老年人群淚液白細(xì)胞介素-6與糖尿病及其視網(wǎng)膜病變的相關(guān)性

張　潔　王偉超　王　虹　劉素波　李雅婷

(石家莊市第三醫(yī)院眼科，河北　石家莊　050011)

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老年人群淚液白細(xì)胞介素-6與糖尿病及其視網(wǎng)膜病變的相關(guān)性

張潔王偉超1王虹2劉素波1李雅婷3

(石家莊市第三醫(yī)院眼科，河北石家莊050011)

目的探討糖尿病(DM)及糖尿病視網(wǎng)膜病變(DR)與老年患者淚液、血清白細(xì)胞介素(IL)-6濃度的關(guān)系。方法納入人群分為三組：A組為2型糖尿病無視網(wǎng)膜病變老年患者組，B組為2型糖尿病有視網(wǎng)膜病變老年患者組，C組為正常對照老年人組。用ELISA法分別檢測三組人群淚液、血清中IL-6的含量。結(jié)果A、B組淚液IL-6含量均較C組高，B組淚液IL-6含量較A組高(P<0.01)；淚液IL-6與血清IL-6水平呈正相關(guān)(r=0.655，P<0.05)。結(jié)論老年DM患者淚液IL-6含量較正常老年人增高，老年DR患者淚液IL-6水平進(jìn)一步升高，且淚液IL-6與血清IL-6水平呈直線正相關(guān)。

糖尿??；淚液；血清；白細(xì)胞介素-6

糖尿病性視網(wǎng)膜病變(DR)作為糖尿病(DM)眼部并發(fā)癥之一，對患者的生存質(zhì)量構(gòu)成了巨大的威脅，嚴(yán)重影響了患者的日常生活。研究認(rèn)為2型糖尿病(T2DM)發(fā)病與自身免疫反應(yīng)有關(guān)系，免疫反應(yīng)激活免疫細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子在抑制胰島β細(xì)胞分泌胰島素及促進(jìn)胰島β細(xì)胞損傷方面起著重要作用〔1〕。近年來的炎癥學(xué)說受到廣泛關(guān)注，認(rèn)為T2DM可能是一種免疫性疾病，是細(xì)胞因子介導(dǎo)的一種炎癥反應(yīng)，在DM的發(fā)病機(jī)制中炎癥起了媒介作用〔2〕，該學(xué)說認(rèn)為DM及其血管并發(fā)癥的發(fā)生和發(fā)展有多種炎癥因子的參與〔2，3〕。其中T2DM發(fā)生、發(fā)展過程中介導(dǎo)炎癥反應(yīng)的一種重要細(xì)胞因子是白細(xì)胞介素(IL)-6〔4〕。本研究探討DM及DR的發(fā)生與老年患者血清及淚液IL-6濃度的關(guān)系。

1　資料與方法

1.1一般資料收集老年T2DM患者100例、正常對照老年人50例，將此納入人群分為3組：T2DM無DR組(A組)50例，男25例，女25例，平均年齡65.4歲；DR組(B組)50例，男26例，女24例，平均年齡64.2歲；正常對照組(C組)50例，男25例，女25例，平均年齡63.1歲。以上3組人群的年齡、性別均無明顯差別，具有可比性。T2DM患者按1999年WHO的診斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行確診，患者起病年齡均>30歲，經(jīng)眼底血管熒光造影檢查排除或診斷為DR，患者口服降糖藥物有效果，除外降糖藥物繼發(fā)性失效，糖尿病自身免疫相關(guān)抗體檢測陰性，非酮癥狀態(tài)，排除嚴(yán)重心、肺、腦疾患，排除外嚴(yán)重肝、腎疾病以及明確應(yīng)激狀態(tài)。

1.2標(biāo)本收集所有受試者禁食、停藥8～10 h，然后分別同時(shí)采集3組人群的血液和淚液。標(biāo)本收集成功，淚液標(biāo)本置于法國Jouan超低溫冰箱-20℃保存?zhèn)溆?；血液?biāo)本離心分離血清，與淚液標(biāo)本同條件超低溫保存以備集中檢測。標(biāo)本采集注意事項(xiàng)：以毛細(xì)玻璃管法收集淚液，由經(jīng)培訓(xùn)合格的研究人員依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)操作流程完成，檢查者動作需輕柔。

1.3檢測方法采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法(ELISA)檢測。遵照美國TBE公司的人IL-6 ELISA試劑盒(靈敏度>0.7 pg/ml)說明進(jìn)行操作。OD450值采用法國Jouan公司的酶標(biāo)儀進(jìn)行測定。標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制，橫坐標(biāo)為標(biāo)準(zhǔn)品濃度，縱坐標(biāo)為OD值。最后通過標(biāo)本的OD值在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出其濃度。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析和相關(guān)分析。

2　結(jié)　果

2.1各組人群淚液IL-6的含量A組(12.23±7.28)pg/ml，B組(20.14±11.14)pg/ml，C組(4.56±2.82)pg/ml。三組間存在顯著差異(F=49.23，P<0.05)，A組、B組淚液IL-6含量均高于C組，B組淚液IL-6含量高于A組(q=4.89、9.92、-5.04，P均<0.01)。

2.2各組人群血清IL-6的含量A組(126.19±47.90)pg/ml，B組(256.36±94.45)pg/ml，C組(96.94±52.41)pg/ml。各組間差異顯著(F=77.38，P<0.05)，A、B組血清IL-6含量均較C組高，B組血清IL-6含量較A組高(q=2.14、11.68、-9.54，P均<0.01)。

2.3淚液IL-6與血清IL-6濃度的相關(guān)分析淚液IL-6濃度分布與血清IL-6濃度分布呈現(xiàn)直線正相關(guān)關(guān)系(r=0.655 0，P<0.05，95%CI為0.130 0～0.893 2)。

3　討　論

炎癥因子可認(rèn)為是啟動環(huán)節(jié)，由其引起的血管內(nèi)皮炎癥反應(yīng)在DM慢性并發(fā)癥發(fā)生發(fā)展中起到重要的作用。IL-6是重要的炎癥因子之一，其在T2DM血管病變發(fā)生發(fā)展過程中的作用不容忽視。

B細(xì)胞、T細(xì)胞、單核細(xì)胞等是產(chǎn)生IL-6的主體，IL-6在損傷修復(fù)及免疫、炎癥反應(yīng)中起到了關(guān)鍵性調(diào)節(jié)作用〔5〕。IL-6的主要生物學(xué)作用是促進(jìn)B細(xì)胞增殖分化和分泌抗體；在IL-2 、IL-6共同作用下，T細(xì)胞分化為細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞；促使肝臟合成急性期蛋白；并對神經(jīng)系統(tǒng)、血液系統(tǒng)等產(chǎn)生廣泛效應(yīng)。IL-6為一種內(nèi)源性致熱原，可參與炎性反應(yīng)；另外，IL-6作為急性反應(yīng)的始發(fā)因子，可參與很多疾病的發(fā)病過程，并起到重要的作用〔6，7〕。Sheng等〔7〕研究發(fā)現(xiàn)，IL-6與胰島素相互作用，從而可以影響T2DM的發(fā)生。胰島素抵抗在T2DM發(fā)病中起重要作用，并貫穿于T2DM全過程，IL-6也是一種可以引起胰島素抵抗的重要細(xì)胞因子〔8〕。Yuuki等〔9〕關(guān)于DR的研究發(fā)現(xiàn)：DR患者組的眼玻璃體中IL-6濃度明顯高于對照組，由此證實(shí)IL-6與DR的發(fā)生和發(fā)展有著密切的聯(lián)系。Claudio等〔10〕報(bào)道增殖性DR患者其玻璃體內(nèi)IL-6濃度顯著增高，并且增高的水平與眼底視網(wǎng)膜病變的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。Funatsn等〔11〕通過檢測DM患者房水、玻璃體和血漿中的IL-6濃度，并研究了其相互的關(guān)系，結(jié)果表明隨著DM病程的延長，眼底視網(wǎng)膜病變的加重，患者房水、玻璃體和血漿中的IL-6濃度也隨之增高，由此提示IL-6與DM的發(fā)生、發(fā)展有著密切的聯(lián)系。Canataroglu等〔12〕的研究結(jié)果：增殖性DR患者的玻璃體IL-6和IL-8的含量均有顯著升高，表明IL-6與增殖性DR的發(fā)生和發(fā)展有密切的聯(lián)系。

本研究以老年人為研究對象，檢測了健康老年人及T2DM老年患者淚液及血清的IL-6濃度，在國內(nèi)外尚屬首創(chuàng)。淚液的收集檢查過程是無創(chuàng)的，易于被老年患者接受。本研究結(jié)果表明，對于老年人群而言，老年患者T2DM及DR的發(fā)生與其淚液IL-6的水平有關(guān)系，血清IL-6與淚液IL-6水平正相關(guān)，因此對老年人群淚液IL-6濃度進(jìn)行測定，有望成為老年DM患者病情監(jiān)測及評估的可能方法。

1Senn JJ，Klover PJ，Nowak IA，etal.Interleukin induce cellular insulin resistance in hepatocytes〔J〕.Diabetes，2002；51：3391-9.

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5Yah Z，Zhao N，Wang Z，etal.A mutated human tumor necrosis factor-alpha improves the therapeutic index in vitro and in vivo〔J〕.Cytotherapy，2006；8(4)：415-23.

6Wolf AM，Wolf D，Rnmpiod H，etal.The kinase inhibitor imatinib mesylate inhibits TNF-alpha production in vitro and prevents TNF dependent acute hepatic inflammation〔J〕.Proc Natl Acad Sci U S A，2005；102(38)：13622-7.

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10Claudio L，Martiney JA，Brosnan CF.Ultrastructural studies of the blood-retina barrier after exposure to interleukin-1 beta or tumor necrosis factor-alpha〔J〕.Lab Invest，1994；70(6)：850-86.

11Funatsn H，Yamaschita H，Noma H，etal.Aqueous humour levels of cytokines are related to vitreous levels and progression of diabetic retinopathy in diabetic patient〔J〕.Opthalmology，2005；243(1)：3-8.

12Canataroglu H，Varinli I，Ozcan AA，etal.Interleukin (IL)-6，interleukin (IL)-8 levels and cellular composition of the vitreoushumor in proliferative diabetic retinopathy，proliferative vitreoretinopathy and traumatic proliferative vitreoretinopathy〔J〕.Ocul Immunol Inflamm，2005；13(5)：375.

〔2015-02-03修回〕

(編輯苑云杰/曹夢園)

石家莊市科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(No.111461293)

張潔(1979-)，女，碩士，副主任醫(yī)師，主要從事眼表及眼底疾病的研究。

R771.3

A

1005-9202(2016)18-4472-02；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.18.033

1石家莊市第一醫(yī)院內(nèi)分泌科2石家莊市第一醫(yī)院干部老年病科

3石家莊市第七醫(yī)院健康檢查科