淋巴細胞白血病發(fā)病機制的研究進展。

大顆粒淋巴細胞白血?。槐磉_自身免疫；病毒感染

關(guān)于大顆粒淋巴細胞白血病的首次描述出現(xiàn)在1977年，作為一種慢性中性粒細胞減少的臨床綜合征，臨床上伴有外周血大顆粒淋巴細胞增多現(xiàn)象，其細胞遺傳學(xué)為克隆性異常，確定了其惡性腫瘤的性質(zhì)。1993年根據(jù)異常克隆淋巴細胞的來源分為NK-LGLL和TLGLL。T-LGLL約占LGLL的85%，常見于老年患者，中位發(fā)病年齡60(4～88)歲，無性別差異。NK-LGLL約占LGLL的15%，發(fā)病年齡小，中位年齡39歲。該文將LGLL發(fā)病機制的有關(guān)研究進展綜述如下。

1 Fas/FasL凋亡途徑受抑

作為一種跨膜蛋白，F(xiàn)as隸屬于腫瘤壞死因子受體家族，其在成功與配體結(jié)合之后，能夠?qū)毎牡蛲霎a(chǎn)生誘導(dǎo)作用，當(dāng)機體處于正常生理狀態(tài)時，其可以通過控制細胞凋亡機制來對淋巴細胞的增值過程實施有效控制，這對于機體免疫自穩(wěn)的維持具有積極的促進作用，并且大部分的抗原特異性T細胞在凋亡之后能夠及時得到清除，這有利于機體當(dāng)中的T細胞數(shù)量保持穩(wěn)定。已經(jīng)有研究結(jié)果證實Fas凋亡途徑異?，F(xiàn)象與LGLL的發(fā)生之間存在著一定的關(guān)聯(lián)性。O’Malley D P[1]指出由于LGLL當(dāng)中所出現(xiàn)的異?？寺〉腖GL對Fas/ FasL的持續(xù)高表達，對于Fas依賴的凋亡具有抵抗作用，長此以往就容易導(dǎo)致LGL的發(fā)生。Jun Y等[2]研究表明LGLL患者表達c-FLIP-l(FLICE樣凋亡抑制蛋白)水平的明顯增加，會表現(xiàn)出招募DISC(死亡誘導(dǎo)的信號復(fù)合物)減少及Fas-介導(dǎo)的凋亡抵抗現(xiàn)象。

正常情況下，CTL對病毒肽段進行辨別，病毒感染的靶細胞對Fas進行表達，上調(diào)的FasL通過凋亡途徑來對病毒感染的靶細胞予以清除，當(dāng)前有研究結(jié)論認為Fas/FasL所出現(xiàn)的凋亡途徑異?？赡苡欣赥-LGL亞群增生，但不是唯一因素，Liu J H等[3]報道了33例LGLL患者血清內(nèi)含高水平的可溶性Fas，且LGLL血清中存在Fas mRNA多種變異表達，所出現(xiàn)的Fas變異體對可溶性Fas分子進行編碼，對Fas變異體細胞上清液進行轉(zhuǎn)染，對于LGL的Fas依賴的凋亡，具有一定的阻礙作用。

2 JAK-STAT3 信號通路異常

通常情況下，造血細胞處于正常狀態(tài)時，會在細胞因子的各種作用之下，不斷地分化成熟，但是對于白血病細胞來說，其正常的分化過程受到破壞，導(dǎo)致其表現(xiàn)出無限制增殖現(xiàn)象，由此也可以看出，導(dǎo)致白血病發(fā)病的一個非常重要的因素就是細胞中信號通路異常。

作為一條細胞因子刺激的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，JAKSTAT信號通路直接參與到細胞的增殖、凋亡、分化及免疫調(diào)節(jié)等多個生物學(xué)過程當(dāng)中，其主要成分包含了STAT（信號轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子）、JAK（酪氨酸激酶）、酪氨酸激酶相關(guān)受體等。其具體的傳遞過程表現(xiàn)為：細胞因子在與相關(guān)的受體成功結(jié)合之后會導(dǎo)致出現(xiàn)受體分子二聚化，與受體偶聯(lián)的JAK激酶在這種情況下會相互接近，并且能夠在交互的酪氨酸磷酸化的作用之下活化，在成功將JAK激活之后，會將受體上的酪氨酸殘基進行催化，導(dǎo)致其發(fā)生磷酸化修飾，促使酪氨酸位點在磷酸化之后與周圍的氨基序列形成停泊位點，在激酶將JAK催化之后，與受體上的STAT蛋白結(jié)合，出現(xiàn)磷酸化修飾現(xiàn)象，通過二聚體的形式，活化的STAT蛋白會進入到細胞核當(dāng)中，成功與靶基因結(jié)合之后，能夠?qū)虻霓D(zhuǎn)錄進行調(diào)控。

STAT3是一種癌基因，存在于胞漿并在激活后轉(zhuǎn)入核內(nèi)與DNA結(jié)合的蛋白，在許多腫瘤的發(fā)生中起著重要作用。Epling-Bumette等[4]對19例LGLL患者進行分析研究發(fā)現(xiàn)，白血病的LGL細胞當(dāng)中存在高水平活化的STAT3，應(yīng)用JAK選擇性酪氨酸激酶抑制劑AG－490及反義寡核苷酸對STAT3的表達進行抑制，對于LGL的凋亡具有很好的逆轉(zhuǎn)作用，AG－490誘導(dǎo)的凋亡不會對Bcl-2或者是Bcl-XL的表達產(chǎn)生依賴作用，在實施治療之后，Mcl-1在LGL中的表達明顯下調(diào)，由此也可以推測發(fā)生LGLL與STAT3活化、抗凋亡蛋白Mcl-1所導(dǎo)致的LGL克隆累積之間存在一定的關(guān)聯(lián)性。有學(xué)者應(yīng)用DNA測序聯(lián)合PCR檢測對初診的28例T-LGLL患者的STAT3外顯子20、21的基因序列開展檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)STAT3的突變率是21.4%。且STAT3突變TLGLL患者常常合并純紅細胞再生障礙性貧血、中性粒細胞減少、β2-MG水平較高，STAT3突變患者預(yù)后差。Koskela HL等[6]研究了77例LGLL患者，40%的患者存在STAT3的異常激活，其中17%的突變熱點為Y640F，9%的突變熱點為D661V，9%的突變熱點為D661Y，4%的突變熱點為N647。推測LGLL的發(fā)生，與STAT3異?；罨瘜?dǎo)致LGL過度增殖有關(guān)。C S Liang等[7]研究發(fā)現(xiàn)磷酸化STAT3在造血干細胞移植相關(guān)LGLL中的表達增加。

3 PI3 K/AKT通路異常

磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)是T淋巴細胞內(nèi)重要的信號傳導(dǎo)分子，參與細胞增殖、分化、凋亡和葡萄糖轉(zhuǎn)運等多種細胞功能的調(diào)節(jié)。PI3K可被生長因子、細胞因子、激素等細胞外信號刺激激活。PI3K活性的增加常與多種癌癥相關(guān)。

PI3K/AKT通路異常與白血病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，PI3K/AKT通路中的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子的活性異常容易導(dǎo)致下游出現(xiàn)細胞周期加快或者是凋亡通路受阻等現(xiàn)象，導(dǎo)致正常的細胞向腫瘤細胞轉(zhuǎn)化，并且PI3K/AKT通路還會在其上游各種受體-配體相結(jié)合的作用之下，受到其他各種分子活性的影響，導(dǎo)致PI3K/Akt通路被異常激活，從而對細胞轉(zhuǎn)化起到促進作用。Borlado等[8]發(fā)現(xiàn),P85缺失P65/PI3K突變編碼異常蛋白可以引發(fā)小鼠淋巴增殖性疾病。T-LGLL細胞產(chǎn)生促炎細胞因子RANTES、巨噬細胞炎癥因子-1β（MIP-1β）和白細胞介素-8（IL-8），從而將PI3K通路激活，導(dǎo)致出現(xiàn)LGL凋亡受阻現(xiàn)象。Schade等[9]研究證明T-LGLL發(fā)病依賴于PI3K/AKT通路活性，如果通路活性正常，T-LGLL細胞將發(fā)生自發(fā)凋亡。

4 IL-15

IL-15能夠改變Bcl-2家族成員的表達，這使得其對于LGLL的發(fā)生與發(fā)展都具有非常重要的作用，其能夠通過蛋白酶來對Bid進行降解，對于LGLL的治療存在一定的促進作用。

5 PDGF

腫瘤系統(tǒng)可以同時產(chǎn)生生長因子受體及生長因子的自分泌機制，從而對自身的增殖產(chǎn)生刺激作用。作為一個多功能分子，原癌基因血小板的源生長因子具有細胞增殖、生長、趨化、凋亡抵抗、肌動蛋白重組等功能。LGLs白血病細胞通過自分泌調(diào)節(jié)機制,同時表達PDGF-BB和其受體-β,介導(dǎo)PDGF/RTK自身磷酸化和活化下游存活信號級聯(lián)通路,表現(xiàn)出對凋亡的抵抗。

6 KIR表達

殺傷細胞免疫球蛋白樣受體的表達提示NK細胞客隆性。尤其是對于侵襲性NK細胞白血病來說，其是一種非常罕見的大顆粒淋巴細胞白血病，邱志遠[5]對36例ANKL患者進行分析，其中24例患者均為KIR克隆性表達或者表達缺失，其中克隆性表達患者7例，表達缺失的患者17例。進而推定ANKL具有克隆性KIR表達且，KIR檢測對ANKL有重要的診斷價值。

7 自身免疫

純紅細胞再生障礙性貧血、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等一些自身免疫性疾病患者大多存在TLGL克隆擴增現(xiàn)象，PRCA患者的TLGL不但對于紅系前體細胞生長存在抑制作用，同時其對于多能造血干細胞也具有明顯的抑制作用。Prochorec-Sobieszek M等[11]研究結(jié)果表明，RA患者帶有LGL表型和功能的T細胞，提示LGLL與RA在發(fā)病機制上有相關(guān)性。

在LGLL患者中，常見到自身免疫性疾病的特征，如類風(fēng)濕因子陽性，抗核抗體陽性，多克隆免疫球蛋白血癥，血β2微球蛋白升高，25%～35%的T-LGLL患者發(fā)生類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎，LGLL，RA，F(xiàn)elty綜合征患者存在相同的MHC位點。治療上，LGLL患者應(yīng)用免疫抑制劑如環(huán)孢素治療后，中性粒細胞數(shù)量可達正常，說明粒細胞減少為免疫介導(dǎo)的病理過程，但是循環(huán)血中LGL數(shù)量不能改變，說明粒細胞減少與白血病進程無關(guān)[12]。

8 病毒感染

EBV感染與NK-LGLL的發(fā)生有關(guān)，這種推測在1992年新西蘭得到證實[13]。Loughran等[14]對18例TLGLL以及CD3-LGL增多癥的13例患者，開展CD3-LGL增多癥，通過分析結(jié)果可以看出，其血清學(xué)結(jié)果顯示這些患者全都感染過EBV，而無1例存在EBVDNA，因此有人認為EBV與NK-LGLL的發(fā)生密切相關(guān)，與T-LGLL發(fā)生關(guān)系不大。

反轉(zhuǎn)錄病毒感染可激活LGL，少數(shù)LGLL患者有感染人類嗜T胞病毒-I或-II(HTLV-I或HTLV-II)的證據(jù)，Loughran等[15]對LGLL 41例患者應(yīng)用PCR實施HTLV-I/II分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)存在HTLV感染的患者只有2例，Perzova[16]利用對LGLL 22例患者應(yīng)用寡聚核苷酸探針開展PCR分析發(fā)現(xiàn)，陽性患者數(shù)量為0，雖然絕大部分的LGLL患者沒有出現(xiàn)HTLV等原型病毒感染，但是通過為患者開展血清學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)抗HTLV-I gag p24和env p21e，提示HTLV-I感染在LGLL發(fā)病中起重要作用。在出現(xiàn)人類免疫缺陷型病毒、巨細胞病毒等的感染之后，其LGL數(shù)量也表現(xiàn)出增加的趨勢。

[1]O’Malley D P．T-cell large granular leukemia and related proliferation[J].Am J Clin Pathol，2007，127（6）：850-859．

[2]Jun Y，Epling-Burnette P K，Painter J S，et al．Antigen activation and impaired Fas-induced death-inducing signaling complex formation in T-large-granular lymphocyte leukemia [J]．Blood，2008，112(5)：1610-1616．

[3]Liu J H，Wei S，Lamy T，et al.Blockade of Fas-dependent apoptosis by soluble Fas in LGL leukemia[J].Blood，2002,100（4）：1449-1453

[4]Epling-Burnette P K，et al．Inhibition of STAT3 signaling leads to apoptosis of leukemic large granular lymphocytes and decreased Mcl-1 expression[J]．J Clin Inv，2001，107(3)：351-362．

[5]邱志遠．大顆粒淋巴細胞白血病發(fā)病機制探討和克隆性檢測[D]．南京醫(yī)科大學(xué)，2014．

[6]Koskela HL，Eldfors S，Ellonen P，et al．Somatic STAT3 mutations in large granular lymphocytic leukemia[J]．N Engl J Med，2012，366(20)：1905-1913．

[7]C S Liang，A E Quesada，M Goswami，et al．Bone Marrow Transplant[J].2016．

[8]Borlado L R，Redondo C，Alvarez B，et al．Increased phosphoinositide 3-kinase activity induces a lymphoproliferative disorder and contributes to tumor generation in vivo[J].FASEB J，2000，14(7)：895-903．

[9]Schade A E，Powers J J，Wlodaski M W，et al．Phosphatidylinositol-3-phosphate kinase pathway activation protects leukemic large granular lymphocytes from undergoing homeostatic apoptosis[J]．Blood，2006，107(12)：4834-4840．

[10]Hodge D L，Yang J，Buschman M D，et al．Interleukin-15 enhances protea somal degradatio n of bid innormal lymphocytes：implicationsforlargegranularlymphocyte leukemias[J].Cancer Res，2009，69(9)：3986-3994．

[11]Prochorec-Sobieszek M，Rymkiewicz G，Makuch-Lasica H，et al．Characteristics of T-cell large granular lymphocyte proliferations associated with neutropenia and inflammatory arthropathy[J]．Arthritis Res Ther，2008，10(3)：R55．

[12]Melenhorst J J，Brummendorf T H，Kirby M，et al．CD8+T cells in large granular lymphocyte leukemia are not defective inactivation and replication-related apoptosis[J]．Leuk Res，2001（25）：699-708．

[13]Hart DNJ，Baker BW，Inglis MJ，et al．Blood[J]．1992（79）：2116．

[14]Loughran TP Jr，Zambello R，Ashley R，et al．Blood[J]. 1993，81(10)：2723.

[15]Loughran TP Jr，Hadlock KG，Perzova R，et al．Br J Haematol[J].1998（101）：318．

[16]Perzova RN,Loughran TP Jr，F(xiàn)errer J，et al．Br J Haematol[J]. 2000（109）：64．

Research Progress of Nosogenesis of Large Granular Lymphocytic Leukemia

CHE Yan-li
Feicheng People’s Hospital,Tai’an,Shandong Province,271600 China

The large granular lymphocyte is a large and medium-sized lymphocytes with azurophil granule in cytoplasm, and similar to the small lymphocyte in shape,and its size is between small lymphocyte and mononuclear cells,and its diameter is about 12-15um,and the cytoplasm is rich with many azurophil granules of different sizes,and LGL in blood accounted for 10%-15%in the mononuclearcell in normal peripheral blood,including 85%CD3-LGL(NK cells)and 15%CD3+ LGL(T cell),the large granular lymphocytic leukemia is a disease taking the large granular lymphocyte increase in the peripheral blood as features,and divided into NK-LGLL and T-LGLL according to the different cell origins,and the paper mainly summarizes the research progress of nosogenesis of large granular lymphocytic leukemia.

Large granular lymphocytic leukemia;Expression of autoimmune;Virus infection

R733.7

A

1672-5654（2016）12（c）-0187-03

10.16659/j.cnki.1672-5654.2016.36.187

2016-09-27）

車艷麗（1982.8-），女，山東泰安人，碩士研究生，主治醫(yī)師，E-mail：checarole1982@163.com。